A new three-step procedure for pancreatic head carcinoma with invasion of superior mesenteric artery

Pancreatic head carcinoma is characterized by high malignancy and a low survival rate and its mortality ranks fourth for malignant tumors with a 5-year survival rate of only 5%[1].Treatment of this cancer relies on surgical resection.However,the resection rate is only about 20%,because majority of the patients are classified as unresectable when diagnosed due to distant metastasis or

表皮干细胞体外分离与培养

探索和建立表皮干细胞体外分离与培养的技术方法。通过酶消化法获得幼鼠表皮 ,并制成单表皮细胞悬液 ,以表皮干细胞培养基 ,即无钙EMEM培养基 (添加 9%FBS ,0 0 5mmol/LCaCl2 ,4ng/mlEGF ,0 5ng/ml硫酸庆大霉素及 5 0 %成纤维细胞条件培养基 )置细胞培养箱内培养。成纤维细胞条件培养基为无钙EMEM培养基(添加 9%FBS、0 0 5mmol/LCaCl2 、0 5 μg/ml硫酸庆大霉素 )培养幼鼠皮肤块 4 8h后所得培养液。将 1×10 6/ml上述培养的角质形成细胞经TGG细胞消化液 37℃下振荡消化后 ,接种至鼠Ⅳ型胶原包被的培养瓶内 ,37℃下静置 10～ 15min,留用快速贴壁细胞继续培养 ,所得细胞分别以能否呈克隆状生长和透射电镜观察其超微结构及β1整合素、K19免疫细胞化学染色进行鉴定。结果显示 ,鼠Ⅳ型胶原包被的培养瓶内快速贴壁细胞经继续培养 ,可见细胞呈克隆状生长。电镜观察其超微结构示非成熟细胞特征 ,β1整合素、K19免疫细胞化学染色阳性。研究表明 ,表皮干细胞可在体外分离与培养 ,本实验方法为较好方法之一。

应用移动尼龙袋法和三步法评定反刍家畜常用饲料的蛋白质小肠消化率

本研究选用3头装有永久瘤胃瘘管和十二指肠“T”型瘘管的阉牛，采用移动尼龙袋法和三步法测定了15种饲料蛋白质的小肠消化率。结果表明，移动尼龙袋法测得的玉米蛋白粉、菜籽粕、豆粕、棉籽粕、花生饼、小麦麸、黄玉米、啤酒糟、米糠、玉米胚芽饼、酒糟蛋白、苜蓿、羊草、玉米秸秆和玉米青贮中蛋白质小肠消化率分别为90．60％、82．31％、96．32％、80．62％、95．58％、67．89％、89．86％、74．33％、58．65％、79．79％、90．42％、40．00％、44．88％、35．52％、10．52％。同时将三步法与移动尼龙袋法测得的消化率进行线性回归分析，结果显示．不同种类饲料蛋白质小肠消化率差异很大（10％～96％），作为一种简便、可靠的体外酶解评定方法．三步法与移动尼龙袋法呈线性正相关[Y=1．1851X-5．9468，n=15，R^2=0．8912；其中Y代表移动尼龙袋法所测饲料瘤胃非降解蛋白质的小肠消化率（％），X代表三步法所测的消化率结果（％）]。

罗汉果组培苗规范化种植生产操作规程(SOP)

该操作规程明确了罗汉果组培苗的种质特征、产地环境、栽培技术措施、质量标准以及采收加工、包装、储运方法等,侧重规范了肥水管理、整形修剪、病虫害防治等关键种植环节和罗汉果总甙含量测定方法,为罗汉果的标准化生产和现代化质量管理提供了操作依据。

雅培c16000全自动生化分析仪上的试剂交叉携带污染发现及解决方案

为了解决临床生化检测中隐蔽的交叉携带污染,提出了一种合理普适的交叉携带污染评估和解决方案.该方案采用雅培c16000全自动生化分析仪,设计合理普适的交叉携带污染测定试验及特殊的污染清洗程序,对体外诊断市场中占有率较高的中生试剂的交叉携带污染情况进行评价,通过对31个临床常规检测试剂盒的930个组合进行交叉携带污染试验,对隐蔽性的交叉携带污染提出判定标准,并对具有交叉携带污染的组合用提出的特殊的清洗程序进行清洗.结果表明,传统标准仅识别出10个具有交叉携带污染的组合,而提出的新标准比传统标准额外识别出了5个交叉携带污染组合.对以上15组具有交叉携带污染的组合用提出的特殊的清洗程序进行清洗,其污染率绝对值全部显著降低,且交叉携带污染情况全部得到消除.

