不同干预因素对膝骨关节炎患者滑液中MMP-3和TIMP-1的影响

目的:观察透明质酸钠(hyaluronic acid,HA)、硫酸氨基葡萄糖(glucosamine sulfate,GS)、关节镜下关节清理术(arthroscopic debridment,AD)治疗膝骨关节炎(osteoarthritis,OA)时,对关节液内基质金属蛋白酶-3(matrix metalloproteinase-3,MMP-3)、组织型金属蛋白酶抑制剂-1(tissue inhibitor of metallo-proteinase-1,TIMP-1)水平的影响,并探讨其治疗OA的机制。方法:60例膝OA病人(64关节)分为HA组和GS+HA组,并于HA组和GS+HA组选取部分病例组成HA′组和GS+HA′组,再与AD组比较。于治疗前和治疗后4周、6月抽取关节液样本,采用双抗体夹心ELISA法测定关节液内MMP-3和TIMP-1水平。结果:HA组和GS+HA组治疗4周时关节液中MMP-3水平及MMP-3/TIMP-1比值均较治疗前降低(P<0.01),且在治疗半年后MMP-3水平和MMP-3/TIMP-1比值下降仍有统计学意义(P<0.01)。GS+HA组治疗4周时TIMP-1水平较治疗前显著升高(P<0.01);HA组治疗4周时TIMP-1水平虽较治疗前升高,但无统计学意义(P>0.05)。AD组治疗4周与治疗前比较,关节液中MMP-3水平降低(P<0.01),TIMP-1水平升高(P<0.01),MMP-3/TIMP-1比值降低(P<0.01);且在治疗半年后MMP-3水平、MMP-3/TIMP-1比值下降仍有统计学意义(P<0.01);但治疗6月后与治疗4周比较,TIMP-1水平降低(P<0.01),MMP-3/TIMP-1比值升高(P<0.01)。HA组与GS+HA组比较,GS+HA组治疗4周时TIMP-1升高水平显著高于HA组(P<0.01)。AD组与相应的HA′组、GS+HA′组比较,治疗4周时AD组的TIMP-1升高最明显(P<0.01),其余指标无明显差异。结论:⑴HA,GS和AD治疗均能使膝关节OA患者关节液内的MMP-3水平、MMP-3/TIMP-1比值降低。⑵HA对关节液内的TIMP-1水平无明显影响,但同时应用GS可使关节液内的TIMP-1水平升高。HA和GS可通过不同的机制发挥治疗OA的作用。HA联合GS治疗可能获得更好的疗效。⑶在中、重度膝关节OA患者中,与相应的HA′组、GS+HA′组比较,治疗4周后AD组TIMP-1升高最明显,AD可能获得更好的疗效。⑷对MMP-3和TIMP-1的影响,可能是HA,GS和AD改善OA病情的重要机制。

大鼠免疫性肝纤维化形成中MMP-1和TIMP-1表达的动态变化

目的:研究MMP-1,TIMP-1在肝纤维化发生发展中的作用.方法:SD大鼠48只,体质量120-150g,随机分成正常对照组8只和肝纤维化组40只.肝纤维化动物模型制备按BlackWell方法稍加改进,予HSA致敏大鼠后再予尾静脉攻击注射.在攻击注射0,2,4,6,8wk后取肝.应用肝组织羟脯氨酸(HYP)的测定和HE,嗜银及VG染色监测肝纤维组织增生情况,ELISA方法测定MMP-1,TIMP-1的蛋白表达,半定量RT-PCR方法测定MMP-1,TIMP-1基因表达.结果:HYP随着HSA的不断注射逐渐升高,纤维组织增生逐渐加重,显示HSA所致的免疫性肝纤维化逐步形成.正常肝组织有MMP-1蛋白表达,在肝纤维化发展过程中以及肝硬化阶段,其蛋白表达没有显著性变化(P>0.05);而TIMP-1蛋白表达水平逐渐增加(4wk后,与0wk比较有统计学差别:P<0.01),到肝硬化阶段达到高峰(8wk时接近0wk的4倍).在肝纤维化形成的进展中,MMP-1mRNA表达无明显变化(P>0.05),而TIMP-1mRNA表达随着时间的推移而逐渐增高(4wk后与0wk比较,P<0.01).在肝纤维化发生发展中,MMP-1/TIMP-1蛋白表达比值逐渐降低,尤其是4wk以后,分别与0wk比较有显著差异(P<0.01).按肝纤维化增生程度分组,随着肝纤维化程度的加重,TIMP-1的表达逐渐升高,MMP-1/TIMP-1比值逐渐减小.结论:在大鼠免疫性肝纤维化进程中,TIMP-1进行性升高,使MMP-1活性受到抑制.MMP-1及TIMP-1比例逐渐失调并持续存在,加速了肝纤维化的进程.

