豹皮樟总黄酮对大鼠非酒精性脂肪性肝炎的防治作用

目的研究豹皮樟总黄酮(TFLC)对大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)的防治作用。方法SD大鼠48只,随机分为6组(n=8):对照组、模型组、烟酸组及TFLC组(50、100、200 mg.kg-1)。除对照组外,其余各组每天给予脂肪乳剂和相应药物。实验开始后3 d收集72 h的粪便,测定粪便中脂质;于1 wk后断尾取血,测定血清脂质;3 wk后处死动物,测定血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST)、丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)和肝匀浆TG、TC、MDA、SOD,并行肝脏病理学检查。结果模型组大鼠出现NASH,烟酸组及TFLC组(100、200 mg.kg-1)均能降低血清和肝脏TG,肝脂肪变性程度和炎症均明显减轻;TFLC组(200 mg.kg-1)还能降低血清和肝MDA,提高肝组织SOD活性。结论TFLC可以降低大鼠血和肝组织TG,且能改善NASH大鼠脂肪变,减轻炎症反应。其机制可能是:TFLC抑制TG在肠道的吸收,同时减轻脂质过氧化。

豹皮樟总黄酮调控瘦素、TGF-β1对肝纤维化大鼠的预防作用研究

目的研究豹皮樟总黄酮(TFLC)调控瘦素(leptin)和转化生长因子-β1(TGF-β1)对肝纤维化大鼠的预防作用。方法采用CCl4诱导大鼠肝纤维化模型,TFLC灌胃给药第12周末,检测ALT、AST及HA、LN、PⅢNP、CⅣ含量;检测Ⅰ型胶原(CollagenⅠ)、瘦素、TGF-β1的含量;检测Hyp及组织病理变化;检测瘦素受体(OB-Rb)、TGFβ1Ⅰ型受体(TGFβR1)、Smad3 mRNA及蛋白表达。结果 TFLC(200、400 g.L-1)能明显降低肝纤维化大鼠肝纤维化指标及血清Ⅰ型胶原、瘦素、TGF-β1水平;降低Ob-Rb、TGFβR1、Smad3的mRNA及蛋白表达。结论 TFLC能有效预防CCl4诱导的大鼠肝纤维化,可能与下调肝内瘦素及其受体,抑制TGF-β1/Smad通路有关。

老鹰茶正丁醇部分的化学成分

目的对樟科植物老鹰茶叶醇提取物中正丁醇部分的化学成分进行研究。方法老鹰茶经70%乙醇提取,再经石油醚、氯仿、乙酸乙酯和正丁醇依次萃取,正丁醇部分用大孔树脂、硅胶、Sephadex LH-20以及制备高效液相色谱法等进行分离纯化,通过1H-NMR、13C-NMR、MS等方法鉴定化合物的结构。结果从老鹰茶叶的正丁醇部分分离得到7个化合物,分别鉴定为原儿茶酸、山奈酚-3-O-β-D-(6-O-trans-p-香豆酰基)吡喃葡萄糖苷、山奈酚-3-O-β-D-(6-O-trans-p-香豆酰基)吡喃甘露糖苷、山奈酚-3-O-α-L-鼠李糖苷、反式香豆酸、邻苯二甲酸二正丁酯、水杨酸。结论这7种化合物均为首次从该植物中分离得到。

老鹰茶总黄酮的提取工艺及抗氧化活性研究

以老鹰茶为原料,槲皮素为对照品,总黄酮含量为考核指标,研究了老鹰茶总黄酮的水浴提取工艺,同时对总黄酮提取物的抗氧化活性进行了探讨。在提取温度、时间、溶剂浓度、料液比等单因素的基础上,通过正交实验,确定老鹰茶总黄酮的最佳工艺条件为:提取温度60℃,提取时间90min,乙醇浓度70%,液固比35∶1。在此条件下,测得的老鹰茶总黄酮得率为6.190%(以槲皮素计)。老鹰茶总黄酮的抗氧化活性结果表明,老鹰茶总黄酮对DPPH自由基具有较强的清除活性,其EC50值为18.17μg/mL;老鹰茶总黄酮具有较强的还原能力,其EC50值为77.52μg/mL。老鹰茶总黄酮具有较强的抗氧化活性,是一种潜在的具有抗氧化功能食品原料。

