UPLC-PDA-QTOF/MS分析肌注胆木注射液后大鼠血浆中的分布

目的分析并鉴定大鼠肌肉注射胆木注射液后的主要入血的成分,初步探究其药效物质。方法采用UPLCPDA-QTOF/MS分析空白血浆、含胆木注射液血浆、胆木注射液和对照品,对比图谱中色谱峰保留时间以及离子碎片信息,解析成分的归属。结果以胆木注射液11个化学成分为参照,从大鼠血浆中鉴定了8个原形入血成分,分别是naucleamide A-10-O-β-D-glucopyranoside、短小蛇根草苷、3-表短小蛇根草苷、3α,5α-tetrahydrodeoxycordifoline lactam、naucleoxoside A、naucleoxoside B、异长春花苷内酰胺、喜果苷。结论 8个入血成分均为生物碱类成分,提示生物碱是胆木注射液可能的活性物质。

乌檀化学成分研究

目的:研究乌檀Nauclea officinalis(Pierre ex Pitard)Merr.et Chun茎干的化学成分。方法:采用硅胶、RP-18和Sephadex LH-20葡聚糖凝胶等柱色谱进行分离纯化,运用现代波谱学技术进行化合物结构鉴定。结果:从乌檀茎干乙醇提取物的二氯甲烷相中分离纯化得到17个化合物,分别鉴定为:19-乙氧基牛眼马钱托林碱(1)、3,14-二氢狭花马钱碱(2)、安枯斯特定碱(3)、3,14-二氢-19-乙氧基牛眼马钱托林碱(4)、4-(3-氨丙基)-2-甲氧基苯酚(5)、松脂素(6)、(-)-去甲氧基木兰素(7)、(+)-去甲氧基木兰素(8)、右旋杜仲树脂酚(9)、(+)-南烛木树脂酚(10)、猫眼草酚D(11)、3,4-二甲氧基苯酚(12)、顺式-5-羟基亚铁酸(13)、3-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)丙烷-1,2-二醇(14)、(+)-赤式-7-乙氧基愈创木甘油(15)、(-)-赤式-7-乙氧基愈创木甘油(16)和苏式-3-(4-羟基-3,5-二甲氧基苯基)-3-乙氧基丙烷-1,2-二醇(17)。结论:其中,化合物5和13为新天然产物,化合物5、7~13和15~17为首次从乌檀属植物中分离得到。

胆木树干乙酸乙酯部位化学成分研究

目的:研究胆木Nauclea officinalis Pierre ex Pitard树干的化学成分。方法:采用硅胶柱、Sephadex LH-20葡聚糖凝胶和制备型高效液相等色谱技术对胆木树干95%乙醇提取物的乙酸乙酯部位进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定化合物的结构。结果:从胆木树干乙酸乙酯部位中分离得到14个化合物,分别鉴定为:(6R,7E,9R)-9-hydroxy-4,7-megastigmadien-3-one(1)、(9S)-9-hydroxymegastigma-4,6E-dien-3-one(2)、blumenol C(3)、9-epi-blumenol C(4)、松柏醛(5)、3,5-二甲氧基-4-羟基苯甲醛(6)、芥子醛(7)、3,4-二甲氧基苯酚(8)、3,4,5-三甲氧基苯酚(9)、2-oxopomolic acid(10)、覆盆子酸(11)、桔皮晶(12)、(E)-3,3′-二甲氧基-4,4′-二羟基二苯乙烯(13)、fraxidin(14)。结论:其中,化合物2~8、10、11、13、14为首次从乌檀属植物中分离得到,化合物1、9、12为首次从胆木中分离得到。

