Mechanism of multidrug resistance of human small cell lung cancer cell line H446/VP

Background Small cell lung cancer （SCLC） is the most aggressive form of lung cancer. This study aimed to investigate the mechanism of human small cell lung cancer cell line resistance to etoposide （VP-16）, H446NP. Methods The cell viability was measured by MTT assay. Immunocytochemistry, reverse transcription-polymerase chain reaction （RT-PCR） and Western blotting methods were used to detect the multidrug resistance gene （MDR1）, bcl-2, bax and the topoisomerase Ⅱ （TopoⅡ） expressions in H446 and H446NP cells after treated with or without VP-16. Results The 50% inhibition concentration （IC50） of VP-16 on H446 cells was 49 mg/L, and 836 mg/L was for H446NP cells. The expressions of MDR1 and bcl-2 were up-regulated, while the amounts of bax and Topo II were reduced in H446NP cells. After treated with 49 mg/L of VP-16, it showed that the drug could significantly inhibit bcl-2 and Topo fl expressions, and increase bax expression in H446 cells compared with that of H446NP cells. Conclusions The H446NP cell was stably resistant to VP-16. The decreased expression of Topo II was correlated with the H446NP multidrug resistance. The elevated expressions of MDR1, and the altered apoptotic pathways also played an important role in VP-16 induced multidrug resistance of SCLC.

P-gp和Topo-II在原发性肝癌中的表达及临床意义

目的研究多药耐药相关蛋白P-糖蛋白(gp)和拓扑异构酶II(Topo-II)在原发性肝癌组织中的表达及临床意义。方法采用免疫组化S-P法检测49例原发性肝癌组织P-gp和Topo-II的表达。结果P-gp和Topo-II在原发性肝癌中阳性表达率分别为61.22%(30/49)和32.65%(16/49),P-gp主要在细胞膜和细胞浆中表达,Topo-II在细胞核内表达,P-gp和Topo-II表达与Edmonson分级有关,Topo-II还与转移有关。P-gp、Topo-II在原发性肝癌中表达呈负相关(P<0.05)。结论肝癌组织P-gp和Topo-II表达可能是肝癌对化疗不敏感的原因之一。

核基质成分-拓扑异构酶II与肿瘤耐药

DNA拓扑异构酶 (topoisomerase ,Topo)是核基质成分之一 ,是一种调整DNA拓扑结构的核酶 ,在DNA的复制和转录过程中发挥着重要作用 ,故而成为许多抗肿瘤化疗药物的靶。针对TopoII的抗肿瘤化疗药物同样面临着耐药问题。

鸦胆子油乳具有多药耐药逆转和拓扑异构酶Ⅱ抑制作用

目的 研究鸦胆子油乳体外对多药耐药细胞株的作用和对拓扑异构酶 (topoisomerase ,TOPO)活性的影响。 方法 MTT法测定鸦胆子油乳体外对敏感和耐药细胞株的杀伤作用 ;TOPOⅠ介导的负超螺旋 pBR3 2 2解旋反应和TOPOⅡ介导的kDNA去连环反应检测鸦胆子油乳对TOPOⅠ和TOPOⅡ催化活性的影响。结果 鸦胆子油乳浓度为 0 0 2 5g·L-1时能在一定程度上逆转K5 62 /A0 2、MCF 7/ADM和KB/VCR等细胞的耐药性。鸦胆子油乳能抑制TOPOⅡ介导的kDNA去连环作用 ,浓度为 0 3 1g·L-1时鸦胆子油乳可部分抑制TOPOⅡ酶活力 ,浓度为 2 5g·L-1则完全抑制TOPOⅡ酶活力 ;对TOPOⅠ介导的pBR3 2 2解旋作用无影响 ,对DNA也无直接作用。结论 鸦胆子油乳对多药耐药有一定的逆转作用 ,并能明显抑制TOPOⅡ的活性。