BMSCs条件培养液对博来霉素诱导的肺纤维化大鼠肺组织MMP-9/TIMP-1的影响

目的观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)条件培养液对大鼠肺纤维化的影响。方法 50只SD大鼠随机分为健康对照组、模型组、治疗组(A、B和C)。模型组和各治疗组经气管内注入博莱霉素(5 mg/kg),对照组注入生理盐水。次日,模型组经尾静脉注入DMEM/F-12浓缩培养基,各治疗组经尾静脉分别注入不同数量BMSCs条件培养液。20 d后取肺组织进行苏木精-伊红(H-E)及Masson染色;测肺组织羟脯氨酸(HYP)含量,MMP-9 mRNA、TIMP-1 mRNA表达变化以及肺组织匀浆中MMP-9、TIMP-1蛋白含量。结果与模型组相比,各治疗组肺泡炎症反应程度、肺纤维化程度及HYP含量均有所减轻。治疗组肺组织MMP-9 mRNA含量、肺组织匀浆中MMP-9蛋白含量与MMP-9/TIMP-1蛋白含量比值均较模型组、对照组升高。结论 BMSCs条件培养液可通过促进MMP-9及MMP-9/TIMP-1的升高减轻博来霉素诱导的肺泡炎和肺纤维化。

外源性H_2S对糖尿病大鼠心肌纤维化及MMP-13、MMP-14和TIMP-1表达的影响

目的:探讨外源性H2S对糖尿病大鼠心肌纤维化及基质金属蛋白酶-13(matrix metalloproteinase-13,MMP-13)、MMP-14和金属蛋白酶组织抑制因子-1(tissue inhibitor of metallo proteinase-1,TIMP-1)表达的影响。方法:52只SD雄性大鼠随机分成4组(每组13只):正常对照组、糖尿病大鼠组(STZ组)、硫化氢干预糖尿病大鼠组(STZ+H2S组)、硫化氢干预正常大鼠组(H2S组)。腹腔注射链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)(40 mg/kg)建立糖尿病模型;正常对照组每天腹腔注射等剂量生理盐水;STZ组与H2S组每天腹腔注射硫氢化钠(H2S供体)溶液(100μmol/kg)。HE和VG染色观察心肌纤维化,Western blot检测Ⅲ型胶原蛋白以及MMP-13、MMP-14和TIMP-1的表达。结果:排除死亡后每组成功建模量分别为12、9、9、10只;与正常对照组相比,STZ组心肌细胞排列紊乱,细胞间胶原纤维堆积明显增加,Ⅲ型胶原蛋白表达明显上调(P<0.01),而MMP-13、MMP-14和TIMP-1蛋白表达也增加(P<0.01);与STZ组相比,STZ+H2S组大鼠心肌细胞排列紊乱有所改善,细胞间胶原纤维堆积减少,Ⅲ型胶原蛋白表达下调(P<0.01),MMP-13、MMP-14和TIMP-1蛋白的表达也明显减少(P<0.01)。结论:H2S可改善糖尿病大鼠心肌纤维化,其机制可能与下调MMP-13、MMP-14和TIMP-1蛋白的表达有关。

湿热型慢性乙型肝炎患者血清TGF-β_1及TIMP-1水平的研究

目的:探讨湿热型慢性乙型肝炎(CHB)患者血清TGF-β1、TIMP-1的水平。方法:选择HBeAg阳性CHB患者63例进行观察,其中,湿热型27例,非湿热型36例。同时,选择健康人16例为对照组。血清TGF-β1检测采用ELISA法、血清TIMP-1检测采用单克隆抗体透射比浊法。结果:63例CHB患者血清TGF-β1、TIMP-1水平分别为(98.22±23.52)μg/L、(122.67±26.06)μg/L,与对照组比较差异均有非常显著性意义(P<0.01)。湿热型CHB患者血清TGF-β1水平及TIMP-1水平均明显升高,与非湿热型患者相比差异有非常显著性意义(P<0.01)。结论:湿热型CHB患者血清TGF-β1、TIMP-1水平明显升高,预示肝纤维化进程已经启动,中医论治肝纤维化不可忽视湿热为患的影响。

