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Influence of Formate on Bioactivity Material-thuringiensin Synthesized by Bacillus thuringiensis YBT-032
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作者 王志 喻子牛 《Journal of Wuhan University of Technology(Materials Science)》 SCIE EI CAS 2008年第5期691-693,共3页
The biological method to synthesize thuringiensin and the influence of formate on thuringiensin biosynthesis were investigated. Addition of 1.00 g/L formate to growth medium of bacillus thuringiensis YBT-032 resulted ... The biological method to synthesize thuringiensin and the influence of formate on thuringiensin biosynthesis were investigated. Addition of 1.00 g/L formate to growth medium of bacillus thuringiensis YBT-032 resulted in significant enhancements in productions of citrate, α -ketoglutarate, intracellular adenine and thuringiensin. These results demonstrate that added formate attends metabolism of cell, facilitates carbon metabolic flux in tricarboxylic acid cycle and hexose monophosphate pathway. As a carbon source, formate facilitates cell growth, increases glucose consumption and enhances the ability of cell to synthesis adenine analogues, and subsequently thuringiensin. Thuringiensin production rate significantly enhanced from 6.44 to 8.46 mg·g^-1 · h and transformation ratio from glucose to thuringiensin increased by 43.30%. 展开更多
关键词 bacillus thuringiensis PRECURSOR FORMATE thuringiensin
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苏云金素发酵培养基的优化设计 被引量:17
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作者 常亚飞 陈守文 喻子牛 《中国生物防治》 CSCD 北大核心 2006年第3期190-194,共5页
采用Plackett-Burman设计对出发培养基各种成分影响苏云金芽孢杆菌中华亚种CT43发酵合成苏云金素的效应进行评价,筛选出有显著影响效应的因素为葡萄糖和黄豆饼粉。利用最陡爬坡路径试验逼近最大苏云金素产出区域,找到后续试验中心点。... 采用Plackett-Burman设计对出发培养基各种成分影响苏云金芽孢杆菌中华亚种CT43发酵合成苏云金素的效应进行评价,筛选出有显著影响效应的因素为葡萄糖和黄豆饼粉。利用最陡爬坡路径试验逼近最大苏云金素产出区域,找到后续试验中心点。综合中心组合设计和响应面分析法确定显著因素的最佳浓度。优化后培养基组成为(g/L):葡萄糖22.8g、黄豆饼粉32.5g、酵母抽提物3.0g、蛋白胨4.5g、玉米浆3.0g、KH2PO42.0g、MgSO4.7H2O 0.15g、MnSO4.H2O0.02g,苏云金素产量可达3.2g/L,比出发培养基提高2倍以上。 展开更多
