Microscopic simulation of multi-lane traffic under dynamic tolling and information feedback

To investigate drivers' lane-changing behavior under different information feedback strategies,a microscopic traffic simulation based on the cellular automaton model was made on the typical freeway with a regular lane and a high-occupancy one. A new dynamic tolling scheme in terms of the real-time traffic condition on the high-occupancy lane was further designed to enhance the whole freeway's flow throughput. The results show that the mean velocity feedback strategy is generally more efficient than the travel time feedback strategy in correctly guiding drivers' lane choice behavior. Specifically,the toll level,lane-changing rate and freeway's throughput and congestion coefficient induced by the travel time feedback strategy oscillate with larger amplitude and longer period. In addition,the dynamic tolling scheme can make the high-occupancy lane less congested and maximize the freeway's throughput when the regular-lane inflow rate is larger than 0.45.

Toll样受体对成骨及破骨细胞功能的调节

背景:Toll样受体是一类重要的模式识别受体,通过识别特定的分子模式在病原体免疫、细胞因子合成等方面具有重要功能。既往的研究发现,不同种类的骨组织细胞同样表达Toll样受体。激活或抑制Toll样受体可通过多种途径对成骨与破骨细胞功能造成显著影响。目的:总结Toll样受体在成骨及破骨细胞中的表达及作用途径,以进一步阐明生理及病理状态下Toll样受体参与调控的生物学机制。方法:检索截至2022年12月的PubMed、中国知网等文献数据库中的相关文献,中文检索词为“Toll样受体,成骨细胞,破骨细胞,间充质干细胞,巨噬细胞,细胞因子,信号通路”,英文检索词为“toll-like receptor,osteoblast,osteoclast,mesenchymal stem cells,macrophage,cytokine,signaling pathway”,并根据研究需要确立相应的标准,对最终所得文献进行筛选。结果与结论:①Toll样受体可通过激活相关信号通路直接调节成骨、破骨细胞分化;②Toll样受体的激活诱导细胞因子的产生,发挥调节效应;③Toll样受体的激活能够对成骨、破骨细胞的生存及迁移能力产生影响;④在某些疾病及病理环境中,成骨及破骨细胞中的Toll样受体被激活,参与细胞间的相互作用。

miR-124通过抑制TLR4/NF-κB/CCL2对脑梗死大鼠神经元凋亡的影响

目的探讨微小RNA(miR)-124通过抑制Toll样受体(TLR)4/核因子(NF)-κB/CC类趋化因子配体(CCL)2对脑梗死(CI)大鼠神经元凋亡的影响。方法通过线栓闭塞大脑中动脉法建立CI大鼠模型60只,以随机数表法平均分为5组:模型组、miR-124激活剂(miR-124 agomir)组、TLR4过表达质粒组、miR-124 agomir阴性对照+空载质粒组、miR-124 agomir+TLR4过表达质粒组,另取12只大鼠只分离颈动脉,作为假手术组。分组干预后,评测大鼠神经功能缺损情况,比较各组神经功能缺损评分;采用三苯基氯化四氮唑(TTC)染色检测大鼠CI情况,比较各组CI面积;采用TUNEL染色检测海马神经元凋亡情况,比较各组海马神经元凋亡率;采用试剂盒测量各组血清活性氧(ROS)及炎症因子环氧合酶(COX)-2、白细胞介素(IL)-17水平;采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)实验检测各组脑组织miR-124表达;采用Western印迹实验检测各组脑组织凋亡及TLR4/NF-κB/CCL2通路蛋白表达。结果与假手术组比较,模型组、miR-124 agomir阴性对照+空载质粒组、miR-124 agomir+TLR4过表达质粒组脑组织miR-124与B淋巴细胞瘤-2蛋白(Bcl-2)蛋白表达水平显著降低(P<0.05),神经功能缺损评分、CI面积、海马神经元凋亡率、血清ROS及炎症因子COX-2、IL-17水平、脑组织Bcl-2相关X蛋白(Bax)、TLR4、核内NF-κB p65、CCL2蛋白表达水平显著升高(P<0.05)。与模型组、miR-124 agomir+TLR4过表达质粒组分别比较,miR-124 agomir组脑组织miR-124与Bcl-2蛋白表达水平均显著升高(P<0.05),神经功能缺损评分、CI面积、海马神经元凋亡率、血清ROS及炎症因子COX-2、IL-17水平、脑组织Bax、TLR4、核内NF-κB p65、CCL2蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),而TLR4过表达质粒组脑组织miR-124与Bcl-2蛋白表达水平均显著降低(P<0.05),神经功能缺损评分、CI面积、海马神经元凋亡率、血清ROS及炎症因子COX-2、IL-17水平、脑组织Bax、TLR4、核内NF-κB p65、CCL2蛋白表达水平均显著升高(P<0.05)。与模型组相比,miR-124 agomir阴性对照+空载质粒组各指标水平无显著变化(P>0.05)。结论miR-124可通过下调TLR4/NF-κB/CCL2通路蛋白表达,抑制炎症,减轻脑组织梗死及海马神经元凋亡,修复CI大鼠神经功能。