干扰素和利巴韦林联合用药对慢性丙型肝炎患者肝组织中α-SMA、TIMP-1的影响

目的:探讨干扰素α-2b联合利巴韦林治疗慢性丙型肝炎,不同治疗效果组其肝组织中α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)的变化。方法:23例慢性丙型肝炎患者采用干扰素α-2b联合利巴韦林片治疗48周,据治疗结束和随访24周病毒学的结果分为持续病毒学应答(SVR)组和非SVR组。应用两步法对治疗前后肝组织中α-SMA及TIMP-1进行免疫组化染色,对其结果采用BI-2000免疫组化图像分析系统进行定量分析。结果:在SVR组,治疗后肝组织中的α-SMA及TIMP-1较治疗前明显下降(P<0.05);而在非SVR组,治疗后α-SMA及TIMP-1均较治疗前下降,但其差异无统计学意义(P均>0.05)。在SVR组和非SVR组之间,α-SMA及TIMP-1表达的下降具有统计学意义(P<0.05)。结论:干扰素α-2b联合利巴韦林治疗慢性丙型肝炎,可以通过降低α-SMA及TIMP-1的表达而具有抗纤维化的作用。获得SVR者其肝纤维化得到明显改善。

愈肾颗粒小复方对大鼠肾小球系膜细胞MMP-3/TIMP-1 mRNA表达的影响

目的:从基因水平探讨愈肾颗粒不同小复方对肾小球系膜细胞基质金属蛋白酶-3(MMP-3)及基质金属蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)mRNA表达的影响,对具有延缓和防治肾小球硬化进程的有效药味探讨其作用机制。方法:将愈肾颗粒折方,并重组为益气活血通络(复方1号)、益气解毒活血(复方2号)、益气活血止血(复方3号)不同小复方。应用血清药理学方法,制取3组中药小复方及正常组的药理血清。采用体外培养法培养大鼠肾小球系膜细胞;应用ELISA法测定10%FBS组及血管紧张素Ⅱ组纤维连接蛋白(FN)、Ⅳ型胶原的含量;采用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)观察各组间MMP-3及TIMP-1的mRNA的表达情况。结果:(1)血管紧张素Ⅱ组FN及Ⅳ型胶原的分泌量显著增加,同时与10%FBS组相比差异有统计学意义(P<0.05)。(2)复方1号组对MMP-3有显著的促进作用,与病理组比较差异有统计学意义(P<0.05)。其余各组虽有促进MMP-3分泌的趋势,但差异无统计学意义。(3)3组小复方对TIMP-1的影响差异无统计学意义。结论:(1)复方1号组有显著的促进MMP-3基因表达的作用。(2)复方1号组通过促进MMP-3的基因表达,从而发挥延缓和防治肾小球硬化的作用。(3)复方2号组与复方3号组对MMP-3的基因表达有促进趋势。