关键词 苏云金素 试验设计 发酵培养基 优化
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苏云金芽胞杆菌苏云金素缺失突变株的筛选及特性研究 被引量:2
3
作者 董纯明 阮丽芳 +1 位作者 孙明 喻子牛 《应用与环境生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第4期526-529,共4页
利用高温和SDS对苏云金素高产菌株CT-43-1c进行了质粒消除,筛选得到一株不产苏云金素的无晶体突变株BMB0806;并通过SDS-PAGE、高效液相色谱(HPLC)和脉冲电泳(PFGE)分析了野生型菌株CT-43、出发菌株CT-43-1c和突变株BMB0806杀虫晶体蛋白... 利用高温和SDS对苏云金素高产菌株CT-43-1c进行了质粒消除,筛选得到一株不产苏云金素的无晶体突变株BMB0806;并通过SDS-PAGE、高效液相色谱(HPLC)和脉冲电泳(PFGE)分析了野生型菌株CT-43、出发菌株CT-43-1c和突变株BMB0806杀虫晶体蛋白的组成、苏云金素的产量和质粒图谱之间的差异.结果表明,突变株BMB0806与菌株CT-43和CT-43-1c相比,分别缺失了3个和2个大质粒,从而不再产生苏云金素和由cry1B基因编码的分子量为140×103的杀虫晶体蛋白.进一步分析三者质粒图谱后发现,突变株BMB0806中苏云金素的缺失和cry1B基因所在的大质粒A直接相关. 展开更多
关键词 苏云金芽胞杆菌 苏云金素 质粒消除 cry1B
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苏云金素在水中和植株上的衰减与残留 被引量:1
4
作者 林开春 操继跃 +3 位作者 梁运祥 杨尔宁 刘翔 陈亚华 《中国生物防治》 CSCD 1995年第3期97-100,共4页
用HPLC检测了苏云金素在鱼塘水和清水中的衰减速率。清水中该物质的半衰期长达433小时;在鱼塘水中苏云金素的衰减呈双指数消除模型,开始消除半衰期为2.43~10.68小时,终未消除半衰期为128.57~142.01小时。该物质在水稻植株内的... 用HPLC检测了苏云金素在鱼塘水和清水中的衰减速率。清水中该物质的半衰期长达433小时;在鱼塘水中苏云金素的衰减呈双指数消除模型,开始消除半衰期为2.43~10.68小时,终未消除半衰期为128.57~142.01小时。该物质在水稻植株内的消除模型为单指数消除模型C=73.21e-0.0038t;t1/2为182.36小时。在水稻分蘖期大剂量喷药后稻米中无苏云金素残留。苏云金素在夏季小白菜上的开始消除半衰期t1/2a为59.74小时,终末消除半衰期t1/2β为382.89小时;在冬季小白菜上t1/2为330小时。苏云金素制剂在小白菜上施用之后很可能残留到采收食用时。 展开更多
关键词 苏云金素 苏云金芽孢杆菌 半衰期 残留量 植株
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苏云金素测定方法的研究 被引量:1
5
作者 戴经元 肖和艾 +1 位作者 陈亚华 喻子牛 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期249-253,共5页
用黄色八叠球菌、金色微球菌、根癌农杆菌和萤光假单胞杆菌作指示菌,同时用家蝇幼虫作指示昆虫,对产苏云金素的4株苏云金杆菌发酵物的毒力进行了测定。结果表明,两种测定方法所获得的抑菌圈大小与校正死亡率成正相关,但微生物测定... 用黄色八叠球菌、金色微球菌、根癌农杆菌和萤光假单胞杆菌作指示菌,同时用家蝇幼虫作指示昆虫,对产苏云金素的4株苏云金杆菌发酵物的毒力进行了测定。结果表明,两种测定方法所获得的抑菌圈大小与校正死亡率成正相关,但微生物测定法要快速、省材。尤其是用黄色八叠球菌为指示菌的微生物测定法比用其它几种指示菌时所出现的抑菌圈要清晰、透明,容易测定。选用这一指示菌来测定苏云金杆菌所产的苏云金素是可行的。 展开更多
关键词 苏云金杆菌 苏云金素 微生物测定 生物测定
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芽孢杆菌剂与苏脲1号对家蝇幼虫的协同作用和持效 被引量:1
6
作者 喻子牛 邱立友 李泽营 《中国生物防治学报》 CSCD 1990年第S1期78-82,共5页