胆木生物碱成分研究

目的研究胆木Nauclea officinalis的生物碱成分。方法95％乙醇提取胆木带皮茎枝的化学成分，采用反复硅胶柱色谱、Sephadex LH20凝胶柱色谱和C-18反相硅胶柱色谱分离纯化，通过光谱分析鉴定化合物的结构。结果从醋酸乙酯部位分离得到11个成分，其中9个为吲哚类生物碱，2个喹啉酮类生物碱，分别鉴定为：牛眼马钱托林碱（angustoline，Ⅰ）、19-乙氧基牛眼马钱托林碱（19-O-ethylangustoline，Ⅱ）、3-S-3，4-二氢牛服马钱托林碱（3-S-3，4-dihydroangustoline，Ⅲ）、3-R-3，4-二氢牛眼马钱托林碱（3-R-3，4-dihydroangustoline，Ⅳ）、naucleamide A（Ⅴ）、异长春花苷内酰胺（strictosamide，Ⅵ）、喜果苷（vincosamide，Ⅵ）、6′-异乙酰基长春花苷内酰胺（6′-acetylstrictosamide，Ⅷ、2′-异乙酰基长春花苷内酰胺（2′acetyl-strictosamide，Ⅸ）、短小蛇根草苷（pumiloside，Ⅹ）、3-表短小蛇根草苷（3-epi-pumiloside，Ⅺ）。结论化合物Ⅰ～Ⅺ均为首次从该植物中分离得到。

胆木叶提取物的抗氧化活性研究

以胆木叶为原料,通过不同极性溶剂依次萃取50%醇提取物,分别得到石油醚萃取物(PEE)、氯仿萃取物(CE)、乙酸乙酯萃取物(EAE)、正丁醇萃取物(BE)和水萃取物(WE),它们的收率依次为0.62%、3.90%、0.68%、1.78%和6.06%。采用过氧化氢体系、超氧阴离子(O2-.)体系、羟基自由基体系(.OH)和Oyaizu法,以Vc为阳性对照,进行5个不同萃取部分抗氧化活性的测定和比较。结果表明,5种萃取部分均具有一定的抗氧化活性,随着浓度的增加而提高;且在不同的自由基产生体系中,其抗氧化活性强弱不尽相同。在过氧化氢体系中,对H2O2的清除能力强弱顺序依次为Vc>BE>CE>EAE>PEE>WE;在超氧阴离子体系中,对O2-.抗氧化活性强弱顺序依次为Vc>EAE>BE>PEE>WE>CE,在羟基自由基体系中,对.OH抗氧化活性强弱顺序依次为Vc>BE>CE>EAE>PEE>WE;而其还原能力强弱顺序依次为BE>EAE>WE>CE>PEE。

胆木不同部位异长春花苷内酰胺的含量研究

目的:获得胆木茎木、皮及叶中有效成分异长春花苷内酰胺含量高低的研究结果,为挖掘胆木新的药用部位奠定科学基础。方法:采用薄层色谱法,对胆木的茎木、皮、叶中异长春花苷内酰胺化学成分进行定性鉴别;同时采用高效液相色谱技术对该3个部位中异长春花苷内酰胺含量高低进行检测。结果:胆木茎木、皮及叶的薄层色谱图中均出现异长春花苷内酰胺蓝色荧光斑点;且茎木、皮、叶中异长春花苷内酰胺含量值分别为1.22%,1.08%,1.54%。结论:定性鉴别和含量测定的实验结果均表明:胆木茎木、皮、叶中均含有效成分异长春花苷内酰胺,且叶中含量相对较高、皮中含量相对较低。

胆木新生物碱胆木碱己的结构测定

从胆木中分得新生物碱—胆木碱己。用紫外光谱,红外光谱,质谱及质子—质子二维核磁共振相关波谱法提出结构1,并由单晶X衍射确证。

胆木叶的抗炎镇痛作用研究

目的:研究胆木叶的抗炎、镇痛作用。方法:采用对二甲苯致小鼠鼠耳肿胀的影响、对二甲笨致小鼠毛细血管通透性的影响来观察胆木叶的抗炎作用;采用热板法和扭体法来考察胆木叶的镇痛作用。结果:胆术叶醇提物(20g/kg)具有抑制二甲苯所致小鼠鼠耳肿胀的作用(P<0.01)、具有抑制二甲苯所致小鼠毛细血管通透性的作用(P<0.01);能明显抑制热板所致的小鼠疼痛(P<0.01)、能明显抑制醋酸所致小鼠的疼痛作用(P<0.05)。结论:胆木叶醇提物(20g/kg)具有抗炎和镇痛作用。