依那普利对肝纤维化大鼠门静脉血流动力学及基质金属蛋白酶1组织抑制剂表达的影响

目的 探讨血管紧张素转换酶抑制剂（ACEI）依那普利对肝纤维化大鼠门静脉血流动力学和基质金属蛋白酶1组织抑制剂（TIMP-1）表达的影响. 方法 30只大鼠完全随机分为正常对照组、模型组、治疗组,每组10只.模型组和治疗组通过四氯化碳（CCl4）损伤制备肝纤维化门静脉高压模型,治疗组在造模的同时用依那普利灌胃.3组大鼠均测量门静脉压（PVP）、平均动脉压（MAP）、门静脉血流速度（BFR）;进行肝纤维化分级和胶原沉积半定量检测;检测TIMP-1的蛋白及mRNA表达并进行半定量分析. 结果 模型组的PVP高于正常对照组和治疗组,治疗组亦高于正常对照组均（P＜0.05）;模型组和治疗组的MAP均低于正常对照组（均P＜0.05）;模型组的BFR明显低于正常对照组和治疗组（均P＜0.05）.模型组肝纤维化V级的大鼠明显多于治疗组（P＜0.05）,模型组和治疗组肝细胞变性/坏死（＋）及（＋＋）的大鼠明显多于正常对照组（P＜0.01）,模型组和治疗组炎性细胞浸润（＋）及（＋＋）的大鼠明显多于正常对照组（P＜0.01或P＜0.05）.治疗组和模型组的胶原沉积面积[（6.393±2.113）×10-2、（10.030±3.565）×10-2]均明显大于正常对照组[（1.538±0.458）×10-2,均P＜0.01],但治疗组明显小于模型组（P＜0.01）.治疗组与模型组比较TIMP-1的蛋白表达有明显下降,TIMP-1 mRNA的表达亦有明显下降,但模型组和治疗组两指标明显高于正常对照组（均P＜0.05）. 结论 依那普利可以有效地改善肝纤维化大鼠的门静脉血流动力学;亦可有效地下调CCl4引起的肝纤维化大鼠TIMP-1的蛋白和mRNA表达,进而抑制大鼠肝纤维化的发展.

心肝宝对在糖尿病大鼠肾脏MCP-1、TIMP-1表达的影响

目的研究糖尿病大鼠中MCP-1、TIMP-1等细胞因子的表达以及心肝宝对糖尿病大鼠肾脏MCP-1、TIMP-1表达的影响。方法选取雄性Wistar大鼠36只,行右肾切除术后两周,随机分成正常对照组(A组),糖尿病大鼠对照组(B组)和糖尿病大鼠治疗组(C组)。采用HE、PAS染色,行肾脏组织形态学分析,用Real time FQ-PCR检测MCP-1、TIMP-1等细胞因子的mRNA表达情况。结果糖尿病组大鼠肾脏MCP-1、TIMP-1的mRNA表达均明显升高。治疗组大鼠肾脏MCP-1、TIMP-1的mRNA表达均有不同程度下调。结论DN大鼠肾脏MCP-1、TIMP-1炎症相关的细胞因子表达水平显著升高DN大鼠肾脏肥大、系膜ECM沉积以及UAER增加均与肾脏MCP-1、TIMP-1细胞因子的高表达有关。提示炎症参与了DN肾脏病理改变和肾功能损害的发生和发展。心肝宝可下调肾脏MCP-1、TIMP-1等细胞因子mRNA的表达,从而减少ECM沉积、抑制肾脏肥大、降低尿蛋白,防止DN的发生发展。心肝宝可通过非特异性抗炎作用对DN产生保护作用。另外,心肝宝对DN脂代谢紊乱有显著调节作用。并且心肝宝对肾脏TIMP-1表达的抑制作用较强。

结膜瓣覆盖治疗角膜碱烧伤中MMP-9和TIMP-1的表达

目的:研究结膜瓣覆盖术治疗兔角膜碱烧伤中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及组织型基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)的表达机制。方法:将50只兔随机分成实验组及对照组,每组分别25只,建立兔角膜烧伤模型。实验组在角膜烧伤后当天行结膜瓣覆盖术。采用免疫组化法测定两组角膜碱烧伤后不同时间点MMP-9和TIMP-1的表达。结果:MMP-9在角膜碱烧伤后的3d开始升高,14d达到最高,之后逐渐下降;而TIMP-1在伤后即有表达,7d有所下降,于14d达到最低,21d达到峰值。实验组MMP-9的表达均明显低于对照组,且角膜碱烧伤后的3,14,21d和28d差异有统计学意义(P<0.05);而TIMP-1则明显高于对照组,且角膜碱烧伤后3,14d和21d差异有统计学意义(P<0.05)。结论:角膜碱烧伤的病理损伤及修复过程中,MMP-9及TIMP-1的表达密切相关。结膜瓣覆盖治疗重度角膜碱烧伤的疗效确切。

