P物质对大鼠下丘脑催产素及加压素免疫反应性神经元Fos癌蛋白的诱导作用

为研究Ｐ物质激活的下丘脑大细胞神经分泌神经元及其分布，将Ｐ物质注入大鼠侧脑室，用Ｆｏｓ癌蛋白免疫组织化学结合催产素或加压素抗血清免疫组织化学的双标记法，检测了下丘脑各大细胞神经分泌核区被激活的催产素及加压素免疫反应性神经元。结果表明：Ｆｏｓ免疫强反应性的神经元主要见于第三脑室周围区及室旁核，在视上核及其他下丘脑大细胞神经分泌核区仅见到少数至极少数Ｆｏｓ免疫反应性神经元。Ｆｏｓ和催产素或加压素的免疫双染色神经元主要见于第三脑周围区，由于第三脑室周的加压素样神经元较少，因此在该区域我们见到的主要为中等至较多数量的Ｆｏｓ和催产素免疫双染色神经元，仅有少数的Ｆｏｓ和加压素免疫双染色神经元。室旁核的Ｆｏｓ免疫反应性神经元主要分布于室旁核的小细胞部，虽与催产素及加压素免疫反应性神经元的分布区有部分重叠，但该核区却仅见到少数Ｆｏｓ和催产素或加压素的免疫双染色神经元。此外，在视上核、背内侧副核也可见到少数Ｆｏｓ和催产素或加压素的免疫双染色神经元。本研究中将Ｐ物质注射入侧脑室后诱导的Ｆｏｓ阳性表达的催产素及加压素样神经元在下丘脑的分布与该区域Ｐ物质样传入纤维的分布不完全吻合，但与该区域Ｐ物质样受体的分布基本吻合。以上研究结果?

大鼠下丘脑前部室周区内生长抑素样神经元与神经肽Y样传入纤维的关系

应用包埋前免疫电镜PAP双重反应技术对大鼠下丘脑前部室周区内的生长抑素和神经肽Y的分布进行了超微结构研究。先用DAB法显示神经肽Y反应，然后用钼酸-TMB法显示生长抑素免疫反应，再经DAB-氯化钴稳定后作免疫电镜包埋。光镜观察结果显示在下丘脑室周区内见到生长抑素样神经元和神经肽Y样神经纤维末梢。电镜观察结果显示，生长抑素的钻酸-TMB免疫反应产物呈针状或块状位于胞质内；神经肽Y样神经纤维末梢内见到颗粒状或絮状DAB免疫反应产物分布于小清亮囊泡周围和线粒体膜上。神经肽Y样神经纤维末梢与生长抑素样神经元胞体形成轴-体突触。此外神经肽Y样神经末梢内大颗粒囊泡与突触前膜融合而形成胞吐像。由此可见神经肽Y样神经纤维末梢经过突触或非实触方式作用于下丘脑前部室周区内生长抑素样神经元而调节其分泌活动。

电刺激杏仁核对猫视前区—下丘脑前部温度敏感神经元放电活动的影响

本实验采用微电极细胞外记录及脑内电刺激技术,观察了电刺激杏仁皮质内侧核对下丘脑前部-视前区温度敏感神经元放电活动和温度敏感系数的影响。结果表明:杏仁皮质内侧核主要通过抑制热敏神经元的温度敏感系数参与体温调节,对冷敏神经元的温度敏感系数产生双相性影响。

电刺激腹中隔区对IL-1_β作用下兔POAH温敏神经元放电特性的影响

目的 :进一步探讨中枢解热机理。方法 :采用微电极细胞外记录 ,观察在致热原IL - 1β作用下电刺激兔腹中隔区 (VSA)对视前区 -下丘脑前部 (POAH)温度敏感神经元放电特性的影响。结果 :(1)IL - 1β 使热敏神经元放电频率减少时 ,电刺激腹中隔区可明显降低POAH热敏神经元的温度敏感系数。 (2 )IL - 1β 使冷敏神经元放电频率增加时 ,电刺激腹中隔区可增加POAH冷敏神经元的温度敏感系数。结论

神经元凋亡与神经免疫调节网络功能下调模式

目的探讨神经免疫调节网络功能下调模式。方法应用大鼠全基因芯片检测技术分析免疫大鼠下丘脑外侧区和杏仁核前区神经免疫调节功能相关神经元凋亡等的相关信号表达;应用数据库对差异基因功能树进行分析。结果实验组大鼠基因表达谱分析显示有632个差异基因,经功能树相关分析显示其中34个基因参与信号传导功能的已知功能基因,涵盖了已知凋亡信号和凋亡调节信号相关传导路。结论在LH和AA脑区存在以神经元凋亡方式实现神经免疫调节功能相关的网络功能下调模式。