海南黎药胆木PsbA-trnH-PCR体系的建立与优化

为了建立适合黎药胆木的PsbA-trnH-PCR体系来研究不同地理居群胆木遗传多样性,本研究以植物基因组试剂盒法提取胆木基因组DNA为模板,采用单因素实验和正交试验对PsbA-trnH-PCR过程中的关键影响因素进行优化,并对PsbA-trnH-PCR产物进行测序鉴定。结果表明,最佳PsbA-trnH-PCR反应体系(25μL)为:Taq酶1.0 U,dNTPs 0.4 mmol/L,Mg^(2+)0.75 mmol/L,引物0.15μmol/L,模板20 ng,10×PCR Buffer(不含Mg^(2+))2.5μL;采用该最佳体系对胆木基因组DNA进行PCR扩增,获得扩增产物,经单向测序获得了胆木PsbA-trnH部分序列;并建立了稳定的PsbA-trnH-PCR体系,为胆木的药材鉴别及其遗传多样性研究奠定了基础。

胆木叶总黄酮的提取工艺研究

利用L9(34)正交试验法研究了胆木叶中总黄酮的提取工艺条件及其含量测定。结果表明:对胆木叶中总黄酮的提取效果影响最大的因素是提取温度,其次是乙醇浓度和提取时间,影响最小的是料液比。总黄酮的提取工艺条件为提取温度为75℃,提取时间为4.0h,提取溶剂为85%的乙醇,料液比为1:16,胆木叶粗提物中总黄酮的含量为2.443%。

乌檀化学成分的研究

目的研究乌檀Nauclea officinalis(Pierre ex Pitard) Merr. et Chun的化学成分。方法乌檀75%乙醇提取物采用硅胶、ODS、Sephadex LH-20进行分离纯化,根据理化性质及波谱数据鉴定所得化合物的结构。结果从中分离得到12个化合物,分别鉴定为没食子酸(1)、3,4-二羟基苯甲酸(2)、山柰酚(3)、2α,3β-二羟基乌苏-12-烯-28-酸(4)、2α,3β,19α-三羟基乌苏-12-烯-28-酸(5)、23-羟基-乌苏酸(6)、2α,3β,19α,23-四羟基乌苏-12-烯-28-酸(7)、2β,3β,19α-三羟基乌苏-12-烯-28-酸(8)、3-O-β-D-glucopyranosyl-23-hydroxyursolic acid(9)、3β,19α,23-三羟基乌苏-12-烯-28-酸(10)、乌苏酸(11)、胡萝卜苷(12)。结论化合物3~9均为首次从该植物中分离得到。

UPLC-PDA测定胆木中异长春花苷内酰胺含量

目的建立超高效液相色谱法测定胆木不同部位(根、枝、皮、叶)中异长春花苷内酰胺含量。方法样品采用75%甲醇超声提取;选用Waters BEH C_(18)色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm);流动相为乙腈(A)-纯水(B),梯度洗脱;流速0.4 mL·min^(-1);柱温40℃;进样量3μL;检测波长227 nm。结果异长春花苷内酰胺在0.11~85.60μg·mL^(-1)与峰面积线性关系良好(R^(2)=0.9991),平均加样回收率为99.77%,RSD为0.13%。异长春花苷内酰胺在根中含量最高(11.42~13.38 mg·g^(-1)),其次为叶(2.03~5.00 mg·g^(-1)),在枝中含量相对较低(1.57~3.79 mg·g^(-1))。结论该方法快捷、灵敏、准确、可靠,可用于胆木中异长春花苷内酰胺含量的测定,为胆木的质量控制提供参考。

