miR-221和TIMP2在早发型重度子痫前期合并胎儿生长受限患者血清和胎盘中的表达

目的:探讨微小RNA-221(miR-221)、基质金属蛋白酶抑制因子2(TIMP-2)在早发型重度子痫前期(EOSP)合并胎儿生长受限(FGR)患者血清和胎盘中的表达及临床意义。方法:选择2018年9月-2020年10月在本院就诊的EOSP患者256例,根据FGR将患者分为非FGR组139例和FGR组117例。酶联免疫吸附法检测两组血清TIMP-2水平,qRT-PCR检测血清与胎盘组织中miR-221表达,免疫组化法检测胎盘组织TIMP-2蛋白表达,Pearson法分析血清miR-221、TIMP-2表达水平与新生儿体重相关性,ROC曲线分析miR-221、TIMP-2对EOSP患者发生FGR的预测价值。结果:与非FGR组比较,FGR组血清与胎盘组织中miR-221(1.65±0.23、2.32±0.21)、血清TIMP-2(38.52±8.36 ng/ml)升高,胎盘组织TIMP-2蛋白阳性表达率(82.1%)升高(P<0.05);相关性分析显示,miR-221、TIMP-2表达水平均与新生儿体重呈负相关性(P<0.05);血清miR-221、TIMP-2联合预测EOSP患者发生FGR曲线下面积为0.921,敏感度88.9%,特异度84.2%。结论:EOSP合并FGR患者血清和胎盘中miR-221、TIMP-2高表达,且与胎儿生长受限有关,血清miR-221、TIMP-2有望成为评估EOSP发生FGR的分子标志物。

原发性青光眼合并2型糖尿病患者血液及房水中MMP-2及TIMP-2的表达研究

目的观察和分析原发性青光眼合并2型糖尿病(T2DM)患者血液及房水中基质金属蛋白酶2(MMP-2)及金属蛋白酶2组织抑制因子(TIMP-2)的表达变化。方法选取60例原发性青光眼患者,根据将合并T2DM情况将其分为A组(单纯POAG病例,15例23只眼)、B组(单纯PACG病例,15例26只眼)、C组(POAG合并T2DM病例,15例25只眼)、D组(PACG合并T2DM病例,15例23只眼),选取糖尿病性白内障病例(20例33只眼)作为E组,选取年龄相关性白内障病例(20例32只眼)作为F组。对6组患者房水及血清MMP-2、TIMP-2水平及比值进行观察和比较。结果 B组和D组患者的房水MMP-2、TIMP-2水平均高于其它各组,A组和C组患者的房水TIMP-2水平高于E组或F组,A组、B组、C组、D组患者的房水TIMP-2/MMP-2比值均显著高于E组或F组,差异均有统计学意义(P<0.05);A组患者的血清MMP-2、TIMP-2水平均高于其它各组,差异均有统计学意义(P<0.05),而6组患者血清TIMP-2/MMP-2比值的差异无统计学意义(F=1.634,P>0.05)。结论原发性青光眼患者血液和房水中存在着显著的MMP-2/TIMP-2系统失衡,但合并T2DM并不能加剧这一失衡状态,不具有促进青光眼进展的作用。