豹皮樟总黄酮对高脂血症大鼠胰岛素抵抗的改善作用及其机制研究

目的:观察豹皮樟总黄酮对高脂血症大鼠胰岛素抵抗的改善作用,并初步探讨其作用机制。方法:以高脂乳剂灌胃制备高脂血症大鼠胰岛素抵抗模型,观察豹皮樟总黄酮对大鼠糖耐量受损(IGT)、空腹血清血糖(FSG)、血胰岛素含量(FINS)、血脂、血清游离脂肪酸(FFA)和血清瘦素(Leptin)水平的影响,并计算胰岛素敏感指数(ISI)。结果:豹皮樟总黄酮能改善高脂血症致胰岛素抵抗大鼠的IGT状态,显著降低高脂血症大鼠FSG及FINS水平,使胰岛素敏感指数升高,并能显著降低模型大鼠TC、TG、LDL-C、FFA及Leptin水平,并显著提高HDL-C含量。结论:豹皮樟总黄酮具有较好的增加胰岛素敏感性及改善胰岛素抵抗的作用,其机制与调节脂质代谢及显著降低血清Leptin水平有关。

豹皮樟总黄酮降低2型糖尿病大鼠血糖的可能机制研究

目的探讨豹皮樟总黄酮降低2型糖尿病(T2DM)大鼠血糖的可能机制。方法 T2DM大鼠给予豹皮樟总黄酮(total flavonoids of litsea coreana,TFLC,400mg/kg)或阳性对照药二甲双胍(MET,400mg/kg)灌胃治疗6周。各组大鼠空腹血清作常规生化指标测定,肝脏作HE染色和透射电镜观察;肝匀浆作丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)分析;RT-PCR检测大鼠肝脏中蛋白酪氨酸磷酸酶1B(protein tyrosine phosphatase 1B,PTP1B)的表达。结果糖尿病大鼠经TFLC或MET治疗后葡萄糖耐量明显改善,空腹血糖(FBG)、糖化血红蛋白(HbA1c)、胰岛素(FINS)、游离脂肪酸(FFA)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)和低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)显著下降,高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)明显增加,肝匀浆MDA含量下降,SOD活性升高,2个治疗组的各指标之间差异无统计学意义。光镜下T2DM组肝脏有明显的脂肪变性,电镜下肝脏线粒体肿胀,内质网断裂,TFLC组和MET组均有不同程度的改善。T2DM组肝脏中PTP1B的表达明显升高,TFLC组PTP1B表达显著降低,MET组PTP1B的表达无明显改变。结论 TFLC可明显降低血糖和血脂,减轻肝脏组织的氧化应激,其改善胰岛素抵抗,可能与其降低T2DM大鼠肝脏中PTP1B的表达,增强胰岛素信号通路有关。

用正交设计法优选老鹰茶总黄酮的提取工艺

目的优选老鹰茶总黄酮提取的最佳工艺。方法以芦丁为对照,AlCl3为显色剂,用紫外分光光度法在410nm处测定总黄酮含量,以总黄酮含量为指标,应用正交实验,优选老鹰茶总黄酮提取的最佳工艺。结果老鹰茶总黄酮的最佳提取工艺为80%乙醇,12倍量,回流提取3次,每次2h。结论紫外分光光度法方便、快捷,可用于老鹰茶总黄酮提取工艺的优选。

