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Cloning the Promoter of BcNA1 from Brassica napus and Fad2 Gene from Arabidopsis thaliana and Construction of the Plant Expression Vector 被引量:1
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作者 石东乔 《High Technology Letters》 EI CAS 2000年第1期83-90,共8页
The upstream regulatory region of a seed specific gene was isolated from the genomic DNA of Brassica napus by PCR amplification. The cloned fragment contained 1755 nucleotides, and shared a sequence homology of 99.6%... The upstream regulatory region of a seed specific gene was isolated from the genomic DNA of Brassica napus by PCR amplification. The cloned fragment contained 1755 nucleotides, and shared a sequence homology of 99.6% with the reported data. The coding region of oleic acid desaturase gene was then cloned from Arabidopsis thaliana. The sequencing analysis indicated that the sequence of the PCR product was just the same as reported before. In addition, the plant expression vector harboring the seed specific promoter and trans Fad2 gene was constructed. 展开更多
关键词 BRASSICA NAPUS Arabidopsis THALIANA seed specific promoter FAD2 gene plant expression vector
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Identification and validation of root-specific promoters in rice 被引量:1
2
作者 HUANG Li-yu ZHANG Fan +3 位作者 QIN Qiao WANG Wen-sheng ZHANG Ting FU Bin-ying 《Journal of Integrative Agriculture》 SCIE CAS CSCD 2015年第1期1-10,共10页
Novel promoters that confer root-specific expression would be useful for engineering resistance against problems of nutrient and water absorption by roots. In this study, the reverse transcriptase polymerase chain rea... Novel promoters that confer root-specific expression would be useful for engineering resistance against problems of nutrient and water absorption by roots. In this study, the reverse transcriptase polymerase chain reaction was used to identify seven genes with root-specific expression in rice. The isolation and characterization of upstream promoter regions of five selected genes rice root-specific promoter (rRSP) 1 to 5 (rRSP1-rRSP5) and A2P (the promoter of OsAct2) revealed that rRSP1, rRSP3, and rRSP5 are particularly important with respect to root-specific activities. Furthermore, rRSP1, rRSP3, and rRSP5 were observed to make different contributions to root activities in various species. These three promoters could be used for root-specific enhancement of target gene(s). 展开更多
关键词 RICE root-specific promoters expression profile
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Cell Type Specific Expression of CD80 (B7-1) Gene in Murine
3
作者 Kalaivani Vivehananthan Manish Sharma +1 位作者 Naresh Sahoo Kanury Venkata Subba Rao 《Journal of Agricultural Science and Technology(A)》 2012年第1期58-64,共7页