CD64指数联合IL-1β、TLR4在诊断结直肠癌患者术后感染中的临床价值

目的探讨CD64指数联合血清白细胞介素-1β(IL-1β)、Toll样受体4(TLR4)在诊断结直肠癌患者术后切口感染中的临床应用价值。方法以2020年6月至2022年6月收治入院的113例行结直肠癌根治术患者作为研究对象,根据其术后是否发生切口感染,分为感染组与非感染组。分别于术前、术后3 d及术后5 d检测外周血CD64指数及血清IL-1β、TLR4水平,绘制ROC曲线并分析各指标单独及联合应用时诊断结直肠癌术后切口感染的临床应用价值,以及三者与患者切口感染严重程度之间的关系。结果术后3 d及术后5 d,感染组患者CD64指数以及血清IL-1β、TLR4水平均高于非感染组;术后3 d,感染组患者CD64指数、血清IL-1β及TLR4水平均较术前明显上升;术后5 d,感染组各指标均较术后3 d有所下降,但依旧高于术前水平,差异均具有统计学意义(P<0.05)。非感染组患者术前、术后3 d以及术后5 d CD64指数、IL-1β、TLR4水平差异均无统计学意义(P>0.05)。以术后3 d作为预测结直肠癌术后感染的时间点绘制各指标的ROC曲线,结果发现CD64指数、血清IL-1β、TLR4单独及三者联合应用预测结直肠癌术后感染的AUC^(ROC)分别为0.937、0.901、0.790及0.997(95%CI:0.992~1.000),各指标单独应用能较好地预测结直肠癌术后感染,三者联合应用的预测效能最高。结论外周血CD64指数、血清IL-1β、TLR4在预测结直肠癌术后切口感染中具有良好效能,三者联合应用的预测效能最高,可作为临床筛查术后感染的早期预测指标。

姜黄素调控TLR4/NF-κB和NRF2/HO-1信号通路改善草酸钙晶体诱导的小鼠肾损伤

目的探讨姜黄素(curcumin,CUR)对乙醛酸诱导的小鼠肾结石形成模型中肾损伤的保护作用及其机制。方法通过连续腹腔注射乙醛酸,建立小鼠肾结石形成模型。以一水草酸钙(calcium oxalate monohydrate,COM)诱导HK-2细胞作为体外模型。小鼠模型经CUR作用后,测定肾小管损伤、炎症细胞因子水平,研究CUR对小鼠肾结石的保护作用;CUR对COM诱导HK-2作用后,检测细胞活力及炎症因子;Western blot检测小鼠肾组织和HK-2细胞Toll样受体4(TLR4)/核因子κB(NF-κB)和核因子红血球相关因子2(NRF2)/血红素加氧酶1(HO-1)通路相关蛋白;为进一步探讨CUR对TLR4/NF-κB和NRF2/HO-1通路的调控作用,采用NRF2抑制剂ML385和TLR4激动剂CCL-34分别作用于COM诱导的HK-2细胞,以进行功能增益和功能丧失检测。结果CUR改善小鼠肾结石形成模型损伤,抑制炎症和抗氧化作用;促进COM诱导HK-2细胞的活力,抑制炎症因子的表达。CUR抑制TLR4/NF-κB通路中蛋白的表达,促使NRF2从细胞质转移到细胞核,并促进HO-1的表达。ML385和CCL-34分别抵消CUR对COM诱导HK-2细胞抗炎作用的影响。结论CUR通过调控小鼠肾结石形成模型TLR4/NF-κB和NRF2/HO-1通路改善肾损伤。

枸杞多糖对类风湿关节炎大鼠炎症反应及TLR4/NF-κB信号通路的影响

目的 研究枸杞多糖对类风湿关节炎(RA)大鼠炎症反应及Toll样受体(TLR)4/核因子(NF)-κB信号通路的影响。方法 采用Ⅱ型胶原联合完全弗氏佐剂诱导建立关节炎大鼠模型,并随机分为模型组、枸杞多糖低、高剂量组及氨甲蝶呤组,另设正常组(不建模),每组10只。枸杞多糖低、高剂量组灌胃200、400 mg/kg的枸杞多糖,氨甲蝶呤组灌胃3.8 mg/kg氨甲蝶呤,1次/d,持续28 d。记录足趾肿胀度、关节炎评分、机械性痛阈及热刺激缩足反射潜伏期,苏木素-伊红染色观察足关节滑膜组织病理,酶联免疫吸附试验及实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6含量及mRNA表达,Western印迹检测TLR4、髓样分化因子(MyD)88、磷酸化p-NF-κB蛋白表达。结果 与正常组比较,模型组足趾肿胀度、关节炎评分明显升高,机械性痛阈及热刺激缩足反射潜伏期明显降低,足关节滑膜组织病理形态明显,血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量明显增加,足关节滑膜组织TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA及TLR4、MyD88、p-NF-κB蛋白表达明显增加(P<0.01);与模型组比较,枸杞多糖低、高剂量组足趾肿胀度、关节炎评分明显降低(P<0.05,P<0.01),机械性痛阈及热刺激缩足反射潜伏期明显升高,足关节滑膜组织病理形态明显减轻,血清TNF-α、IL-1β、IL-6含量明显降低(P<0.01),足关节滑膜组织TNF-α、IL-1β、IL-6 mRNA及TLR4、MyD88、p-NF-κB蛋白表达明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论 枸杞多糖可通过抑制TLR4/NF-κB信号通路介导的炎症反应,改善RA症状。

