解脲支原体药敏与tetM基因检测及生物群的研究

目的 了解泌尿生殖道支原体的耐药性机理 ,指导临床治疗。方法 采用微量肉汤稀释法测定 2 81株UU对 5种抗菌药物的最低抑菌浓度 (MIC) ,用PCR法扩增tetM基因并酶切 ,用UUMB抗原基因引物对tetM基因阳性UU株进行生物群的研究。结果 2 81株UU中 82株对四环素MIC为 16～ 2 5 6μg/ml ,3 9株为 8μg/ml ,7株为 4μg/ml,15 3 株MIC <4μg/ml;12 1株MIC≥ 8μg/ml及 2株MIC =4μg/ml者均出现 3 77bptetM基因阳性带 ;阳性检测率为 43 .77%。15 8株UUMIC≤ 4μg/ml未见类似扩增带。扩增产物用HpaⅡ酶切和电泳分析 ,均产生 2 79bp和 98bp两个特异性片段。2 81株UU用群特异性PCR分析 ,生物群 1有 166株 ,生物群 2有 115株 ;12 3株tetM阳性UU株 ,属生物群 1、2者分别有 5 4株和 69株 ,分别占 3 2 .5 3 % ( 5 4/166)和 60 .0 % ( 69/115 ) ( χ2 =7.94,P <0 .0 5 )。结论 ①PCR技术检测泌尿生殖道感染患者UU耐药性tetM基因具有特异、敏感、快速等优点 ;②载有tetM基因的UU株可能成为四环素耐药株 ,应进行监测及随访 ;③我国衡阳地区UU四环素耐药株以生物群 2占优势。

猪源屎肠球菌tetM基因的检测

用微量肉汤倍比稀释法测定了猪源屎肠球菌对四环素等抗生素的敏感性,用PCR和DNA测序方法检测了屎肠球菌中四环素类耐药基因(tet基因),并分析了试验菌对四环素类的耐药机制。结果表明:14株猪源屎肠球菌对四环素、多西环素、环丙沙星、红霉素全部耐药,4株对头孢噻呋耐药;在14株屎肠球菌中,分别有13株和9株含tet L和tet M基因,其中有9株同时携带tet L和tet M基因;猪源屎肠球菌主要存在主动外排和核糖体保护两种耐药机制,其对四环素类的耐药性主要与携带tet M和tet L有关。

解脲支原体耐药性与tetM基因关系的研究

从流行病学角度进一步探讨解脲支原体耐药性与其ＴｅｔＭ基因之间的关系。方法对１７７株Ｕｕ临床菌株采用微量肉汤稀释法检测其对四环素和强力霉素的敏感性，用聚合酶链反应（ＰＣＲ）法检测其ｔｅｔＭ基因携带情况，并用Ｒ＊Ｃ表Ｘ＾２检验分析Ｕｕ对四环素族药物的耐药性与ｔｅｔＭ基因之间的关系。结果（１）Ｕｕ对四环素和强力霉素的耐药性与ｔｅｔＭ基因关系密切（Ｐ〈０．０５）；

阴道加德纳菌四环素耐药基因tetM的体外扩增及其产物的序列测定

利用聚合酶链式反应（ＰＣＲ）对５株耐四环素阴道加德纳菌（Ｇａｒｄｎｅｒｅｌａｖａｇｉｎａｌｉｓ）（ＭＩＣ＞１６ｍｇ／Ｌ）的耐药基因ｔｅｔＭ进行体外扩增。核苷酸序列测定证实，１株耐四环素阴道加德纳菌的ｔｅｔＭ核苷酸序列与另４株ｔｅｔＭ的序列不同，两者的同源性为９８．４％，同时又和Ｔｎ１５４５、Ｔｎ９１６部分同源。说明在阴道加德纳菌中ｔｅｔＭ基因存在多态性，其获得方式、来源途径均不相同。