肝纤维化大鼠血清及肝组织基质金属蛋白酶-1及其抑制因子表达的变化

目的检测肝纤维化大鼠血清及肝组织中基质金属蛋白酶-1(MMP-1)和基质金属蛋白酶组织抑制因子-1(TIMP-1)表达,探讨MMP-1和TIMP-1在肝纤维化中的作用。方法 20只雄性SD大鼠随机均分正常组及模型组,每组各10只,其中模型组以四氯化碳腹腔注射方法制作大鼠肝纤维化模型,12周后同时处死大鼠,用酶联免疫吸附测定法、免疫组化染色检测血清MMP-1及TIMP-1含量及肝组织MMP-1及TIMP-1表达的变化,两组间数据采用统计软件SPSS 12.0进行分析。结果①与正常组(553.81±98.89)μg/L比较,模型组血清MMP-1含量较正常组明显下降(t=13.38,P<0.01);模型组TIMP-1含量较正常组(10.17±1.35)μg/L升高,差异均有高度统计学意义(t=31.92,P<0.01)。②模型组肝组织MMP-1免疫组化图像分析面积百分比为(5.60±1.51)%,较正常组(19.20±1.48)%明显下降(t=14.37,P<0.01);模型组TIMP-1免疫组化图像分析面积百分比较正常组明显升高,差异均有高度统计学意义(t=38.96,P<0.01)。结论模型组血清及肝组织MMP-1子IMP-1下降下表达减少,而TIMP-1表达增加,TIMP-1表达增加可能在肝脏纤维化过程发挥重要作用。

基质金属蛋白酶纤溶系统在大鼠酒精性肝纤维化形成中的作用

目的:通过动态观察基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)和其抑制物1型金属蛋白酶组织抑制剂(type-1 tissue inhibitor of metalloproteinases,TIMP-1)大鼠酒精性肝纤维化(alcohol liver fibrosis,ALF)形成中的变化,探讨在ALF形成中MMPs纤溶途径的作用.方法:♂SD大鼠随机分为空白组、四氯化碳(CCl4)组和造模组.造模组采用56度二锅头酒、玉米油、吡唑混合物灌胃联合腹腔注射CCl4橄榄油溶液(CCl4∶橄榄油=1∶3)的方法造模型.分别于第4、8、10、12周处死大鼠,观察大鼠肝功能变化,肝组织病理学改变.采用蛋白印迹法、荧光定量PCR法检测MMP2、MMP9和TIMP-1蛋白和mRNA表达的动态变化.结果:与同期空白组大鼠相比,CCl4组大鼠体质量、肝质量、肝体比及肝功能均无明显变化(P>0.05),而模型组大鼠体质量明显降低;肝质量、肝体比明显增加,转氨酶显著升高,肝纤维化程度明显加重,空白组和CCl4组大鼠肝组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1蛋白及mRNA表达之间无显著性差异,而模型组大鼠肝组织MMP-2、MMP-9、TIMP-1蛋白及mRNA表达显著高于空白组(P<0.01)随着肝纤维化的形成,MMP-2、MMP-9和TIMP-1的表达均逐渐增强,TIMP-1的表达明显强于相应的MMP-2或MMP-9.结论:TIMP-1过多增长,MMP-2及MMP-9的生成相对不足,促进了ALF的形成.抑制TIMP-1的过度表达,或者增加MMP-2及MMP-9的表达可能是治疗ALF的重要途径之一.

