基于IL-6/STAT3和IL-2/STAT5信号通路探讨伏九贴敷药物调控Th17/Treg免疫平衡的抗哮喘作用机制

目的考察伏九贴敷药物(白芥子、甘遂、延胡索、细辛组成)通过IL-6/信号转导器和转录激活因子3(STAT3)、IL-2/信号转导器和转录激活因子5(STAT5)信号通路对哮喘大鼠CD4+T辅助细胞17(Th17)/CD4+CD25+调节性T细胞(Treg)平衡的调节作用,揭示其抗哮喘的作用机制。方法采用卵白蛋白(OVA)和氢氧化铝混合液致敏激发造模,然后于大鼠大椎穴、肺俞穴和肾俞穴敷上伏九贴敷药物,每次贴敷4 h,隔日1次,共给药7次。采用免疫组化检测肺组织Th17特异细胞因子IL-17、Treg转录因子Foxp3的阳性表达;流式细胞术检测外周血中Th17、Treg细胞比例;免疫蛋白印迹法检测肺组织IL-6/STAT3和IL-2/STAT5通路相关蛋白的表达。结果与模型组比较,伏九贴敷组大鼠肺中IL-17的阳性表达量明显减少(P<0.01),Foxp3的阳性表达明显增加(P<0.05);同时IL-6蛋白和STAT3磷酸化蛋白表达水平明显降低(P<0.01),而IL-2蛋白和STAT5磷酸化蛋白表达水平明显升高(P<0.01),但总STAT3和STAT5蛋白表达均没有明显变化(P>0.05)。此外,伏九贴敷组大鼠外周血中Th17细胞比例低于模型组,而Treg细胞比例高于模型组,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论哮喘大鼠存在Th17/Treg免疫失衡,伏九贴敷药物可通过抑制哮喘大鼠IL-6表达,下调磷酸化STAT3的表达,降低产生IL-17的Th17细胞水平;同时增加IL-2表达,介导STAT5磷酸化,升高表达Foxp3的Treg细胞水平,促进Th17/Treg趋于平衡,抑制大鼠哮喘免疫应答,从而发挥抗哮喘效应。

积雪草酸调控白细胞介素-6/信号转导子和转录激活子3/核转录因子-κB通路对哮喘小鼠Treg/Th17免疫平衡的影响

目的:探讨积雪草酸调控白细胞介素(IL)-6/信号转导子和转录激活子3(STAT3)/核转录因子-κB(NF-κB)通路对哮喘小鼠Treg/Th17免疫平衡的影响。方法:采用卵清蛋白(OVA)致敏和激发来制备哮喘小鼠模型,随机分为模型组、积雪草酸低剂量组(54 mg/kg)、积雪草酸高剂量组(108 mg/kg)、积雪草酸高剂量(108 mg/kg)+Colivelin(IL-6/STAT3/NF-κB激活剂,2 mg/kg)组,每组各10只。另选10只小鼠在致敏和激发阶段给予等剂量生理盐水设为对照组,用积雪草酸和Colivelin分组处理各组小鼠后检测其肺组织病理形态,肺泡灌洗液(BALF)中炎性细胞计数,外周血Treg/Th17,BALF和血清中Treg、Th17细胞分泌因子水平,肺组织IL-6/STAT3/NF-κB通路相关蛋白表达。结果:与对照组比较,模型组小鼠肺组织发生明显病理损伤,外周血Treg细胞占比和Treg/Th17,BALF和血清IL-10、IL-35水平降低(P<0.05)。肺部炎症评分,BALF中白细胞计数与嗜酸粒细胞计数,外周血Th17细胞占比,BALF和血清IL-17、IL-6水平,肺组织IL-6蛋白表达与p-STAT3/STAT3、p-NF-κB p65/NF-κB p65升高(P<0.05)。低、高剂量积雪草酸可逆转哮喘模型小鼠上述病理变化,且高剂量积雪草酸作用更强。Colivelin可减弱积雪草酸对哮喘模型小鼠上述病理变化的作用。结论:积雪草酸可通过减弱IL-6表达与STAT3、NF-κB的磷酸化,抑制哮喘小鼠炎症细胞及炎症因子产生,从而减轻气道炎症及肺组织损伤,改善肺功能。

