低剂量微丝解聚剂对地塞米松诱导的牛小梁细胞骨架及基质蛋白TSP-1的影响

目的研究低剂量的肌动蛋白微丝解聚剂Latrunculin(LAT)-A对地塞米松诱导的牛小梁细胞肌动蛋白细胞骨架及细胞外基质蛋白TSP-1产生的影响。方法体外培养牛眼小梁细胞,分别用地塞米松和LAT-A在不同条件下孵育,免疫荧光显微镜观察细胞骨架形态和结构的改变并用免疫组织化学法对TSP-1的表达进行定位和半定量分析。结果培养的小梁细胞NSE染色阳性,ⅧR∶Ag染色阴性,TSP-1染色阳性。经地塞米松诱导后微丝重组杂乱,细胞外TSP-1表达减弱。LAT-A可部分逆转此重组,促进其恢复;LAT-A可抑制TSP-1表达,且随作用时间的延长抑制作用更强。结论低剂量的LAT-A可以逆转由地塞米松诱导的细胞骨架的改变,并对TSP-1的产生有抑制作用。

膜性及非膜性肾病综合征患者血浆血管性血友病因子及其裂解酶的变化及临床意义

目的 探讨膜性及非膜性肾病综合征（nephrotic syndrome,NS）患者治疗前后血浆中血管性血友病因子裂解酶（a disintegrin-like and metalloprotease with thrombospondin type I repeats 13,ADAMTS13）及血管性血友病因子（von Willebrand factor,vWF）的变化其临床意义.方法 将60例NS患者分为膜性肾病组（n=21）、非膜性肾病组（n=39）,43例健康体检者作为正常对照组,检测各组血、尿生化指标,ELISA法检测各组血浆AD-AMTS13、vWF水平并计算vWF/ADAMTS13比值.结果 与正常对照组相比,治疗前膜性肾病组和非膜性肾病组患者血浆ADAMTS13水平均降低（P＜0.05）,而vWF、vWF/ADAMTS13水平均升高（P＜0.05）.相关分析显示,NS患者血浆ADAMTS13与血清白蛋白（ALB）呈正相关（r=0.668,P＜0.05）,与尿蛋白定量（UTP）、D-dimer和三酰甘油（TG）呈负相关（r=-0.403,r=-0.313,r=-0.281,P＜0.05）.血浆vWF与ALB呈负相关（r=-0.376,P＜0.05）,与总胆固醇（TC）、UTP呈正相关（r=0.328,r=0.269,P＜0.05）.血浆ADAMTS13与vWF之间呈负相关（r=-0.387,P＜0.05）.非膜性肾病组ADAMTS13治疗后较治疗前升高,差异具有统计学意义（P＜0.05）,膜性肾病组ADAMTS13治疗后较治疗前升高,但差异无统计学意义（P ＞0.05）;NS两组血浆vWF及vWF/ADAMTS13比值治疗前后比较差异均无统计学意义（P＞0.05）.结论 vWF、ADAMTS13及vWF/AD-AMTS13与NS高凝状态有关,ADAMTS13可能成为判断肾病综合征病情与预后的新指标.

冠状动脉内血管性血友病因子裂解蛋白酶活性和全球急性冠状动脉事件注册评分对急诊经皮冠脉介入术治疗ST段抬高型心肌梗死病人住院期间主要心血管不良事件的预测价值

目的 探讨冠状动脉内血管性血友病因子裂解蛋白酶(ADAMTS13)活性和全球急性冠状动脉事件注册(GRACE)评分对ST段抬高型心肌梗死(STEMI)行急诊经皮冠脉介入术(PCI)的病人住院期间主要心血管不良事件(MACE)的预测价值。方法 选取2019年10月至2021年6月在潍坊医学院附属医院住院的162例STEMI接受急诊PCI治疗的病人,根据住院期间是否发生MACE,分为MACE组(38例)和无MACE组(124例)。记录两组病人的重要临床特征、GRACE评分。采用荧光共振能量转换法(FRETS-VWF73)分别测定两组病人急诊PCI术前外周血和冠脉内的ADAMTS13活性。四格表χ~2检验及独立样本t检验比较两组病人的重要临床特征、GRACE评分。Pearson相关性分析探讨ADAMTS13活性与GRACE评分的相关性。多因素logistic回归分析MACE的独立危险因素。应用受试者操作特征曲线(ROC曲线)分析冠脉内ADAMTS13活性、GRACE评分以及联合诊断对MACE的预测效能。结果 两组比较,MACE组病人糖尿病史、吸烟史更多,年龄较大、外周血血小板计数更低、凝血酶原时间(PT)更长、N端脑钠肽前体(NT-proBNP)和肌钙蛋白I(cTnI)更高(P<0.05);MACE组病人GRACE评分更高[(187.26±35.50)分比(153.87±32.95)分,P<0.001],术前外周血[(59.01±4.56)%比(63.86±5.75)%]和冠脉内[(46.37±5.43)%比(54.26±5.70)%]的ADAMTS13活性更低(均P<0.001)。术前冠脉内ADAMTS13活性与GRACE评分中等强度负相关(r=-0.40,P<0.001),而外周血ADAMTS13活性与GRACE评分无明显相关性(r=-0.08,P=0.457)。多因素logistic回归分析,糖尿病史和GRACE评分为MACE的独立危险因素[OR=2.513,95%CI:(2.045,3.381),P=0.007;OR=1.089,95%CI:(1.033,1.147),P=0.001],术前冠脉内ADAMTS13活性是MACE的保护性因素[OR=0.568,95%CI:(0.429,0.753),P=0.001]。术前冠脉内ADAMTS13活性、GRACE评分诊断MACE的AUC及其95%CI分别为0.833(0.735,0.932)和0.746(0.624,0.867),截断值分别为50.95%和158.50分,联合诊断的AUC为0.893(0.824,0.962)。结论 GRACE评分增高、术前冠脉内ADAMTS13活性降低均是接受急诊PCI治疗的STEMI病人住院期间MACE的独立危险因素,二者联合诊断的预测价值更高。