急性冠状动脉综合征患者颈动脉斑块与血浆基质金属蛋白酶的相关性

目的研究急性冠状动脉综合征患者颈动脉斑块与血浆基质金属蛋白酶的相关性。方法采用高分辨率超声,测定30例急性冠状动脉综合征患者、29例稳定型心绞痛患者和17例正常对照者的颈动脉内膜中膜厚度及斑块积分,同时采用夹心酶联免疫分析法测定血浆基质金属蛋白酶9和组织型金属蛋白酶抑制因子1的变化。结果三组间的年龄、性别、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇无显著性差异。急性冠状动脉综合征组血浆基质金属蛋白酶9、组织型金属蛋白酶抑制剂1、基质金属蛋白酶9/组织型金属蛋白酶抑制剂1及颈动脉内膜中膜厚度、总斑块积分、软斑块积分和硬斑块积分显著高于稳定型心绞痛组和正常对照组。基质金属蛋白酶9与颈动脉内膜中膜厚度、总斑块积分、软斑块积分呈正相关(r=0.468,P<0.01;r=0.592,P<0.01;r=0.677,P<0.01);组织型金属蛋白酶抑制剂1与颈动脉内膜中膜厚度、总斑块积分、软斑块积分、硬斑块积分呈正相关(r=0.449,P<0.01;r=0.493,P<0.01;r=0.435,P<0.01;r=0.227,P<0.05);基质金属蛋白酶9/组织型金属蛋白酶抑制剂1与颈动脉内膜中膜厚度、总斑块积分、软斑块积分呈正相关(r=0.253,P<0.05;r=0.431,P<0.01;r=0.547,P<0.01)。去除年龄因素后,偏相关分析显示颈动脉内膜中膜厚度与基质金属蛋白酶9(r=0.461,P<0.001)、组织型金属蛋白酶抑制剂1(r=0.441,P<0.001)、基质金属蛋白酶9/组织型金属蛋白酶抑制剂1(r=0.241,P<0.01)呈正相关关系。结论急性冠状动脉综合征患者血浆基质金属蛋白酶9、组织型金属蛋白酶抑制剂1、基质金属蛋白酶9/组织型金属蛋白酶抑制剂1及颈动脉内膜中膜厚度、总斑块积分、软斑块积分和硬斑块积分显著高于稳定型心绞痛患者和正常对照。血浆基质金属蛋白酶9、组织型金属蛋白酶抑制剂1、基质金属蛋白酶9/组织型金属蛋白酶抑制剂1与颈动脉内膜中膜厚度、总斑块积分、软斑块积分呈正相关关系。

甲基泼尼松龙对急性肺损伤大鼠肺组织氧化应激和金属蛋白酶的调节作用

目的探讨糖皮质激素对急性肺损伤治疗的作用途径和机制。方法雄性SD大鼠42只随机分为3组:空白对照组(n=6)、油酸造模组(n=18)、甲基泼尼松龙组(n=18)。用油酸制备大鼠急性肺损伤模型,并对急性肺损伤大鼠进行糖皮质激素干预实验,以大体标本病理改变、肺湿/干重比(W/D)、光镜下半定量肺损伤评分(IQA)、动脉血氧分压(PaO_2)、血浆及肺组织MDA和SOD为观察检测指标,同时检测其他相关生化指标(如血浆及肺组织TIMP-1和MMP-9),以便对糖皮质激素治疗的过程进行客观评估,进一步探讨糖皮质激素的作用途径和机制,为探讨ALI的药物干预研究提供实验依据。结果 (1)动脉血氧分压(PaO_2):2、6、18h 3个观察点的PaO_2逐渐升高,且差异有统计学意义;(2)肺湿/干重比(W/D):2、6、18h 3个观察点的W/D逐渐降低,且差异有统计学意义;(3)肺损伤评分(IQA):与6h观察点比较,18h观察点的IQA有降低(P> 0. 05),但差异无统计学意义;(4)血浆和肺组织SOD含量变化:2、6、18h 3个观察点的血浆SOD值逐渐升高,且差异有统计学意义; 6、18h的肺组织SOD值均高于2h的观测值,但18h和6h相比没有明显变化;(5)肺组织MDA含量变化:2、6、18h 3个观察点的肺组织MDA逐渐降低,18h和2h相比较降低明显,差异有统计学意义;(6)肺组织MMP-9含量变化:2、6、18h 3个时间点的肺组织MMP-9值随时间有逐渐降低趋势,但无统计学意义。结论甲基泼尼松龙干预治疗对急性肺损伤模型大鼠有明显的疗效,其可能部分通过对急性肺损伤大鼠血浆和肺组织SOD、MDA、MMP-9和TIMP-1的调节,来改善动脉血PaO_2、W/D、IQA,而发挥抗炎、抗渗出作用,从而为临床防治急性肺损伤提供可能的途径和思路。随着治疗时间进程糖皮质激素起到积极的干预作用。甲基泼尼松龙通过调节血浆和肺组织SOD、MDA及MMP-9、TIMP-1活性或含量改善急性肺损伤大鼠肺部病理损伤这一过程也存在着随时间变化而发生积极的改变。