牛蒡子苷元抑制TLR4/TRAF6/NF-κB信号通路对哮喘模型大鼠气道重塑和Th1/Th2免疫平衡的影响

目的研究牛蒡子苷元抑制Toll样受体4(TLR4)/肿瘤坏死因子受体相关因子-6(TRAF6)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路对哮喘模型大鼠气道重塑和Th1/Th2免疫平衡的影响。方法构建急性哮喘大鼠模型,随机分为5组(每组12只模型大鼠):模型组、牛蒡子苷元低、高剂量组、脂多糖(LPS,TLR4激活剂)组、牛蒡子苷元+LPS组,以12只Wistar正常大鼠作为对照组。分组处理后,观察各组大鼠哮喘症状并做评分、分类计数各组大鼠支气管肺泡灌洗液(BALF)中炎症细胞、检测各组大鼠肺组织病理变化、血清IgE水平、BALF和血清中白细胞介素(IL)-4、干扰素γ(IFN-γ)水平、IFN-γ/IL-4及肺组织TLR4/TRAF6/NF-κB通路相关蛋白表达。结果与对照组相比,模型组大鼠肺组织产生严重病理损伤,哮喘症状评分、WAt/Pbm、WAm/Pbm、BALF中巨噬细胞及淋巴细胞计数、血清IgE水平、BALF与血清中IL-4水平、肺组织TLR4、TRAF6表达及p-NF-κB p65/NF-κB p65升高(P<0.05),BALF与血清中Th1型细胞因子IFN-γ水平、IFN-γ/IL-4降低(P<0.05);与模型组相比,各牛蒡子苷元处理组中模型鼠的上述改变均被扭转,且高剂量牛蒡子苷元作用更强;LPS组大鼠各指标变化与牛蒡子苷元处理组相反,另外LPS可逆转高剂量牛蒡子苷元对大鼠各指标的作用。结论牛蒡子苷元可通过抑制TLR4/TRAF6/NF-κB信号激活而阻止哮喘大鼠气道炎症,促使Th1/Th2免疫平衡向Th1转移,改善大鼠气道重塑和肺损伤。

苦参碱调节IL-6/STAT3/NF-κB信号通路对炎症性肠病大鼠Th17/Treg平衡的影响

目的探讨苦参碱(MT)调节白细胞介素-6(IL-6)/信号转导和转录激活因子3(STAT3)/核转录因子κB(NF-κB)通路对炎症性肠病大鼠辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)平衡的影响。方法按照随机数字表法将SD大鼠分为空白对照组(CK组)、Model组,低、中、高剂量MT组(MT-L组,50 mg/kg;MT-M组,100 mg/kg;MT-H组,200 mg/kg),美沙拉嗪组(MSLM组,0.42 g/kg)、MT-H+rIL-6(IL-6激活剂)组(200 mg/kg+0.05 mg/kg),每组18只。除CK组外,其余组大鼠均采用50 g/L三硝基苯磺酸(20 mg/kg)缓冲液与500 mL/L乙醇按照1∶1比例混匀后灌肠以构建炎症性肠病大鼠模型,建模成功后,分别进行给药处理,每天1次,持续7周。分别在给药1、3、5、7周时对大鼠进行体质量的测量;比较各组大鼠结肠长度的变化;HE染色检测大鼠结肠组织病理损伤;ELISA法检测大鼠血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-17(IL-17)、IL-10水平;流式细胞术检测大鼠外周血中Th17、Treg细胞比例;Western blotting检测大鼠结肠组织中维甲酸相关孤核受体γt(RORγt)、叉头框蛋白P3(Foxp3)、IL-6、p-STAT3、p-NF-κB p65蛋白表达。结果与CK组比较,Model组大鼠结肠组织病理损伤严重,体质量(3、5、7周时)、IL-10水平、Treg细胞比例、Foxp3蛋白表达降低,结肠变短,TNF-α、IL-17水平、Th17细胞比例、Th17/Treg比值、RORγt、IL-6、p-STAT3、p-NF-κB p65蛋白表达增高(P<0.05);与Model组比较,MT-L组、MT-M组、MT-H组、MSLM组对应指标变化趋势与上述相反(P<0.05);rIL-6减弱了高剂量MT对炎症性肠病大鼠Th17/Treg平衡的促进作用。结论MT可能通过抑制IL-6/STAT3/NF-κB信号通路,促进炎症性肠病大鼠Th17/Treg平衡。