豹皮樟总黄酮对大鼠酒精性脂肪性肝炎的防治作用及部分机制

目的探讨豹皮樟总黄酮(TFLC)对大鼠酒精性脂肪性肝炎的防治作用及部分机制。方法以酒精联合脂肪乳剂灌胃,每天2次,连续6周,制备大鼠酒精性脂肪性肝炎模型。给药组同时灌服相应药物。于实验的第6周末采血,检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨基转移酶(AST)、γ-谷氨酰基转移酶(γ-GT)、碱性磷酸酶(ALP)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)及肝脏TG、TC、SOD、MDA、GSH-PX,并行肝脏病理学检查。结果TFLC(200、400mg/kg)组能明显降低酒精性脂肪性肝炎大鼠血清AST、ALT、ALP、γ-GT水平;降低血清和肝匀浆中TC、TG、MDA含量,增强SOD和GSH-PX活性;同时病理组织学显示TFLC能明显改善酒精性脂肪性肝炎大鼠的肝细胞脂肪变性。结论TFLC对大鼠酒精性脂肪性肝炎具有较好的防治作用。其作用机制与抗氧化和调节脂质代谢有关。

豹皮樟总黄酮体外对酒精性脂肪肝大鼠肝细胞脂肪变性的影响

目的探讨豹皮樟总黄酮(TFLC)对酒精性脂肪肝(AFL)大鼠肝细胞脂肪变性的影响。方法大鼠自由饮用含乙醇饮料,起始浓度为5%,依次增加为10%,15%,20%,25%,30%和35%,每个浓度持续1周,第8周～第12周浓度为40%的方法制备大鼠AFL模型,原位二步灌流法分离AFL大鼠肝细胞,用细胞角蛋白18(CK18)抗体进行肝细胞鉴定。肝细胞培养16 h后加入TFLC 1,10和100 mg.L-1或谷胱甘肽(GSH)10 mmo.lL-1孵育48 h。MTT法测定肝细胞存活,用试剂盒方法检测肝细胞丙氨酸转氨酶(ALT)和天冬氨酸转氨酶(AST)活性以及肝细胞内甘油三酯(TG)含量,免疫组化和逆转录PCR方法测定脂肪分化相关蛋白(ADRP)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)mRNA和蛋白表达的变化。结果 TFLC对正常大鼠肝细胞存活无明显影响。TFLC 100 mg.L-1明显增加AFL大鼠肝细胞存活(P<0.05)。AFL大鼠肝细胞培养液ALT和AST活性分别为(63±12)和(74±19)U.L-1,TFLC 10和100 mg.L-1分别将ALT活性降低到(42±12)和(44±8)U.L-1(P<0.05),将AST活性降低到(46±14)和(47±8)U.L-1(P<0.05)。AFL大鼠肝细胞内TG含量为(2.3±0.6)mmol.L-1,TFLC 10和100 mg.L-1分别将AFL肝细胞内TG含量降低到(1.4±0.3)和(1.5±0.5)mmo.lL-1(P<0.05)。AFL肝细胞ADRP和PPARγ阳性表达细胞分别为(41±6)%和(37±10)%,TFLC 100 mg.L-1治疗组ADRP和PPARγ阳性表达细胞分别降低为(26±6)%(P<0.01)和(25±5)%(P<0.05)。结论 TFLC可能通过改善肝细胞活性、减少肝细胞内TG生成、抑制ADRP表达及调控肝细胞PPARγ的表达,从而改善AFL大鼠肝细胞的脂肪变性。

