矮牵牛(Petunia hybrida Vilm)组织培养技术研究

实验以矮牵牛(Petunia hybrida Vilm)的花瓣为培养材料,在MS培养基中附加不同浓度的细胞分裂素(6-BA)和生长素(NAA),进行矮牵牛快速繁殖技术研究。结果表明,MS+6-BA(2.0 mg.L-1)+NAA(0.1mg.L-1)培养基愈伤组织发生的较早,数量多,培养基为最佳分化培养基,不定芽发生早,粗壮,数量多,玻璃化程度很小;诱导不定根时,1/2 MS+NAA(0.5 mg.L-1)培养基诱导生根的时间较早,不定根发生率达100%。

矮牵牛组织培养及变异苗的RAPD分析

探索了矮牵牛组织培养的配方,对组培过程中产生的表型变异植株进行了DNA水平的分析。并对矮牵牛叶片组织培养及产生变异的影响因素等进行探讨。

比久和矮壮素对矮牵牛穴盘苗生长的控制作用

为了防止矮牵牛穴盘育苗徒长，采用不同浓度的比久（B9）和矮壮素（CCC）溶液叶面喷施矮牵牛穴盘苗。结果表明，B9，CCC及二者混合处理矮牵牛穴盘苗的最佳浓度分别为2500 mg/L B9、0.3% CCC、1500 mg/L B9＋0.3% CCC，适宜浓度分别为1000~2500 mg/L B9、0.05%~0.3% CCC、1500 mg/L B9＋0.3% CCC，3种延缓剂最佳浓度相比，效果从好到坏为：1500 mg/L B9＋0.3%CCC ＞0.3%CCC ＞2500 mg/L B9，但2500 mg/L B9成本最低。当CCC处理浓度大于1%时，出现药害现象。

矮牵牛转基因体系的建立及转BIO和bio基因研究初报

BIO ORGANS(BIO)是百脉根中调控器官形态及大小的基因。首先改良了矮牵牛愈伤诱导和再生体系,并进一步利用根癌农杆菌介导法定向将BIO及其突变基因bio导入矮牵牛中进行功能研究。结果证实含0.1mg/L6-BA的MS培养基有利于矮牵牛组培苗的增殖,添加了1.0mg/L 6-BA和0.1mg/L NAA的MS培养基有利于愈伤以及不定芽的诱导。对转基因植株目的基因的PCR检测结果显示,BIO及其突变基因bio被成功转入了矮牵牛中。表型观察结果显示:转BIO及其突变基因bio的植株叶片边缘均呈现不规则形态,部分叶片缺刻,出现由一个叶片向两个叶片分裂的趋势。其中转BIO基因植株部分叶片面积减小,叶片变窄或几乎只剩主叶脉。该研究证实BIO基因对保持叶片器官形态起到关键的作用,从而为进一步探索BIO基因的调控机制提供了实验依据。

矮牵牛茎段植株再生体系的建立

将矮牵牛Petunia hybrida Vilm的茎段接种在MS附加不同激素的培养基上进行愈伤组织诱导．结果表明：在MS＋BA1．0mol·L^-1＋NAA1．0mol·L^-1的培养基上可以形成愈伤组织，而且经过继代培养仍可形成愈伤组织；茎段或愈伤组织接种在MS＋BA1．0mol·L^-1＋NAA0．1mol·L^-1的培养基上可以形成不定芽，且诱导率达100％；健壮的高1．5～2．0cm的不定芽接种在1／2MS＋IBA0．5mol·L＋AC1．0g·L^-1的培养基上，其生长根状况良好，生根率达100％．

不同激素配比对重瓣矮牵牛组织培养的影响

[目的]研究不同激素配比对重瓣矮牵牛组织培养的影响。[方法]以重瓣矮牵牛叶片为外植体,研究不同激素配比对其愈伤组织、不定芽诱导和不定芽生根的影响。[结果]愈伤组织及不定芽的诱导以MS+6-BA 2.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L最佳,不定芽生根以1/2 MS+NAA 0.1 mg/L或1/2MS+IBA 0.1 mg/L最佳,产生的根较粗,数量较多。[结论]该研究结果为重瓣矮牵牛的快速繁殖、种质资源的保存和遗传转化建立了基础。

矮牵牛的组织培养研究

矮牵牛以茎尖、茎段和叶片为外植体 ,以MS为基本培养基 ,添加不同的激素配比 ,在MS +BA 2mg/L +NAA0 .1mg/L上诱导形成的愈伤组织块 ,再移至MS+BA 1mg/L +NAA 0 .1mg/L上分化形成苗 ,如此交替作用 ,可达到最高的繁殖倍数、诱导率和分化率 ,变异苗也最少 ,能取得最佳效果 ;生根适宜的培养基为MS +NAA 0 .5mg/L和MS +NAA 0 .3mg/L +IAA 0 .2mg/L。

