TERT基因在非小细胞肺癌易感性及预后中的研究进展

肺癌是世界上最常见的恶性肿瘤之一,具有很高的死亡率,85%的肺癌患者组织学类型为非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)。非小细胞肺癌的预后较差,与诊断晚、复发风险高、药物耐药等有关。端粒酶是细胞存活的关键酶,它能维持细胞端粒的长度,使细胞具有无限增殖和永生化的潜能。端粒酶逆转录酶(TERT基因编码)是端粒酶的催化亚基,能激活端粒酶,为细胞提供癌变的可能。TERT启动子突变被证明是激活端粒酶的一种新的遗传机制,并存在于多种人类肿瘤中。端粒酶激活和端粒损伤与人类肺癌的发生有关,且TERT基因多态性与非小细胞肺癌的易感性及预后有关。本文总结了TERT启动子突变及TERT多态性在非小细胞肺癌中的研究,以及它对非小细胞肺癌预后的影响及靶向治疗前景。

TERT调控线粒体氧化应激在疾病中的作用

氧化应激是活性氧(ROS)形成与抗氧化剂水平不平衡的结果,线粒体是调控氧化应激的重要细胞器,端粒酶反转录酶(TERT)不仅存在于细胞核维持端粒酶的活性和端粒长度,还可逆地转位到线粒体,提高线粒体氧化呼吸链活性,减少线粒体活性氧(mtROS)的产生、激活GSH系统和自噬通路,促进mtROS的清除,从而下调mtROS水平,减轻氧化应激及其损伤,维持细胞氧化还原平衡和机体的正常功能。

联合BRAFV600E突变及TERT启动子突变基因检测对判断甲状腺乳头状癌侵袭性价值研究

目的:探讨联合BRAFV600E突变及TERT启动子突变基因检测判断甲状腺乳头状癌侵袭性价值。方法:选取2021年6月-2023年4月在本院手术证实的120例甲状腺乳头状癌(PTC)患者病理标本,根据病灶是否突破甲状腺被膜或有无发生淋巴结转移,分为侵袭组和惰性组,对侵袭组与惰性组患者BRAFV600E、TERT启动子两个位点突变阳性率以及临床因素(年龄、性别、肿瘤直径、UICC分期、双侧累及)进行分析,统计侵袭性的危险因素。结果:侵袭组与惰性组患者性别、年龄、肿瘤直径、UICC分期、双侧累及情况差异均具有统计学意义(P<0.05),其中侵袭组患者男性患病率更高、年龄更小、肿瘤直径更大、UICC分期更高、双侧累及更多。侵袭组患者BRAFV600E、TERT启动子突变率,以及BRAFV600E+TERT启动子同时突变率均显著高于惰性组(P<0.05),Logistic回归分析显示:性别、年龄、肿瘤直径、UICC分期、双侧累及情况、BRAFV600E、TERT启动子突变均为PTC患者侵袭性的危险因素。结论:联合BRAFV600E突变及TERT启动子突变与甲状腺乳头状癌侵袭性相关,虽然机制尚未明确,但可以作为判断PTC患者侵袭性的分子标志物,为PTC患者治疗方案的选择提供依据。

甲状腺乳头状癌BRAF V600E、TERT和RET分子检测及与临床病理特征的关系

目的探讨甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)中三种驱动基因BRAF V600E、TERT和RET与临床病理特征的关系。方法收集4678例PTC,2637例患者行BRAF V600E和TERT启动子检测(C250T和C228T位点),另2041例患者行BRAF V600E和RET检测,并分析以上3种基因与临床病理特征的关系。结果PTC中BRAF V600E、TERT及RET基因阳性检出率分别为88.9%(4161/4678)、0.5%(12/2637)、3.7%(75/2041)。BRAF V600E突变仅与被膜侵犯及桥本甲状腺炎伴随相关(P<0.05);TERT启动子突变与患者年龄、肿瘤最大径、肿瘤数量、淋巴结转移、TNM分期均有关(P<0.05);RET基因融合与患者性别、肿瘤最大径、淋巴结转移、桥本甲状腺炎伴随有关(P<0.05)。双基因改变患者合计12例,包括1例BRAF V600E突变伴CCDC6-RET(Exon1-Exon12)基因重排变异,1例BRAF V600E突变伴NCOA4-RET(Exon6-Exon12/partial Exon7-Exon12)基因重排变异,10例BRAF V600E伴TERT启动子双突变。BRAF V600E伴TERT双突变在>55岁、较大肿瘤、多癌灶、有淋巴结转移或晚期患者中更易发生(P<0.05)。结论BRAF V600E在PTC中突变率极高,提示可作为PTC诊断的重要分子学依据;TERT及RET基因改变可反映肿瘤侵袭性生物学行为并提示预后不佳,两者均可伴有BRAF V600E突变,且BRAF V600E和TERT双突变提示更差的临床预后,因此联合多基因检测可更全面评估患者预后风险,为疾病预后分层及临床个性化治疗策略提供分子基础。