雌二醇对大鼠视前区—下丘脑前部温度敏感神经元放电活动的影响

目的 :探讨雌激素影响体温中枢的作用机理 ,并为视前区—下丘脑前部 ( PO/ AH )温度—性激素敏感相关神经元的存在提供电生理依据。方法 :采用微电极细胞外记录神经元放电的方法 ,记录肌肉注射苯甲酸雌二醇对大鼠 PO/ AH温度敏感神经元放电活动的影响。结果 :5 0只大鼠 PO/ AH ,记录到 2 9例温度敏感神经元 ,其中热敏神经元 2 2例 ,冷敏神经元 7例。苯甲酸雌二醇对 9例热敏神经元呈明显的增频效应 ,对 4例冷敏神经元表现为减频效应。结论 :雌激素对体温的影响是直接或间接通过改变 PO/ AH温度—性激素相关神经元的电活动而实现的。

隔区和第Ⅲ脑室注射精氨酸加压素对家兔视前区—下丘脑前部温敏神经元放电的影响

为了研究精氨酸加压素（ＡＶＰ）的抗热机理，本研究观察了家兔隔区和第Ⅲ脑室微量注射ＡＶＰ对视前区一下丘脑前部（ＰＯ－ＡＮ）温度敏感神经元放电的影响。结果如下：（１）隔区注射ＡｖＰ能使ＰＯ－ＡＨ热敏神经元放电明显增加，冷敏神经元放电明显减少。（２）第Ⅲ脑室注射ＡＶＰ只能使部分ＰＯ－ＡＨ热敏神经元放电增加，冷敏神经元放电减少；而另外一部分热敏神经元和冷敏神经元则出现相反的效应。实验结果表明，隔区注射ＡＶＰ的抗热作用，可能是由于注射到隔区的ＡＶＰ使该区的神经元活动发生改变，而影响了ＰＯ—ＡＨ温度敏感神经元的活动所致。也提示隔区在体温调节中可能起重要作用。

PO/AH区注入RN-1734对孕酮致大鼠体温升高的影响

目的探讨瞬时受体电位香草酸受体4(transient receptor potential vanilloid 4,TRPV4)是否参与♀大鼠性周期中孕酮致体温升高的过程。方法检测正常♀大鼠性周期中不同阶段的体温及孕酮浓度;给予去卵巢大鼠不同剂量孕酮,并检测体温;于正常♀大鼠动情后期,在视前区-下丘脑前部(preoptic-anterior hypothalamus area,PO/AH)给予TRPV4特异性阻断剂RN-1734,以观察大鼠体温的变化。进一步在去卵巢大鼠腹腔注射孕酮后,于PO/AH区给予RN-1734,对比观察孕酮对大鼠体温的影响,以及在此基础上特异性阻断TRPV4后体温的波动情况。结果在♀大鼠动情周期的不同阶段,发现体温变化与体内孕酮水平呈正相关。在去卵巢大鼠给予不同剂量的孕酮,显示剂量依赖性体温升高。于正常大鼠动情后期体温最高点前2 h,在PO/AH区给予RN-1734,大鼠体温升高的幅度明显下降。同时也观察到RN-1734能够明显降低给予孕酮的去卵巢大鼠的体温升高幅度。结论在体温调节中枢给予TRPV4特异性阻断剂,能够降低大鼠动情后期体温的升高幅度,提示TRPV4通道可能参与了孕酮致大鼠体温升高的过程。

γ-氨基丁酸能神经元参与热应激的初步形态研究

目的从形态上证实γ-氨基丁酸（GABA）神经元参与脊髓中间外侧柱胆碱能调节反应，参与热应激时下丘脑对高温调节反应。方法出生后6周的C57BL小鼠按随机数字表法分为正常对照组和热刺激组，取颈胸端脊髓及下丘脑组织切片，采用免疫组化双标记方法观察小鼠胸脊髓中间外侧柱胆碱能神经元标志物胆碱乙酰转移酶（CHAT）和谷氨酸脱羧酶65（GAD65）的免疫标记情况以及热应激后下丘脑TRPV4及GAD65分别和c-FOS的免疫双标记。结果中间外侧柱交感神经节前神经元存在ChAT和GAD65免疫荧光双标记。热激活后，下丘脑热敏感神经元与GABA能神经元存在双标记。结论GABA能神经元可能参与中间外侧柱交感神经节前胆碱能神经元调节，以及参与下丘脑对高温的反应。