耐药相关基因在非小细胞肺癌组织中的表达及其意义

目的:探讨耐药相关基因在非小细胞肺癌(NSCLC)组织中的表达及其临床意义。方法:应用免疫组化技术检测治疗前肺癌组织标本中P-gp、MRP、LRP、GST-π和TopoII表达。结果:58例治疗前NSCLC中P-gp、MRP、LRP、GST-π和TopoII阳性率分别为96.55%,67.24%,75.86%,65.52%,98.28%,并有部分共表达。癌旁正常肺组织呈阴性或弱阳性表达。性别、有无吸烟史、有无淋巴结转移及在TNM各分期中P-gp、MRP、LRP、GST-π和TopoII阳性表达无明显差异(P>0.05)。比较腺癌组与鳞癌组,MRP、LRP、GST-π阳性表达有显著性差异(P<0.05),而P-gp、TopoII阳性表达无明显差异(P>0.05);MRP、LRP、P-gp、GST-π共表达有显著性差异(字2=21.662,P<0.001);低分化腺癌、鳞癌与中、高分化腺癌、鳞癌P-gp、MRP、LRP、GST-π和TopoII阳性表达无明显差异(P>0.05)。结论:肺癌耐药为一多途径多基因参与的过程,肺腺癌原发的多药耐药机率较肺鳞癌高,联合检测肺癌组织中耐药相关基因的表达有助于判断化疗疗效及预后。

乳腺癌原发灶及淋巴结转移灶中P-gp、GST-π、TopoⅡ的表达及临床意义

目的探讨乳腺癌原发灶和淋巴结转移灶中P-gp、GST-π、TopoⅡ的表达及相关性。方法选择2005年1～12月所有在我科行手术治疗的乳腺癌患者70例,其中有腋下淋巴结转移的36例,无腋下淋巴结转移的34例,用免疫组化SP法检测原发灶和淋巴结转移灶P-gp、GST-π、TopoⅡ的表达。结果(1)有腋下淋巴结转移的乳腺癌中P-gp、GST-π的表达高于无腋下淋巴结转移的乳腺癌(P=0.043、P=0.012),TopoⅡ的表达两者间差异无统计学意义。(2)乳腺癌原发灶和淋巴结转移灶的GST-π、TopoⅡ表达有相关性(P=0.001、P=0.01),P-gp的表达无相关性。结论(1)P-gp、GST-π高表达与腋下淋巴结转移显著相关。(2)乳腺癌原发灶与淋巴结转移灶的耐药性不尽一致。

阿霉素在小鼠体内诱导S－180细胞株抗药性的实验研究

利用ＢＡＢＬ／ｃ小鼠，腹腔接种Ｓ－１８０瘤细胞，阿霉素腹腔注射治疗１５个周期培育传代，得到抗阿霉素的Ｓ－１８０细胞株（Ｓ－１８０Ｒ）。此抗药细胞对阿霉素的抗药性比亲本细胞提高６６倍。对典型的ＤＮＡ拓扑异构酶Ⅱ抑制刻ＶＰ１６（Ｅｔｏｐｏｓｉｄｅ）抗药性增加９倍。经免疫组化进一步证实，抗药细胞显示多药抗药基因（ＭＤＲｇｅｎｅ）产物Ｐ－１７０糖蛋白过表达。流式萤光细胞仪测试结果也表明抗药细胞比亲本细胞排出药物能力提高８９倍。可以肯定这是ＭＤＲ基因过表达产物所致。本工作为筛选有效逆转抗药功能的药物及其他治疗手段提供了有用的动物模型。

植物生物碱抗肿瘤机制(英文)

生物碱中的一些种类用于治疗癌症已有相当长的一段时间。回顾了近年来在分子、细胞及生理水平上这些生物碱抗肿瘤的作用机制 ,包括长春花生物碱类、喜树碱、秋水仙碱、玫瑰树碱等。