豹皮樟总黄酮对酒精性脂肪肝大鼠脂质过氧化及TNF-α生成的影响

目的研究豹皮樟总黄酮(TFLC)对酒精性脂肪肝大鼠的保护作用及其机制。方法喂食乙醇、蔗糖混合液体食料制备大鼠酒精性脂肪肝模型。给药组在第6周末给予不同剂量的豹皮樟总黄酮或凯西莱共给药6周。于实验第12周末处死大鼠,测定血清天门冬氨基转移酶(AST)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平,肝组织超氧化物岐化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)含量及肝组织TNF-α mRNA的表达情况,取肝组织作病理学检查。结果TFLC能降低模型大鼠ALT、AST、MDA、TNF-α含量,提高SOD、GSH-PX含量,肝组织TNF-α mRNA表达下降。同时病理学显示TFLC能明显减轻肝的病理损伤程度,表现为TFLC干预后大鼠肝细胞脂肪变及炎症程度减轻。结论TFLC能可明显减轻酒精性脂肪肝大鼠肝组织脂肪变和炎症程度,减轻脂质过氧化,并能显著降低血清TNF-α水平,减少肝组织TNF-α mRNA表达,该作用可能是其有效防治酒精性脂肪肝作用机制之一。

豹皮樟总黄酮对非酒精性脂肪性肝炎治疗作用及部分机制

目的研究豹皮樟总黄酮对大鼠非酒精性脂肪性肝炎(NASH)治疗作用,并初步探讨Toll样受体4(TLR4)在治疗中的作用。方法将SD大鼠随机分为5组:正常组、模型组及TFLC组(100、200、400 mg.kg-1)。除正常组外,其余各组每天给予脂肪乳剂灌胃连续10周,制备NASH模型。治疗组于造模第6周开始灌胃给予相应剂量的药物。实验10周后,检测血清ALT、AST、TC、TG、TNF-α及肝脏TC、TG含量、TLR4 mRNA和蛋白表达、NF-κB核蛋白表达,并行病理组织学检查。结果模型组大鼠血清ALT、AST、TG、TC、TNF-α水平及肝脏TC、TG含量明显升高,病理组织学检查显示模型组大鼠发生明显的肝细胞脂肪变性、炎症和坏死。TFLC能降低模型大鼠血清ALT、AST、TG、TC、TNF-α水平及肝脏TC、TG含量,病理组织学检查显示TFLC明显改善大鼠肝细胞脂肪变性及炎症程度减轻。进一步研究发现TFLC能明显抑制TLR4 mRNA和蛋白表达、NF-κB核蛋白水平。结论 TFLC对NASH有较好的治疗作用,且与抑制TLR4介导的细胞信号转导通路有关。

豹皮樟总黄酮通过增强小鼠睾丸Leydig细胞缝隙连接功能减轻奥沙利铂的细胞毒作用

目的:探讨豹皮樟总黄酮(TFLC)对体外培养的小鼠睾丸Leydig细胞系(TM3)缝隙连接(GJ)功能的作用,以及TFLC是否减轻化疗药奥沙利铂(OHP)的细胞毒作用。方法:荧光示踪法测定体外培养的TM3细胞之间荧光传递,反映GJ的功能;Western印迹法检测TFLC对连接蛋白43(Cx43)表达的影响;细胞免疫荧光法观察TFLC对TM3细胞胞膜Cx43蛋白表达的影响;MTT法检测OHP的细胞毒作用,以及TFLC对OHP细胞毒的影响。结果:在TM3细胞中GJ的功能随着TFLC浓度的增加而增强;Western印迹和免疫荧光实验结果显示TFLC可显著增强TM3细胞中Cx43蛋白和膜Cx43蛋白的表达;MTT结果表明,高密度接种细胞(生长融合,有GJ形成),20μg/ml TFLC增强细胞GJ功能,且减轻OHP的细胞毒作用[细胞存活率(89.5±1.8)%高于单用ONP组(80.0±1.5)%,(P<0.05)];低密度接种细胞(生长未融合,无GJ形成),TFLC对OHP的细胞毒作用没有影响(P>0.05)。结论:TFLC增强睾丸正常细胞TM3中Cx43的表达,并增强细胞间的GJ功能;TFLC减轻OHP在TM3细胞的毒性作用,并可能与增强GJ功能有关。