TERT启动子突变在中枢神经系统孤立性纤维性肿瘤预后中的相关性分析

目的探讨TERT(telomerase reverse transcriptase)基因启动子对中枢神经系统孤立性纤维性肿瘤(solitary fibrous tumors of the central nervous system,CNS SFT)预后的影响。方法采用Sanger测序法检测61例CNS SFT和20例胸膜孤立性纤维性肿瘤(solitary fibrous tumors,SFT)中TERT启动子突变。采用Kaplan-Meier法分析各项指标与预后的相关性。Cox比例风险回归模型分析预后影响因素。结果81例样本中有8例样本检测到TERT突变,其中7例突变位点均为C228T,1例检测到少见位点突变C216T。生存分析显示,TERT启动子突变与患者无进展生存期(progression-free survival,PFS)无关(P=0.469)。CNS SFT比胸膜SFT更易复发(P=0.002)。多因素分析显示,肿瘤发生部位及有无坏死是SFT独立预后因素(HR=4.294,95%CI=1.163~15.845,P=0.029;HR=5.887,95%CI=1.322~26.255,P=0.020)。结论TERT启动子突变对CNS SFT及胸膜SFT缺乏明确的预后价值,组织学特征是判断其预后的最佳指标。

乳腺纤维上皮性肿瘤中TERT启动子突变的临床病理学意义

目的探讨TERT启动子突变在乳腺纤维上皮性肿瘤鉴别诊断中的临床病理学意义。方法收集76例乳腺纤维上皮性肿瘤患者的临床及病理学资料;应用Sanger测序检测TERT启动子突变情况,采用免疫组化法检测Ki-67的表达,分析其临床病理学特征并复习相关文献。结果TERT启动子突变与患者年龄、肿瘤大小、间质细胞丰富程度、不典型性、核分裂象、Ki-67增殖指数等均相关;TERT启动子突变在乳腺纤维腺瘤中的发生率(11.6%,5/43)明显低于叶状肿瘤(48.5%,16/33)。结论TERT启动子突变与乳腺纤维上皮性肿瘤的临床病理特征密切相关,TERT启动子突变检测对乳腺纤维上皮性肿瘤的鉴别诊断具有重要意义。

BRAF V600E、TERT启动子突变与甲状腺乳头状癌临床特征的关系

目的 探索BRAF V600E和TERT启动子两种基因突变与甲状腺乳头状癌(PTC)临床特征的关系,旨在为PTC患者的个体化精准诊断及治疗提供科学线索。方法 选择2019年2月至2021年4月在成都医学院第二附属医院普外二科收治的120例诊断为PTC手术患者的病理组织,应用二代测序法(NGS)进行BRAF V600E、TERT基因检测,分析两种基因的突变特点及其与临床特征之间的关系。结果 PTC患者经检测的BRAFV600E基因突变率为89.2%,TERT启动子突变率为4.2%,TERT启动子突变的患者均发现有BRAF V600E基因突变。两种基因共突变患者有80.0%(4/5)出现淋巴结转移。单因素分析结果显示,BRAF V600E突变与肿瘤原发灶情况、淋巴结转移、病变数量相关(P<0.05),BRAF V600E和TERT启动子双突变与临床分期相关(P<0.05)。结论 BRAF V600E基因在PTC中的突变率高,BRAF V600E与TERT启动子突变常同时出现,并且在一定程度上对预测PTC的恶性程度及预后情况具有应用价值。