ADAMTS1在结直肠癌组织中的表达及其与预后的关系

目的探讨含血小板结合蛋白基序1的解聚蛋白样金属蛋白酶（a disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin type I motif，ADAMTS1）在结直肠癌组织中的表达情况，并分析其与结直肠癌临床病理特征及预后的关系。方法采用免疫组化染色SP法检测65例结直肠癌组织和癌旁组织中ADAMTS1的表达，采用妒检验分析ADAMTS1表达与结直肠癌临床病理特征的关系，采用Cox比例风险模型分析ADAMTS1表达及其他临床病理特征与结直肠癌预后的关系。结果结直肠癌组织中ADAMTS1的表达阳性率为40％（26／65），癌旁组织为85％（55／65），结直肠癌组织较低（X=27．546，P〈0．001）。有淋巴结转移的结直肠癌组织其ADAMTS1的表达阳性率低于无淋巴结转移者（X=5．329，P=0．021）。ADAMTS1表达阴性结直肠癌患者的中位生存时间为27个月，而ADAMTS1表达阳性者为70个月，ADAMTS1表达阳性者的生存情况较好（X=10．151，P=0．001）。Cox比例风险模型分析结果显示，TNM分期（RR=3．782，95％ CI：1．509-9．476，P=0．005）、淋巴结转移（RR=3．107，95％ CI：1．186-8．138，P=0．021）和ADAMTS1表达情况（RR=2．020，95％ CI：1．071-3．809，P=-0．030）均影响结直肠癌患者的预后，Ⅰ-Ⅱ期、无淋巴结转移及ADAMTSI表达阳性者的预后较好。结论ADAMTS1在结直肠癌组织中呈低表达；ADAMTS1表达与结直肠癌的淋巴结转移有关；ADAMTS1表达阳性结直肠癌患者的预后好于ADAMTS1表达阴性者，提示其是预测结直肠癌患者预后的重要指标。

表没食子儿茶素没食子酸酯对骨性关节炎的治疗作用

【目的】评价表没食子儿茶素没食子酸酯(epigallocatechin-3-gallate,EGCG)对小鼠骨性关节炎的治疗作用。【方法】取C57BL/6小鼠36只,随机分为对照组、模型组和EGCG组,每组12只,通过韧带切除制造小鼠骨性关节炎模型。模型制作成功后连续给药,腹腔注射25 mg/kg EGCG,1次/d。3组小鼠分别于治疗4、8周后分批处死,采用骨性关节炎软骨病理变化评价系统评价关节软骨的病变,取小鼠膝关节软骨,切片后进行免疫组化染色,测量蛋白聚糖和Ⅱ型胶原染色平均灰度值用于评估关节软骨中蛋白多糖和Ⅱ型胶原的含量,计算基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13),聚蛋白聚糖酶(a disintegrin-like and metalloprotease with thrombospondin type I motifs-5,ADAMTS-5)阳性细胞百分率。运用实时定量PCR测定关节软骨中1-甲基环丙烯(1-methylcyclopropene,MCP-1)、趋化因子受体2(chemokine receptor2,CCR-2)、白细胞介素1β(interleuk in-1β,IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)RNA表达。【结果】骨性关节炎小鼠经EGCG治疗4、8周后,OARSI评分与模型组相比显著降低(P<0.01),关节软骨中蛋白聚糖、Ⅱ型胶原蛋白表达与模型组相比显著升高(P<0.01),MMP-13、ADAMTS-5阳性细胞百分率显著降低(P<0.01);治疗8周后,关节软骨中MCP-1、CCR-2、IL-1β、TNF-αm RNA表达与对照组相比显著减少(P<0.01)。【结论】EGCG能够缓解小鼠骨性关节炎的病理过程。