解脲脲原体的tetM基因与四环素类药物MIC水平的关联性研究

目的探讨目前解脲脲原体对四环素类药物的耐药性及其与tetM耐药基因的关系。方法对分离自临床妇产科和性病门诊患者的解脲脲原体49株,经鉴定确认后,采用微量肉汤稀释法检测其四环素和米诺环素的最小抑菌浓度(MIC),根据药敏结果分层随机抽取部分菌株采用PCR技术扩增四环素耐药基因tetM。结果解脲脲原体的米诺环素和四环素MIC50(50%菌株被抑制所需抗生素浓度)分别为<0.0625 mg/L和<0.125 mg/L;MIC90(90%菌株被抑制所需抗生素浓度)分别为0.125 mg/L和1 mg/L;在28株非四环素耐药的解脲脲原体菌株中,有8株检测到tetM基因tetM基因阳性组的四环素和米诺环素的MIC水平比tetM阴性组高,且差异有统计学意义(四环素:t=4.34,P=0.0001;米诺环素:t=5.90,P<0.0001)。结论在泰安地区四环素类药物可以重新作为治疗解脲脲原体感染的一线药物,尤其是米诺环素的抗菌效果较好;在非四环素耐药的解脲脲原体菌株中也存在tetM基因的携带,且影响其MIC的提高。

解脲脲原体中tetM基因的检测及其临床应用评价

目的检测解脲脲原体(Uu)tetM基因,并与临床疗效进行综合分析。方法以多聚酶链反应(PCR)法检测tetM基因;用多西环素对患者进行治疗,并观察其疗效。结果120株Uu分离株中,有32株Uu检测tetM基因阳性;tetM基因检测阳性患者及阴性患者用多西环素治疗的有效率分别为11.1%和100%。结论tetM基因检测能较准确地反应Uu对四环素类的耐药性,且与临床疗效有很高相关性。

甲基丙烯酸三乙基锡酯(TETM)的辐射聚合

本文介绍了用^(60)Coγ辐射引发聚合合成了纯度较高的聚甲基丙烯酸三乙基锡酯(PTETM),并研究了温度对其辐射溶液聚合的影响。结果表明,辐射聚合反应速率及聚合物分子量均随着聚合温度的升高而增大,影响辐射聚合反应的综合活化能为18.0kJ/mol。本文还研究了聚合物(PTETM)的部分热性质。

南昌地区35株肺炎链球菌TetM基因检测

目的调查南昌地区肺炎链球菌对四环素耐药tetM基因。方法采用细菌编码细菌核糖体护保蛋白的tetM基因PCR检测体系对2005年元月～2005年10月临床分离株35株肺炎链球菌(1株中介,34株耐药)进行检测。结果35株肺炎链球菌中有31株检出tetM基因,还有4株耐药基因不明。结论南昌地区肺炎链球菌对四环素的耐药以含tetM基因为主。