成人胶质母细胞瘤TERT启动子和ATRX突变预后价值

目的探究成人胶质母细胞瘤(glioblastoma,GBM)中端粒酶逆转录酶(telomerase reverse transcriptase,TERT)启动子,α-地中海贫血伴智力低下综合征基因(alpha-thalassemia/mental retardation syndrome X-linked,ATRX)突变对预后的影响。方法收集2020年至2022年在徐州医科大学附属医院神经外科行手术治疗的82例GBM患者病理及随访资料。TERT启动子区(C228T和C250T)及ATRX突变检测采用多重PCR扩增+二代测序(next generation sequencing,NGS)方法,根据患者HE染色切片的镜下结果将其分为低级别组织形态的GBM和高级别组织形态GBM两组,分析两组GBM患者TERT启动子和ATRX突变率的差异。GBM患者预后的影响因素采用多因素COX回归分析。结果两组GBM患者中TERT启动子突变率(25.0%vs.75.8%,χ^(2)=12.584,P<0.01)存在统计学差异。年龄≤60岁、术中肿瘤全切、术后放疗、化疗、TERT启动子非突变是影响GBM患者预后的独立保护性因素(P<0.05)。结论TERT启动子突变的GBM患者预后较差、临床中常规检测TERT启动子并结合其他分子标记物有助于正确评估GBM患者预后,有较高临床价值。

丁二烯中阻聚剂TBC测试方法的研究

通过对工业用丁二烯中微量特丁基邻苯二酚(TBC)的测定方法分光光度法和气相色谱法进行了方法原理、仪器条件、校准曲线等对比研究,试验结果表明,两种方法不存在显著性差异,气相色谱法较分光光度法具有操作简捷、准确度高、重复性好的特点。

基于AMPK/mTOR通路探讨注射用益气复脉对TBHP诱导H9c2细胞损伤的保护作用

目的:探讨注射用益气复脉(YQFM)通过AMPK/mTOR信号通路调控自噬减轻叔丁基过氧化氢(TBHP)所致H9c2心肌细胞损伤的机制。方法:体外培养H9c2心肌细胞,分为正常对照组、TBHP组、TBHP+YQFM组。CCK-8法检测各组H9c2心肌细胞存活率;免疫荧光检测细胞自噬情况;免疫印迹法检测各组细胞自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ及AMPK/mTOR通路相关蛋白表达。结果:用2、4、8、16 g/L的YQFM预处理后,可显著恢复TBHP诱导的H9c2细胞损伤;免疫荧光染色结果显示,与正常对照组相比,TBHP组细胞LC3荧光强度显著升高(P<0.01);与TBHP组相比,TBHP+YQFM组LC3荧光强度降低,其中2 g/L YQFM组具有显著性(P<0.05)。Western blot检测结果显示:TBHP组p-AMPK/AMPK、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ表达显著增加,p-mTOR/mTOR比率显著降低;YQFM预处理使自噬相关蛋白p-AMPK/AMPK、LC3-Ⅱ/LC3-Ⅰ比率明显降低,4 g/L YQFM组p-mTOR/mTOR比率明显升高。结论:注射用益气复脉能有效拮抗TBHP引起的H9c2细胞损伤,其机制与通过AMPK/mTOR信号通路调控自噬途径有关。

叔丁基过氧化氢催化分解制备丙酮及催化剂失活原因

以催化异丁烷和氧气为原料生成的叔丁基过氧化氢(TBHP)分解来制备丙酮。对制备丙酮的最优反应条件、催化体系、催化剂稳定性、循环利用性以及催化剂失活的原因进行了考察。结果表明,催化剂的酸性对反应的活性有明显的影响,β分子筛具有最优的催化性能(TBHP转化率为100%),且主要产物丙酮的选择性为49%;在28 h的反应周期内,丙酮的选择性明显下降(降低21%),说明催化剂的稳定性较差,但多次(5次)再生活性仍可恢复。通过不同产物预处理催化剂,确定了丙酮的进一步反应是催化剂失活的主要原因;使用无水乙醇稀释TBHP后反应28 h的稳定性明显提高,并且催化剂的反应性能及重复利用性并未受到影响。

