小麦不同器官总RNA含量及提取方法的比较研究

采用4种方法分别对小麦幼叶、幼茎、幼根及乳熟期籽粒的总RNA进行了提取和分析.结果表明,4种方法所提取的总RNA均能满足一般的下游操作,其中TRIzol法提取的总RNA产量最高,用该法提取的小麦叶片总RNA产量为其他方法的2～4倍;天为时代试剂盒提取时间短,可在常温下操作;而醋酸钠/乙醇沉淀法具有提取步骤少、操作时间短、可用于大量样品提取且价格便宜等优点,适于小麦不同器官的总RNA提取;经紫外分光光度计检测,各样品总RNA的A260/A280均在1.88～2.09,表明所提取的总RNA中没有蛋白质及其他有机溶剂的污染,且A260/A230在1.89～2.41,表明盐类小分子的污染也较少,所提取的总RNA质量较高.除了细胞质rRNA外,小麦中还存在叶绿体rRNA,且叶绿体rRNA占总rRNA的比例较高,在甲醛变性琼脂糖凝胶电泳时,幼叶、幼茎比幼根明显多出2条带.

高温胁迫下半夏叶片总RNA变化及mRNA差异表达的研究

目的:分析半夏高温倒苗过程中总RNA及mRNA差异表达的变化规律,为研究半夏高温倒苗的分子机制提供了信息。方法:经过不同时间的高温胁迫处理,测定半夏叶片总RNA含量变化和mRNA表达的差异。结果:半夏叶片总RNA的含量变化分为3个降低阶段和2个升高阶段,胁迫0,6 h时含量最高,胁迫4,42 h和倒苗时含量最低,差异显示表明胁迫6h的样品条带多态性和带型与0 h的接近,其余胁迫时间的样品条带远少于0,6 h时的样品条带,并且在不同的样品之间均有mRNA差异条带出现。结论:在半夏经高温胁迫而倒苗的过程中,基因表达开启与关闭和基因表达增强与减弱模式具有一定的规律,并且可能启动了不同的基因表达系统。