高迁移率族蛋白B1和Toll样受体4轴与脓毒症患者发生ARDS的风险及其预后的关系

目的研究高迁移率族蛋白B1(HMGB1)和Toll样受体4(TLR4)轴与脓毒症患者发生急性呼吸窘迫综合征(ARDS)的风险及预后的关系。方法选择2022年6月至2023年10月期间我院收治的176例脓毒症患者,根据是否发生ARDS分为ARDS组(n=58)和非ARDS组(n=112),根据28 d生存情况评价预后。入院后24 h内采集静脉血并分离血清,检测HMGB1、TLR4、核转录因子-κB(NF-κB)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,比较两组患者临床资料及血清指标的差异,采用多因素Logistic回归分析脓毒症患者发生ARDS的影响因素,采用受试者工作特征曲线(ROC)分析脓毒症患者发生ARDS的诊断指标及预后预测指标。结果ARDS组年龄、C反应蛋白(CRP)、降钙素(PCT)、APACHEⅡ评分及血清HMGB1、TLR4、NF-κB、TNF-α含量均高于非ARDS组(t=3.007、4.423、7.413、8.069、16.955、9.072、4.751、8.569,P<0.05);HMGB1、TLR4、TNF-α和APACHEⅡ评分是脓毒症患者发生ARDS的影响因素(Waldχ^(2)=18.284、11.878、13.248、12.620,P<0.05);四项联合使用诊断和预后预测价值均优于单一指标。结论脓毒症ARDS患者的HMGB1及下游TLR4轴均处于过表达状态,血清HMGB1、TLR4、TNF-α和APACHEⅡ评分联用对脓毒症ARDS患者具有较好的诊断及预后评估价值。

三七对慢性肾衰竭大鼠Sortilin蛋白、Toll样受体及血管钙化的影响

目的 以Sortilin为切入点,探究慢性肾衰竭(CRF)血管钙化的机制,并探讨三七干预的影响,以期为临床降低CRF心血管事件提供有效的方法。方法 将36只雄性SD大鼠随机分为正常组、模型组、三七低、中、高剂量组、骨化三醇组,每组6只。采用腺嘌呤联合高磷饲料喂养复制CRF血管钙化大鼠模型。检测主动脉钙盐沉积,大鼠血清Scr、BUN、TG、TC、P、Ca,主动脉TLRs、Sortilin蛋白及炎症因子水平。结果 模型组大鼠肾纤维化明显,肾间质许多腺嘌呤结晶;大量钙盐沉积。各治疗组肾纤维化、钙盐沉积均有不同程度的减轻。与正常组比较,模型组大鼠血清BUN、Cr、P、TG、TC、IFN-γ、IL-6、IL-10、IL-17A含量明显升高(P <0.01),Ca含量明显降低(P <0.01)。与模型组比较,三七中、高剂量组和骨化三醇组大鼠血清BUN、Cr、P、TG、TC、IFN-γ、IL-6、IL-10、IL-17A含量明显降低(P <0.01),Ca含量明显升高(P <0.05或P <0.01)。与正常组比较,模型组大鼠主动脉组织BMP2、RUNX2、Sortilin、TLR7、TLR9蛋白的表达显著升高(P <0.01),SM22α蛋白的表达显著下降(P <0.01)。与模型组相比,三七低、中、高剂量组和骨化三醇组BMP2、RUNX2、Sortilin、TLR7、TLR9蛋白表达下降显著(P <0.01),SM22α蛋白表达显著上调(P <0.05或P <0.01),三七高剂量组和骨化三醇组效果更显著。结论 三七可改善CRF血管钙化模型大鼠的肾纤维化、血管钙化,其机制可能与调控Sortilin、TLRs的生物学功能有关。

射干制剂对失眠大鼠自主活动及TLR7/MyD88信号通路的影响

目的 探研射干制剂对PCPA致失眠大鼠自主活动、脑电波以及脑组织TLR7、MyD88基因表达的影响。方法 随机将70只健康SD大鼠分为空白对照组、模型对照组、射干制剂低剂量组(26 mg·kg^(-1))、射干制剂中剂量组(52 mg·kg^(-1))、射干制剂高剂量组(104 mg·kg^(-1))、朱砂安神丸组(1.62 g·kg^(-1))、地西泮片组(0.9 mg·kg^(-1))。荧光定量PCR检测各组TLR7、My D88基因的相对表达量;采用Etho Vision大小鼠行为学系统记录大鼠自主活动情况;通过无线遥测系统记录各组睡眠时脑电图。结果 与空白组对照比较,模型对照组脑组织TLR7、MyD88相对表达量显著升高(P<0.01);同模型对照组相比,射干制剂低剂量组、射干制剂中剂量组TLR7、MyD88的mRNA表达量均降低(P<0.05),射干制剂高剂量组TLR7、MyD88 mRNA表达量显著降低(P<0.01);与空白对照组相比,PCPA造模后大鼠运动量明显增加,不同剂量射干制剂组、朱砂安神丸组及地西泮片组运动有不同程度的减少,射干制剂高剂量组运动减少较为明显;给药120 min后,与空白对照组相比,模型对照组脑电波中的δ波百分比降低(P<0.05);与模型对照组相比,射干低中剂量组、朱砂安神丸组、地西泮片组δ波百分比均升高(P<0.05)。结论 射干制剂可有效抑制大鼠兴奋性,增加脑电图δ波百分比,改善睡眠,这些作用可能是通过调节脑组织TLR7和MyD88基因的表达来实现。