叔丁基化芳基磷酸酯和碳微球对PC/ABS性能的影响

为研究叔丁基化芳基磷酸酯(TBP)和碳微球(CMS)对聚碳酸酯/丙烯腈-丁二烯-苯乙烯(PC/ABS)塑料性能的影响,通过熔融挤出法制备了PC/ABS/TBP/CMS复合材料,利用水平垂直燃烧试验仪、锥形量热仪、热重分析仪和万能材料试验机等分析了复合材料的阻燃性能、热性能和物理性能。结果表明,TBP可以提高PC/ABS的阻燃性能,但会降低力学性能和尺寸稳定性,在PC/ABS中加入质量分数12%的TBP,PC/ABS/TBP复合材料的极限氧指数(LOI)为28.1%,垂直燃烧测试(UL 94)等级达到V-0级(3 mm),相比于PC/ABS,PC/ABS/TBP的拉伸强度、弯曲强度、弯曲弹性模量和缺口冲击强度分别下降19.5%,16.6%,17.5%和56.1%,水平方向模后收缩率(PMSH)、垂直方向模后收缩率(PMSv)和熔体流动速率(MFR)提升68.9%,58.1%和196.1%;随着CMS加入量的增加,PC/ABS/TBP/CMS复合材料的阻燃性能先升高后下降,拉伸强度、弯曲强度和缺口冲击强度先上升后下降,热性能、刚性和尺寸稳定性逐渐提高;PC/ABS/TBP/5CMS的LOI为33.2%,UL 94等级达到V-0级(2 mm),相比于PC/ABS/TBP,其最大失重温度、拉伸强度、弯曲强度、弯曲弹性模量和缺口冲击强度分别提高7.5℃,11.7%,12.2%,14.1%和26.3%,PMSP,PMSH和MFR分别降低32.0%,26.5%和19.1%。

特丁基对苯二酚在不同油脂贮存过程中转化产物的识别、分离与鉴定

以猪油、大豆油和棕榈油为实验原料,模拟贮存过程,分析不同种类油脂贮存过程中特丁基对苯二酚(tert-butylhydroquinone,TBHQ)转化情况。结果表明:随着贮存时间的延长,油样中TBHQ的剩余量及转化的叔丁基对苯醌(2-tert-butyl-1,4-benzoquinone,TBBQ)量之和小于TBHQ原始添加量,并在不同油样甲醇提取液的气相色谱图中均发现除TBHQ和TBBQ之外相同的色谱峰。采用液相色谱分别分离纯化出未知色谱峰,并采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱、核磁共振仪、紫外光谱仪和傅里叶变换红外光谱仪对未知化合物结构进行鉴定与表征,结果证明TBHQ在不同油脂中的转化产物相同,除TBBQ外均含有另一转化产物2-(2-甲基烯丙基)氢醌。

臭氧化法制备N-Boc-(甲氨基)乙醛

以N-甲基烯丙胺和二碳酸二叔丁酯为原料,在乙醇中缩合得到N-Boc-甲基烯丙胺,再以乙酸乙酯为溶剂经臭氧臭氧化,用NaHSO_(3)还原分解,经萃取、蒸馏,制备N-Boc-(甲氨基)乙醛。采用L16(45)正交实验确定了最优臭氧化温度为5~10℃、反应时间为3 h、臭氧流量为0.04 m^(3)/h,粗产物用乙醚萃取,获得目标产物收率78.7%,纯度99.2%(HPLC),并用IR、^(1)H NMR、^(13)C NMR和MS表征了产物的结构。