原发性肝细胞癌中P-gp、TopoⅡα和P53的表达及意义

目的研究原发性肝细胞癌(pri mary hepatocellular carcinoma,PHC)组织中多药耐药基因P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)、拓扑异构酶Ⅱα(topoisomeraseⅡalpha,TopoⅡα)和P53的表达及共表达情况,分析其表达与PHC临床特征的关系。方法采用免疫组织化学SP法检测P-gp、TopoⅡα和P53的表达,并结合临床特征进行分析。结果 P-gp、TopoⅡα和P53阳性表达率分别为80.74%(109/135)、46.67%(63/135)和33.33%(45/135),P-gp阳性率明显高于TopoⅡα、P53(P=0.000),TopoⅡα阳性率高于P53(P<0.05)。P-gp阳性率与患者年龄、肿瘤细胞分化程度、肿瘤大小有关,患者血清AFP升高者P-gp、TopoⅡα阳性率均高于AFP正常者(P<0.05),血清AST升高者P-gp、P53阳性率均高于AST正常者(P<0.05)。TopoⅡα和P53阳性率与患者年龄、肿瘤细胞分化程度、肿瘤大小无关(P>0.05)。两种和三种基因产物共表达阳性率为51.85%(70/135),明显高于单一基因产物表达阳性率34.07%(χ2=8.706,P<0.01)。结论肝癌多药耐药是由多种耐药基因产物共同作用的结果,单基因和多基因共同作用,以多基因共表达为主。联合检测肝癌患者的多药耐药基因产物,对于临床合理用药、提高化疗疗效具有指导意义。

原发性肝癌中多药耐药蛋白谷胱甘肽转移酶及拓扑异构酶Ⅱ的表达与临床病理指标的相关性

目的探讨原发性肝癌中谷胱甘肽转移酶(GST-π)及拓扑异构酶Ⅱ(Topo-Ⅱ)的表达与临床病理指标的相关性及其临床意义。方法采用免疫组织化学法检测GST-π及Topo-Ⅱ在原发性肝癌患者病理组织中的表达情况,分析GST-π及Topo-Ⅱ阳性表达与临床病理指标之间的关系,评价其临床意义。结果原发性肝癌患者肝癌组织中GST-π的阳性表达与术前甲胎蛋白水平、肿瘤直径、有无癌栓及肿瘤包膜是否完整相关(P<0.05),与患者年龄、肿瘤淋巴结转移(TNM)分期及病灶个数无关(P>0.05);Topo-Ⅱ的阳性表达与患者术前甲胎蛋白水平、肿瘤直径、TNM分期、有无癌栓及肿瘤包膜是否完整相关(P<0.05),与患者年龄及病灶个数无关(P>0.05)。结论 GST-π及Topo-Ⅱ阳性表达与肝癌患者临床病理指标密切相关,可作为判断肝癌患者预后的客观评价指标。

多药耐药相关基因在胃癌组织中的表达及意义

[目的]研究多药耐药相关基因产物P 糖蛋白(Pgp)、DNA拓朴异构酶Ⅱ(TopoⅡ)在胃癌组织中的表达及其意义。[方法]应用SP免疫组化方法 ,检测两者在101例胃癌及40例胃周阳性转移淋巴结、20例正常胃粘膜、18例异型增生组织中的表达。[结果]正常胃粘膜、异型增生及未经术前化疗的胃癌中Pgp表达强度依次增强 ;化疗导致胃癌Pgp表达增强并与化疗次数有关 ;Pgp表达强度与胃癌浸润深度、淋巴结转移及pTNM分期显著相关 ;Pgp表达水平与胃癌预后有关 ,Pgp高水平表达者预后较差。正常胃粘膜、异型增生及未经化疗的胃癌中TopoⅡ指数(TI)依次增高 ;化疗导致TI下降并与化疗次数有关 ;胃周阳性转移淋巴结中TI较癌原发灶为低。