食管鳞状细胞癌中VEGF与TIMP-2、MVD、树突状细胞的关系及对浸润转移的影响

目的探讨与VEGF相关的TIMP2表达、血管形成、肿瘤免疫异常对食管鳞癌浸润转移的影响。方法运用原位杂交和免疫组织化学方法检测46例食管鳞癌组织中VEGF蛋白和mRNA的表达、TIMP2的表达、CD34标记的微血管密度、S100标记的肿瘤浸润性树突状细胞的密度。结果食管鳞癌组织中VEGF蛋白阳性表达率为58.7%(27/46),其阳性表达与浸润深度、转移状态有关;TIMP2表达与分化、浸润深度有关,VEGF与TIMP2之间没有相关关系;VEGF表达阳性组MVD(50.71±12.16/单位面积)显著高于阴性组(31.74±17.93/单位面积);食管鳞癌中S100+树突状细胞平均密度与分化程度、浸润深度的有关,VEGF表达与树突状细胞密度之间存在显著的负相关性(r=-0.462)。结论VEGF蛋白表达具有促进食管鳞癌浸润转移的作用,免疫组化方法较原位杂交更适合临床作为判断食管鳞癌浸润转移潜能的手段;TIMP2可抑制食管鳞癌的浸润,其表达与VEGF表达之间无相关关系;MVD值可作为判断食管鳞癌浸润、转移及预后的参考指标;VEGF影响鳞癌组织中树突状细胞的密度,进而可能影响宿主的抗肿瘤免疫能力和肿瘤的浸润转移过程。

胎膜早破孕妇胎膜组织中基质金属蛋白酶9与金属蛋白酶组织抑制剂2和核因子κB的表达与意义

目的 探讨胎膜早破患者胎盘胎膜组织中基质金属蛋白酶9（MMP-9）、金属蛋白酶组织抑制剂2（TIMP-2）和核因子κB（NF-κB）表达变化及意义.方法 采用免疫组织化学法,实时定量聚合酶链反应法和免疫印迹法分别检测胎膜早破剖宫产病例45例（胎膜早破组）、正常妊娠择期剖宫产52例（未临产组）、足月自然临产组56例（临产组）孕妇分娩后胎膜组织中MMP-9、TIMP-2和NF-κB的表达水平.结果 实时定量PCR在未临产组,临产组和胎膜早破组中,MMP-9的相对表达量分别是（3.0±1.2）、（10.4±3.1）、（22.1±3.5）,TIMP-2的相对表达量分别是（7.1±2.7）、（4.6±2.0）、（3.6±1.8）,NF-κBP65在3组的相对表达量分别是（1.1±0.4）、（2.5±0.4）、（3.3±0.4）,3组数据比较差异均有统计学意义（P＜0.05）;免疫印迹显示,未临产、临产和胎膜早破组的MMP-9在胎膜的IOD值分别为（29.5±1.2）、（68.7±3.1）、（167.2±4.8）,TIMP-1的IOD值分别是（61.1±4.1）,（32.2±2.7）,（7.3±3.0）,NF-κB P65的IOD值分别是（22.3±3.2）、（52.5±3.6）、（182.7±5.0）,3组数据比较差异均有统计学意义（P＜0.05）.结论 MMP-9在胎膜早破中起到关键性作用,MMP-9/TIMP-2的平衡失调可能间接导致胎膜早破,可能通过NF-κB信号通路发挥调控作用.

MMP-2与TIMP-2在宫颈鳞状细胞癌组织中的表达及临床意义

目的检测基质金属蛋白酶-2(MMP-2)与基质金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)在宫颈鳞状细胞癌组织中的表达,探讨宫颈鳞状细胞癌发展与临床分期及淋巴结转移中的意义。方法应用免疫组化法和图像分析方法检测MMP-2与TIMP-2在正常宫颈、宫颈上皮内瘤变(CIN)及宫颈鳞癌组织中的表达情况,并对临床病理特征进行对比分析。结果 MMP-2在正常宫颈、CIN、宫颈鳞癌组织中表达阳性率逐渐增高(P<0.05),MMP-2在宫颈鳞癌中的表达与分化程度、临床分期及淋巴结转移正相关(P<0.05);TIMP-2在宫颈鳞癌中的表达与临床分期及淋巴结转移负相关(P<0.05);MMP-2与TIMP-2在宫颈鳞癌中的表达呈负相关关系(P<0.05)。结论 MMP-2及TIMP-2与宫颈鳞癌的发生、发展相关,联合检测MMP-2及TIMP-2对预测CIN的转归及判断宫颈鳞癌的预后可提供一定的理论依据,并为宫颈癌的基因治疗提供靶点。