实验室研究结果表明,苏云金杆菌CT—43和YBT—127菌株的孢晶素粉对家蝇幼虫的效果分别为65%和40%,明显高于森田芽孢杆菌的效果(5%),在多种混合应用的组合中,只有CT—43菌株的孢晶粉与苏脲Ⅰ号混合应用有明显的协同作用。苏云金素混... 实验室研究结果表明,苏云金杆菌CT—43和YBT—127菌株的孢晶素粉对家蝇幼虫的效果分别为65%和40%,明显高于森田芽孢杆菌的效果(5%),在多种混合应用的组合中,只有CT—43菌株的孢晶粉与苏脲Ⅰ号混合应用有明显的协同作用。苏云金素混入家蝇饲料中在培养室保存15天,对蝇幼虫的毒力没有下降,其他菌剂和苏脲Ⅰ号的毒效均明显下降。改进苏云金杆菌的孢晶素制剂,用于防治家蛹幼虫是有效可行的。 展开更多
关键词 苏云金杆菌 森田芽孢杆菌 家蝇 苏云金素 苏脲I号
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高产苏云金素培养基和培养条件的优选 被引量:1
7
作者 喻子牛 沈鞠群 熊春林 《中国生物防治学报》 CSCD 1990年第S1期54-59,共6页
用正交试验的方法筛选了苏云金杆菌高产苏云金素的培养基配方和培养条件。在第一次正交试验筛选出的6种培养基配方的基础上,对培养基成分和用量作调整后进行第二次正交试验,筛选出五种培养基配方。将这11种培养基用3个菌株继续评选,尽... 用正交试验的方法筛选了苏云金杆菌高产苏云金素的培养基配方和培养条件。在第一次正交试验筛选出的6种培养基配方的基础上,对培养基成分和用量作调整后进行第二次正交试验,筛选出五种培养基配方。将这11种培养基用3个菌株继续评选,尽管不同菌株在同一培养基中产苏云金素的量不同,但3个菌株产苏云金素量最高,且稳定的培养基匀为M_3培养基。正交试验的最后培养条件:温度32℃、pH6.5、通气量最大,转速200rpm、接种菌龄16小时、接种量3%、培养24小时。同时,还对苏云金菌杆CT—43菌株在培养基M_3中不同发酵时间的细胞数、pH、还原糖、氨态氮和可溶性磷以及苏云金素的杀虫活性进行了检测。 展开更多
关键词 苏云金杆菌 苏云金素 家蝇 正交试验
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应用高压液相色谱测定苏云金杆菌发酵液中的苏云金素 被引量:1
8
作者 林开春 杨尔宁 +1 位作者 陈亚华 喻子牛 《生物防治通报》 CSCD 1992年第1期36-40,共5页
通过正交试验将测定苏云金素所用的HPLC流动相确定为:0.075M磷酸二氢钾水溶液,加1%甲醇并用磷酸调pH至2.5。所选定的色谱条件可保证苏云金素的分离度为100%。苏云金素浓度从0.6μg/ml至900μg/ml,其峰面积与素的含量之间呈很好的直线... 通过正交试验将测定苏云金素所用的HPLC流动相确定为:0.075M磷酸二氢钾水溶液,加1%甲醇并用磷酸调pH至2.5。所选定的色谱条件可保证苏云金素的分离度为100%。苏云金素浓度从0.6μg/ml至900μg/ml,其峰面积与素的含量之间呈很好的直线关系。苏云金素的最低检出量为2.25×10^(-3)ng。用发酵样品进行测定,不同浓度素的峰面积对数与生测的试虫死亡机率值之间的相关系数为0.998。以HPLC法和昆虫生测法同时测定结果各重复间的变异系数(C.V.)为0.2~1.5%,测出浓度与实际浓度的平均不符合率为2.4%;昆虫生测法的测定结果各重复间的变异系数为14.6~16.2%,测出浓度与实际浓度的平均不符合率为17.0%。用这两种方法同时测定了3个苏云金素发酵样品中素的浓度,两种方法所得结果的平均符合率为86.84%。 展开更多
关键词 苏云金杆菌 苏云金素 高压液相色谱
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苏云金素对几种农林卫生害虫的杀虫活性 被引量:1
9
作者 林开春 操继跃 《生物防治通报》 CSCD 1994年第1期18-21,共4页
在室内用加毒饲料或沾毒叶片喂饲等感染方法,分别测定了苏云金素对鞘翅目、鳞翅目、双翅目和同翅目等14种农林卫生害虫的毒力。结果表明苏云金素对所试昆虫的幼虫均有一定的毒杀或抑制作用,其LC_(50)值从0.638μg/m... 在室内用加毒饲料或沾毒叶片喂饲等感染方法,分别测定了苏云金素对鞘翅目、鳞翅目、双翅目和同翅目等14种农林卫生害虫的毒力。结果表明苏云金素对所试昆虫的幼虫均有一定的毒杀或抑制作用,其LC_(50)值从0.638μg/ml至603.22μg/ml不等,因试虫种类、虫龄而异。苏云金素对玉米象和前28星瓢虫成虫毒力较低,对玉米象的LC_(50)为410.52μg/ml;以50~450μg/ml浓度感染28星瓢虫成虫,死亡率仅4~32%,其产卵量明显低于对照组,但对卵的孵化率没有影响。 展开更多