HMGB1基因敲除通过抑制TLR4/NF-κB通路减轻脓毒症小鼠急性肺损伤

目的 研究高迁移率族蛋白B1(HMGB1)基因敲除减轻脓毒症小鼠急性肺损伤及抑制Toll样受体4(TLR4)/核因子-κB(NF-κB)通路的作用。方法 野生型(WT)小鼠分为WT-Sham组和WT-模型组,HMGB1基因敲除(KO)小鼠分为KO-Sham组和KO-模型组。WT-模型组和KO-模型组采用盲肠结扎穿孔术制备脓毒症ALI模型,WT-Sham组和KO-Sham组进行假手术操作。造模后24 h,检测动脉血氧分压(PaO_(2)),计算氧合指数(OI),检测肺组织病理改变,计算肺损伤评分,检测血清及肺组织中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、活性氧簇(ROS)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)的浓度,肺组织中HMGB1、TLR4、核NF-κB的表达。结果 WT-模型组的PaO_(2)、OI、血清及肺组织SOD的浓度低于WT-Sham组,肺损伤评分、血清及肺组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、ROS、MDA的浓度、肺组织中HMGB1、TLR4、核NF-κB的表达水平高于WT-Sham组(P<0.05);KO-模型组肺组织中不表达HMGB1,PaO_(2)、OI、血清及肺组织SOD的浓度高于WT-模型组,肺损伤评分、血清及肺组织中TNF-α、IL-1β、IL-6、ROS、MDA的浓度、肺组织中TLR4、核NF-κB的表达水平低于WT-模型组(P<0.05)。结论敲除HMGB1减轻脓毒症小鼠ALI,相关的分子机制可能是抑制TLR4/NF-κB通路介导的炎症反应和氧化应激反应。

血清TLR4、TIMP-1水平与小儿热性惊厥临床特征的关系及对继发癫痫的预测价值

目的分析血清Toll样受体4(TLR4)、基质金属蛋白酶组织抑制剂(TIMP)-1水平与小儿热性惊厥(FC)临床特征的关系及对FC继发癫痫的预测价值。方法选取2019年1月至2022年6月320例FC患儿作为研究组,另选取同期发热无惊厥儿童150例作为发热组,体检健康儿童150例作为对照组。根据FC患儿是否继发癫痫分为癫痫组和无癫痫组。采用酶联免疫吸附试验检测血清TLR4、TIMP-1水平,采用Pearson相关分析TLR4、TIMP-1水平及与临床指标间的相关性。采用受试者工作特征(ROC)曲线分析血清TLR4、TIMP-1预测FC继发癫痫的价值。采用Logistic回归分析FC患儿继发癫痫的影响因素。结果FC患儿、发热无惊厥儿童、体检健康儿童血清TLR4、TIMP-1水平依次降低,且两两比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。研究组与发热组围生期异常发生情况、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、C-反应蛋白(CRP)、白细胞介素-1β(IL-1β)水平和振幅整合脑电图(AEEG)评分比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。癫痫组患儿血清TLR4、TIMP-1水平明显高于无癫痫组(P<0.05)。癫痫组和无癫痫组患儿首次惊厥次数、惊厥持续时间、首次惊厥前发热时间、围生期异常发生情况、TNF-α、CRP、IL-1β水平和AEEG评分比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。血清TLR4水平与TIMP-1呈正相关(P<0.05);血清TLR4、TIMP-1水平与TNF-α、CRP、IL-1β呈正相关(P<0.05),与AEEG评分呈负相关(P<0.05)。TLR4、TIMP-1联合预测FC患儿继发癫痫的曲线下面积(AUC)明显高于单项检测的AUC(Z_(TLR4-联合)=3.016,P=0.003;Z_(TIMP-1-联合)=2.232,P=0.026)。Logistic回归分析结果表明,TLR4、TIMP-1、TNF-α、CRP、IL-1β水平升高,AEEG评分降低均为FC继发癫痫的危险因素(P<0.05)。结论血清TLR4、TIMP-1与FC患儿临床特征密切相关,TLR4、TIMP-1可能是FC继发癫痫的影响因素。

