高糖环境下Trx1过表达对HBZY-1细胞中MMP9表达的影响

硫氧还蛋白1(thioredoxin1,Trx1)是细胞内一种重要的巯基-二硫键氧化还原酶,在细胞内氧化还原状态的调控及抵抗氧化应激损伤过程中发挥重要的作用.为了探讨高糖环境下Trx1过表达对肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cells)HBZY-1中基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase 9,MMP9)表达水平的影响,本实验采用脂质体介导的瞬时转染实现Trx1蛋白过表达;采用RT-PCR和明胶酶谱法检测HBZY-1中MMP9 mRNA及酶活性的变化;通过流式细胞仪检测细胞内活性氧的含量.实验结果显示,高糖状态下,细胞中MMP9的mRNA和酶活性分别在12 h、24 h、48 h时表达增加(P<0.05);HBZY-1细胞中转染正义Trx1组,MMP9 mRNA水平及MMP9酶活性,高糖组与正常糖组无明显差异(P>0.05),转染反义Trx1组和未转染组中,高糖组均比正常糖组表达增加,差异有统计学意义(P<0.01);细胞中活性氧含量,高糖作用12 h、24 h、48 h均较正常糖组明显增多(P<0.01),高糖环境下转染正义Trx1质粒较转染反义Trx1质粒,细胞中活性氧含量明显减少,差异有统计学意义(P<0.05).实验提示,高糖环境下,Trx1过表达对MMP9的抑制作用是通过减少细胞内活性氧含量来实现的.本实验为Trx1的抗氧化作用提供新的证据,也为继续探讨Trx1在糖尿病肾病的预防和治疗提供新的思路.

白藜芦醇对脂多糖诱导的急性肺损伤的保护作用

目的研究白藜芦醇对脂多糖(LPS)造成的急性肺损伤的保护作用及其分子机制。方法用LPS气管内滴注构建小鼠急性肺损伤的模型。HE染色法观察肺病理形态学变化,ELISA法检测小鼠肺组织匀浆中肿瘤坏死因子(TNF-α)、白介素-6(IL-6)的含量,用Real-time PCR和ELISA分别检测硫氧还蛋白mRNA和蛋白水平表达。结果病理形态学显示白藜芦醇可明显减轻LPS诱导的肺损伤,并显著减少TNF-α,IL-6的含量。细胞水平白藜芦醇在50～100μg/ml范围内可以明显提高LPS刺激后的细胞活力。Real-time PCR和ELISA检测结果表明:白藜芦醇能明显提高动物肺组织和细胞中硫氧还蛋白的mRNA和蛋白水平。结论白藜芦醇可以减轻LPS诱导的肺损伤,其机制可能与提高Trx1有关。