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小麦果聚糖合成酶基因6-SFT克隆和功能验证 被引量:12
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作者 高翔 佘茂云 +5 位作者 殷桂香 于洋 别晓敏 杜丽璞 徐惠君 叶兴国 《科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第23期70-75,共6页
许多研究表明植物中果聚糖累积有助于提高植物耐逆境胁迫能力,但对小麦中果聚糖合成相关基因及其与抗逆性关系还缺乏研究。本研究拟从普通六倍体小麦中克隆出果聚糖合成酶基因6-SFT并进行生物学特性及功能研究,以期解析小麦通过累积果... 许多研究表明植物中果聚糖累积有助于提高植物耐逆境胁迫能力,但对小麦中果聚糖合成相关基因及其与抗逆性关系还缺乏研究。本研究拟从普通六倍体小麦中克隆出果聚糖合成酶基因6-SFT并进行生物学特性及功能研究,以期解析小麦通过累积果聚糖途径提高自身抗逆境胁迫能力的分子机理,为转6-SFT基因提高小麦抗逆境胁迫能力提供理论依据。利用touch-down PCR技术从小麦品种杨麦6(Triticum aestivum cv. Yangmai 6)基因组及cDNA中分离出编码6-SFT基因的全长序列,运用生物学信息技术对其编码蛋白的相关理化及生物学功能进行了预测,同时利用农杆菌介导法将所克隆的小麦6-SFT基因转入了烟草,对转基因烟草植株进行了抗旱、抗盐和抗低温鉴定。结果表明,小麦中6-SFT基因的gDNA和cDNA长度分别为3134bp和1851bp,序列结构分析表明该基因含有4个外显子、3个内含子,编码产物为约68kD的蛋白质,其等电点(pI)约为5.25,具有液泡定位信号;转小麦6-SFT基因烟草植株表现出较强的抗旱、抗盐和抗低温能力。本研究为利用基因工程技术改良小麦抗逆性提供重要理论依据。 展开更多
关键词 小麦 6-SFT基因 烟草 转基因 抗逆性
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海藻糖-6-磷酸合成酶转基因烟草提高耐盐性的研究 被引量:21
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作者 郭蓓 胡磊 +2 位作者 何欣 陈雪梅 蒋湘宁 《植物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第1期41-49,共9页
海藻糖-6-磷酸合成酶(trehalose-6-pho sphate synthase,TPS)是海藻糖合成途径中的一个关键酶,近些年来受到广泛关注,以往的研究多数集中于细菌和真菌等,而对植物体内TPS基因的研究较少。为此,我们首先通过RT-PCR(reverse tran-scriptio... 海藻糖-6-磷酸合成酶(trehalose-6-pho sphate synthase,TPS)是海藻糖合成途径中的一个关键酶,近些年来受到广泛关注,以往的研究多数集中于细菌和真菌等,而对植物体内TPS基因的研究较少。为此,我们首先通过RT-PCR(reverse tran-scription PCR)克隆得到了拟南芥的TPS基因,进而将其构建到原核高效表达载体pET30a(+)上并在大肠杆菌BL21中进行高效诱导表达。在确认该基因能够在体外正常表达之后,将其构建到植物表达载体上并转入烟草体内,通过实时荧光定量PCR检测,证明在转基因个体中目的基因已经在受体基因组上完成整合,并且在其中的2个个体中实现了正常转录。在对目标个体进行海藻糖含量的测定以及抗逆性实验后发现,S5个体具有良好的表现,其体内海藻糖的含量明显高于其它个体,并具有较强的耐受盐胁迫的能力。 展开更多
关键词 基因克隆与异源表达 实时荧光定量PCR 胁迫耐受 转基因植物 海藻糖-6-磷酸合成酶
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深黄被孢霉Δ~6-脂肪酸脱氢酶基因的原核表达和转基因植株再生研究
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作者 王广科 李明春 +1 位作者 李晋川 刑来君 《成都医学院学报》 CAS 2009年第1期1-6,共6页
目的通过农杆菌介导法将来源于深黄被孢霉的Δ6-脂肪酸脱氢酶(D6D)基因导入到东北大豆绥农10和吉林47中,最终获得转基因植株。方法利用子叶节外植体诱导出丛生芽和再生植株,利用卡那霉素的抗性筛选培养基连续筛选以及PCR方法、DNA分子... 目的通过农杆菌介导法将来源于深黄被孢霉的Δ6-脂肪酸脱氢酶(D6D)基因导入到东北大豆绥农10和吉林47中,最终获得转基因植株。方法利用子叶节外植体诱导出丛生芽和再生植株,利用卡那霉素的抗性筛选培养基连续筛选以及PCR方法、DNA分子杂交分析和GC分析检测转基因植株中的Δ6-脂肪酸脱氢酶基因表达状况。结果经过含50 mg/L卡那霉素的抗性筛选培养基连续筛选,获得了一批转基因植株。经PCR检测和DNA分子杂交分析,初步证明Δ6-脂肪酸脱氢酶基因已导入并整合到大豆基因组中。将转基因大豆T1代和T2代种子进行脂肪酸GC分析,结果在大豆种子中检测到Δ6-脂肪酸脱氢酶基因的产物GLA,证明该基因在大豆中得到了表达。 展开更多
关键词 Δ6-脂肪酸脱氢酶基因 大豆 农杆菌介导转化 脂肪酸GC分析 转基因植株
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Transgenic Tobacco Expressing a Modified VP6 Gene Protects Mice Against Rotavirus Infection
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作者 Jiang-Li DONG Bo ZHOU Gang SHENG Tao WANG 《Journal of Integrative Plant Biology》 SCIE CAS CSCD 2005年第8期978-987,共10页