恶性葡萄胎患者血清Hcy和MMP-2、TIMP-2检测的临床评价

目的:评估了恶性葡萄胎患者化疗前后血清Hcy和MMP-2、TIMP-2水平的变化及临床意义。方法:应用酶免法和放射免疫分析对32例恶性葡萄胎患者进行了化疗前后血清Hcy和MMP-2、TIMP检测,并与35名正常妇女作比较。结果:恶性葡萄胎患者在化疗前血清Hcy和MMP-2、TIMP-2水平均非常显著地高于正常妇女组(P<0.01),化疗后6个月未复发的29例中其水平明显下降或接近正常,而复发的3例,其水平又回升到化疗前水平(P<0.01)。结论:检测恶性葡萄胎患者血清Hcy和MMP-2、TIMP-2水平的变化可作为患者诊断和疗效观察的参考。

小细胞肺癌患者化疗前后血清CEA.NSE和MMP-2.TIMP-2水平检测的临床意义

目的探讨肺小细胞肺癌患者化疗前后血清CEA.NSE和MMP-2.TIMP-2水平的变化及临床意义。方法应用放射免疫分析法对33例肺小细胞肺癌患者化疗前后血清CEA.NSE和MMP-2.TIMP-2水平检测,并与35名正常健康人进行比较。结果肺小细胞肺癌患者化疗前血清CEA.NSE和MMP-2.TIMP-2水平均非常显著地高于正常人组(P<0.01),化疗后6个月在未复发的28例中其水平明显下降或接近于正常,而复发5例,其水平又回升至化疗前水平(P<0.01)。结论检测肺小细胞肺癌患者化疗前后血清CEA.NSE和MMP-2.TIMP-2水平的变化可作为肺小细胞肺癌患者诊断和疗效观察的参考。

MMP-2和TIMP-2在脂多糖诱导的新生大鼠急性肺损伤中表达的变化

目的探讨基质金属蛋白酶-2(matrix metallo proteinase-2,MMP-2)及其组织抑制剂(tissue inhibitors of met-allo proteinase-2,TIMP-2)在脂多糖(LPS)诱导的新生大鼠急性肺损伤中的作用。方法选择30只新生7日龄SD大鼠,随机分为生理盐水对照组(n=6)和急性肺损伤组(n=24),后者进一步分为1、2、4及6h亚组,每组6只。以LPS腹腔注射建立急性肺损伤模型,观察注射LPS后不同时间点大鼠肺组织的病理改变,用免疫组织化学法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测大鼠肺组织中MMP-2和TIMP-2的蛋白及mRNA表达。结果病理学检查证实新生大鼠急性肺损伤模型复制成功。与生理盐水对照组比较,急性肺损伤组注射LPS后MMP-2蛋白及mRNA均表达增加,4～6h达高峰,差异有统计学意义(均P<0.05)。TIMP-2蛋白及mRNA表达在6h内可见微弱增加趋势,但与生理盐水对照组比较差异无统计学意义(均P>0.05)。结论LPS致新生大鼠的急性肺损伤存在MMP-2和TIMP-2的表达失衡,进而可能通过破坏基底膜参与急性肺损伤的病理过程。

散结通络方对缺血性肾病晚期大鼠MMP-2、TIMP-2表达的影响

目的探讨散结通络方对缺血性肾病晚期大鼠肾组织基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶组织抑制因子2(TIMP-2)表达的影响。方法将SD雄性大鼠按随机数字表法分为假手术组、模型组(均给予生理盐水3 m L/d)、药物组[散结通络方10.85 g/(kg·d)],采用单侧肾动脉不全结扎术建立模型。于实验第28天检测大鼠24 h尿蛋白定量及血肌酐。处死大鼠,取肾组织做光镜检查,观察各组大鼠肾脏形态学改变;免疫组化法检测肾组织MMP-2、TIMP-2表达。结果光镜下模型组和药物组大鼠的肾小球及肾小管间质均有损伤。与假手术组比较,模型组和药物组肾小球硬化指数评分及肾小管间质损伤评分均明显升高(P<0.01),而药物组较模型组降低(P<0.01)。与模型组比较,药物组MMP-2表达升高(P<0.01),24 h尿蛋白定量、血肌酐及TIMP-2表达降低(P<0.01),且两组均高于假手术组(P<0.01)。结论散结通络方可能通过上调MMP-2、下调TIMP-2在肾组织中的表达对缺血性肾病晚期病变起防治作用。