肺炎链球菌耐药基因ermB、mefA、tetM与转座子整合酶基因intTn的检测

目的研究耐药基因ermB、mefA、tetM与转座子整合酶基因intTn在携带肺炎链球菌的北京儿童中分布特点。方法对185株呼吸道感染患儿鼻咽部分离的肺炎链球菌进行以下检测:Etest、琼脂稀释或纸片扩散法测定对大环内酯类、四环素、β内酰胺类及头孢类等15种抗生素的药物敏感性。PCR检测大环内酯类耐药基因ermB和mefA,四环素耐药基因tetM以及转座子Tn1545的整合酶基因intTn。结果185株肺炎链球菌的药敏结果显示,对红霉素、克林霉素、四环素和复方磺胺甲基异唑的耐药率较高,分别为78.9%、76.2%、86.0%和78.7%,对阿莫西林克拉维酸、头孢克洛、头孢曲松和头孢呋辛耐药率较低,分别为2.2%、15.5%、2.8%和14.1%。所有红霉素耐药株均检出ermB和或mefA,其中79.5%为ermB阳性,17.8%为ermB和mefA同时阳性,2.7%为mefA阳性。tetM基因在分离株中的阳性率是87%,四环素耐药组的tetM基因携带率是96.9%,高于敏感组(26.9%)。四环素耐药株的红霉素耐药率(90.0%)亦高于敏感株组(11.5%)。87.6%的肺炎链球菌存在intTn基因,intTn基因阳性组的红霉素、四环素、氯霉素、复方磺胺甲基异唑和环丙沙星的耐药率较intTn基因阴性组高。分离株最常见的基因组合是intTn+tetM+ermB,占58.4%。结论北京地区呼吸道感染儿童鼻咽部肺炎链球菌耐大环内酯类抗生素的主要原因是ermB编码的23SrRNA甲基化酶致靶位改变。tetM基因编码蛋白质的核糖体保护作用,是肺炎链球菌四环素耐药的重要机制。接合性转座子Tn1545的存在与菌株的红霉素和四环素耐药关系密切,可能是肺炎链球菌多重耐药的重要机制之一。

支原体四环素耐药与渔畜禽类养殖业中抗性基因TetM污染的关联性研究

目的:探讨支原体四环素耐药与养殖业抗性基因污染的相关性。方法:采集渔畜禽类养殖业周边环境部分标本、产品标本和临床分离出的四环素耐药支原体,检测各类标本中的Tet M基因进行比对。结果:支原体对四环素的耐药菌株和中介菌株中均有部分菌株检测到TetM基因存在,检出率分别为82.86%和49.28%;渔畜禽类养殖业环境标本共计60份,TetM基因检出率为95%;渔畜禽类产品食材标本Tet M基因共计检出率为80%。结论:本地区的支原体临床分离株四环素耐药基因Tet M检出率较高,养殖业抗生素的大量使用导致抗性基因对环境的污染情况非常严重,推断可能因为Tet M基因与可移动元件相结合,通过污染环境和食物链整合到人体菌群,包括感染的支原体,导致耐药的发生。

海南地区2011年四环素高度耐药淋球菌tetM基因分型

目的了解海南地区四环素高度耐药淋球菌(TRNG)的分子流行病学情况。方法采用琼脂稀释法检测TRNG菌株,PCR方法对TRNG菌株鉴定并进行tetM基因分型;纸片酸度法测定产β-内酰胺酶菌株(PPNG),PCR方法鉴定β-内酰胺酶质粒并行TEM-1基因分型。结果 2011年检测101株淋球菌,检出TRNG 54株(53.47%),其中22株(40.74%)对四环素和青霉素耐药;tetM基因分型结果显示52株为荷兰型,有2株为美国型。22株对四环素和青霉素耐药株的TEM-1基因分型21株为亚洲型,1株非洲型且合并美国型;未见多伦多型、里约型。结论海南地区TRNG流行株以荷兰型tetM基因为主(96.30%),美国型偶见。

南京地区1999-2004年四环素高度耐药淋球菌tetM基因分型及流行研究

目的 了解南京地区四环素高度耐药淋球菌（TRNG）tetM基因的分子流行病学情况。方法 采用琼脂稀释法检测菌株是否为TRNG，采用纸片酸度定量法测定菌株是否产β-内酰胺酶。采用单管PCR方法对TRNG阳性菌株作terM基因分型。结果 1999-2004年间南京地区804株淋球菌中共检出136株（16．92％）TRNG，β-内酰胺酶阳性的淋球菌（PPNG）为290株，所有TRNG中69．85％（95／136）为PPNG／TRNG，TRNG的阳性率逐年增高。tetM基因分型结果显示，荷兰变型为135株，美国变型仅1株。结论 南京地区流行的TRNG以荷兰型tetM基因为主（99．26％），美国型仅为偶发。