Elevated expression of the rotavirus VP6 antigen in transgenic plants is a critical factor in the development of a safe and effective rotavirus vaccine. Using codon optimization, a gene that encodes the inner capsid p... Elevated expression of the rotavirus VP6 antigen in transgenic plants is a critical factor in the development of a safe and effective rotavirus vaccine. Using codon optimization, a gene that encodes the inner capsid protein VP6 of the human group A rotavirus was synthesized (sVP6). The VP6 and sVp6 genes were transformed into tobacco (Nicotiana tabacum L.) plants using Agrobacterium tumefaciens. The expression level of the sVP6 gene in transgenic plants was 3.8-34-fold higher than that of controls containing the non-modified VP6 gene, accounting for up to 0.34% of the total soluble protein (TSP). Then, BALB/ c female mice that had been gavaged weekly with 10 mg TSP containing 34 p.g VP6 protein, in which VP6-specific serum IgG and mucosal IgA antibodies were investigated. The severity and duration of diarrhea caused by simian rotavirus SA-11 challenge were reduced significantly in passively immunized pups, which indicates that anti-VP6 antibodies generated in orally immunized female mice can be passed onto pups and provide heterotypic protection. An edible vaccine based on the VP6 of human rotavirus group A could provide a means to protect children and young animals from severe acute diarrhea. 展开更多
关键词 capsid protein VP6 edible vaccine oral immunogenicity ROTAVIRUS TOBACCO transgenic plants.
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转双抗虫基因三倍体毛白杨抗虫性分析 被引量:6
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作者 李立 杨敏生 +2 位作者 梁海永 王进茂 张二亮 《河北农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第2期74-78,共5页
对经过6年田间栽植的转双抗虫基因(Bt cry1Ac和API)三倍体毛白杨部分系号再次进行分子生物学检测,初步证明外源基因在杨树基因组中稳定存在。同时以成树转基因系号叶片对杨扇舟蛾(Lymantria disparL.)和舞毒蛾(Lymantria disparL.)幼虫... 对经过6年田间栽植的转双抗虫基因(Bt cry1Ac和API)三倍体毛白杨部分系号再次进行分子生物学检测,初步证明外源基因在杨树基因组中稳定存在。同时以成树转基因系号叶片对杨扇舟蛾(Lymantria disparL.)和舞毒蛾(Lymantria disparL.)幼虫进行室内饲虫试验,并对幼虫致死率及树木生长情况进行了相关分析。结果表明:所检测的19个转基因系号,对两种昆虫均表现出抗虫性,分别有63.15%和31.58%的系号对舞毒蛾和杨扇舟蛾幼虫表现出高抗性(校正致死率超过80%),且不同系号对两种昆虫抗性大小是一致的,两者存在显著相关性;不同转基因系号对两种昆虫致死率与幼树相比均已明显下降;转基因明显抑制存活幼虫生长发育,且以不同系号所饲养幼虫的发育存在显著差异;转基因系号对幼虫致死率与其生长情况之间相关性不显著,表明外源基因转入时对生长没有产生影响。 展开更多
关键词 三倍体毛白杨 6年生转基因植株 外源基因 抗虫性
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对大班幼儿种植区域活动行为的观察研究 被引量:3
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作者 张春美 《幼儿教育(教育科学)》 2014年第1期32-35,共4页
研究者采取非参与式观察法,对N市一所省级示范幼儿园大班幼儿在种植区域活动中的行为进行了研究,结果发现:63.4%的幼儿能够独自完成播种任务,36.6%的幼儿需在教师或同伴的指导下完成;幼儿在拔草过程中对拔草原因、拔草方法和... 研究者采取非参与式观察法,对N市一所省级示范幼儿园大班幼儿在种植区域活动中的行为进行了研究,结果发现:63.4%的幼儿能够独自完成播种任务,36.6%的幼儿需在教师或同伴的指导下完成;幼儿在拔草过程中对拔草原因、拔草方法和拔下来的草的用途感兴趣,在收获活动中对作物的外形特征和用途感兴趣;幼儿会运用各种感官来感知土壤以及土壤中的小动物。另外,教师的观念、教师的指导和工具的种类对幼儿在种植区域活动中的行为有重要影响。 展开更多
关键词 种植区域 大班幼儿 行为
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