补肾健脾方对卵巢早衰小鼠ER/c-Myc/TERT信号通路调控的影响

目的观察补肾健脾方对卵巢早衰(POF)小鼠ER/c-Myc/TERT信号通路调控的影响。方法将50只B6AF1小鼠随机分为正常组、模型组、阳性药组、补肾健脾方高剂量组、补肾健脾方低剂量组。采用小鼠透明带3(ZP_(3))诱导建立POF模型,各组分别给予药物或生理盐水,期间定时观察小鼠动情周期的变化。干预4周后,取小鼠血清和卵巢组织。放射免疫分析法检测小鼠血清雌二醇(E_(2))、促卵泡生成激素(FSH)的水平;HE染色法观察卵巢组织病理形态;免疫荧光法检测卵巢透明带的变化;Western blot法检测雌激素受体(ER)、c-Myc和端粒酶逆转录酶(TERT)的表达。结果与模型组相比,补肾健脾方高、低剂量组均可显著升高小鼠血清E_(2)水平(P<0.05),降低FSH水平(P<0.05,P<0.01),提高生长卵泡和成熟卵泡的数量,降低卵巢透明带的荧光表达,显著增加ER、c-Myc、TERT的表达(P<0.05,P<0.01)。结论补肾健脾方通过提高E2水平,促进ER的激活,刺激c-Myc的表达,进而调节TERT的表达,从而促进卵巢颗粒细胞的增殖发育以及卵母细胞的成熟,是其发挥治疗POF作用的途径。

甲状腺癌RAS/BRAF/TERT基因突变与临床病理特征的关系

目的研究甲状腺癌5种驱动基因RAS(KRAS,NRAS,HRAS)、BRAF和TERT突变与临床病理特征的关系,以期细化甲状腺癌主要驱动基因突变的人群特征,在临床实践中为患者提供更精准的分子分型检测指导。方法回顾性收集319例甲状腺癌患者的临床病理特征和5种基因突变状态资料,分析各基因突变状态与患者年龄、性别、病理类型的相关性。结果 319例患者的RAS(KRAS,NRAS,HRAS)、BRAF和TERT突变频率分别为5. 3%、45. 1%和12. 9%。其中37例患者检出双基因突变(11. 6%);BRAF和TERT共突变发生频率最高,为9. 4%;其次为NRAS/TERT共突变4例。RAS和BRAF的突变状态与患者病理类型显著相关(均P<0. 01);RAS突变在滤泡性癌中比例高;BRAF突变主要见于乳头状癌,滤泡性癌中少见;TERT突变在乳头及滤泡性癌中均可见,在滤泡性癌中比例增高,但无统计学意义。此外,RAS/BRAF/TERT基因突变患者的平均年龄分别为52. 5岁、44. 6岁和59. 5岁,均显著高于总体平均年龄(40岁)(P <0. 01);而<19岁的青少年患者(31例)仅1例检出BRAF基因突变;所有病例其他驱动基因均为阴性。结论甲状腺癌RAS(KRAS,NRAS,HRAS)、BRAF和TERT驱动基因突变与患者的病理分型及年龄相关。青少年甲状腺癌患者RAS(KRAS,NRAS,HRAS)、BRAF和TERT驱动基因突变发生频率极低,在临床实践中需有针对性的设计基因检测方案。

TERT及TIN2在获得性再生障碍性贫血患者中的表达及其与发病相关性研究

目的:检测获得性再生障碍性贫血(acquired aplastic anemia,AAA)患者外周血单个核细胞的端粒酶逆转录酶TERT和端粒保护蛋白TIN2基因表达水平,探讨它们与AAA发病的关系。方法:采用实时荧光定量聚合酶链反应(RT-q PCR)检测40例AAA中非重型再生障碍性贫血(NSAA)患者33例,重型再生障碍性贫血(SAA)患者7例和20例正常对照者外周血单个核细胞中TERT、TIN2 mRNA表达情况,并与外周血细胞分类之间进行了相关性比较。结果:AAA患者TERT、TIN2 mRNA表达水平均较正常对照组明显降低(P<0.05);SAA患者TERT、TIN2mRNA表达水平较正常对照组明显降低(P<0.01);SAA患者TERT、TIN2 mRNA表达水平较NSAA明显降低(P<0.05);NSAA患者TIN2 mRNA表达水平较正常对照组明显降低(P<0.01);NSAA患者TERT mRNA表达水平和正常对照组比较没有显著性差异(P=0.082)。TERT mRNA表达水平与红细胞(RBC)(r=0.437,P=0.029)及血红蛋白(Hb)(r=0.522,P=0.007)有显著相关性;TIN2 mRNA表达水平与淋巴细胞百分比(lymphocyte%)(r=-0.404,P=0.045)有显著相关性。结论:端粒酶逆转录酶TERT mRNA表达水平与RBC、Hb水平有关;端粒保护蛋白TIN2 mRNA表达水平与淋巴细胞比例有关。