基于成分定量和指纹图谱的化学模式识别法评价胆木不同部位的差异性

目的建立胆木不同部位的UPLC指纹图谱,结合成分定量与化学模式识别,评价胆木不同部位的差异性。方法采用Waters Acquity BEH C18色谱柱(100 mm×2.1 mm,1.7μm);以乙腈(A)-0.1%磷酸水溶液(B)为流动相进行梯度洗脱;检测波长240 nm;体积流量0.3 mL/min;柱温30℃,对胆木不同部位异长春花苷内酰胺的含量进行测定,利用化学模式识别法通过SPSS 20.0对色谱数据进行聚类分析和通过SIMCA 14.1软件对胆木9部位进行主成分分析,并将所有色谱峰化为分类数据对药材不同部位的差异性进行分析。结果对于异长春花苷内酰胺而言,植株地下部位(根皮、去皮根茎)的累积量要高于地上部位的累积量,在地下部位,根皮部位的含量高于去皮根茎部位的含量,地上部位中叶含量最高,其次为茎干部位,最后为枝部位,茎干部位趋势从高到低大致为去皮茎干、带皮茎干、茎皮,枝部位趋势从高到低大致为枝皮、去皮枝茎、带皮小枝。3批次9部位(27份)药材UPLC图谱有9个共有峰,指认了其中獐牙菜苷、绿原酸、马钱苷酸3个色谱峰。当平方欧氏距离为10时,9部位被聚为3类:3批叶聚为一类,3批根皮、3批茎皮、3批枝皮共聚为一类,3批去皮根茎、3批带皮茎干、3批去皮茎干、3批带皮小枝、3批去皮枝茎聚为一类。所有色谱峰化为分类数据后,在皮部位中,根皮能区分于茎皮和枝皮,色谱图中根皮也存在区别于茎皮和枝皮的特征峰;在去皮部位中,去皮根茎可区分于去皮枝茎和去皮茎干,色谱图中去皮根茎也存在区别于去皮枝茎和去皮茎干的特征峰,同时去皮枝茎和去皮茎干可通过色谱图中的特征峰区分开来;在带皮部位中,带皮小枝与带皮茎干可以区分开来。结论胆木皮部位(根皮、枝皮、茎皮)、带皮部位(带皮小枝、带皮茎干)、去皮部位(去皮茎干、去皮枝茎、去皮根茎)、叶部位存在差异,可为胆木的进一步开发利用提供依据。

胆木茎的生物碱类成分研究

目的研究胆木Nauclea offcinalis茎枝生物碱类化学成分。方法综合采用硅胶柱色谱、反相柱色谱及制备HPLC色谱等方法进行分离纯化,利用紫外、质谱及核磁共振谱等方法鉴定化合物的结构。结果从胆木茎枝70%乙醇提取物中分离得到13个化合物,分别鉴定为3-R-3,4-二氢牛眼马钱托林碱(1)、吐叶醇(2)、naucleofficine D(3)、1,2,3,4-四氢-β-咔啉(4)、3-S-3,4-二氢牛眼马钱托林碱(5)、latifoliamide D(6)、latifoliamide B(7)、牛眼马钱托林碱(8)、3,14-二氢狭花马钱碱(9)、3,14,18,19-四氢狭花马钱碱(10)、6′-乙酰基异长春花苷内酰胺(11)、喜果苷(12)、异长春花苷内酰胺(13)。结论化合物2和4为首次从该属植物中分离得到,化合物6、7、9、10为首次从该植物中分离得到。

胆木与其混淆品的生药学鉴别研究

目的:探讨胆木与其混淆品——苦木木材的鉴别特征,完善药材胆木的性状和显微鉴别特征。方法:在对照研究相关文献与标本的基础上,对胆木与其混淆品进行外观性状和横切面、径切面和弦切面显微特征研究。结果:发现胆木与其混淆品在外观性状和显微特征方面均存在较大差异。结论:胆木与其混淆品——苦木木材可通过性状和显微特征比较进行鉴别。