黄芪甲苷对慢性间歇性缺氧诱导的遗尿症大鼠TLR4-p38 MAPK通路的影响

目的 探讨黄芪甲苷对慢性间歇性缺氧诱导的遗尿症大鼠Toll样受体4(Toll-like receptor-4,TLR4)/p38丝裂原活化蛋白激酶(p38 mitogen-activated protein kinase, p38 MAPK)信号通路的影响。方法 将SD大鼠随机分为对照组、模型组、黄芪甲苷低剂量组、黄芪甲苷中剂量组、黄芪甲苷高剂量组、去氨加压素组、脂多糖组、黄芪甲苷高剂量+脂多糖(Lipopolysaccharide, LPS)组,每组12只。除对照组外,其他组均需采用慢性间歇性缺氧诱导的方法构建遗尿症大鼠模型,各组大鼠每天于进入动物舱前1 h进行给药处理,1次/d,持续4周。末次处理24 h后,检测各组大鼠24 h排尿量及膀胱漏尿点压(bladder leak point pressures, BLPP)值的变化;ELISA法检测大鼠血清中抗利尿激素(antidiuretic hormone, ADH)含量;HE染色检测大鼠膀胱组织病理变化;比色法检测大鼠膀胱组织中超氧化物歧化酶(superoxide dismutase, SOD)活性、丙二醛(malonic dialdehyde, MDA)含量;Western blot检测大鼠膀胱组织中P2X3、TLR4、p-p38蛋白表达。结果 与对照组比较,模型组大鼠膀胱组织病理损伤严重,24 h排尿量增多,BLPP值变小,ADH含量、SOD活性降低,MDA含量和P2X3、TLR4、p-p38蛋白表达升高(P<0.05);与模型组比较,黄芪甲苷低剂量组、黄芪甲苷中剂量组、黄芪甲苷高剂量组、去氨加压素组大鼠膀胱组织病理损伤减轻,24 h排尿量减少,BLPP值变大,ADH含量、SOD活性升高,MDA含量和P2X3、TLR4、p-p38蛋白表达降低,LPS组大鼠膀胱组织病理损伤加剧,24 h排尿量增多,BLPP值变小,ADH含量、SOD活性降低,MDA含量和P2X3、TLR4、p-p38蛋白表达升高(P<0.05);与黄芪甲苷高剂量组比较,黄芪甲苷高剂量+LPS组大鼠膀胱组织病理损伤严重,24 h排尿量增多,BLPP值变小,ADH含量、SOD活性降低,MDA含量和P2X3、TLR4、p-p38蛋白表达升高(P<0.05)。结论 黄芪甲苷可能通过抑制TLR4/p38MAPK信号通路改善慢性间歇性缺氧诱导的大鼠遗尿症。

反复呼吸道感染患儿外周血单个核细胞中TLR2、TLR4表达情况与Th1/Th2免疫应答的关系

目的探讨反复呼吸道感染(RRTI)患儿外周血单个核细胞(PBMC)Toll样受体2(TLR2)、Toll样受体4(TLR4)表达情况与辅助性T细胞1(Th1)/辅助性T细胞2(Th2)免疫应答的关系。方法将2020年12月至2022年12月该院收治的65例确诊为RRTI的患儿纳入研究作为RRTI组。另选取同期于该院体检的健康儿童45例作为对照组。采用实时荧光定量PCR(qPCR)检测PBMC中TLR2和TLR4的信使核糖核酸(mRNA)相对表达水平。采用流式细胞仪检测PBMC中TLR2和TLR4蛋白表达率。采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆中Th1细胞因子干扰素-γ(IFN-γ)、Th2细胞因子白细胞介素-4(IL-4)水平及二者比值(IFN-γ/IL-4)。采用Pearson相关分析TLR2、TLR4蛋白表达率与血浆IFN-γ、IL-4水平的相关性。结果RRTI组血浆Th2细胞因子IL-4水平高于对照组,血浆Th1细胞因子IFN-γ水平低于对照组,IFN-γ/IL-4低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。RRTI组PBMC中TLR2和TLR4 mRNA相对表达水平及蛋白表达率均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析显示,RRTI患儿PBMC中TLR2和TLR4蛋白表达率与血浆IFN-γ水平及IFN-γ/IL-4均呈负相关(P<0.05),与血浆IL-4水平均呈正相关(P<0.05)。结论RRTI患儿PBMC中TLR2、TLR4的表达及血浆Th1/Th2细胞因子均可能参与疾病的发生、发展的过程。过度活化的TLR2和TLR4可能会使Th1功能减弱、Th2功能增强。