甲泼尼龙治疗视神经脊髓炎谱系疾病患者后IL-6和Th17/Treg细胞平衡的关系

目的探讨甲泼尼龙视神经脊髓炎谱系疾病(Neuromyelitis optica spectrum disorder,NMOSD)患者后白介素6(Interleukin-6,IL-6)在NMOSD急性期中对辅助性17型T细胞(Helper T cell type 17,Th17)细胞/调节性T细胞(Regulatory T cell,Treg)细胞平衡的作用影响。方法收集2019年1月-2020年12月就诊于维吾尔自治区人民医院住院的NMOSD共19例,采用大剂量静脉注射甲泼尼龙(high-dose intravenous methylprednisolone,IVMP)冲击治疗,激素冲击治疗结束后通过流式细胞术检测Th17和Treg细胞比例,CBA法检测外周血IL-6、IL-17和IL-10水平,采用EDSS评估NMOSD患者急性期残疾状态,比较IVMP治疗前后Th17、Treg及IL-6、IL-17和IL-10的变化,以及治疗前后EDSS评分改变与Th17/Treg细胞失衡的相关性。结果IVMP不仅可以降低AQP4-IgG阳性的NMOSD患者急性期外周血IL-6水平,还可以增加NMOSD患者急性期外周血中Treg细胞比例,从而促进Th17/Treg比例向Treg倾斜,促使这一细胞比例的升高,达到细胞平衡状态。IVMP治疗NMOSD患者的EDSS评分差值与Th17/Treg比值的差值存在一定的相关性,这一相关性在AQP4-IgG抗体阳性的NMOSD较为显著。结论IVMP可以降低AQP4-IgG阳性的NMOSD患者急性期外周血IL-6水平,还可以扭转NMOSD患者Th17/Treg的细胞失衡状态,其临床残疾好转程度与Th17/Treg比值的差值存在相关性。

加味茵陈四逆汤对胆道闭锁肝纤维化幼鼠IL-17、IL-6与Th17及其特异性转录因子RORγt之间的影响

目的 探讨加味茵陈四逆汤对胆道闭锁(Biliary atresia, BA)肝纤维化幼鼠白介素-17(Interleukin-17,IL-17)、白介素-6(Interleukin-6,IL-6)与辅助性T细胞17(T helper cell 17,Th17)及其特异性转录因子维甲酸相关孤儿受体γt(RetinoicAcid-relatedOrphangammat, RORγt)之间的影响。方法 雄性SD大鼠幼鼠48只,随机分为假手术组、模型组、阳性对照组及加味茵陈四逆汤高、中、低剂量组,每组8只。建立幼鼠胆道结扎模型,5 d后进行灌胃给药。用药10 d后,计算肝脏指数;各组行苏木精-伊红染色法(Hematoxylin-eosin, HE)及Masson染色观察肝组织病理改变;采用酶联免疫吸附试验测定血清IL-17和IL-6水平;采用流式细胞仪测定Th17细胞占CD+4T细胞比例;采用实时荧光定量聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction, PCR)法测定RORγt mRNA表达。结果 模型组及各给药组肝脏指数高于假手术组(P<0.05);各给药组肝脏指数低于模型组(P<0.05);各给药组肝纤维化程度较模型组减轻;模型组及各给药组IL-17、IL-6、Th17细胞占CD_(4)^(+)T细胞比例和RORγt mRNA表达高于假手术组(P<0.05);各给药组IL-17、IL-6、Th17细胞占CD_(4)^(+)T细胞比例和RORγt mRNA表达低于模型组(P<0.05);中剂量组和高剂量组IL-17、IL-6、Th17细胞占CD+4T细胞比例和RORγt mRNA表达低于熊去氧胆酸组和低剂量组(P<0.05)。结论 加味茵陈四逆汤可有效改善BA幼鼠肝纤维化程度,可能是通过降低血清IL-17和IL-6水平,从而降低Th17细胞水平及下调RORγt表达来发挥作用的。