The CD80 (B7-1) costimulatory molecule is expressed on the surface of B cells and its expression is transcriptionally upregulated upon stimuli. To identify the region of murine CD80 promoter that direct cell type sp... The CD80 (B7-1) costimulatory molecule is expressed on the surface of B cells and its expression is transcriptionally upregulated upon stimuli. To identify the region of murine CD80 promoter that direct cell type specific gene expression, four promoters construct of CD80 gene were generated with DNA fragments fused to the GFP reporter gene. In the present study, significant promoter activity was detected with all four promoter constructs only in the murine B lymphocyte. Further, the CD80 promoter region extending from -3,005 bp to +273 bp in relation to the previously reported transcription start site, was identified as tissue specific region. Interestingly, the shortest 700 bp (-427/+273) of promoter fragment was sufficient to direct the CD80 gene expression. The level of CD80 expression was also found to be modulated by exogenous stimuli in B lymphocyte. Additionally, it was demonstrated that the CD80 gene expression is regulated at the level of transcription where the inducible CD80 gene transcript was detected in B lymphocyte with increasing time. 展开更多
关键词 CD80 gene promoter activity cell type specific expression B lymphocyte
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陆地棉CLE基因家族的鉴定及GhCLE13参与调控棉花抗旱性的功能分析
4
作者 戎宇轩 惠留洋 +4 位作者 王沛琦 孙思敏 张献龙 袁道军 杨细燕 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第12期2925-2939,共15页
CLAVATA3/Embryo surrounding region-related(CLE)小肽家族是植物中最大的小肽激素家族,在植物中广泛存在,且参与植物多个重要的生命活动。本研究对陆地棉CLE基因家族进行了鉴定,并对GhCLE基因家族成员进行基因结构、启动子顺式作用元... CLAVATA3/Embryo surrounding region-related(CLE)小肽家族是植物中最大的小肽激素家族,在植物中广泛存在,且参与植物多个重要的生命活动。本研究对陆地棉CLE基因家族进行了鉴定,并对GhCLE基因家族成员进行基因结构、启动子顺式作用元件、蛋白质理化性质、系统发育的分析;通过RNA-seq数据构建了GhCLE基因家族成员在陆地棉各组织的表达谱及干旱处理下的表达模式,并筛选在棉花根系特异表达且受干旱诱导的CLE基因;最后通过VIGS技术对筛选出的GhCLE基因进行了抗旱功能的验证。结果显示,在陆地棉全基因组共鉴定出40个GhCLE基因,GhCLE基因结构较为简单,32个GhCLE基因没有内含子,所有基因编码的蛋白序列均包含12 aa的CLE结构域;GhCLE基因启动子区域包含多种光诱导响应、胁迫响应、激素响应和发育相关的顺式作用元件;GhCLE基因在陆地棉多个组织均有表达,筛选出了1个根系特异表达且受干旱诱导的GhCLE13-D-2基因。通过VIGS技术和MDA含量的测定和比较验证了GhCLE13-D-2基因提高棉花的抗旱性的功能。本研究为CLE小肽在植物抗逆方面的深入研究以及棉花种质创新提供了新的理论依据。 展开更多
关键词 陆地棉 CLE小肽基因家族 根系特异表达 抗旱 GhCLE13-D-2
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甘薯PEBP基因家族鉴定以及影响甘薯块根发育候选PEBP基因的鉴定
5
作者 黄哲瑞 辛曙丽 +2 位作者 赵添 刘永华 朱国鹏 《热带作物学报》 CSCD 北大核心 2024年第3期459-472,共14页
磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)在植物中广泛存在,在调控开花、种子休眠以及地下储藏器官(如马铃薯块茎和洋葱鳞茎)形成中发挥着重要作用。但目前有关甘薯(Ipomoea batatas)PEBP基因家族成员的研究较少,且尚未有研究系统揭示调控甘薯块根... 磷脂酰乙醇胺结合蛋白(PEBP)在植物中广泛存在,在调控开花、种子休眠以及地下储藏器官(如马铃薯块茎和洋葱鳞茎)形成中发挥着重要作用。但目前有关甘薯(Ipomoea batatas)PEBP基因家族成员的研究较少,且尚未有研究系统揭示调控甘薯块根发育的关键PEBP家族成员。本研究首先通过生物信息学分析对甘薯基因组中PEBP基因家族成员的数量和种类进行鉴定,然后通过PEBP基因表达的组织特异性分析、PEBP基因在不同发育时期块根中表达水平的动态变化及其与糖转运蛋白SWEET基因表达水平之间的相关性分析,系统筛选出调控甘薯块根发育的候选PEBP基因家族成员并初步揭示其可能的调控机制。结果如下:(1)从甘薯基因组中共鉴定出15个PEBP基因,聚类分析将其分为4个亚家族:5个FT-like成员(IbFT1~5)、6个TFL1-like成员(IbTFL1~6)、2个MFT-like成员(IbMFT1~2)和2个PEBP-like成员(IbPEBP1~2)。(2)聚类分析结果表明,IbFT5可能会促进甘薯块根发育,而IbTFL3可能会抑制其块根发育。(3)甘薯PEBP基因表达的组织特异性分析表明,在根系高表达的PEBP基因中,只有IbFT5、IbTFL4和IbTFL6不仅在根系的表达水平高于在其他组织中的表达水平,而且和根系中其他PEBP家族成员的表达水平相比,这3个基因的表达水平也是最高的,因此推测这3个PEBP基因可能会促进块根膨大。(4)对上述2种方法得到的4个候选PEBP基因(IbFT5、IbTFL3、IbTFL4和IbTFL6)在不同发育时期块根(定植后30、60、90、120 d)中的表达水平测定结果表明,随着块根的发育,IbFT5、IbTFL4、IbTFL6的表达水平显著上升,特别是在块根快速膨大期(60~90 d),而IbTFL3的表达水平在块根快速膨大期(60~90 d)则快速下降。因此,IbFT5、IbTFL4、IbTFL6可能促进块根发育,而IbTFL3则可能抑制块根发育。(5)伴随着IbFT5、IbTFL4、IbTFL6的表达水平的升高,块根中高表达的5个SWEET基因中有4个(IbSWEET4、IbSWEET11、IbSWEET16和IbSWEET19)的表达水平均呈现不断下降的趋势,这与马铃薯的研究结果相似,表明甘薯PEBP基因可能也是通过抑制SWEET蛋白活性,从而促进糖分通过更高效率的共质体转运途径向块根进行运输最终促进块根发育。综上,本研究不仅确定了甘薯基因组中PEBP基因家族成员的数量和种类,而且还筛选出4个可能影响甘薯块根发育的候选PEBP基因,为进一步提高我国甘薯的产量提供理论依据。 展开更多