五味子乙素通过TLR4/NF-κB信号通路对急性胰腺炎大鼠肺部损伤的影响

目的:探讨五味子乙素通过Toll样受体4(TLR4)/核转录因子-κB(NF-κB)信号通路对急性胰腺炎(AP)大鼠肺部损伤的影响。方法:取SD大鼠,通过胆胰管内逆行注射5%牛磺胆酸钠方法诱导建立AP肺损伤模型,经随机数表法分为模型组、五味子乙素组、TLR4过表达载体组、TLR4空载组、五味子乙素+TLR4过表达载体组,每组12只大鼠,再取12只SD大鼠仅翻动肠管不注射5%牛磺胆酸钠,作为假手术组。以药物分别干预大鼠后,检测各组大鼠肺功能及各组大鼠腹水量与肺组织湿重/干重(W/D);HE染色检测各组大鼠肺组织病理形态并评分;检测各组大鼠动脉血气;全自动生化分析仪检测大鼠血清淀粉酶,ELISA检测炎症细胞因子IL-6、IL-18水平;蛋白免疫印迹法检测肺组织TLR4/NF-κB通路蛋白表达;免疫组织化学染色检测肺组织TLR4蛋白表达。结果:与假手术组相比,模型组大鼠肺组织出现病理损伤改变,模型组大鼠MV、PEF、PaO_(2)、OI显著降低(P<0.05),Ri、腹水量与W/D、PaCO_(2)、Holfbauer评分、血清淀粉酶、IL-6与IL-18水平、肺组织TLR4阳性细胞比例、TLR4与MYD88蛋白表达、p-NF-κB p65/NF-κB p65水平显著升高(P<0.05)。与模型组、五味子乙素+TLR4过表达载体组分别相比,五味子乙素组大鼠肺组织病理损伤改变程度均减轻,MV、PEF、PaO_(2)、OI均升高(P<0.05),Ri、腹水量与W/D、PaCO_(2)、Holfbauer评分、血清淀粉酶、IL-6与IL-18水平、肺组织TLR4阳性细胞比例、TLR4与MYD88蛋白表达、p-NF-κB p65/NF-κB p65水平均降低(P<0.05);TLR4过表达载体组大鼠肺组织病理损伤改变程度均加重,MV、PEF、PaO_(2)、OI均降低(P<0.05),Ri、腹水量与W/D、PaCO_(2)、Holfbauer评分、血清淀粉酶、IL-6与IL-18水平、肺组织TLR4阳性细胞比例、TLR4与MYD88蛋白表达、p-NF-κB p65/NF-κB p65水平均升高(P<0.05)。与模型组相比,TLR4空载组大鼠各指标差异无统计学意义(P>0.05)。结论:五味子乙素可通过下调TLR4/NF-κB信号通路,抑制炎症,减轻AP大鼠肺部损伤,修复肺功能。

室旁核H_(2)S通过TLR4/MyD88/NF-κB信号通路对盐敏感性高血压大鼠的影响

目的研究室旁核(PVN)硫化氢(H_(2)S)对高盐诱导的高血压大鼠Toll样受体4(TLR4)/髓样分化因子88(MyD88)/核转录因子κB(NF-κB)信号通路的影响,探讨H_(2)S降压的作用机制。方法选择40只成年雄性Dahl盐敏感性大鼠,鼠龄8周,体质量260~280 g。随机把大鼠分成正常对照组(Control组)、正常给药组(Control+GYY组)、高盐模型组(Model组)、高盐给药组(Model+GYY组),每组10只。于第4周末,利用微型渗透泵向Control+GYY组和Model+GYY组大鼠双侧PVN区域持续注射H_(2)S的缓释供体GYY4137,其余组大鼠全部注射等量人工脑脊液。连续注射6周后进行取材,通过酶联免疫吸附分析(ELISA)法来检测PVN H_(2)S及血浆去甲肾上腺素(NE)的水平,免疫荧光法检测TLR4、MyD88的表达,免疫组化法检测磷酸化核转录因子κB(p-NF-κB p65)、磷酸化κB抑制蛋白激酶β(p-IKKβ)的表达,通过Western blot法检测TLR4、MyD88、p-NF-κB p65/NF-κB p65的蛋白表达。结果Model组平均动脉压(MAP)、血浆NE较Control组升高(t=10.204、24.155、23.967、25.657、22.069、31.036、23.054、28.189,P<0.05),PVN中H_(2)S水平降低(t=14.348,P<0.05),Model+GYY组与Model组相比MAP、NE水平降低(t=8.295、12.931、10.992、16.064、12.228、16.017,P<0.05),PVN中H_(2)S水平升高(t=7.889,P<0.05)。免疫荧光或免疫组化结果显示,Model组PVN中TLR4、MyD88、pNF-κB p65、p-IKKβ因子的表达水平较Control组均升高(t=8.844、10.344、6.813、3.909,P<0.05),Model+GYY组与Model组相比PVN中TLR4、MyD88、p-NF-κB p65、p-IKKβ因子的表达水平均降低(t=4.719、4.313、3.234、4.955,P<0.05)。Western blot结果表明,与Control组相比,Model组大鼠PVN中TLR4、MyD88、p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达水平升高(t=15.951、6.537、7.394,P<0.05);与Model组大鼠相比,Model+GYY组TLR4、MyD88、p-NF-κB p65/NF-κB p65蛋白表达水平下降(t=9.415、4.901、8.997,P<0.05)。结论室旁核H_(2)S可明显降低高盐诱导的高血压大鼠的血压、降低外周交感神经活动,其机制可能与抑制TLR4/MyD88/NF-κB信号通路有关。