左西孟旦对脓毒性休克患者肾脏功能保护作用观察

目的观察左西孟旦对脓毒性休克患者肾脏功能保护作用。方法选取脓毒性休克32例,按照治疗方法不同将其分为观察组和对照组两组各16例。观察组先静脉滴注多巴酚丁胺24 h后,改用左西孟旦连续静脉滴注24 h;对照组持续静脉滴注多巴酚丁胺48 h。观察比较两组治疗前后血流动力学参数、左室射血分数(LVEF)、肾血流阻力指数(RI)、血乳酸、血肌酐清除率、尿胰岛素样生长因子结合蛋白7(IGFBP-7)、尿金属蛋白酶组织抑制剂2(TIMP-2)、其他相关指标,以及治疗期间不良反应发生情况。结果治疗前,两组血流动力学参数、LVEF、肾血流RI、血乳酸、血肌酐清除率及尿IGFBP-7、TIMP-2比较差异均无统计学意义(P>0.05)。治疗后,两组心率(HR)和中心静脉压(CVP)均较治疗前降低;观察组LVEF和血肌酐清除率较治疗前升高,肾血流RI和血乳酸、尿IGFBP-7、TIMP-2较治疗前降低,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。治疗后,观察组HR、CVP、肾血流RI、血乳酸及尿IGFBP-7、TIMP-2低于对照组,LVEF及血肌酐清除率高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。观察组非连续性肾脏替代治疗患者24 h尿量多于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。治疗期间,两组均未出现相关不良反应。结论左西孟旦治疗脓毒性休克患者可以改善肾血流RI,增加肾脏叶间动脉血流,改善肾脏灌注,对肾脏功能有保护作用。

红花注射液后处理对大鼠缺血再灌注心肌的保护作用探讨

目的对比观察中药红花注射液后处理对大鼠心肌缺血再灌注(I/R)损伤中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、组织金属蛋白酶抑制剂-2(TIMP-2)的mRNA表达水平及MMP-2/TIMP-2 mRNA比值的影响,初步探讨红花注射液后处理保护I/R损伤心肌的可能性及可能机制。方法建立大鼠在体心肌I/R损伤模型,以缺血(I)30m in再灌注(R)30m in为观察点,选取健康成年雄性SD大鼠50只,随机分为假手术组(S组)、单纯缺血组(I组)、I/R组、红花注射液低剂量组(L组)、红花注射液高剂量组(H组),每组10只。采用RT-PCR技术检测各组心肌组织中MMP-2、TIMP-2的mRNA表达水平。结果 I组和I/R组心肌组织中MMP-2 mRNA表达水平明显高于S组(P<0.05),而TIMP-2 mRNA表达水平则显著低于S组(P<0.05),MMP-2/TIMP-2 mRNA比值明显高于S组(P<0.05);且I/R组MMP-2 mRNA表达水平高于I组(P<0.05),TIMP-2 mRNA表达水平低于I组(P<0.05),MMP-2/TIMP-2比值高于I组(P<0.05)。L组及H组与I/R组相比,MMP-2 mRNA表达水平显著下降(P<0.05),而TIMP-2 mRNA表达水平则明显升高(P<0.05),MMP-2/TIMP-2 mRNA比值明显降低(P<0.05)。结论红花注射液后处理可改善I/R心肌的损伤程度,并可通过调节MMP-2/TIMP-2比值而保护I/R损伤的心肌组织。