OSAHS、OSAHAHT患者血清基质金属蛋白酶9及其抑制因子水平

目的探讨阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征(obstructivesleepapnea-hypopneasyndrome,OSAHS)、阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征相关性高血压(obstructivesleepapnea-hypopneaassociatedhypertension,OSAHAHT)患者血清基质金属蛋白酶9(MMP-9)及其抑制剂-基质金属蛋白酶组织抑制因子1(TIMP-1)水平的变化。方法用酶联免疫吸附法对20例OSAHS、OSAHAHT患者血清MMP-9和TIMP-1水平测定,与16例健康对照组进行比较。结果OSAHS、OSAHAHT患者血清MMP-9水平较正常对照组明显升高,有显著统计学意义,TIMP-1在OSAHS与对照组无明显差异,在OSAHAHT与对照组有明显差异,OSAHS、OSAHAHT患者血清MMP-9与反映睡眠呼吸暂停严重程度的指标有明显相关性。结论OSAHS、OSAHAHT患者存在MMP-9及TIMP-1代谢的异常,血清MMP-9可反映睡眠呼吸暂停病情的严重程度。

慢性阻塞性肺疾病中MMP-9/TIMP-1与Th17/Treg作用与联系

目的检测慢性阻塞性肺疾病(COPD)外周血中Th17、Treg细胞占CD4+T细胞的比例、Th17/Treg比值和血浆中MMP-9、TIMP-1含量、MMP-9/TIMP-1比值,探讨其在发病中的作用和机制。方法COPD急性加重组患者30例,COPD缓解组25例患者健康吸烟组20例患者,健康非吸烟组20例患者;采用流式细胞分析技术检测Th17、Treg细胞占CD4+T细胞的比例,ELISA法检测血浆中MMP-9、TIMP-1含量。结果外周血Th17占CD4+T细胞的比例在:COPD急性期组高于缓解组、健康非吸烟组、健康吸烟组,差异有统计学意义(P<0.05),COPD缓解期组与健康吸烟组相比差异无统计学意义(P>0.05),与健康非吸烟组相比差异有统计学意义(P<0.05)。外周血Treg占CD4+T细胞比例在:各组间比较,差异无统计学意义(F=1.971,P>0.05);Th17/Treg比值的:COPD急性期组分别与COPD缓解期组、健康吸烟组、健康非吸烟组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),COPD缓解期组与健康吸烟和健康非吸烟组比较,差异无统计学意义(P>0.05);血浆中MMP-9含量的在:COPD急性期组与COPD缓解期组、健康吸烟组、健康非吸烟组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),COPD缓解期组与健康吸烟组、健康非吸烟组比较,差异有统计学意义(P<0.05),血浆中MMP-9/TIMP-1比值:COPD急性加重期组与其他三组相比均有统计学意义(P<0.05),COPD缓解期组与健康组相比,均有统计学意义(P<0.05)。结论 Th17、Treg细胞、MMP-9、TIMP-1可能均参与了COPD的发生和发展。Th17、MMP-9增高可能促发COPD的发生和急性加重,并且两者存在一定相关性,并相互影响,加重COPD的自体免疫反应。

TGF-β1对子宫内膜基质细胞的增殖和活性的影响

目的观察和分析TGF-β1对子宫内膜基质细胞(endometrial stromal cells,ESCs)增殖和活性的影响。方法体外分离、培养和鉴定ESCs。实验分组:对照组和TGF-β1组,对照组:加入不含血清的培养液;转化生长因子-β1(TGF-β1)组:不含血清的培养液+不同浓度的TGF-β1,通过噻唑蓝法检测各组细胞的增殖率;用ELISA法检测各组细胞培养液中Ⅰ型胶原(Collagen typeⅠ,ColⅠ)和纤黏连蛋白(Fibronectin,FN)的含量。免疫印迹法检测各组细胞胞质中的MMP-9及TIMP-1的表达水平。结果 TGF-β1可以促进ESCs增殖,并呈剂量依赖性;使细胞分泌ColⅠ(0.736 6±0.042 4)和FN(0.713 1±0.046 8)的量增多,细胞内MMP-9含量减低,而TIMP-1含量升高;与对照组比较,其差异有统计学意义(P<0.05)。结论 TGF-β1能使子宫内膜基质细胞增殖,并使其活性增加。