单叶省藤和黄藤种质离体培养保存研究

对黄藤和单叶省藤种质离体培养保存进行了研究 .在温度 15 .5℃、照度 3 0 0 lx、光照时间 12 h· d- 1 的保存条件下 ,采用适宜的保存培养基 ,以丛芽形式 ,黄藤和单叶省藤种质可安全保存 15个月以上不转接 ,丛芽高生长小于 1.0 cm.回接到增殖培养基和增殖条件下 ,单叶省藤种质能恢复原有的增殖能力 ,保证了保存培养和增殖培养的可循环性 .种质保存后伸长能力和生根能力没有下降 ,可确保离体种质转换为田间种质 .因而 ,棕榈藤种质离体保存具有一定的可行性 。

牛卵泡卵母细胞的体外成熟和冷冻保存

在简化牛卵母细胞体外成熟的基础上,观察了保护剂、平衡温度、预平衡方法、解冻方法以及冷冻方法对牛卵泡卵母细胞冷冻的影响。结果表明:在体外成熟培养液中添加26.2 mmol/L的NaHCO3和对屠宰场卵巢进行选择更能促进牛卵母细胞的体外成熟;无论是程序冷冻还是玻璃化冷冻,乙二醇(EG)与甘油(GLY)相比更能促进牛卵泡卵母细胞的冷冻效果;在程序冷冻中,冷冻液中添加0.1 mol/L蔗糖比添加0.3mol/L的蔗糖更能促进牛卵泡卵母细胞的冷冻;在玻璃化冷冻中,37℃和25℃的平衡温度比4℃更适合牛卵泡卵母细胞的冷冻;在10%、5%、1%的预平衡浓度之间,5%的预平衡浓度即可达到预平衡的效果;在解冻时,多步脱除保护剂更能保护冷冻的卵母细胞;比较了几种最小样本量(minimum size sample,MSS)玻璃化冷冻方法,解冻成熟培养后的成熟率,拉细毛细玻璃管冷冻法为(41.67±3.19)%,极显著高于未拉细毛细玻璃管冷冻法(glassmicropipette,GMP)的(30.19±1.93)%和固体表面冷冻法(solid surface vitrification,SSV)的(28.33±2.89)%(P<0.01)。

饲料蛋白在陕北白绒山羊小肠的消化率

选用7只年龄相同、体质量相近的陕北白绒山羊母羊,外科手术为其中3只安装永久性瘤胃瘘管,4只安装十二指肠"T"型瘘管,采用移动尼龙袋法和体外三步法研究了陕北白绒山羊常用的4种精饲料(棉粕、菜籽粕、玉米蛋白粉、酵母)和4种粗饲料[(桑(Morus alba)叶、芦苇(Phragmites australis)、紫穗槐(Amorpha fruticosa)、柠条(Caragana korshinskii)]在小肠中的降解特性。移动尼龙袋法测得棉粕、菜籽粕、玉米蛋白粉、酵母、桑叶、芦苇、紫穗槐、柠条的小肠粗蛋白的表观消化率依次是77.24%、60.08%、96.36%、18.49%、42.05%、49.62%、30.36%、52.21%。研究结果表明,玉米蛋白粉有提供高水平过瘤胃蛋白的潜能,体外三步法和移动尼龙袋法所测小肠粗蛋白降解率呈线性正相关,y=0.802 3x-0.128 5(R2=0.911 5)。

西藏山南地区饲料原料能量与蛋白质营养价值评定

为了明确西藏山南地区粗饲料、能量饲料和蛋白质饲料的营养价值,试验采用体外产气法对几种粗饲料(箭舌豌豆、鸭茅、青稞秸秆、紫花苜蓿、小麦秸秆和黑麦草等)和能量饲料(青稞、小麦、玉米和麦麸),采用3步消化法对蛋白质饲料(葵花粕、菜籽粕和箭舌豌豆种子)进行了营养价值评定。结果表明:粗饲料的净产气量范围为16.46～54.47 mL/200 mg,代谢能和泌乳净能值(计算值)分别为4.47～9.69 MJ/kg和2.14～5.82 MJ/kg;能量饲料青稞、小麦、玉米和麦麸的平均产气量分别为61.64,69.09,68.81,43.38 mL/200 mg,代谢能与泌乳净能值(计算值)分别为10.86,12.00,11.98,8.04 MJ/kg和6.81,7.65,7.63,4.74 MJ/kg。蛋白质饲料中,葵花粕和箭舌豌豆种子的蛋白质快速降解组分显著高于菜籽粕(P<0.05);菜籽粕的潜在降解组分显著高于其他2种蛋白质饲料(P<0.05);葵花粕、箭舌豌豆和菜籽粕的降解率常数c有很大差异,分别为0.079,0.062和0.055 h-1。饲料成本占畜禽生产总成本的65%左右。