自拟复方中药汤剂对肝纤维化大鼠相关细胞因子表达的影响

目的观察自拟复方中药汤剂治疗大鼠肝纤维化时肝组织中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、金属蛋白酶组织抑制因子-2(TIMP-2)、结缔组织生长因子(CTGF)的表达,初步探讨自拟复方中药汤剂治疗肝纤维化的机制。方法 100只雄性SD大鼠建立四氯化碳大鼠肝纤维化模型,造模后分别以含低、中、高剂量姜黄的自拟复方中药汤剂给随机分组的大鼠灌胃处理,以小柴胡汤和复方鳖甲软肝片为阳性对照,12周后处死大鼠,留取同一部位新鲜肝组织,行HE染色,光镜下观察病理学改变,并按SSS计分系统进行评分,免疫组织化学染色检测肝组织MMP-2、TIMP-2、CTGF表达,专业图像分析软件(Axio Vision 4.5版,Germany)进行图像分析。结果与模型对照组比较,各治疗组肝纤维化评分明显降低(P<0.05),而MMP-2的表达量增加(P=0.001),TIMP-2的表达量减少(P<0.05),CTGF阳性表达明显减少(P<0.05)。结论自拟复方中药汤剂可以减轻肝纤维化大鼠的肝纤维化病理改变;可能与其抑制促肝纤维因子CTGF、TIMP-2的表达,促进抗肝纤维化因子MMP-2表达增多有关。

维甲酸对大鼠肺气肿模型肺组织中MMP-12、TIMP-2及TNF-α表达的调节

目的探讨维甲酸(TR)对猪胰弹性蛋白酶(PPE)诱导的肺气肿大鼠模型肺组织中基质金属蛋白酶12(MMP-12)、金属蛋白酶组织抑制剂2(TIMP-2)及肿瘤坏死因子α(TNF-α)的调节作用。方法60只SD大鼠随机分为6组(均n=10):对照组、模型组、TR低剂量治疗组、TR中剂量治疗组、TR高剂量治疗组和棉籽油组。PPE诱导肺气肿大鼠模型成功后,TR各治疗组和棉籽油组于d76分别每日向大鼠腹腔内注射低、中、高剂量TR(500、1000、2000μg·kg-1)和棉籽油(1mL·kg-1),连续14d,90d后处死大鼠。HE染色观察各组大鼠肺组织的病理改变,免疫组化法观察肺组织内MMP-12、TIMP-2及TNF-α的蛋白表达情况,酶联免疫吸附实验(ELISA)检测血清中TNF-α的含量。结果光镜下观察,模型组、棉籽油组及TR高剂量治疗组可见肺泡管、肺泡囊和肺泡明显扩张,肺泡壁变薄,并有不同程度的断裂,类似于人类小叶中央型肺气肿,而低、中剂量TR治疗组则病变程度较轻。与对照组相比,模型组及TR各治疗组肺组织的MMP-12、TIMP-2和TNF-α的蛋白表达明显增强(P<0.01)。TR各治疗组与模型组肺组织的MMP-12表达无明显差异(P>0.05)。TR各治疗组肺组织的TIMP-2表达高于模型组(P<0.01),但各治疗组之间无显著差异。TR中剂量治疗组的MMP-12/TIMP-2比值明显低于模型组,差异显著(P<0.003)。TR各治疗组肺组织的TNF-α表达低于模型组;血清中TNF-α的含量,模型组高于对照组(P<0.01),TR各治疗组与模型组间无明显差异(P>0.05)。结论TR在一定程度上可减轻PPE诱导的大鼠肺气肿严重程度,其机制可能为:通过调节MMP-12/TIMP-2的平衡,抑制肺组织局部TNF-α的表达,从而促进肺组织的修复。

