G-蛋白信号转导调节子4(RGS4)基因多态性与精神分裂症的关联研究

目的：探讨G-蛋白信号转导调节子4（regulator of G-protein signaling-4，RGS4）基因与精神分裂症及临床症状的遗传关联。方法：应用病例对照关联研究设计，采用聚合酶链式反应-限制性片断长度多态性（PCR-RFLP）和DNA测序方法，分析386例精神分裂症患者和390例正常对照者中RGS4基因4个单核苷酸多态性（SNP）位点与精神分裂症的关联。并采用阳性和阴性症状量表（PANSS）评估患者的临床症状，进一步分析PANSS因子分与RGS4多态性的关联。结果：RGS4基因的两个多态性位点rs12753561（T〉G，χ^2=8．970，P=0．002）和rs10759（C〉A，χ^2=13．773，F=0．002，P=0．002）与精神分裂症关联，由上述4个SNPs组成的多个单体型如AAGA（χ^2=11．120，P=0．0008，OR=0．52，95％CI=0．36—0．77）和GGGC（χ^2=10．096，P=0．001，OR=1．43，95％CI=1．15—1．79）均与精神分裂症关联。PANSS量表的阴性症状因子分与rs12753561（t=2．216，P=0．029）和rs10759（t=2．543，P=0．012）关联。结论：RGS4基因多态性与精神分裂症及阴性和一般精神病理症状显著关联。

阿片受体信号调节相关蛋白RGS4及β-arrestin2在泻剂结肠大鼠结肠中的表达变化

目的探讨泻剂结肠大鼠结肠中阿片受体信号调节相关蛋白RGS-4和β-arrestin2的表达变化及意义。方法 7~8周龄Wistar大鼠16只,体质量（200±20）g,雌雄各半,按随机数字表法分为对照组（n=8）及泻剂结肠组（n=8）,饲养环境温度18~28℃,相对湿度40%~80%。对照组饲以普通软饲料,泻剂结肠组饲以混有酚酞的饲料,建立泻剂结肠大鼠模型。通过RT-PCR及Western blot方法对RGS-4和β-arrestin2在结肠中的表达进行相对定量分析。结果两种阿片受体信号调节蛋白在泻剂结肠组及对照组大鼠结肠内均有不同程度的表达。RT-PCR结果显示泻剂结肠组RGS-4和β-arrestin2 mRNA相对表达水平均明显高于对照组[（3.418 3±0.247 4）vs（0.987 6±0.034 1）,（2.974 4±0.214 2）vs（0.921 1±0.040 1）,P〈0.01]。Western blot检测结果显示RGS-4和β-arrestin2的表达在泻剂结肠组较对照组明显升高[（0.403 4±0.049 9）vs（0.115 3±0.010 2）,（0.913 9±0.061 1）vs（0.467 6±0.043 7）,P〈0.01]。结论RGS-4和β-arrestin2在泻剂结肠大鼠结肠中表达均明显增强,提示其可能增强泻剂结肠大鼠结肠MOR信号传导调节功能。

急性肺损伤后RGS4的表达变化及地塞米松对其的影响

目的:研究急性肺损伤后RGS4的表达变化及地塞米松对其的影响,以探讨RGS4在急性肺损伤发病机制中的作用。方法:采用油酸性急性肺损伤模型,以肺含水率为肺水肿的指标,采用Western blot和免疫组织化学方法检测急性肺损伤后RGS4的表达变化。结果:油酸性急性肺损伤后6 h肺含水率即显著升高,24 h达到高峰,48 h较24 h有所降低但仍高于生理盐水组;RGS4蛋白含量在伤后6、24、48 h均显著升高,与肺含水率的变化趋势一致。地塞米松处理后可显著降低各时点的肺含水率和RGS4蛋白含量。结论:RGS4参与了油酸性急性肺损伤的发病机制,糖皮质激素治疗可降低急性肺损伤后的RGS4蛋白含量。

精神分裂症与神经调节素1、G72及G-蛋白信号转导调节子4基因的关联研究

目的 探索神经调节素1（NRG1）、G72、G-蛋白信号转导调节子4（RGS4）基因变异的独立或联合作用与精神分裂症的关联。方法 采用酶切或测序方法,对315例精神分裂症患者和347例正常对照者NRG1、G72、RGS4基因的13个单核苷酸多态性（SNPs）位点进行基因型检测和遗传关联分析。应用Lo-gistic回归分析和风险或保护基因型分层后卡方检验评估三基因的交互作用。结果 单位点关联分析发现,NRG1的5个SNPs、G72的1个SNP、RGS4的2个SNPs与精神分裂症关联（P〈0.05）。Logistic回归分析构建了三个基因交互作用模型,各自变量的OR分别为：nrg1=3.58,rgs4=1.24,g72_rs947267=1.45,nrg1＊rgs4=3.03,nrg1＊g72_rs947267=1.06。应用基因型分层后卡方检验表明,三基因存在协同风险效应（OR=2.35～4.05;P〈0.05）。结论 NRG1、G72及RGS4基因的单独或交互作用与精神分裂症关联。