基于IL-6/STAT3通路探讨参芪复方对缺血性心力衰竭大鼠Th17/Treg平衡的影响

目的观察参芪复方对缺血性心力衰竭(IHF)大鼠的治疗作用并探究其可能的作用机制。方法选取SD大鼠60只,其中50只采用结扎冠状动脉左前降支建立IHF模型后随机分为模型组、参芪复方低、中、高剂量组、福辛普利组,每组10只,另10只设为假手术对照组,只穿线不结扎。治疗组分别按不同剂量灌胃给药,模型组与假手术组给予相同容积的生理盐水,连续灌胃5周。治疗结束后,行心脏超声检测心室结构及心功能变化;采用苏木素-伊红染色(HE)观察心肌组织病理学改变;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-17A、IL-6、TNF-α、IL-10水平;流式细胞术检测外周血和脾脏Th17、Treg细胞含量;免疫组化(IHC)观察心肌组织IL-6、STAT3、p-STAT3表达;蛋白质免疫印记(Western blot)检测心肌组织IL-6、STAT3、p-STAT3、Foxp3、RORγt表达。结果与假手术相比,模型组LVEF、LVFS、SV、CO明显下降,LVDs、LVDd、LVESV、LVEDV明显增加,并出现心肌细胞排列紊乱,伴炎性细胞浸润等病变,血清IL-17A、IL-6、TNF-α水平升高,IL-10水平下降,外周血与脾脏Th17细胞百分比增加,Treg细胞百分比下降,心肌组织IL-6、STAT3、p-STAT3、RORγt蛋白表达增加,Foxp3蛋白表达下降;与模型组比较,参芪复方高剂量组心室结构与心功能指标得到改善,心肌损伤减轻,血清IL-17A、IL-6、TNF-α水平下降,IL-10水平升高,Th17细胞百分比下降,Treg细胞百分比升高,心肌组织IL-6、STAT3、p-STAT3、RORγt蛋白表达减少,Foxp3蛋白表达增加。结论参芪复方可改善IHF大鼠心功能,抑制炎症反应,其机制可能与抑制IL-6/STAT3信号通路,调节Th17/Treg细胞免疫平衡有关。

鄂尔多斯盆地大牛地气田马五_(6~10)亚段沉积相高频演化特征

鄂尔多斯盆地大牛地气田马五_(6~10)亚段沉积微相高频变化,分布特征尚不明确,严重制约了天然气勘探与开发。综合利用岩心、薄片、测井及野外露头等资料,详细分析了该地区马五_(6~10)亚段碳酸盐岩岩石类型及测井响应特征,划分了4种沉积微相,进一步分析了该地区马五_(6~10)亚段高频沉积相演化特征。研究表明,马五期海平面整体呈下降趋势,发育局限台地亚相,云坪、膏云坪、灰云坪微相在空间上彼此相邻,纵向上相互叠置,随海平面的涨落沉积微相在膏云坪、云坪和云坪、灰云坪、云灰坪之间频繁转化。马五_(10)、马五_(8)、马五_(7)^(2)、马五_(6)^(1)亚段主要发育膏云坪和云坪微相,马五_(9)亚段主要发育云坪和灰云坪微相,马五_(7)^(1)、马五_(6)^(2)亚段主要发育膏云坪、云坪及灰云坪微相,马五_(6)^(3)亚段则由西向东依次发育膏云坪、云坪、灰云坪、云灰坪微相。研究区海平面升降控制了沉积亚相的演化,更为高频的次级海平面变化控制着沉积微相快速变化。鄂尔多斯盆地大牛地气田马五_(6~10)亚段沉积相高频演化特征研究,将有力支撑大牛地气田马家沟组深部天然气资源的开发动用,同时为大牛地气田马家沟组沉积模式研究提供依据。