体外诊断医疗器械不良事件全程化云监测模式研究

目的完善体外诊断医疗器械不良事件监测模式,制定科学有效的技术程序。方法通过探讨体外诊断医疗器械不良事件的特征、表现及成因等客观规律,明确监测工作的关键节点。结果构建基于风险管理的体外诊断医疗器械不良事件全程化云监测模式,制定收集与上报、调查、分析与评价、控制四大核心环节的工作程序。结论全程化云监测模式有助于提高我国体外诊断医疗器械不良事件监测水平与监测效率,从而加强风险控制能力,保障大众用械安全。

RPH治疗直肠粘膜内脱垂离体试验和临床应用

目的研究自动弹力线痔套扎吻合器套扎离体人直肠标本,探索自动痔套扎术(RPH)治疗直肠粘膜内脱垂的基本参数及其临床应用的可行性与安全性。方法观察RPH套扎10例离体人直肠手术标本,分析套扎点数、吸引压力、操作方式与肠粘膜紧缩效果、吸入肌层的关系;依据试验结果,对28例直肠粘膜内脱垂患者行RPH治疗。结果离体人直肠壶腹部自然展开周径为6. 8～8. 5 cm,平均(7. 6±1. 2) cm;最大展平周径10. 5～12. 0 cm,平均(11. 6±1. 1) cm。单点套扎吸入粘膜直径1. 8～2. 8 cm,平均(2. 3±0. 4) cm,多点套扎后粘膜明显紧缩。套扎远端直肠粘膜时,通过抖动套扎器无肌层被吸入,持续吸引有浅层肌肉被吸入;套扎近端直肠粘膜,抖动套扎器无肌层被吸入,持续吸引则肠壁全层被吸入。28例患者中治愈25例,治愈率为89. 3%。术后下腹部及肛门坠胀不适26例,肛门疼痛6例,肛门少量出血2例,经对症处理1周后均缓解,无创面感染、大出血、肠穿孔、直肠阴道瘘等严重并发症发生。随访6～23个月,3例仍有排便不尽感,但较术前明显改善,排便造影亦显示粘膜脱垂减少1/3以上,无一例复发。结论 RPH治疗直肠粘膜内脱垂手术操作简单,安全可行,效果满意。

太子参组培苗规范化种植生产技术规程

介绍了太子参组培苗的种质特征、产地环境、栽培技术措施、质量标准以及采收加工、包装、储运方法等,侧重规范了肥水管理、病虫害防治等关键种植环节,为太子参的标准化生产和现代化质量管理提供了操作依据。

质量管理系统在体外受精实验室中的应用

质量管理系统最初广泛用于临床检测实验室,近10年来才被逐步引入体外受精(IVF)实验室,对其实验方法及工作人员职责进行质量管理。作为辅助生殖技术中重要组成部分的IVF实验室,其环境会对胚胎的发育潜能产生影响,因此通过全面的质量管理系统为胚胎提供稳定的发育环境对IVF结局至关重要。实验室的质量控制手册应明确地告知工作人员哪些"必须做"、哪些"禁止做",而且手册应不断更新,使操作程序内容更易于理解,实验操作方法更为灵活实用。因此,建立一个强有力的质量管理机制是拥有一个稳定IVF实验室的基础,是获得理想妊娠率的基础,是保证胚胎正常发育的基础。

体外诊断试剂质量管理体系考核现场检查的程序和方法

介绍了体外诊断试剂质量管理体系考核现场检查的程序和方法,对要点和注意事项进行了探讨,旨在提高检查员的现场检查经验,保证体系考核工作的质量、规范和高效。

体外孵化项目的合法会计信息失真研究——以爱尔眼科为例

新经济、新业态的发展,新商业模式不断涌现,会计信息生产者按已有的会计准则和职业判断进行确认、计量、记录和报告,路径依赖下的会计处理程序可能会形成合法性信息失真。体外孵化成为企业扩张的加速器,也是隐藏风险的“雷”,目前的会计处理程序展现了一份资产、利润都高速增长的财务报表,而交易的风险可能被隐匿。本文以运用并购基金实现体外孵化的典型案例爱尔眼科作为研究对象,通过阐述体外孵化项目投资逻辑,分析复杂的商业交易造成控制权的模糊,致使其会计信息未反映经济实质以及内含的风险,以此提示信息使用者以及为监管层提供政策建议,当前会计准则和规范滞后商业模式发展,相关部门应该更关注市场的新商业模式以及其会计处理程序和信息披露监管。