兔耳病理性瘢痕皮回植术后组织中基质金属蛋白酶－1及金属蛋白酶组织抑制剂－1表达的变化

目的通过建立兔耳模型观察基质金属蛋白酶－1（matrixmetalloproteinase－1，MMP－1）及金属蛋白酶组织抑制剂－1（tissueinh｜bitorofmetalloproteinase1，TIMP1）在病理性瘢痕皮回植术后组织中表达的变化，探讨瘢痕皮回植治疗病理性瘢痕的机制。方法建立兔耳病理性瘢痕模型。共分为3组：正常皮肤组（对照组，A组）、病理性瘢痕组（B组）及瘢痕皮回植组（c组）。切取标本行HE染色和Masson特殊组织化学染色及免疫组织化学染色，观察各组标本MMP－1、TIMP－1的表达情况。结果病理性瘢痕经瘢痕皮回植术后，MMP－1及TIMP－l均较A组明显升高（P〈O．01）．MMP一1的表达较TIMP一1明显增强（P〈O．01）。结论瘢痕皮回植术治疗瘢痕的机制与瘢痕组织内MMP一1和TIMP一1相互作用的失衡有关。

补脏通络方含药血清对高糖环境下人脐静脉内皮细胞NO、eNOS及MMP9/TIMP1表达的影响

目的旨在观察补脏通络方含药血清对高糖环境下人脐静脉内皮细胞(HUVEC)NO、eNOS及MMP9/TIMP1表达的影响,探讨补脏通络方保护糖尿病大血管内皮的可能机制。方法采用血清药理学方法提取补脏通络方含药血清。体外培养HUVEC,细胞分正常组、高糖组、补脏通络方低剂量含药血清干预组(BZTL-L)、补脏通络方中剂量含药血清干预组(BZTL-M),补脏通络方高剂量含药血清干预组(BZTL-H)进行干预实验。硝酸还原酶法检测细胞上清液NO水平,Western Blot分析细胞eNOS、MMP9、TIMP1蛋白含量。结果高糖组较正常组,NO水平和eNOS、TIMP-1表达均降低(P<0.01),MMP-9表达和MMP-9/TIMP-1比值均升高(P<0.01);各中药干预组较高糖组,NO水平和eNOS、TIMP-1表达均升高(P<0.01),MMP-9表达和MMP-9/TIMP-1比值均下降(P<0.01),且MMP-9/TIMP-1比值下降呈剂量依赖性。结论改善内皮细胞NO分泌,调节内皮细胞MMP-9/TIMP-1平衡以稳定血管基质的正常代谢,可能是补脏通络方保护糖尿病大血管内皮的具体机制之一。

中西医结合疗法对儿童哮喘发作期患者血清MMP-9和TIMP-1水平的影响

目的：观察中西医结合治疗儿童发作期哮喘肺实肾虚证的临床疗效以及其对血清基质金属蛋白酶-9（matrix metalloproteinases-9,MMP-9）和基质金属蛋白酶组织抑制剂-1（tissue inhibitors of matrix metalloproteinases-1,TIMP-1）水平的影响。方法：88例儿童发作期哮喘肺实肾虚证患儿随机分为观察组和对照组,每组各44例。对照组给予氨茶碱片口服,每次按体质量（3~5）mg·kg-1,3次·d-1;沙美特罗替卡松粉吸入剂,每次1吸,2次·d-1。治疗组在对照组基础上给予射干麻黄汤合都气丸加减治疗,1剂·d-1,常规煎煮2次内服;两组患者均连续治疗2周。比较两组中医临床症状积分以及喘息、咳嗽、呼吸困难和肺部哮鸣音消失时间以及住院所需时间;检测两组血清MMP-9和TIMP-1水平。结果：观察组治疗后中医临床症状各指标积分均明显低于对照组（P〈0.01）;观察组显效率为97.73%,对照组为81.82%,观察组显著高于对照组（χ2=4.456,P〈0.05）;观察组治疗后患者在喘息、咳嗽、呼吸困难、肺部哮鸣音消失时间以及住院时间均显著短于对照组（P〈0.05）;治疗后,观察组MMP-9和TIMP-1水平均低于对照组（P〈0.01）。结论：射干麻黄汤合都气丸加减联合氨茶碱片治疗儿童发作期哮喘肺实肾虚证临床疗效显著,可显著降低患者中医临床症状积分,减少临床缓解时间和住院时间,降低患者血清MMP-9和TIMP-1水平。