屋尘螨过敏的支气管哮喘患儿Th17/Treg细胞水平变化及意义

目的观察屋尘螨过敏的支气管哮喘患儿Th17/Treg细胞以及相关细胞因子水平变化,分析Th17/Treg细胞及相关细胞因子水平与病情的相关性,探讨支气管哮喘发病机制。方法选择2018年2月—2021年1月河北医科大学第二医院收治的30例对屋尘螨过敏的急性发作的中度支气管哮喘患儿作为研究组,另选择同期30例健康查体儿童作为对照组。留取2组研究对象外周血单个核细胞悬液,给予48 h屋尘螨浸出液刺激,应用流式细胞分析仪检测Th17/Treg细胞水平,同时应用酶联免疫吸附法检测细胞培养上清液中白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-10(IL-10)以及白细胞介素-17(IL-17)水平。比较研究组与对照组及研究组患儿发作期与缓解期这些检测指标的差异性,Spearman等级相关方法分析这些指标与支气管哮喘病情的相关性。结果研究组患儿哮喘发作期和哮喘缓解期的Th17细胞以及IL-6、IL-17水平均显著高于对照组(P均<0.05),而Treg细胞及IL-10水平均显著低于对照组(P均<0.05);同时研究组患儿发作期Th17细胞以及IL-6、IL-17水平均显著高于缓解期(P均<0.05),发作期Treg细胞及IL-10水平均显著低于缓解期(P均<0.05);Th17细胞以及IL-6、IL-17水平均与病情呈正相关,而Treg细胞以及IL-10水平均与病情呈负相关。结论对屋尘螨过敏的支气管哮喘患儿存在Th17/Treg细胞功能失衡,可根据Th17/Treg细胞水平来评估哮喘病情。

刺五加有效部位对C_(57)BL/6小鼠PD模型GABA、TH、GFAP影响的实验研究

目的:研究刺五加有效部位对C57BL/6小鼠的帕金森病(PD)模型γ-氨基丁酸(GABA)、黑质酪氨酸羟化酶(TH)、及海马区胶质原酸性蛋白(GFAP)的影响,初步探讨其治疗帕金森病的作用机制。方法:用MPTP对C57BL/6小鼠制备PD模型,总量为150mg/kg。连续给予刺五加有效部位20 d,测定小鼠的爬杆时间,用免疫组化法测定小鼠黑质纹状体GABA、TH及海马区GFAP的阳性表达。结果:20 d后,爬杆时间、GABA、TH给药组相对模型组P<0.05。而GFAP没有出现显著差异。结论:刺五加有效部位可以增强GABA和TH的阳性表达,而对海马区GFAP则无影响,推测其对MPTP导致的PD可能有脑保护作用。

慢性阻塞性肺病大鼠肺功能降低与Th1/Th2极化、STAT4/6表达的关系

目的研究慢性阻塞性肺病(COPD)大鼠Th1/Th2极化、转录信号转导子及转录激活子(STAT)蛋白表达及与肺功能的关系。方法将60只大鼠随机均分为空白组、假手术组、模型组。采用脂多糖(LPS)复制COPD大鼠模型,模型复制成功后28 d,检测大鼠肺功能变化,采用HE染色观察大鼠肺组织形态学变化,ELISA检测血清IFN-γ、IL-4、IL-12、IL-13变化,采用PCR法检测大鼠肺组织IFN-γmRNA、IL-4 mRNA的表达、Western blot法检测大鼠肺组织STAT4、STAT6蛋白表达。结果与空白组、假手术组比较,模型组大鼠肺组织炎性细胞浸润,血清IFN-γ、IL-12、Th1/Th2升高,肺功能和血清IL-4、IL-13降低;同时肺组织IFN-γmRNA和STAT4蛋白表达升高,IL-4 mRNA和STAT6蛋白降低(P<0.05或P<0.01)。相关性分析显示,COPD大鼠肺功能参数分别与IFN-γ、Th1/Th2、STAT4蛋白呈负相关,与IL-4、IL-13、IL-4 mRNA、STAT6蛋白呈正相关(P<0.01或P<0.05)。结论 COPD肺功能降低与气道炎症反应、Th1/Th2细胞失衡有关,STAT4、STAT6参与调控Th1/Th2细胞表达,共同导致COPD发生。