重瓣矮牵牛叶片的组织培养

以矮牵牛叶片为外植体进行愈伤组织诱导、丛芽直接诱导的研究,同时也进行了芽苗生根试验。研究结果表明:两类植物生长调节剂细胞分裂素和生长素的不同浓度配比对叶片体外培养特性影响较大,直接诱导成苗以MS+6-BA3.2mg/L+NAA0.1mg/L和MS+6-BA1.6mg/L+NAA0.2mg/L较为适宜,其余处理多形成愈伤组织。添加了不同浓度生长素NAA或IBA的生根培养基均表现出一定的对生根的抑制作用,不添加任何激素的1/2MS固体培养基最为适合矮牵牛的生根。

B_9对矮牵牛穴盘苗生长的影响

采用不同浓度的B9溶液叶面喷施矮牵牛穴盘苗1结果表明,B9能有效地抑制矮牵牛穴盘苗的生长高度,使其株型紧凑、叶色加深、根系发达、叶片厚实,从而提高花卉的质量。处理的最佳浓度为2 500 mg/L,适宜浓度为1 000～2 500 mg/L。

矮牵牛组织培养快速繁殖技术研究

目的为给矮牵牛试管苗工厂化生产提供依据，研究了影响矮牵牛试管苗生长主要因素，包括激素浓度配比、蔗糖和琼脂浓度．方法以无菌种子获得的试管苗为试材，筛选矮牵牛快速繁殖最适培养基．结果IBA浓度为0．3mg／L、6-BA浓度为0．6mg／L时，幼苗生长健壮，长势强，茎干粗壮，叶色绿且叶片厚f蔗糖浓度为20～50g／L时，矮牵牛幼苗生长情况较好；琼脂浓度为6g／L时矮牵牛幼苗生长较快，长势好．结论矮牵牛是一种比较容易进行组织培养的植物，在MS＋IBA0．3mg／L＋6-BA0．6mg／L＋蔗糖20～50g／L＋琼脂6g／L，PH6．5条件下增殖系数可达5．00．

紫色大花矮牵牛组织培养与植株再生

矮牵牛叶片外植体在MS + 6-BA 1.0mg/L + NAA 0.1mg/L培养基上培养3周后产生致密的浅绿色愈伤组织;转入芽分化培养基MS + 6-BA 0.5mg/L + 4-PU 0.5mg/L + NAA 0.1mg/L 1周后,从愈伤组织表面不断分化产生幼芽;待幼芽长至3cm时转接至生根培养基1/2MS + NAA 1.0 mg/L + GA3 0.5mg/L中生根,长成完整植株。

矮牵牛茎尖诱导分化研究

[目的]推动矮牵牛组培的产业化,达到使其苗木生产快速、经济的目的。[方法]共配制5种MS培养基,选择无污染、生长健壮的矮牵牛茎尖作为外植体,进行诱导分化单因素试验,研究不同浓度的NAA对矮牵牛外植体诱导成活率的影响,进而选择适合矮牵牛诱导成活的最佳培养基。[结果]培养基中NAA浓度的差异对外植体成活率的影响较大。NAA浓度为0.5mg/L的培养基为最佳诱导成活培养基,NAA浓度为0.7及0.3mg/L的培养基对矮牵牛的作用仅次于NAA浓度为0.5mg/L的培养基,但NAA浓度为0.1及0.9mg/L的培养基处理效果不是十分理想。筛选出矮牵牛组培最佳诱导分化培养基为MS+NAA0.5mg/L+6-BA0.3mg/L+琼脂8g/L+蔗糖30g/L。[结论]研究结果可为矮牵牛的组织培养提供参考。

应用正交设计进行矮牵牛组培苗生根条件的筛选

采用正交设计方法对矮牵牛组培苗生根的条件进行筛选。试验表明1/2MS+BA 0.1 mg.L-1+IBA 0.8 mg.L-1+NAA 3.0 mg.L-1,蔗糖30 g.L-1的培养基对矮牵牛组培苗生根最有利。

探讨不同浓度的外源激素对矮牵牛组织培养的影响

研究了不同浓度配比的NAA ,6-BA对矮牵牛组织培养过程中愈伤组织增殖、芽分化和生根的影响。结果表明:MS +NAA0 .2mg·L- 1 +BA1.0mg·L- 1 培养基对愈伤组织增殖效果最好;最佳的分化培养基为MS +BA1.0～1.5mg L +NAA0 .3～0 .5mg L ;而生根的培养基可选1 2MS +NAA0 .5～1.0mg L。