关键词 甘薯 PEBP基因家族 生物信息学 组织表达特异性 块根发育
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Effects of specific expression of iaaL gene in tobacco tapetum on pollen embryogenesis 被引量:3
6
作者 杨洪全 卫志明 许智宏 《Science China(Life Sciences)》 SCIE CAS 1997年第4期384-391,共8页
The indoleacetic-acid-lysine synthetase (iaaL) gene from Pseudomonas syringae subsp. savastanoi was fused to tobacco tapetum-specific expression promoter TA29, and introduced into tobacco. The expression pattern of th... The indoleacetic-acid-lysine synthetase (iaaL) gene from Pseudomonas syringae subsp. savastanoi was fused to tobacco tapetum-specific expression promoter TA29, and introduced into tobacco. The expression pattern of this chimeric gene was studied, and the endogenous indoleacetic acid (IAA) levels in different organs were assayed. The results demonstrated that TA29 promoter was only able to direct the specific expression of iaaL gene in transgenic tobacco anther, and resulted in the decrease of endogenous IAA levels in transgenic tobacco anther. No significant phe-notype variation was observed among the transgenic plants at the whole plant level. However, the percentage of pollen embryogenesis was reduced to 11 % when anthers of the transgenic plants were cultured on the modified hormone-free Nistch H (NH) medium, while those of both CK1 and CK2 (see sec. 1.2.2) were more than 50% ; when the an-thers were cultured on NH medium supplemented with 0. 2 mg/L IAA, the percentage of pollen embryogenesis re-stored to the same level of that of the wild type (up to 55. 7% ). This study demonstrates that the IAA metabolism in anther tapetum cells is of significant importance to the androgenic development in anther culture. 展开更多
关键词 tapetum-specific expression indoleacetic-acid-lysine SYNTHETASE gene transgenic tobacco pollen embryogenesis.
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Functional analysis of cis-acting sequences regulating root-specific expression in transgenic tobacco 被引量:2
7
作者 Lan Nan Huixin Lin +1 位作者 Yucheng Guan Fan Chen 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 2002年第17期1441-1445,共5页
Two different length fragments, RSF1 and RSF2 which contained the cis-acting sequences of root-specific gene TobRB7, were isolated from tobacco genome. The abilities of these fragments to direct root-specific expressi... Two different length fragments, RSF1 and RSF2 which contained the cis-acting sequences of root-specific gene TobRB7, were isolated from tobacco genome. The abilities of these fragments to direct root-specific expression were studied by fusing them to the β-glucuronidase (GUS) report gene with different directions. After the recombined vectors were transformed into tobacco, the expression pattern was performed by histochemical staining and the quantitative analysis of GUS activity. The data suggested that the cis-acting element of TobRB7 gene direct GUS expression not only as root-specific but also as bidirectional. In our studies, the short fragment, RSF2, performed stronger activity than RSF1 with any direction. The stronger activity of GUS expression was determined by reverse inserting of RSF1 or RSF2 than positive inserting. 展开更多
关键词 root TISSUE-specific expression bidirectional promoter cis-acting element TRANSGENIC plant.