不同浓度IAA对微藻TH6(Oedocladium sp.)生长及脂肪酸含量的影响

研究了在BG11液体培养基中添加0．1～1．5mg·L^-1 IAA对微藻TH6（Oedocladium sp．）生长和脂肪酸含量的影响。结果表明，随培养时间的延长，微藻TH6的生长量逐渐增加；与对照相比，添加不同浓度IAA对微藻TH6的生长均有不同程度的促进作用，其中添加1．0mg·L^-1 IAA对微藻TH6生长的促进效果最佳，至培养第33天，微藻TH6的生长量比对照提高了44．34％。在培养基中添加IAA均能不同程度提高微藻TH6的总脂肪酸含量，当IAA浓度为0．1、0．5、1．0和1．5mg·L^-1时，总脂肪酸含量分别是对照的2．09、2．13、2．41和1．73倍。IAA对微藻TH6中软脂酸、硬脂酸、亚油酸和油酸含量的影响作用不同。添加不同浓度IAA均能不同程度提高软脂酸的含量，当IAA浓度为1．0mg·L^-1时，软脂酸的相对含量最高，达到了28．62％；较高浓度的IAA（1．0和1．5mg·L^-1）能促进硬脂酸含量的提高，低浓度IAA（0．1和0．5mg·L^-1）使硬脂酸含量降低；当IAA浓度为0．1—1．0mg·L^-1时，亚油酸含量较对照有不同程度提高；IAA对油酸含量的影响作用不明显。研究结果显示，含有1．0mg·L^-1 IAA的BG11液体培养基为微藻TH6的最佳液体培养基。在这一培养基中，微藻TH6的总脂肪酸含量最高，饱和及不饱和脂肪酸含量也较高，且微藻TH6生长量最大，可作为生物柴油资源进一步研究和开发。

白细胞介素-6在溃疡性结肠炎模型小鼠Th17/Treg细胞失衡中的作用

目的研究白细胞介素-6(IL-6)在溃疡性结肠炎(ulcerative colitis,UC)模型小鼠结肠固有层黏膜局部Th17和调节性T细胞(Treg)失衡中的作用。方法制备葡聚糖硫酸钠(DSS)诱导的UC模型小鼠(UC组,n=5),检测UC组小鼠和正常对照组小鼠(NC组,n=5)结肠固有层黏膜单个核细胞中Th17细胞及Treg细胞的水平,用CBA检测细胞培养上清IL-6、IL-10、IL-17等细胞因子的水平。结果在DSS诱导的UC小鼠结肠固有层黏膜中,Th17细胞水平均高于NC组(P<0.05);IL-17A水平高于NC组(P<0.05);Treg细胞水平显著高于NC组(P<0.05)。UC模型小鼠结肠固有层黏膜单核细胞培养上清液中IL-10表达水平均低于NC组(P<0.05)。UC模型小鼠血清及结肠固有层黏膜单核细胞中,IL-6的水平高于NC组(P<0.05),而在其他组织中,两组差异无统计学意义(P>0.05);在UC模型小鼠中,血清及结肠固有层单核细胞中IL-6的水平高于其他组织(P<0.05)。结论在UC模型小鼠结肠固有层黏膜中存在Th17/Treg细胞的失衡,局部IL-6升高参与了Th17/Treg细胞间的分化失衡,从而在UC模型小鼠的免疫异常发病中起重要作用。

胸腺瘤合并重症肌无力患者外周血Th17/Treg变化及其与IL-6相关性

目的:研究单纯胸腺瘤和胸腺瘤合并重症肌无力(MG)患者外周血CD4+T细胞中Th17细胞、Treg细胞变化及其与IL-6的相关性。方法:采用流式细胞术检测胸腺瘤合并MG(MG组)、单纯胸腺瘤(NMG组)和健康对照组患者外周血CD4+T细胞中Th17细胞、Treg细胞比例,ELISA法检测IL-6。结果:MG组及NMG组Th17细胞比例高于对照组(P<0.01);MG组与对照组、NMG组比较,Treg细胞比例降低、IL-6水平增高(P<0.01)。MG组IL-6水平与Th17细胞比例呈正相关性(r=0.792,P<0.001),与Treg细胞比例呈负相关性(r=-0.559,P=0.005)。结论:单纯胸腺瘤及胸腺瘤合并MG患者Th17细胞增多,胸腺瘤合并MG患者Treg细胞减少,IL-6在维持两者间平衡起着重要作用,Th17/Treg失衡可能导致免疫调节功能紊乱。