矮牵牛梅林愈伤组织诱导与植株再生

为建立矮牵牛梅林的高频再生体系,以叶器官为材料,研究不同生长调节剂配比、叶片不同部位和不同形态愈伤对不定芽再生的影响。结果表明:6BA和NAA及其配比极显著影响矮牵牛梅林不定芽再生率,其中NAA 0.3 mg·L^(-1)极显著促进了矮牵牛梅林不定芽的再生,6BA和NAA浓度超过1.0 mg·L^(-1)和0.5 mg·L^(-1)时,刺激玻璃化的发生。叶片不同部位极显著影响不定芽的再生,芽分化率由高到低依次是叶柄>带主叶脉>不带主叶脉,愈伤组织形态决定芽分化能力和质量,叶柄直接分化丛芽是梅林再生的优良外植体,分化率达98.3%。芽诱导最佳培养基为MS+6BA 1.0 mg·L^(-1)+NAA 0.3 mg·L^(-1),其产生不定芽无玻璃化且分化率高,为68.3%。叶片愈伤组织诱导最佳培养基为MS+6BA 1.0 mg·L^(-1)+NAA 0.3 mg·L^(-1),其不定芽分化率为68.3%且未产生玻璃化苗;最佳生根培养基为1/2 MS培养基,生根率达100.0%;继代增殖培养最佳培养基为MS+6BA 0.5 mg·L^(-1)+NAA 0.1 mg·L^(-1),丛生芽多且大小均匀。

Hg^(2+)对矮牵牛组培苗生长的影响

以矮牵牛组培苗为试验材料,在培养基中添加不同浓度的HgCl2,分析Hg2+对矮牵牛组培苗生长方面的影响。结果表明:低浓度的Hg2+对矮牵牛的生长影响不大,表现为叶片数、株高、鲜重均超过对照,叶绿素也能正常合成,临界浓度为HgCl210μg.mL-1。而当HgCl2浓度超过150μg.mL-1时,植株就会死亡,说明HgCl2对矮牵牛产生毒害的致死浓度为150μg.mL-1。

干旱胁迫下钙离子对矮牵牛种子萌发及幼苗生长的影响

为了了解干旱胁迫下矮牵牛(Petunia hybrida Vilm.)的生长适应能力,试验通过聚乙二醇(PEG-6000)模拟不同程度的干旱条件,研究了干旱胁迫及胁迫后施用CaCl_2对矮牵牛种子萌发和幼苗生长的影响。结果表明:在25℃最适温度下,随着干旱胁迫程度的加剧,矮牵牛种子的发芽率、发芽势、发芽指数及幼苗的胚根长度、胚芽长度、鲜重、干重均呈逐渐下降的趋势。在50%PEG-6000胁迫下,矮牵牛种子及幼苗的以上7项指标最低,其发芽率、发芽势分别为14.67%、2.00%,较对照分别下降了84.50%、95.00%;在50%PEG-6000干旱胁迫下对矮牵牛种子施用CaCl_2,矮牵牛种子的发芽率、发芽势、发芽指数,以及幼苗的胚根长度、胚芽长度、鲜重、干重,随着钙离子浓度的增加均呈先上升后下降的趋势,其中30mmol/L的CaCl_2溶液对其缓解效果最好,其发芽率、发芽势分别为79.33%、31.33%,分别是对照的5.41倍、15.67倍。

矮牵牛杂交一代新品种的组培快繁技术研究

以矮牵牛幼苗的带芽短缩茎、无芽短缩茎、叶片和盆花的花托为外植体,进行其组培快繁研究。结果表明,与无芽短缩茎、嫩叶和花托相比,带芽短缩茎作外植体明显缩短了愈伤组织诱导期和芽苗的诱导分化期,是较理想的外植体;诱导愈伤组织及芽的增殖培养基均以MS+3.0 mg/L BA+0.1 mg/L NAA为佳;生根培养基以1/2MS+0.2 mg/L 2,4-D为好。

微型月季组织培养育苗技术

微型月季常规种苗繁殖方式采用根蘖分株、埋土压条、扦插及嫁接。根蘖分株方式因受生长周期限制,导致苗木长势不齐,且多年连续繁殖还易导致品种退化,苗木质量变差;压条、扦插及嫁接繁殖方式,因其枝条少且短小的品种特性,致使繁殖速度较慢,难以满足市场对优良种苗的需求。植物组织培养具有不受季节影响、生长周期短、繁殖系数高等优点,利用该技术繁育微型月季种苗可在较短时间内获得大量优良种苗。阐述了如何利用组织培养技术繁育微型月季种苗。

Hg^(2+)对矮牵牛组培苗生长影响研究

以矮牵牛组培苗为试验材料,在培养基中添加不同浓度的HgCl2,观察和分析Hg2+对矮牵牛组培苗生长的影响。结果表明,低浓度Hg2+对矮牵牛生长影响不大,表现为叶片数量、株高、鲜质量均超过对照,叶绿素也能正常合成,HgCl2临界浓度为10μg/mL。当HgCl2浓度超过150μg/mL时,植株死亡,说明HgCl2对矮牵牛产生毒害的致死浓度为150μg/mL。