原文传递
响应ABA的甘草bZIP转录因子的基因表达及调控研究
8
作者 王清 武立伟 +7 位作者 范潘慧 徐志超 罗红梅 孙伟 王瑀 郑司浩 宋经元 姚辉 《中国现代中药》 CAS 2023年第6期1207-1217,共11页
目的:研究响应脱落酸(ABA)的甘草碱性亮氨酸拉链(GubZIPs)转录因子的基因表达差异,克隆并分析甘草关键酶基因的启动子序列,为解析bZIP转录因子调控甘草活性成分生物合成提供参考。方法:采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)分析甘... 目的:研究响应脱落酸(ABA)的甘草碱性亮氨酸拉链(GubZIPs)转录因子的基因表达差异,克隆并分析甘草关键酶基因的启动子序列,为解析bZIP转录因子调控甘草活性成分生物合成提供参考。方法:采用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)分析甘草毛状根中GubZIPs转录因子基因在外源ABA处理下的表达模式及在3年生甘草中的空间表达差异;利用TBtools软件从甘草基因组中提取关键酶基因的启动子片段并克隆,利用生物信息学分析启动子上潜在的关键调控元件。结果:甘草GubZIP1、GubZIP5、GubZIP33和GubZIP56基因在不同的ABA处理条件下表达模式不同,其中GubZIP1和GubZIP33的响应最为显著。分析GubZIPs基因在甘草不同组织的表达差异发现,GubZIP1和GubZIP5在根部高水平表达,GubZIP33和GubZIP56在叶中高水平表达。基于甘草基因组克隆获得甘草生物合成途径中关键酶查耳酮异构酶(CHI)、查耳酮合成酶(CHS)、β-香树脂醇合酶(β-AS)基因的启动子序列,分析结果显示,CHI基因的启动子区域有2个G-box和1个A-box顺式作用元件,CHS基因的启动子区域有2个ABRE和1个G-box顺式作用元件,β-AS基因的启动子区域有1个ABRE和1个G-box顺式作用元件。结论:甘草毛状根中GubZIP1、GubZIP5、GubZIP33和GubZIP56基因对ABA均有显著响应,采用50 mg·L^(–1)的ABA处理3 h是研究甘草中ABA相关通路较为适宜的方案。此外甘草的关键酶基因启动子上存在可与bZIP转录因子结合和响应ABA等激素的顺式作用元件;研究结果可为深入解析响应ABA的bZIP转录因子调控甘草活性成分生物合成的分子机制提供参考。 展开更多
关键词 甘草 毛状根 亮氨酸拉链转录因子 空间表达 关键酶基因 启动子
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烟草花药特异表达基因启动子的克隆及序列分析 被引量:10
9
作者 彭仁旺 周雪荣 +2 位作者 周奕华 方荣祥 莽克强 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期247-250,共4页
通过PCR扩增,从烟草(Nicotiana tabacum cv.NC89)中克隆了花药绒毡层中特异表达基因的启动子,序列分析表明,该启动子含1303个核苷酸,与已报道的序列比较,核苷酸的同源性为99.4%。
关键词 烟草 花药特异性 启动子 基因表达 序列分析
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植物磷吸收的分子机理研究进展 被引量:20
10
作者 黄沆 付崇允 +2 位作者 周德贵 陈光辉 周少川 《分子植物育种》 CAS CSCD 2008年第1期117-122,共6页
磷是植物生长发育所必需的大量营养元素。植物磷营养高效利用通常与根形态、根分泌物、膜与体内磷转运以及菌根等因素有关,表现为受多基因控制。随着分子生物学技术的发展和研究的不断深入,对植物磷吸收的研究也深入到分子水平。本文主... 磷是植物生长发育所必需的大量营养元素。植物磷营养高效利用通常与根形态、根分泌物、膜与体内磷转运以及菌根等因素有关,表现为受多基因控制。随着分子生物学技术的发展和研究的不断深入,对植物磷吸收的研究也深入到分子水平。本文主要从根的构型、根系分泌物、菌根、植物的磷转运子以及磷胁迫条件特异性表达基因等方面对植物磷吸收的分子机制进行综述。 展开更多