实验性肝纤维化大鼠基质金属蛋白酶-2和组织型金属蛋白酶抑制剂-1mRNA表达及姜黄素的作用

目的探讨大鼠肝纤维化过程中基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、组织型金属蛋白酶抑制剂-1（TIMP-1）mRNA表达及姜黄素汤对其的影响。方法复制大鼠四氯化碳（CCl4）肝纤维化模型，分别以高、中、低剂量姜黄素处理，检测血清透明质酸（HA）、层粘连蛋白（LN）、三型前胶原（PCⅢ）和四型胶原（IVC）水平，检测肝组织纤维化程度和MMP-2及其抑制因子TIMP-1mRNA表达。结果CCl4成功诱导肝纤维化大鼠模型，姜黄素治疗能够降低血清肝纤维化指标及肝组织纤维化程度，姜黄素可以抑制CCl4诱导的MMP-2和TIMP-1mRNA表达，并能恢复MMP-2／TIMP-1的动态平衡。结论姜黄素可以通过减少MMP-2及其TIMP-1表达抑制肝纤维化。

外周血基质金属蛋白酶及其抑制剂与甲状腺癌相关性分析

目的:探讨外周血中基质金属蛋白酶-2(MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、金属蛋白酶组织抑制剂-2(TIMP-2)和金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)与甲状腺癌的相关性。方法:采用酶联免疫吸附法(ELISA)和RT-PCR法检测30例甲状腺癌患者、27例良性甲状腺肿瘤患者和25例健康志愿者外周血中MMP-2、MMP-9、TIMP-2和TIMP-1的表达水平,分析两者与甲状腺癌之间的关系。结果:甲状腺癌、良性甲状腺病变和健康对照组血清中MMP-2的表达分别为(118.88±7.59)、(51.13±6.89)和(47.55±8.61)ng/mL,TIMP-2分别为(70.78±8.58)、(36.05±7.34)和(32.56±7.27)ng/mL,MMP-9分别为(110.18±15.49)、(56.39±10.90)和(49.28±11.64)ng/mL,TIMP-1分别为(63.62±9.95)、(38.53±8.31)和(34.01±8.22)ng/mL。甲状腺癌患者外周血中的表达均明显高于良性甲状腺肿瘤患者和健康志愿者P=0.000;良性甲状腺肿瘤患者和健康志愿者之间差异无统计学意义,P>0.05。结论:外周血中MMP-2、MMP-9、TIMP-2和TIMP-1的表达水平有助于甲状腺肿瘤良恶性的鉴别,是重要的术前评估手段。

补脏通络方含药血清对高糖环境下人脐静脉内皮细胞NO、eNOS及MMP9/TIMP1表达的影响

目的旨在观察补脏通络方含药血清对高糖环境下人脐静脉内皮细胞(HUVEC)NO、eNOS及MMP9/TIMP1表达的影响,探讨补脏通络方保护糖尿病大血管内皮的可能机制。方法采用血清药理学方法提取补脏通络方含药血清。体外培养HUVEC,细胞分正常组、高糖组、补脏通络方低剂量含药血清干预组(BZTL-L)、补脏通络方中剂量含药血清干预组(BZTL-M),补脏通络方高剂量含药血清干预组(BZTL-H)进行干预实验。硝酸还原酶法检测细胞上清液NO水平,Western Blot分析细胞eNOS、MMP9、TIMP1蛋白含量。结果高糖组较正常组,NO水平和eNOS、TIMP-1表达均降低(P<0.01),MMP-9表达和MMP-9/TIMP-1比值均升高(P<0.01);各中药干预组较高糖组,NO水平和eNOS、TIMP-1表达均升高(P<0.01),MMP-9表达和MMP-9/TIMP-1比值均下降(P<0.01),且MMP-9/TIMP-1比值下降呈剂量依赖性。结论改善内皮细胞NO分泌,调节内皮细胞MMP-9/TIMP-1平衡以稳定血管基质的正常代谢,可能是补脏通络方保护糖尿病大血管内皮的具体机制之一。