关键词 苏云金素 杀虫活性
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苏云金芽胞杆菌产苏云金素菌株CT-43及其缺失突变株的差异蛋白 被引量:2
10
作者 郭承亮 胡振飞 +4 位作者 刘晓艳 余子全 阮丽芳 孙明 喻子牛 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2008年第7期970-974,共5页
【目的】苏云金素(Thuringiensin)的合成和代谢途径的相关研究在国内外一直进展缓慢,本文拟从蛋白质组水平揭示与苏云金素合成或代谢相关的蛋白。【方法】利用双向电泳技术研究了高产苏云金素的苏云金芽胞杆菌野生菌株CT-43、其高产突... 【目的】苏云金素(Thuringiensin)的合成和代谢途径的相关研究在国内外一直进展缓慢,本文拟从蛋白质组水平揭示与苏云金素合成或代谢相关的蛋白。【方法】利用双向电泳技术研究了高产苏云金素的苏云金芽胞杆菌野生菌株CT-43、其高产突变菌株CT-43-1C及不产突变菌株BMB0806在蛋白表达水平的差异,然后对差异蛋白点进行质谱鉴定,最后对鉴定出的蛋白进行生物信息学分析。【结果】与野生型和高产菌株相比,在BMB0806中发现了13个差异显著的蛋白点,鉴定出了其中的9个,生物信息学结果显示有6个蛋白可能与苏云金素合成或代谢相关。【结论】通过蛋白质组研究找到了6个可能与苏云金素合成或代谢相关的蛋白,为苏云金素合成基因簇的克隆和合成途径的验证提供了有力的证据。 展开更多
关键词 苏云金芽胞杆菌 苏云金素 蛋白质组学 差异蛋白
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苏云金素对棉铃虫幼虫生长发育和取食行为的影响研究 被引量:4
11
作者 左广胜 郭玉杰 +1 位作者 王念英 方昌源 《棉花学报》 CSCD 北大核心 1994年第2期126-128,F004,共4页
苏云金素0~1000μg/ml的含毒饲料喂棉铃虫幼虫,处理后第7天,各处理平均体长和体重与对照差异明显,初孵幼虫体长抑制率为83%左右,5日龄幼虫体长和体重抑制率分别为40.15%~61.61%和78.10%~91.... 苏云金素0~1000μg/ml的含毒饲料喂棉铃虫幼虫,处理后第7天,各处理平均体长和体重与对照差异明显,初孵幼虫体长抑制率为83%左右,5日龄幼虫体长和体重抑制率分别为40.15%~61.61%和78.10%~91.43%。随着测试浓度的增加,含毒饲料上取食的棉铃虫幼虫数量的权重逐渐下降。结果表明,低剂量的含毒饲料对棉铃虫幼虫取食无抑制作用,而高剂量的含毒饲料胁迫幼虫转向提供的对照饲料上取食,但这一现象是由饲养器的大小和供试苏云金素剂量的设置共同决定。 展开更多
关键词 苏云金杆菌 棉铃虫 生长发育
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苏云金素对东亚小花蝽捕食作用的影响 被引量:2
12
作者 左广胜 郭玉杰 +1 位作者 王念英 郭予元 《生物防治通报》 CSCD 1994年第3期126-130,共5页
采用二次回归最优设计,研究苏云金素对东亚小花蝽捕食作用的影响,得出日均捕食量(y)与猎物(x1)和捕食者(x2)之间互作关系模型。处理捕食数量回归方程:y=-0.0021x21+1.2112x22+0.8822x1-... 采用二次回归最优设计,研究苏云金素对东亚小花蝽捕食作用的影响,得出日均捕食量(y)与猎物(x1)和捕食者(x2)之间互作关系模型。处理捕食数量回归方程:y=-0.0021x21+1.2112x22+0.8822x1-10.3465x2-0.0649x1x2+1.7174;对照捕食数量回归方程:y=-0.0017x21+0.7734x22+0.6941x1-6.4914x2-0.0474x1x2-0.4636。综合定性分析和定量分析结果,苏云金素处理东亚小花蝽若虫,减弱了其对二斑叶螨卵的捕食能力,但二者的差异不显著。 展开更多
关键词 苏云金素 东亚小花蝽 安全性
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苏云金芽胞杆菌CT-43内生质粒pBMB0558上virD4基因的功能
13