耐药基因相关蛋白在非小细胞肺癌组织中的表达及其临床意义

背景与目的肿瘤的多药耐药是肺癌化疗失败和导致患者死亡的重要原因之一。本研究的目的是探讨P糖蛋白(Pgp)、多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药蛋白(LRP)、拓扑异构酶Ⅱ(TopoⅡ)、谷胱甘肽S转移酶π(GSTπ)在肺癌中的表达及其临床意义。方法采用免疫组织化学染色链亲和素生物素过氧化物酶法(streptavidin-biotin immunoperoxidase,SP)检测98例非小细胞肺癌组织中5种耐药蛋白的表达。结果Pgp、MRP、LRP、TopoⅡ、GSTπ的阳性表达率分别为27.6%、11.2%、75.5%、50.0%和64.3%。LRP、TopoⅡ在鳞癌、腺癌、腺鳞癌间的表达有显著性差异(P<0.05)。5种耐药蛋白的表达与临床分期无明显关系(P>0.05)。47例接受化疗的非小细胞肺癌患者中,Pgp、LRP、GSTπ的表达与化疗疗效有密切关系(P<0.05)。结论肺癌的耐药由多种耐药蛋白介导,联合检测肺癌组织中耐药蛋白的表达有助于选择合理的化疗方案及判断化疗疗效。

P-gp和TopoⅡ在中国胃癌患者中的表达及其临床意义

目的:评价P-gp和TopoⅡ过表达与胃癌患者临床病理参数间的相关性及其临床意义.方法:收集2006-01/2009-08在中国人民解放军南京军区福州总医院手术切除的胃癌组织标本1107例,采用EliVisionTM plus免疫组织化学染色方法检测其中临床资料完整的775例胃腺癌标本中P-gp和TopoⅡ蛋白的表达.结果:P-gp和TopoⅡ在胃癌组织中阳性表达率分别为52.39%(406/775)、58.45%(453/775);P-gp蛋白表达与患者性别、年龄、肿瘤部位、组织类型、分化程度及远处转移无相关性(P>0.05),而与浸润深度、TNM分期、淋巴结转移相关(P<0.05);TopoⅡ蛋白表达与患者性别、TNM分期、远处转移无相关性(P>0.05),而与年龄、肿瘤部位、浸润深度、组织类型、分化程度及淋巴结转移相关(P<0.05).结论:P-gp和TopoⅡ可以作为评估胃癌恶性生物学行为及预后的指标,并为临床选择化疗药物提供参考依据.

PHⅡ-7对人乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR体外杀伤活性和逆转耐药作用

背景与目的:多药耐药(multidrug resistance,MDR)是恶性乳腺癌化疗失败的主要原因,而ABC转运蛋白家族的P-glycoprotein(P-gp)高表达是MDR的主要机制之一。因此研制能抑制P-gp表达及其功能的新型抗癌药是目前研究的热点。本研究旨在研究PHⅡ-7对人乳腺癌多药耐药细胞MCF-7/ADR体外抗瘤活性及逆转耐药的作用。方法:采用MTT法检测PHⅡ-7、多柔比星(adriamycin,ADR)及二者联合应用对人乳腺癌细胞MCF-7和耐药细胞株MCF-7/ADR的IC50值;采用流式细胞仪测定PHⅡ-7对MCF-7及MCF-7/ADR细胞凋亡的诱导作用;采用逆转录PCR和实时荧光定量PCR方法检测PHⅡ-7对多药耐药基因1(multidrug resistance gene1,mdr1)表达水平的影响;通过流式细胞仪观察PHⅡ-7处理前后,MCF-7/ADR细胞内Rhodamine123浓度的改变,分析PHⅡ-7对P-gp外排功能的影响。结果:PHⅡ-7对MCF-7和MCF-7/ADR细胞均有生长抑制作用,IC50值分别为(6.07±0.85)和(5.51±1.22)μmol/L;低浓度PHⅡ-7与ADR联合应用能增强其细胞毒作用,二者具有协同作用。PHⅡ-7可诱导MCF-7和MCF-7/ADR细胞凋亡;在诱导凋亡过程中,PHⅡ-7可降低MCF-7/ADR细胞内mdr1基因的表达,抑制P-gp外排功能。结论:PHⅡ-7可诱导MCF-7/ADR凋亡,并具有对MCF-7相同的体外杀伤活性。PHⅡ-7可通过抑制P-gp的表达和功能逆转MCF-7/ADR耐药性。