成人癫痫患者血清miR-146a、miR-125a、TLR4水平及临床意义

目的 探讨成人癫痫患者血清微小核糖核酸(miR)-146a、miR-125a、Toll样受体4(TLR4)水平及其与疾病严重程度的关系。方法 选取2020年8月至2023年8月新疆维吾尔自治区人民医院收治的69例癫痫患者作为癫痫组,另选取同期体检的69例健康人群作为对照组。采用实时荧光定量聚合酶链反应检测入组对象血清miR-146a、miR-125a水平,采用酶联免疫吸附试验检测血清TLR4、白细胞介素(IL)-1β、IL-2和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平。根据脑电图检测结果,将癫痫患者分为轻度组、中度组和重度组,并比较3组患者血清miR-146a、miR-125a、TLR4、IL-1β、IL-2和TNF-α水平。采用Pearson相关分析癫痫患者血清miR-146a、miR-125a、TLR4水平与IL-1β、IL-2、TNF-α水平的关系,采用Spearman相关分析癫痫患者血清miR-146a、miR-125a、TLR4水平与疾病严重程度的关系。结果 癫痫组血清miR-146a、miR-125a水平低于对照组,TLR4、IL-1β、IL-2和TNF-α水平高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。脑电图检测结果显示,轻度组、中度组及重度组分别有23、25和21例,3组患者血清miR-146a、miR-125a、TLR4、IL-1β、IL-2和TNF-α水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);且血清miR-146a、miR-125a水平均为轻度组>中度组>重度组,血清TLR4、IL-1β、IL-2和TNF-α水平均为轻度组<中度组<重度组,任意两组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson相关分析结果显示,癫痫患者血清miR-146a和miR-125a水平与IL-1β、IL-2、TNF-α水平呈负相关(P<0.05),TLR4水平与IL-1β、IL-2、TNF-α水平呈正相关(P<0.05)。Spearman相关分析结果显示,癫痫患者血清miR-146a和miR-125a水平与疾病严重程度呈负相关(P<0.05),TLR4水平与疾病严重程度呈正相关(P<0.05)。结论 成人癫痫患者血清miR-146a、miR-125a表达下调,TLR4表达上调,且三者与IL-1β、IL-2和TNF-α水平相关,可以评估癫痫患者疾病严重程度。

外周血TLR4和NLRP3表达与小儿肺炎支原体肺炎病情的相关性分析

目的研究外周血Toll样受体-4(TLR4)、NOD样受体蛋白3(NLRP3)表达与小儿肺炎支原体肺炎(MPP)病情的相关性。方法回顾性选取2023年1月至2023年12月入山西省儿童医院的92例MPP患儿为观察对象,设为观察组;同时选取同期入院体检的40名健康儿童设为对照组。参考病情严重程度将观察组患儿划分为重症组(n=35)与轻症组(n=57)。采集各组儿童的血样,对单个核细胞内NLRP3、TLR4相对表达量予以测定,同时对血清白细胞介素(IL)-18、IL-1β水平予以测定。分析MPP患儿NLRP3、TLR4表达水平与IL-18、IL-1β水平的相关性,以及采用受试者操作特征(ROC)曲线评估MPP病情评估中NLRP3、TLR4价值。结果观察组患儿的NLRP3、TLR4、IL-18、IL-1β水平分别为1.94±0.12、0.76±0.10、(179.78±16.31)pg/mL、(6.82±1.19)pg/mL,均明显高于对照组[1.66±0.10、0.60±0.05、(86.83±13.88)pg/mL、(4.41±1.17)pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。重症组患儿的NLRP3、TLR4、IL-18、IL-1β水平分别为2.18±0.19、0.89±0.11、(213.09±19.58)pg/mL、(8.59±1.34)pg/mL,均明显高于轻症组[1.69±0.13、0.68±0.09、(150.57±14.97)pg/mL、(4.97±1.09)pg/mL],差异均有统计学意义(P<0.05)。Pearson分析结果显示,MPP患儿IL-18、IL-1β随NLRP3、TLR4升高而上升,呈正相关(P<0.05)。ROC曲线显示,重症MPP预测中NLRP3、TLR4曲线下面积分别为0.993、0.949,预测价值均较好(P<0.05)。结论MPP患儿的IL-18、IL-1β、NLRP3、TLR4水平均明显上升,且NLRP3、TLR4水平随IL-18、IL-1β水平升高而上升,NLRP3、TLR4可作为MPP患儿病情进展预测的辅助因子。