体外生物学活性测定法试验数据分析流程探讨

目的:探讨建立规范的体外生物学活性测定法试验数据分析流程。方法:参照美国药典通则<1034>介绍的生物检定试验数据分析流程,选择以抗TNF-α全人源单克隆抗体的体外生物学活性试验数据分析为例,根据其国家药品注册标准、企业内控标准及历史数据制定分析流程中系统适用性和样品适用性等各项评价指标的可接受标准,对1批抗TNF-α全人源单克隆抗体3次独立试验数据按照拟定标准进行分析和评价。结果:抗TNF-α全人源单克隆抗体3次独立测定的结果均符合各项系统适用性和样品适用性评价指标要求,3次独立结果合并计算的效价值和可信区间可作为有效结果出具报告值。结论:本研究参照美国药典尝试建立了规范的抗TNF-α全人源单克隆抗体体外生物学活性试验数据分析流程,以期为其他药品的生物学活性测定试验数据分析提供参考。

输卵管切除术对体外受精-胚胎移植中控制性超促排卵的影响

目的:探讨输卵管切除术对体外受精-胚胎移植(IVF-ET)周期超促排卵中卵巢反应性的影响。方法:选择因异位妊娠行一侧输卵管切除、双侧输卵管切除的患者以及双侧输卵管未切除的管性不孕患者,观察在IVF-ET中卵巢对控制性超排卵的反应。结果:3组患者年龄、促性腺激素用量、获卵数、受精数以及妊娠率差异无统计学意义。单侧输卵管切除的患者中输卵管切除侧卵巢获卵数少于对侧,但差异无统计学意义。结论:输卵管切除术对IVF-ET周期中卵巢反应性以及妊娠率无明显影响。输卵管积水患者拟行IVF-ET前预防性切除输卵管是可行的。

改良揭膜消化法分离培养恒河猴角膜内皮细胞

目的分析改良揭膜消化法分离培养恒河猴角膜内皮细胞的可行性。方法揭取恒河猴角膜后弹力层和内皮层,反复剪碎,用1 mg·m L^(-1)胶原酶A消化15 min,离心后重悬接种。待原代细胞长满80%~90%时,以40×106个·L^(-1)的密度传代。观察记录原代及传代细胞生长情况、传代时间,进行细胞鉴定,并与组织贴壁法相比较。结果改良揭膜消化法获取的原代细胞生长较慢,21 d融合成单层铺路石样结构,无基质细胞污染;传代细胞生长较快,5~6 d可传一代;神经元特异烯醇化酶表达阳性。组织贴壁法分离组织24h后组织片体积变小,透亮度明显下降,疑似溶解,高倍镜下观察显示,后弹力层纤维排列紊乱,细胞观察不清;继续培养至第5天,细胞完全溶解,组织片碎裂,轮廓不清,未见角膜内皮细胞爬出。结论改良揭膜消化法能简易高效地获得大量恒河猴角膜内皮细胞。

中国体外诊断技术发展的历史进程

中国体外诊断技术的历史变迁自新中国成立之日起,已经走过六十多个年头。中国体外诊断技术的发展经历了从经典手工、作坊式设备,到标准化、智能化、自动化管理的全过程,在不同时代有其不同特征。体外诊断在学科理念上也从"医学检验"到"检验医学"发生着重大转变,并为临床提供重要的病理、生理信息,是患者诊疗过程中的重要组成部分。

不同换液程序对山羊胚胎发育的影响

通过优化培养程序,筛选培养液,以建立适合山羊胚胎体外发育的培养体系(in vitroculture of embryos,IVC)。培养液添加不同成分和不同换液程序的研究表明,在山羊胚胎培养中,基础培养液选用合成输卵管液(synthesized oviductal fluid,SOF)添加牛血清白蛋白(BSA)或胎牛血清(FCS),并采用正确换液程序,即48 h前是SOF+BSA,之后换为SOF+FCS,可获得理想的囊胚率和卵裂率。