关键词 根系 磷转运子 特异表达基因 菌根
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杨树皮储藏蛋白基因启动子的克隆和功能研究 被引量:22
11
作者 蒋浩 秦红敏 +1 位作者 田颖川 DeanW.Gabriel 《林业科学》 EI CAS CSCD 北大核心 1999年第5期46-50,共5页
杨树树皮储藏蛋白BSP是类似种子储藏蛋白的氮素储藏物 ,冬季在韧皮部薄壁细胞中大量积累 ,是落叶树氮代谢中的重要成分。为了研究BSP基因启动子在转基因植物中的表达特性 ,探索其在植物基因工程研究中潜在的应用价值 ,我们用PCR方法从... 杨树树皮储藏蛋白BSP是类似种子储藏蛋白的氮素储藏物 ,冬季在韧皮部薄壁细胞中大量积累 ,是落叶树氮代谢中的重要成分。为了研究BSP基因启动子在转基因植物中的表达特性 ,探索其在植物基因工程研究中潜在的应用价值 ,我们用PCR方法从美洲黑杨基因组中DNA扩增得到了BSA启动子片段。与GUS基因融合构建中间载体后 ,转化烟草 ,获得了一批PCR检测为阳性的转化再生植株。经GUS组织化学检测 ,发现若干转基因烟草的茎和叶柄韧皮部以及叶脉都呈GUS染色阳性 ,初步证明杨树BSP基因启动子确有韧皮部表达特性 ,可介导GUS基因在转基因烟草韧皮部特异表达。 展开更多
关键词 杨树 启动子 GUS基因 树皮 储藏蛋白
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转双抗虫基因烟草的研究 被引量:22
12
作者 赵存友 袁正强 +1 位作者 秦红敏 田颖川 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期273-277,共5页
用改造的雪花莲凝集素基因GNAmm与合成的苏云金芽孢杆菌 (Bt)毒蛋白cry1Ac基因构建了带有双价基因的植物表达载体 ,在该表达载体中这两个基因的转录分别受笋瓜PP2启动子 (SPP2P)和CaMV 35S启动子的调控。通过根癌土壤杆菌介导转化法 ,... 用改造的雪花莲凝集素基因GNAmm与合成的苏云金芽孢杆菌 (Bt)毒蛋白cry1Ac基因构建了带有双价基因的植物表达载体 ,在该表达载体中这两个基因的转录分别受笋瓜PP2启动子 (SPP2P)和CaMV 35S启动子的调控。通过根癌土壤杆菌介导转化法 ,获得了一批抗卡那霉素的转化再生烟草植株。PCR检测及基因组DNASouthernblot、Slotblot杂交分析的结果表明Gna基因和Bt基因已整合到烟草总DNA中。用Bt毒蛋白抗血清进行Westernblot分析 ,转基因植株均有Bt杀虫蛋白的不同程度的表达。对转化再生烟草的虫试结果表明 ,在所受试的 19株烟草中 6 0 %的植株上的棉铃虫在 5天内死亡率达到 10 0 % ,而且存活幼虫的生长发育受到明显抑制 ;蚜虫抑制生长试验表明 ,多数转化再生植株具有较强的抗蚜活性 ,平均能够抑制桃蚜 5 0 %~ 6 0 %的蚜口密度 ,有的高达 80 %以上。 展开更多
关键词 双抗虫基因 韧皮部启动子 抗虫性 抗蚜 转基因烟草
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番茄根特异表达基因LeGRP2启动子的克隆及其在拟南芥的表达分析 被引量:8
13
作者 李志邈 杨悦俭 +6 位作者 杨飞 叶青静 王荣青 阮美颖 周国治 姚祝平 Vong-Ling Ruan 《中国农业科学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第9期1877-1882,共6页
目的克隆获得番茄根特异表达启动子,为利用基因工程技术创制番茄新种质奠定基础。方法利用Clontech公司的基因组步移(genome walking)技术,扩增番茄根特异表达基因LeGRP2的上游调控序列,并构建植物表达载体,利用农杆菌介导法转化拟南芥,... 目的克隆获得番茄根特异表达启动子,为利用基因工程技术创制番茄新种质奠定基础。方法利用Clontech公司的基因组步移(genome walking)技术,扩增番茄根特异表达基因LeGRP2的上游调控序列,并构建植物表达载体,利用农杆菌介导法转化拟南芥,以GUS为报告基因研究该调控序列的组织表达特异性。结果以番茄基因组DNA为模板,经过2次基因组步移,获得了LeGRP2基因上游1959bp的调控序列(GenBank登录号:EU262719),分析发现含有9个与根特异表达相关的顺式作用元件ROOTMOTIFTAPOX1。转基因拟南芥的组织化学染色分析表明,GUS基因主要在拟南芥的根部特异表达。结论克隆获得了番茄LeGRP2基因启动子,该启动子主要在转基因拟南芥根部表达GUS基因,具有较强的根表达特异性。 展开更多