miR-93靶向TLR4/NF-κB信号通路对动脉粥样硬化大鼠血管内皮炎症反应的影响

目的 探究微小核RNA(miR)-93对Toll样受体(TLR)4/核转录因子(NF)-κB的调控作用及对动脉粥样硬化(AS)大鼠血管内皮炎症反应的影响。方法 大鼠经高脂饲料喂养+腹腔注射维生素D3复制AS模型,随机分为正常对照组、模型组、miR-93模拟物(miR-93 agomir)组、agomir-NC组、RS09(TLR4激活剂)组、miR-93 agomir+RS09组,每组15只,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血脂[三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)]和炎症因子[白细胞介素(IL)-6、C反应蛋白(CRP)]水平;流式细胞术检测循环内皮细胞比例以评价血管内皮损伤状况;Movat染色观察动脉血管泡沫细胞聚集状况;油红O染色检测斑块面积;免疫组化法检测M1型巨噬细胞标记抗体(CD11)阳性表达水平;实时荧光定量-聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测miR-93表达;Western印迹法检测TLR4/核因子(NF)-κB通路蛋白、脂质沉积相关蛋白如三磷酸腺苷(ATP)结合盒转运体(ABC)A1、载脂蛋白(Apo)A1、巨噬细胞清道夫受体(ScR)-A、凝集素型氧化低密度脂蛋白受体(Lox)-1、M1型巨噬细胞极化相关蛋白[IL-1β、诱导型一氧化氮(iNOS)]、M2巨噬细胞极化相关蛋白[IL-10,几丁质酶-3样蛋白3(YM1)]表达。结果 与正常对照组相比,模型组动脉血管内膜增厚、泡沫细胞聚集及脂质沉积严重,斑块面积比例、IL-6、CRP、循环内皮细胞比例、TG、TC、LDL-C水平、TLR4/NF-κB通路活化介导的M1型巨噬细胞极化、炎症应答活性均明显升高,HDL-C、miR-93表达明显降低(P<0.05)。外源性上调miR-93,可明显促进脂质转运相关蛋白ABCA1及ApoA1表达,明显抑制TLR4/NF-κB通路活化介导的M1型巨噬细胞极化和炎症应答,缓解大鼠动脉血管内膜增厚、泡沫细胞聚集及脂质沉积,明显降低斑块面积及循环内皮细胞比例(P<0.05)。RS09可明显促进TLR4/NF-κB通路活化介导的M1型巨噬细胞极化和炎症应答,并可拮抗miR-93 agomir发挥的上述作用(P<0.05)。结论 外源性上调miR-93表达可能通过靶向抑制TLR4/NF-κB通路活化,发挥抗炎、抗M1型巨噬细胞极化、抗泡沫细胞聚集及抗脂质沉积作用,改善AS大鼠血管内皮损伤。

儿童反复呼吸道感染与多种血清标志物的关系研究

目的 探究儿童反复呼吸道感染(RRTIs)可能的影响因素。方法 选取2021年1月至2021年12月我院收治的RRTIs患儿88例作为研究组,采集出院时和补充伊可新等维生素滴剂胶囊1个月后血样,另选同期健康体检儿童90例作为对照组,采集血样。比较两组多种维生素、Toll样受体(TLRs)和炎症因子水平差异以及研究组干预前后的变化,分析影响儿童RRTIs发生的因素。结果 研究组儿童出院时维生素A、D和INF-γ水平较对照组低,TLR-2、TLR-4以及炎性因子水平高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。研究组治疗后维生素A、D和INF-γ水平较治疗前高,TLRs和炎性因子水平低于治疗前,差异有统计学意义(P<0.05)。Logistic回归分析结果表明,25-(OH)D3、维生素A、TLR-2、TLR-4、IL-4、IL-10、TNF-α水平低,INF-γ水平高是儿童发生RRTIs的独立影响因素。结论 儿童体内维生素A、维生素D的不足,TLR2、TLR4、IL-4、IL-10和TNF-α的升高,INF-γ的降低为RRTIs的独立危险因素。

甘草苷通过TLR4/IL-6信号通路改善癫痫幼鼠认知功能及海马神经元损伤

目的探讨甘草苷改善癫痫幼鼠认知功能、海马神经元损伤及对Toll样受体4(TLR4)/白细胞介素-6(IL-6)信号通路的调节作用。方法将60只幼鼠随机分为正常组、模型组、甘草苷组、激动剂组和激动剂+甘草苷组,每组12只。除正常组外,其余组幼鼠腹腔注射氯化锂-匹罗卡品建立癫痫模型。采用水迷宫实验检测幼鼠认知功能,酶联免疫吸附法检测血清IL-1β、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和高迁移率族蛋白B1(HMGB1)水平,苏木精-伊红染色法观察海马神经元组织病理形态,末端脱氧核苷酸转移酶介导的dUTP标记测定法检测海马神经元凋亡率,蛋白印迹法检测海马B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、TLR4、IL-6、IL-1β、TNF-α和HMGB1蛋白表达水平。结果模型组和激动剂组幼鼠海马神经元形态不规则,排列紊乱,细胞核固缩、碎裂,细胞数减少,甘草苷组和激动剂+甘草苷组幼鼠海马神经元损伤程度明显改善。与模型组比较,甘草苷组幼鼠逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增加,血清IL-1β、TNF-α和HMGB1表达水平,海马神经元凋亡率以及Bax、TLR4、IL-6、IL-1β、TNF-α和HMGB1蛋白表达水平均降低,Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.05);与激动剂组比较,激动剂+甘草苷组幼鼠逃避潜伏期缩短,穿越平台次数增加,血清IL-1β、TNF-α和HMGB1表达水平,海马神经元凋亡率以及Bax、TLR4、IL-6、IL-1β、TNF-α和HMGB1蛋白表达水平均降低,Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.05)。结论甘草苷可减轻癫痫幼鼠炎症反应,降低神经元损伤程度,改善认知功能和空间记忆能力。甘草苷可能是通过抑制TLR4/IL-6信号通路发挥作用。