CCR6、Th9细胞、Th17/Treg细胞失衡在大鼠肺纤维化中的表达及意义

目的研究CCR6、Th9细胞、Th17/Treg失衡在大鼠肺纤维化中的表达及意义。方法采取随机分组原则将63只雄性SD大鼠分为三组:生理盐水对照组(N组)、肺纤维化模型组(F组)、地塞米松治疗组(D组),经气管内注入博来霉素制作大鼠肺纤维化模型,分别于第7d、第14d、第28d留取各组大鼠肺组织、肺泡灌洗液,应用HE染色观察大鼠模型肺组织病理改变;免疫组化法评价三组肺组织中CCR6、IL-9表达情况;荧光PCR法检测肺泡灌洗液PU.1mRNA水平,流式细胞术检测Th17、Treg的表达;并分析CCR6、Th9细胞与Th17/Treg的相互关系。结果1.F组、D组与N组相比,肺组织炎症程度、肺纤维化程度显著,肺部炎症以造模第7d最明显。2.对于CCR6、PU.1mRNA、IL-9、Th17,与N组相比较,F、D组大鼠不同时间点表达均明显增高(P<0.05),以造模第7d最明显;F、D组大鼠Treg细胞表达水平较对照组降低(P<0.05)。3.CCR6、Th9、PU.1mRNA表达水平与Th17有显著正相关性,与Treg有显著负相关(P均<0.01)。结论本研究大鼠肺纤维化模型CCR6、Th9细胞与Th17/Treg比值各时间点表达水平较对照组均升高;推断CCR6、Th9细胞可能参与Th17/Treg失衡在肺纤维化免疫炎症的发生过程,进而促进肺组织纤维细胞增殖,在肺纤维化的发生机制中起到重要作用。

姜黄素通过IL-6/STAT3信号通路调控Th17/Treg平衡治疗溃疡性结肠炎

目的:观察姜黄素对溃疡性结肠炎(UC)模型小鼠的疗效及对IL-6/STAT3信号通路中相关分子表达和结肠组织中Treg、Th17细胞水平的影响,探究姜黄素是否通过IL-6/STAT3信号通路调控Th17/Treg平衡以有效治疗UC。方法:采用葡聚糖硫酸钠(DSS)制备UC小鼠模型,将50只健康雌性BALB/c小鼠随机分为5组:正常对照组,UC模型组及姜黄素低、中、高剂量组。HE染色观察小鼠结肠黏膜组织损伤程度并评分,Western blot检测结肠组织中IL-6、STAT3及p-STAT3的蛋白水平,流式细胞术分析结肠组织中Treg和Th17细胞的水平,Western blot检测结肠组织中Treg转录因子FOXP3和Th17转录因子RORγt的表达情况。结果:UC小鼠结肠部位溃疡形成,镜下可见炎症和充血等病理改变,姜黄素中剂量组的黏膜损伤基本恢复正常,只有少量炎性细胞。与正常组相比,UC小鼠结肠组织IL-6、STAT3和p-STAT3的蛋白水平均显著增高;与模型组相比,姜黄素中剂量组IL-6、STAT3和p-STAT3的蛋白水平均明显降低,接近正常组,并且中剂量姜黄素能显著降低Th17细胞的水平和转录因子RORγt的表达,而显著升高Treg细胞的水平和转录因子FOXP3的表达。姜黄素低剂量组和高剂量组对上述指标均无明显影响。结论:姜黄素可以有效治疗DSS诱导的小鼠UC,其作用机制可能是通过IL-6/STAT3信号通路来调控Th17/Treg平衡。

参萸补血方对再生障碍性贫血模型小鼠Th17细胞及其相关因子IL-6、IL-17及IL-23表达水平的影响

目的观察参萸补血方对再生障碍性贫血(AA)模型小鼠Th17细胞及其相关因子白细胞介素6(IL-6)、IL-17及IL-23表达水平的影响,探讨其治疗AA的效果。方法选取清洁级BALB/c小鼠80只,按随机数字表法分为正常对照组、模型组、参萸补血方组、强的松(阳性对照)组。以^(60)CO-γ射线照射加腹腔注射环磷酰胺(CY)加氯霉素(CH)复合方法建立AA小鼠模型。造模成功后给药干预,连续4周后观察各组小鼠外周血象改变及各组小鼠Th17细胞及其相关因子IL-6、IL-17及IL-23表达水平的变化,光镜下观察骨髓增生程度。结果与正常对照组比较,模型组小鼠外周血象和骨髓增生明显降低,Th17细胞及其相关因子IL-6、IL-23和IL-17表达均显著升高,差异有统计学意义(P<0.05)。与模型组比较,参萸补血方组小鼠外周血像明显升高,Th17细胞及其相关因子IL-6、IL-23和IL-17表达水平下降,骨髓增生明显改善,差异有统计学意义(P<0.05)。结论参萸补血方可改善AA模型小鼠的骨髓造血功能,可能与其抑制T细胞免疫功能相关的IL-6、IL-17及IL-23表达水平有关。