关键词 番茄 根特异启动子 基因组步移 组织表达特异性
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弓形虫多表位基因植物表达载体的构建 被引量:12
14
作者 周晓红 陈晓光 +6 位作者 张晓东 杨培梁 习佳飞 胡建军 王亚楠 李林 沈树满 《中国寄生虫学与寄生虫病杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第2期106-109,共4页
目的 构建弓形虫多表位基因(TGMG)植物表达载体。方法①将TGMG亚克隆人pBAC55构建中间载体pB35MG,再将其中E35S/TGMG/NOS3′结构单元亚克隆人pCAMBIA2300构建植物表达载体pC35MG。②将番茄果实特异性启动子E81.1插入pB35MG构建中间载体p... 目的 构建弓形虫多表位基因(TGMG)植物表达载体。方法①将TGMG亚克隆人pBAC55构建中间载体pB35MG,再将其中E35S/TGMG/NOS3′结构单元亚克隆人pCAMBIA2300构建植物表达载体pC35MG。②将番茄果实特异性启动子E81.1插入pB35MG构建中间载体pB35E1MG,再将其中E35SE81.1/TGMG/NOS3′结构单元亚克隆人pCAMBIA2300构建植物表达载体pC35E1MG。③将番茄果实特异性启动子E82.2插入pB35MG构建中间载体pBE2MG,再将其中E82.2/TGMG/NOS3′结构单元亚克隆人pCAMBIA2300构建植物表达载体pCE2MG。测序鉴定pB35MG、pC35E1MG、pCE2MG中的TGMG序列。④pC35MG、pC35E1MG、pCE2MG转化根癌农杆菌LBA404。结果 重组质粒用酶切鉴定均得到预期片段,pB35MG、pC35E1MG、pCE2MG测序结果正确。结论 成功构建TGMG中间载体pB35MG、pB35E1MG、pBE2MG,以及植物表达载体pC35MG、pC35E1MG、pCE2MG。并将3种植物表达载体导入根癌农杆菌。 展开更多
关键词 弓形虫 多表位基因 植物表达载体 番茄果实特异性启动子
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蔗糖合酶基因启动子克隆及其转基因水稻植物中特异性表达 被引量:13
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作者 李永春 张宪银 薛庆中 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第5期586-590,共5页
以水稻品种“明恢 6 3”基因组 DNA为模板 ,用 PCR方法克隆出水稻蔗糖合酶基因起始密码子以前 (包括第一内含子 )的上游序列 RSP1及其不包括第一内含子的上游调控序列 RSP2。测序结果显示 ,在重要的功能区段上 ,克隆的序列与 Wang(1992 ... 以水稻品种“明恢 6 3”基因组 DNA为模板 ,用 PCR方法克隆出水稻蔗糖合酶基因起始密码子以前 (包括第一内含子 )的上游序列 RSP1及其不包括第一内含子的上游调控序列 RSP2。测序结果显示 ,在重要的功能区段上 ,克隆的序列与 Wang(1992 )等的报道基本一致。构建了由 RSP1和 RSP2驱动报告基因 Gus的植物表达载体 ,并用于农杆菌介导法水稻遗传转化。对水稻品种“秀水 11”转基因植株各部位的 GUS组织化学分析表明 :RSP1和 RSP2都可以驱动Gus基因在根、茎、叶及颖壳中高效特异表达 ,但在胚和胚乳中不表达。作者认为 。 展开更多
关键词 蔗糖合酶基因 启动子 克隆 转基因 水稻 植物 特异性表达