酚类抗氧化剂的主要转化产物——醌的研究进展

酚类抗氧化剂在抗氧化过程中的主要转化产物为醌类物质,为了更深入地了解这些醌类物质的特点,从化学结构、检测方法、抗氧化作用等方面总结常用抗氧化剂生育酚、鼠尾草酚、迷迭香酚、茶多酚、特丁基对苯二酚(TBHQ)的主要转化产物生育醌、鼠尾草醌、迷迭香醌、表儿茶素类醌及叔丁基对苯醌(TBBQ)的研究进展,另外,对一些醌类的细胞毒性进行了归纳。上述几种酚类抗氧化剂的转化产物醌类物质,多采用高效液相色谱法检测,它们中大部分具有抗氧化活性,有些则在一定条件下具有促氧化效果。目前,关于醌类细胞毒性的研究主要集中在TBBQ和生育醌。今后应加强醌类物质抗氧化作用、细胞毒性以及定量分析方法等方面的研究,以期为科学认识抗氧化剂和开发新型抗氧化剂奠定基础。

鼻咽癌易感TERT基因的多种靶microRNA在鼻咽癌患者血清中表达量变化及其临床诊断价值

目的探讨鼻咽癌易感TERT基因多种靶miRNA在鼻咽癌患者血清中含量对临床诊断的价值。方法收集在本医院就诊60例鼻咽癌者及60例健康者外周血,RT-PCR法检测外周血中mir-138、mir-491、mir-181、mir-1207、mir-346、mir-512-5P、mir-299、mir-1266、mir-1182相对表达量差异,分析mir-1182含量与鼻咽癌患者临床病理特征相关性。结果鼻咽癌患者血液中mir-346、mir-512-5P、mir-299、mir-1266、mir-1182含量低于健康对照组,mir-1182差异显著(P<0.01);Ⅲ~Ⅳ期、肿瘤直径≥5 cm及癌转移者血清中mir-1182含量分别低于Ⅰ~Ⅱ期、肿瘤直径≤5 cm及无转移患者(P<0.05);mir-1182诊断AUC为0.851(95%CI:0.782~0.919),灵敏度65%,特异度93.3%。结论鼻咽癌患者血清中mir-1182含量与肿瘤大小、有无淋巴结转移、TNM分期、病理分期负相关,可见mir-1182有较好诊断效能,具有鼻咽癌临床诊断运用价值。

BRAF V600E和TERT启动子突变与甲状腺乳头状癌临床病理特征的关系

目的:探讨端粒酶逆转录酶(telomerase reverse transcriptase,TERT)启动子突变和BRAF V600E突变与甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)临床病理因素的关系。方法:对2014年12月至2016年12月山西省肿瘤医院728例PTC患者肿瘤组织提取DNA,检测其BRAF V600E和TERT启动子突变情况,收集患者临床病理资料,进行统计学分析。结果:728例患者中BRAF V600E突变型308例(42.3%)。TERT C228T突变型78例(10.7%),TERT C250T突变型4例(0.5%)。TERT启动子突变与患者发病年龄(P=0.034)、腺外侵犯(P=0.026)、肿瘤直径(P=0.028)、中央区淋巴结转移(P=0.012)、远处转移(P=0.001)、TNM分期(P<0.001)、病理亚型(P=0.003)以及肿瘤复发(P=0.002)显著相关。BRAF V600E突变与PTC患者的腺外侵犯(P=0.001)、肿瘤直径(P<0.001)、桥本甲状腺炎(P<0.001)、远处转移(P=0.010)、TNM分期(P=0.009)和肿瘤复发(P=0.001)显著相关。同时伴有BRAF V600E和TERT启动子突变与发病年龄(P=0.024)、腺外侵犯(P=0.022)、合并桥本甲状腺炎(P=0.005)、中央区淋巴结转移(P=0.018)及更高临床分期(P=0.002)显著相关。结论:BRAF V600E和TERT启动子突变与高侵袭性的临床病理因素相关,BRAF V600E和TERT存在协同作用,对于指导治疗和评估预后具有积极作用。