作者 陈慧杰 刘晓艳 +2 位作者 曹诗云 阮丽芳 孙明 《华中农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期404-410,共7页
苏云金芽胞杆菌CT-43高产苏云金素,其内生质粒pBMB0558上virD4基因编码的VirD4蛋白与Ⅳ型分泌系统中结合底物的偶合蛋白(T4CPs)高度同源。本研究利用插入缺失突变方法,构建同源双交换载体,敲除CT-43中的virD4基因,得到1株突变株BMB1122... 苏云金芽胞杆菌CT-43高产苏云金素,其内生质粒pBMB0558上virD4基因编码的VirD4蛋白与Ⅳ型分泌系统中结合底物的偶合蛋白(T4CPs)高度同源。本研究利用插入缺失突变方法,构建同源双交换载体,敲除CT-43中的virD4基因,得到1株突变株BMB1122。HPLC检测结果显示,突变株BMB1122发酵上清液中未检测到苏云金素特征吸收峰;进一步通过LCMS-IT-TOF飞行质谱检测突变株胞内代谢物,结果显示其含有与苏云金素合成途径中的所有前体物分子质量相符的质荷比(m/z),这与出发菌株CT-43的结果一致。初步推测,virD4基因与苏云金素的分泌相关,virD4基因的敲除影响苏云金素的分泌。 展开更多
关键词 Ⅳ型分泌系统 基因敲除 高效液相色谱 苏云金素
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苏云金素合成基因簇中非核糖体肽合成酶基因thu2功能的初步分析
14
作者 罗春平 李俊花 +2 位作者 徐子雅 彭东海 阮丽芳 《氨基酸和生物资源》 CAS 2014年第1期60-65,共6页
对苏云金素生物合成基因簇中编码非核糖体肽合成酶基因thu2进行基因缺失插入失活的研究。用温敏型质粒pHT304-TS构建基因thu2的插入缺失质粒pEMB1434,电转化苏云金芽胞杆菌菌株CT-43后,通过抗性筛选和PCR验证得到thu2基因同源双交换基... 对苏云金素生物合成基因簇中编码非核糖体肽合成酶基因thu2进行基因缺失插入失活的研究。用温敏型质粒pHT304-TS构建基因thu2的插入缺失质粒pEMB1434,电转化苏云金芽胞杆菌菌株CT-43后,通过抗性筛选和PCR验证得到thu2基因同源双交换基因敲除突变株CT-43-22。HPLC(高效液相色谱,High Performance Liquid Chromatography)检测发现CT-43-22没有苏云金素特征吸收峰;用pHT304构建得到含有完整thu2基因的回补质粒pEMB1435,电转化CT-43-22后得到互补重组菌CT-43-22b,发现其恢复了苏云金素的产生。显微镜观察突变株和互补重组菌均能产生正常的晶体和芽胞。thu2的基因敲除和基因互补实验证明,thu2基因为CT-43苏云金素生物合成的必需基因,但对晶体和芽胞的形成没有影响。 展开更多
关键词 苏云金素 非核糖体肽合成酶 基因敲除 温敏型质粒
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苏云金素与苏云金杆菌芽孢晶体混剂对小菜蛾的增效作用 被引量:8
15
作者 林开春 《植物保护学报》 CAS CSCD 北大核心 1995年第1期27-32,共6页
将苏云金素和苏云金杆菌的孢晶制剂分别作为单一制剂,用混和饲料感染法在室内测定苏云金素分别与苏云金杆菌HD—1、CT—43、81—6、WP—2等4个菌株孢晶制剂的混剂对小菜蛾幼虫的协同作用。按Sun—Johnson毒力指数法计算结果表明,苏云金... 将苏云金素和苏云金杆菌的孢晶制剂分别作为单一制剂,用混和饲料感染法在室内测定苏云金素分别与苏云金杆菌HD—1、CT—43、81—6、WP—2等4个菌株孢晶制剂的混剂对小菜蛾幼虫的协同作用。按Sun—Johnson毒力指数法计算结果表明,苏云金素对所有供试菌的孢晶制剂都有增效作用,共毒系数从127.43至415.62不等。当混剂以芽孢晶体为主要活性组分时,苏云金素占全部活性组分的16.7%(w/w)情况下增效作用最强,共毒系数值235.31;当以苏云金素为混剂的主要活性组分时,苏云金素与芽孢晶体之比为100:10(w/w)情况下增效作用最强,共毒系数值可达1021.49。增效作用的大小因试虫感染毒物时间的长短而异。对于同是3龄的小菜蛾幼虫,苏云金素对3龄末期幼虫的增效作用最显著。 展开更多
关键词 苏云金杆菌 苏云金素 增效作用 共毒系数 小菜蛾
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