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甘薯块根储藏蛋白(Sporamin)启动子克隆及功能验证 被引量:4
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作者 张聪 郑雪莲 +5 位作者 蒲志刚 张婷 吴洁 谭文芳 王大一 阎文昭 《分子植物育种》 CAS CSCD 北大核心 2012年第6期707-713,共7页
提取甘薯"川薯34"总DNA,设计引物,通过高保真PCR扩增获得了长为1144bp的甘薯储藏蛋白(Sporamin)基因启动子SpoA-p。PLACE在线分析表明:Sporamin启动子具有基本的启动子元件CAAT-box,并包含大量与储藏蛋白表达相关、抗逆相关... 提取甘薯"川薯34"总DNA,设计引物,通过高保真PCR扩增获得了长为1144bp的甘薯储藏蛋白(Sporamin)基因启动子SpoA-p。PLACE在线分析表明:Sporamin启动子具有基本的启动子元件CAAT-box,并包含大量与储藏蛋白表达相关、抗逆相关及蔗糖表达相关的功能组件。构建植物表达载体pBI-SpoA-p::GUS、农杆菌工程菌株EHA105:pBI-SpoA-p::GUS后导入烟草及甘薯,分别得到15株烟草和10株甘薯的阳性转基因植株,GUS染色分析表明烟草各部位中只在根中有基因表达,甘薯根、茎和叶各部位未检测到活性。5%蔗糖诱导处理24h后,在烟草根、茎及叶均观察到GUS活性;在甘薯中只有根有GUS活性。因此,可以看出此启动子为甘薯根部特异的表达启动子,并受蔗糖诱导而表达。 展开更多
关键词 甘薯 储藏蛋白基因 启动子 植物表达载体 蔗糖诱导 根部特异的表达
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水稻种胚特异性启动子OsESP1的克隆及其表达特性 被引量:11
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作者 房孝良 刘炜 +1 位作者 安静 王庆国 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第10期1904-1909,共6页
以水稻品种"中花11"基因组DNA为模板,通过PCR的方法,对水稻基因OsESG1上游调控序列扩增,获得长度约为1.4kb的特异性条带,命名为OsESP1。以OsESP1与带有GUS报告基因的植物表达载体连接,经农杆菌介导转化获得转基因水稻阳性植... 以水稻品种"中花11"基因组DNA为模板,通过PCR的方法,对水稻基因OsESG1上游调控序列扩增,获得长度约为1.4kb的特异性条带,命名为OsESP1。以OsESP1与带有GUS报告基因的植物表达载体连接,经农杆菌介导转化获得转基因水稻阳性植株。结合组织化学染色法,检测GUS报告基因的表达特性,结果表明,由OsESP1所调控的GUS报告基因仅在水稻种胚中特异表达,而在其他组织中均未被检测到,初步证明OsESP1为水稻种胚特异性启动子。 展开更多
关键词 水稻 种胚特异性启动子 表达特性分析 GUS报告基因
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竹节花黄斑驳病毒启动子的缺失分析及功能 被引量:6
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作者 吴标 潘瑞琴 +1 位作者 芦睿 田颖川 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 1999年第1期15-22,共8页