IL-4、IL-12、IL-6/STAT/SOCS途径对Th细胞分化调节机制的研究进展

Th细胞分化为Th1和Th2细胞是受多种细胞因子调控的。已有研究资料表明 :IL 4、IL - 12和IL 6通过STAT/SOCS信号途径经对Th细胞的分化进行调节。IL 12 /STAT4 /SOCS3使CD4 + 和Th2向Th1分化和极化 ,IL 4 /STAT6 /SOCS1使Th0B向Th2分化。IL 6则通过STAT3可以上调CD4 + T细胞SOCS 1的表达 ,这是由于IL 6干扰IFN γ受体的信号转导 ,阻断了IFN γ对IFN γ基因的自我调节 ,因此实现了IL 6对Th1细胞的负性调控。据此认为IL 6启动CD4 + T细胞分化与抑制CD4 + T分化为Th1细胞是两种独立的分子机制 ,它在平衡Th1/Th2的免疫反应中起着重要的调节作用。

KL-6、TH17和糖蛋白抗原对CTD-ILD与细菌感染性肺炎的鉴别研究

目的分析涎液化糖链抗原(KL-6)、癌抗19-9(CA19-9)、癌抗原15-3(CA15-3)和辅助性T细胞17(Th17)鉴别结缔组织病相关的间质性肺病(CTD-ILD)与细菌感染性肺炎的价值。方法选择2017年3月~2020年1月间收治的84例CTDILD患者作为观察组,50例细菌感染性肺炎患者作为对照组;检测受试者血中KL-6、CA19-9、CA15-3和Th17水平;采用Logistics回归模型分析KL-6、CA19-9、CA15-3和Th17与CTD-ILD的相关性及联合预测模型,绘制ROC曲线分各指标单独和联合预测模型鉴别CTD-ILD与细菌感染性肺炎价值。结果观察组患者血中KL-6、CA19-9、CA15-3和Th17水平明显高于对照组,且差异存统计学意义(P <0.05);血清中KL-6、CA19-9、CA15-3和Th17的高表达均是影响CTD-ILD疾病的独立性威胁因素(P <0.05),且预测模型为log(P)=0.439KL-6+0.519CA19-9+0.495CA15-3+0.543Th17;采用KL-6、CA19-9、CA15-3和Th17联合鉴别CTD-ILD和细菌感染性肺炎的敏感度、特异度和AUC均明显高于各指标单独应用,且差异有统计学意义(P <0.05)。结论CTD-ILD患者血中KL-6、TH17和糖蛋白抗原呈明显高表达状态,KL-6、TH17和糖蛋白抗原联合应用鉴别诊断CTD-ILD与细胞感染性肺炎的敏感度和特异度较高,且具有较高的应用价值。

沙美特罗替卡松粉吸入剂联合硫酸沙丁胺醇对支气管哮喘患者血清IL-6、TNF-α和IL-4、IFN-γ及Th1/Th2免疫平衡影响研究

目的 观察沙美特罗替卡松粉吸入剂联合硫酸沙丁胺醇对支气管哮喘患者血清IL-6、TNF-α和IL-4、IFN-γ及Th1/Th2免疫平衡影响。方法 选取2014年10月~2015年10月于我院住院治疗支气管哮喘患者60例作为治疗组,同时选取我院健康检查患者30例作为对照组,治疗组给予沙美特罗替卡松粉联合硫酸沙丁胺醇雾化吸入治疗,分别与治疗前,治疗1个月、2个月、3个月时抽取患者晨起静脉血,分离血清,Elisa法检测患者血清IL-6、TNF-α和IL-4、IFN-γ水平。结果 与治疗前和对照组比较,沙美特罗替卡松粉吸入剂联合硫酸沙丁胺醇应用治疗支气管哮喘3个月后,患者血清IL-6、TNF-α和IL-4水平显著降低（P〈0.05）,IFN-γ水平显著升高（P〈0.05）,免疫调节明显向Th1方向调节（P〈0.05）。结论 沙美特罗替卡松粉吸入剂与硫酸沙丁胺醇联合应用治疗支气管哮喘患者,可能通过调节患者体内IL-6、TNF-α、IL-4、IFN-γ与炎症相关的细胞因子及Th1/Th2免疫平衡实现。