人膀胱癌非经典型多药耐受性研究

目的：为了建立人膀胱癌耐阿霉素细胞系并研究它们的生物学特性及药物耐受性的机理。方法：采用人膀胱癌细胞系EJ，经递增阿霉素剂量的方法，历时1年，建立一株耐药亚株EJ／DOR，对其生物学特性及耐药机理进行了研究，并应用反转录PCR检测了MDR1、MRP和DNA TopoⅡ基因的表达。结果：EJ／DOR对阿霉素的相对耐受度较亲本细胞提高了14．3倍；对蒽环类、长春花属生物碱及DNA TopoⅡ靶制剂足叶乙甙有明显的交叉耐药性，但对顺铂、丝裂霉素无明显的交叉耐受性；耐药细胞对柔红霉素的细胞内聚集量显著减少；EJ／DOR并不表达MDR1基因，而MRP基因过表达，但细胞内DNA TopoⅡ基因表达低于亲本细胞。结论：细胞内DNA TopoⅡ基因表达下降及MRP基因过表达是EJ／DOR表现为多药耐受性亚型的主要原因，这种非P－gp介导的非经典型多药耐受性细胞为寻求包括阿霉素在内的化疗方案提供了良好的实验模型。

乳腺癌组织多药耐药类蛋白表达与化疗耐药关系

目的 了解多药耐药相关类蛋白P 糖蛋白 (P gp)、谷胱甘肽 S 转移酶 π(GST π)、DNA拓扑异构酶 Ⅱα(Topo Ⅱα)在乳腺癌化疗耐药机制中的作用及相互间关系。方法 用免疫组化S P法对 91例未经抗肿瘤治疗的原发性乳腺癌和 18例术后经化疗复治乳腺癌组织检测P gp、GST π、Topo Ⅱα蛋白表达。结果 (1)P gp在原发性乳腺癌中阳性表达率为 40 %,术后经化疗复治乳腺癌中阳性表达率为 6 1%。两组P gp表达率差异有显著性 (P <0 0 5 )。 (2 )GST π和P gp在乳腺癌组织表达正相关 (P <0 0 5 )。 (3)原发性乳腺癌Topo Ⅱα表达水平与一些提示预后差的临床病理特征明显相关 (P <0 0 5 )。术后经化疗复治乳腺癌中阳性表达率为 17%,与原发癌相比显著降低 (P <0 0 5 )。结论 乳腺癌耐药是多因素参与的复杂过程 ,P gp、GST π、TopoⅡα均参与其化疗耐药性形成。化疗后的复治乳腺癌比初治原发癌具有更普遍的耐药性。TopoⅡα水平可作为评价乳腺癌恶性度的指标。

人膀胱癌耐药细胞中TopoⅡ基因的表达

目的 :研究DNA拓扑异构酶Ⅱ (TopoⅡ )基因在人膀胱癌多药耐药细胞中的表达状况。方法 :应用MTT法检测人膀胱癌耐药细胞系 (BIU 87 ADM)的耐药性 ;应用逆转录聚合酶链式反应 (RT PCR)分别对BIU 87 ADM及敏感细胞系 (BIU 87)中TopoⅡ基因进行检测。结果 :BIU 87 ADM细胞对阿霉素的耐药性为BIU 87细胞的 5 6 .4倍 ;TopoⅡ基因表达在BIU 87 ADM细胞中呈弱阳性 ,而在BIU 87细胞中呈强阳性。结论 :TopoⅡ基因在人膀胱癌耐药细胞中表达的降低 。

Topo-Ⅱ蛋白与p53蛋白在非小细胞肺癌耐药性中的表达

目的检测非小细胞肺癌(NSCLC)中Topo-II蛋白与p53蛋白的表达,分析NSCLC化学治疗耐药性与二者表达的关系,探讨Topo-II蛋白与p53蛋白在介导NSCLC耐药中的意义。方法应用单核细胞直接细胞毒性测定法对40例NSCLC组织进行体外药物敏感试验,观察对紫杉醇、阿霉素、顺铂+吉西他滨3种用药方案的耐药情况,并用免疫组织化学方法对其进行Topo-II蛋白和p53蛋白表达的检测,并将其表达情况与对应的化学治疗耐药性进行相关性分析。结果 21例(52.5%)对紫杉醇耐药,23例(57.5%)对阿霉素耐药,12例(30.0%)对顺铂+吉西他滨耐药。其中7例(17.5%)对3种用药均敏感,11例(27.5%)对3种用药均耐药。Topo-II蛋白和p53蛋白阳性表达与分化程度无关(P>0.05);Topo-II蛋白阳性表达与组织学类型无关(P>0.05),p53蛋白在腺癌中的阳性表达高于其他组织学类型(P<0.05);Topo-II蛋白表达与3种用药方案耐药性负相关(P<0.05);p53蛋白表达与3种用药方案耐药性正相关(P<0.05);NSCLC中p53蛋白表达与Topo-II蛋白表达正相关(P<0.05)。结论 Topo-II蛋白与p53蛋白均介导了NSCLC多药耐药。