皖北地区MRSA耐药基因研究

目的了解皖北地区临床分离的耐甲氧西林金葡菌(MRSA)所携带5类药物的7种耐药基因状况,并探讨其耐药特性。方法应用PCR方法检测64株MRSA中mecA、gyrA、qacA/B/C、qacA、ermA/B/C、ermB、tetM耐药基因。结果 64株MRSA中,mecA基因携带率为100%,tetM、gyrA、qacA/B/C、qacA、ermA/B/C、ermB基因携带率分别为95.3%、81.3%、34.4%、15.6%、39.1%、28.1%;基因组合以mecA+tetM+gyrA模式最多,为26.5%。MRSA对万古霉素无耐药,对氯霉素、磷霉素、利福平的耐药性较低,对多种药物表现出较高的耐药性。结论皖北地区MRSA中,mecA、tetM、gyrA基因携带率较高,而qacA/B/C、qacA、ermA/B/C、ermB基因携带率相对较低。

解脲脲原体对四环素类药物的耐药性及tet M耐药基因研究

目的探讨目前解脲脲原体对四环素类药物的耐药性及其与tetM耐药基因的关系。方法对分离自临床妇产科和性病门诊患者的解脲脲原体株,经鉴定确认后,采用微量肉汤稀释法检测其四环素和米诺环素的最小抑菌浓度(MIC),根据药敏结果分层随机抽取部分菌株,采用PCR技术扩增四环素耐药基因tetM。结果解脲脲原体的米诺环素和四环素MIC50(50%菌株被抑制所需抗生素浓度)分别为<0.062 5 mg/L和<0.125 mg/L;MIC90(90%菌株被抑制所需抗生素浓度)分别为0.125 mg/L和1 mg/L;在34株非四环素耐药的解脲脲原体菌株中,有7株检测到tetM基因。tetM基因阳性组的四环素和米诺环素的MIC水平比tetM阴性组高,且差异有统计学意义(四环素:t=4.34,P=0.000 1;米诺环素:t=5.90,P<0.000 1)。结论在江苏部分地区四环素类药物可以重新作为治疗解脲脲原体感染的一线药物,尤其是米诺环素的抗菌效果较好;在非四环素耐药的解脲脲原体菌株中也存在tetM基因的携带,且影响其MIC的提高。

江门地区解脲脲原体和人型支原体对8种抗生素的敏感性测定及其与tet M基因检测的评价

目的 了解解脲脲原体 (Uu)和人型支原体 (Mh)对 8种抗生素敏感性 ,检测其tetM基因并进行比较 ,探讨其临床及实验意义。方法 以微量肉汤稀释法进行抗生素敏感性测定 ,以聚合酶链反应 (PCR)法检测tetM基因。结果 对Uu分离株 :四环素和强力霉素药物浓度 (MIC50 )分别为 0 5 μg/ml和 0 12 5 μg/ml,耐药率分别为2 7%、2 6 % ;交沙霉素效果最好 ,耐药率为 0。对Mh分离株 :四环素、强力霉素MIC50 分别为 1μg/ml和 0 0 6 μg/ml,耐药率分别为 4 0 %和 10 % ;交沙霉素效果最好 ,耐药率为 0。Uu、Mh分离株的tetM阳性检测率分别为 2 5 %和36 %。结论 Uu、Mh分离株对四环素、强力霉素的敏感性较差 ,对交沙霉素敏感性最好 ;载有tetM株可能成为耐药株。