竹节花黄斑驳病毒(CoYMV)是侵染单子叶植物竹节花的一种双链环状DNA病毒,它的启动子可介导外源基因在烟草韧皮部特异表达。为了研究其组织特异性表达的最佳启动子区域,对CoYMV启动子进行了5′端五种不同长度的缺失分... 竹节花黄斑驳病毒(CoYMV)是侵染单子叶植物竹节花的一种双链环状DNA病毒,它的启动子可介导外源基因在烟草韧皮部特异表达。为了研究其组织特异性表达的最佳启动子区域,对CoYMV启动子进行了5′端五种不同长度的缺失分析,用不同长度的启动子片段与GUS基因及NOS3′端转录中止序列构建了全长启动子及5个缺失启动子序列的六个嵌合GUS基因植物表达载体。利用农杆菌将上述嵌合基因转化烟草外植体后,每种表达载体都获得了一批转基因烟草植株。转化再生烟草植株的PCR分析、GUS酶活测定及GUS组织染色的结果表明六种类型的嵌合基因已整合到烟草染色体中,并有五种表达出GUS活性。缺失到870bp的启动子比全长启动子(1040bp)的活性约高78%,870bp比585bp启动子介导的GUS活性略高但差别不明显,缺失到447和232时GUS活性有明显下降,但仍具有韧皮部特异表达的特性。当缺失到TATAbox附近的44bp时启动子丧失组织特异性,GUS活性也降低到测不出来的水平。以上结果表明CoYMV启动子从转录起始位点上游870bp~230bp及232bp下游区分别与启动子的活性和韧皮部组织特异性密切相关,87? 展开更多
关键词 CoYMV 启动子 缺失分析 转基因烟草植株 功能
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烟草根特异性启动子植物表达载体的构建及其对番茄的转化 被引量:6
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作者 彭娟 李志邈 +3 位作者 杨悦俭 叶青静 吴才君 张小明 《浙江农业学报》 CSCD 北大核心 2009年第1期1-5,共5页
利用PCR技术从烟草中克隆获得了893bp的根特异性表达基因TobRB7的启动子,命名为NT1。以pBI121为原始植物表达载体,用NT1启动子和番茄广谱抗病基因Pto分别取代CaMV 35S启动子和GUS基因,获得了烟草根特异启动子驱动抗病基因的表达载体,命... 利用PCR技术从烟草中克隆获得了893bp的根特异性表达基因TobRB7的启动子,命名为NT1。以pBI121为原始植物表达载体,用NT1启动子和番茄广谱抗病基因Pto分别取代CaMV 35S启动子和GUS基因,获得了烟草根特异启动子驱动抗病基因的表达载体,命名为pBI-NT1::Pto。采用冻融法将pBI-NT1::Pto导入根癌农杆菌EHA105中,以番茄子叶为外植体进行了侵染转化。PCR检测NPT Ⅱ基因的结果表明已获得转基因番茄植株。 展开更多
关键词 番茄 根特异启动子 表达载体 转基因
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大豆硬脂酸-ACP脱饱和酶基因启动子的克隆及其表达活性分析 被引量:6
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作者 张庆林 赵艳 +5 位作者 李晓薇 翟莹 张艳 王英 李景文 王庆钰 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期1205-1211,共7页
以吉豆2号基因组为模板,通过TAILPCR方法,扩增得到大豆硬脂酸-ACP脱饱和酶基因启动子片段SACPD-Cp。PLACE在线启动子预测分析表明,该序列中含有多种典型的种子特异性表达序列元件。将SACPD-Cp片段取代pCAMBIA1301质粒中的CaMV35S启动子... 以吉豆2号基因组为模板,通过TAILPCR方法,扩增得到大豆硬脂酸-ACP脱饱和酶基因启动子片段SACPD-Cp。PLACE在线启动子预测分析表明,该序列中含有多种典型的种子特异性表达序列元件。将SACPD-Cp片段取代pCAMBIA1301质粒中的CaMV35S启动子,构建表达载体pCAM-SACPD-Cp,通过农杆菌介导法在大豆组织中进行瞬时表达,GUS组织化学染色和荧光定量研究其表达特性。结果表明,SACPD-Cp驱动GUS基因在种子中的表达活性是CaMV35S启动子的93.01%;SACPD-Cp启动子与现已知启动子无同源性,仅在大豆种子中检测到GUS活性,而在根、茎和叶组织中均未检测到GUS活性,证实SACPD-Cp是一个新的种子特异性启动子。 展开更多
关键词 大豆 硬脂酸-ACP脱饱和酶基因 序列分析 种子特异性启动子 瞬时表达
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