食管癌组织中P53、P-gp等蛋白的表达

目的检测食管癌组织中P53、多药耐药基因(mu ltidrug resistance gene1,MDR1)及其编码产物P-糖蛋白(p-glycoprote in,P-gp)、肺耐药蛋白(lung resistance prote in,LRP)、谷胱甘肽S-转移酶(glutath ione S-transferase,GST-π)、拓扑异构酶(topoisom eraseⅡ,TopoⅡ)的表达水平,探讨其与临床分期、分化程度、淋巴结转移、肿瘤浸润深度及病理分型的关系。方法采用免疫组织化学技术检测P53、MDR1、LRP、GST-π、TopoⅡ基因的表达水平。结果66例标本中,P53、MDR1、LRP、GST-π、TopoⅡ基因阳性表达率分别为65.2%(43/66)、97.0%(64/66)、84.8%(56/66)、60.6%(40/66)、37.9%(25/66)。食管癌不同组织学分级的TOPOⅡ表达率不同,高分化的表达率高于中低分化者,但不具显著性差异(P=0.05)。LRP的阳性表达率在不同浸润深度之间有显著性差异。P-gp的阳性表达率在溃疡型食管鳞状细胞癌中明显高于其他两种类型,有显著性差异,P=0.003。结论食管癌组织中P53、MDR1、LRP、GST-π、TopoⅡ基因存在高表达;肿瘤组织分化越高,TopoⅡ表达率越高;肿瘤浸润越深,LRP阳性表达率越高。这些检测对临床化疗药物选择可起一定指导作用。

耐药相关蛋白在肺癌组织中的表达及意义

目的 探讨耐药相关蛋白在肺癌组织中的表达及意义。方法 应用免疫组化法检测治疗前 90例肺癌组织标本中 P-糖蛋白 (P- gp)、多药耐药相关蛋白 (MRP)、肺耐药蛋白 (L RP)、谷胱苷肽 S转移酶 (GST- π)、DNA拓扑异构酶 (Topo- )蛋白的表达 ;流式细胞术检测肺癌组织增值指数 (PI)、DNA指数 (DI)及细胞周期各时相分布。结果 非小细胞癌 (NSCL C组 ) P- gp、L RP表达明显高于小细胞癌 (SCL C)组 (P <0 .0 5 ) ,MRP+L RP共表达者高于 SCL C组 (P <0 .0 5 ) ;中、高分化癌组 P- gp、L RP表达高于 SCL C组 (P <0 .0 5 ) ,MRP表达高于低分化癌组 (P <0 .0 5 ) ;腺癌组 MRP、L RP、MRP+L RP、MRP+L RP+GST- π、MRP+L RP+P- gp+GST-π表达高于鳞癌组、SCL C组、低分化癌组 (P <0 .0 5 ) ,MRP+GST- π共表达者高于鳞癌组、低分化癌组 (P <0 .0 1)。P- gp与 Topo 蛋白表达呈正相关 (P <0 .0 5 )。MRP与肺癌组织增殖指数 (PI)、G2 / M期细胞比例呈正相关 (P <0 .0 5 ) ,与 G0 / G1 期细胞比例呈负相关 (P <0 .0 5 )。结论 联检肺癌组织中耐药相关基因蛋白的表达有助于判断化疗疗效及预后。 P- gp、L RP、MRP、GST-π可作为判断肺癌细胞原发性耐药的指标。