G-蛋白信号转导调节子4基因多态性和甲基化与精神分裂症的关联研究

目的:探讨G-蛋白信号转导调节子4(regulator of G protein signaling 4,RGS4)基因多态性位点和甲基化在精神分裂症患者和正常人群中的差异以及二者的关联。方法:选取闽南地区汉族精神分裂症患者129例和正常对照131例,提取被试外周血DNA,对RGS4的三个多态性位点(rs10759、rs12753561和rs951436)进行扩增、测序,然后进行基因分型。再从两组中各随机选取32例受试者,利用亚硫酸氢盐处理后测序法检测基因甲基化水平。采用SPSS 20.0软件进行数据分析,基因甲基化差异分析采用χ2检验和独立样本t检验,RGS4基因多态性与甲基化关联性采用双因素方差分析。结果:在患者组和对照组中,rs10759位点均有AA、AC、CC三种基因型,基因型在两组间的分布差异有统计学意义(χ2=6.431,P=0.040),等位基因频率差异无统计学意义(χ2=1.270,P=0.260)。rs12753561位点具有GG、GT、TT三种基因型,基因型分布差异均具有统计学意义(χ2=6.217,P=0.045),等位基因频率均差异无统计学意义(χ2=0.021,P=0.885)。rs951436位点具有AA、AC、CC三种基因型,基因型和等位基因频率均差异无统计学意义(χ2=0.008,0.007,均P>0.05)。患者组和对照组分别有26例和27例检测到甲基化,差异无统计学意义(χ2=0.110,P=0.740)。两组个体甲基化率(甲基化位点数/10)分别为(0.24±0.11)和(0.26±0.18),差异无统计学意义(t=-0.318,P=0.752)。两组男性和女性个体甲基化率均差异无统计学意义(均P>0.05)。受试者rs10759、rs12753561和rs951436位点各基因型所对应的个体甲基化率均差异无统计学意义(均P>0.05)。结论:RGS4基因rs10759和rs12753561位点与精神分裂症有关,RGS4基因甲基化与精神分裂症无关,RGS4基因多态性与甲基化无关。

腺苷拮抗大鼠低氧性右心室心肌肥厚的机制

目的 观察腺苷及其激动剂拮抗低氧性右心室心肌肥厚的作用，并探讨其作用机制。方法 56 只Sprague-Dawley大鼠随机分成常氧对照组、低氧对照组、低氧＋腺苷组、低氧 ＋腺苷 A1受体激动剂（CPA）组、低氧＋腺苷A2受体激动剂（NECA）组、低氧＋CPA ＋腺苷A1受体抑制剂（DPCPX）组、低氧 ＋NECA ＋腺苷 A2b受体抑制剂（MRS1754）组，每组各8只。大鼠置于低氧仓（氧体积分数为95～105 mL/L）连续低氧21 d。各处理组于低氧第7天使用植入式胶囊渗透压泵给药，持续14 d，实验结束时，测定大鼠右心室心肌肥厚程度，采用PCR法检测右心室心肌组织中肌球蛋白重链（β-MHC）mRNA、G蛋白调节因子4（RGS4）mRNA 的表达。结果 1.大鼠慢性持续低氧21 d后，低氧对照组右心室/（左心室＋室间隔）［RV/（LV ＋S）］和右心室/体质量（RV/BW）比值均明显高于常氧对照组（P均 〈0.001）；低氧 ＋腺苷组、低氧 ＋ CPA 组 RV/（LV ＋S）、RV/BW 比值均明显低于低氧对照组（P 均 〈0.05）；低氧 ＋ NECA 组 RV/（LV ＋ S）比值明显低于低氧对照组（P 〈 0.05）。2.低氧对照组β-MHC mRNA表达水平高于常氧对照组（P 〈0.001），低氧对照组 RGS4 mRNA 表达水平低于常氧对照组（P均 〈0.001）；低氧 ＋腺苷组、低氧 ＋CPA 组、低氧 ＋NECA 组 β-MHC mRNA 表达水平均低于低氧对照组（P均〈0.001），低氧＋腺苷组、低氧 ＋CPA 组、低氧 ＋NECA 组 RGS4 mRNA 表达水平均高于低氧对照组（P均〈0.001）。结论 腺苷可通过调控RGS4表达拮抗低氧性右心室心肌肥厚。