豹皮樟总黄酮抗肝纤维化作用及对肝组织中TGF-β_1、CTGF mRNA表达的影响

目的研究豹皮樟总黄酮(TFLC)抗肝纤维化作用并探讨作用机制。方法SD大鼠随机分为6组:正常组、模型组、TFLC组(100、200、400mg/kg)和秋水仙碱组(0.1mg/kg)。除正常组外,采用50%CCl4花生油溶液(1ml/kg)皮下注射,每周2次,连续12周复制肝纤维化模型。治疗组于造模第7周开始灌胃给予相应的药物。第12周末处死老鼠,分离血清,比色法检测谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)的含量,放免法检测透明质酸(HA)、层粘连蛋白(LN)、Ⅳ型胶原(CⅣ)、Ⅲ型前胶原氨端肽(PⅢNP)的含量。肝组织石蜡切片HE染色。采用RT-PCR法检测肝组织中TGF-β1、CTGF mRNA的表达。结果TFLC(200、400mg/kg)组血清中ALT、AST、HA、LN、CⅣ、PⅢNP的水平下降,肝纤维化程度明显减轻,肝组织中TGF-β1、CTGF mRNA的表达明显减少。结论TFLC有抗肝纤维化的作用,这可能与其能够抑制肝纤维化大鼠肝组织中TGF-β1、CTGF mRNA的表达有关。

微波辅助提取老鹰茶总黄酮及其抑菌活性研究

以老鹰茶为原料,总黄酮含量为考核指标,研究了微波辅助提取老鹰茶总黄酮的工艺,并对其抑菌活性进行了探讨.在单因素的基础上,通过正交试验,确定老鹰茶总黄酮的最佳提取条件为:乙醇浓度70%、液料比40 g/mL、微波功率中火、微波时间50 s,总黄酮含量可达5.78 g/100 g(以槲皮素计).抑菌试验结果表明,老鹰茶总黄酮提取物除对大肠杆菌、产气杆菌无抑制作用外,对供试的炭疽杆菌、变形杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌等均有不同程度的抑制作用.

毛豹皮樟叶水提物的活性成分及其清除亚硝酸钠和阻断亚硝胺合成的作用

亚硝酸盐在食材、食品加工和食品储存过程中普遍存在,它是亚硝基化合物合成的前体物质,在一定条件下亚硝酸盐极易转化为亚硝胺,二者均可致癌,因此,清除亚硝酸盐和阻断亚硝胺合成对于预防和控制癌症的发生具有重要意义。

贵州4个县域豹皮樟老鹰茶的理化品质比较

为比较贵州4个县域豹皮樟老鹰茶的理化品质,对来自贵州4个县域的用传统铁锅杀青、慢火烘干工艺加工的豹皮樟老鹰茶成品进行生化成分和矿质元素测定。结果表明:江口老鹰茶的各生化成分含量都较高,总黄酮含量最高,品质较好;但其重金属铅含量超标,不符合规定。息烽样品的各生化成分含量也都较高,总黄酮含量仅次于江口样品,且茶多酚和水浸出物含量最高,微量元素锌、镁和硒含量也较高,重金属含量符合国家标准,品质较好。江口老鹰茶的氨基酸组分种类最多,湄潭样品的氨基酸组分种类最少;赤水老鹰茶的微量金属元素含量较高,含有咖啡因,且呈鲜爽味的氨基酸含量较高,具有特异性。综上,贵州4个县域的豹皮樟老鹰茶在理化品质上各有特色。

超高压提取老鹰茶总黄酮的工艺优化

为优化老鹰茶总黄酮常温超高压提取的工艺条件,采用Box-Behnken设计和响应面分析法对影响提取效果的4个主要因素即压力、保压时间、乙醇浓度和液料比进行了优化,建立并分析了各因子与总黄酮得率关系的数学模型。结果表明,最佳工艺条件为超高压力427MPa、保压时间9min、液料比41mL/g、乙醇浓度70%,在此条件下,总黄酮得率可达(6.263±0.014)%(n=3),与模型预测值(6.281%)相符。与传统水浴加热提取相比,超高压提取能显著缩短提取时间,提高黄酮得率。