儿童肺炎链球菌红霉素、四环素相关耐药基因的研究

目的：了解儿童肺炎链球菌（Streptococcus pneumoniae,SP）临床分离株红霉素、四环素耐药基因的流行状况及和耐药表型的关系。方法：对2005年1月-12月从温州附属育英儿童医院住院儿童分离到的47株肺炎链球菌进行了红霉素、四环素药敏试验,并用PCR法检测与红霉素耐药相关的红霉素核糖体甲基化酶基因（ermB）、主动外排转运基因（mefA）,与四环素耐药相关的tetM基因。结果：47株肺炎链球菌红霉素敏感3株、耐药44株;四环素敏感5株、耐药42株。3株红霉素敏感的肺炎链球菌均未检出ermB基因和mefA基因;44株红霉素耐药肺炎链球菌ermB基因和mefA基因的PCR检出率分别为81.8%和29.5%。共有39株肺炎链球菌检出ermB基因或/和mefA基因,其中单独携带ermB基因的耐药表型为29株,占74.4%;单独携带mefA基因的耐药表型2株,占5.1%;同时携带ermB基因和mefA基因的耐药表型8株,占20.5%。47株肺炎链球菌tetM基因的检出率为87.2%,其中四环素耐药组的检出率是95.2%,敏感组为25%。结论：ermB基因和mefA基因同时表达或单独表达均可导致红霉素耐药,ermB基因表达是儿童肺炎链球菌对红霉素耐药的主要原因,mefA基因表达是造成对红霉素耐药的次要原因。tetM基因是造成儿童肺炎链球菌四环素耐药的主要原因。红霉素和四环素已不是治疗肺炎链球菌的有效药物。肺炎链球菌四环素耐药尚存在其他的耐药机制。

解脲脲原体对四环素类药物耐药性变化及机制研究

目的分析解脲脲原体(UU)对四环素类药物的耐药性变化,并探讨其耐药机制。方法取疑似泌尿生殖道感染患者的分泌物进行解脲脲原体培养,同时检测其对多西环素、米诺环素的敏感性;分离对上述两种药物耐药的UU菌株,采用PCR试剂盒检测四环素类耐药基因TetM。结果2003～2005年间共培养检测泌尿生殖道分泌物2845例,UU阳性1213例,3年间UU对多西环素、米诺环素的耐药性没有明显变化,2003年耐药率为5.6%和7.7%,2004年为5.4%和5.5%,2005年为8.2%和7.6%。同时对多西环素、米诺环素耐药的20株UU中均检出四环素类耐药基因TetM。结论四环素类药物仍然是治疗UU感染的敏感药物;TetM耐药基因是导致UU对四环素类药物耐药的主要机制。

PCR检测耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌耐药基因

目的:了解安徽省宿州地区临床分离的耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌(MRCNS)所携带的7种耐药基因状况。方法:使用聚合酶链反应方法检测133株MRCNS中mecA、gyrA、qacA/B/C、qacA、ermA/B/C、ermB、TetM耐药基因。结果:133株MRCNS中,mecA基因携带率为100.0%,gyrA、qacA/B/C、qacA、TetM、ermA/B/C、ermB基因携带率依次为47.4%、51.9%、45.1%、25.6%、24.8%、12.0%。结论:安徽省宿州地区MRCNS中mecA、qacA/B/C、qacA基因携带情况常见,gyrA、TetM基因携带率较高,而ermA/B/C、ermB较低。

生殖道支原体对米诺环素的耐药性及相关耐药基因分析

目的探讨生殖道支原体对米诺环素的耐受性及其相关耐药基因携带情况。方法分别从1 076例生殖道感染者的生殖道分泌物中分离得到生殖道支原体,通过支原体鉴定药敏试剂盒鉴定支原体及其对米诺环素的敏感性,然后采用耐药基因检测试剂盒检测各菌株四环素耐药基因TetM的阳性率。结果共分离得到387株支原体阳性菌株,其中解脲支原体(UU)占71.06%,人型支原体(MH)占5.43%,UU+MH占23.51%;随着米诺环素浓度增大,菌株耐受性逐渐降低,当米诺环素浓度为1.000 0mg/L时抑菌效果最佳;TetM基因在中介菌株检出率显著高于敏感菌株,差异有统计学意义(P<0.05);TetM基因在耐药菌株中的阳性检出率最高,显著高于中介菌株、敏感菌株,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论生殖道支原体对米诺环素米诺环素有一定耐受性,TetM基因与菌株米诺环素耐受性密切相关,可以作为判断米诺环素耐药性的重要参考依据。