山茱萸环烯醚萜苷的化学成分及生物活性研究进展

山茱萸是我国药食两用的大宗药材之一,广泛应用于内外妇儿各类患者及保健品的开发等。山茱萸环烯醚萜苷(cornel iridoid glycosides, CIG)为山茱萸的特征活性成分群,综述近10年的文献报道,已有103种CIG被分离鉴定。研究将对CIG的化学成分、裂解规律、体内代谢产物研究进行归纳总结,并从药理药效、作用通路及分子机制等方面综述CIG在降血糖、神经保护、心脏保护、肝脏保护、肾脏保护、睾丸保护等多种生物活性的研究进展,以期为CIG进一步的研究、开发及应用提供新的思路。

RP-HPLC法测定山茱萸环烯醚萜总苷中马钱苷和莫诺苷含量

目的建立反相高效液相色谱法测定山茱萸环烯醚萜总苷中马钱苷和莫诺苷含量的方法，为完善山茱萸环烯醚萜总苷的质量评价提供依据。方法色谱柱：Lichrosphere C18柱（4．6mm×150mm，5μm）；流动相：乙腈-水梯度洗脱（0～12min，乙腈比例由10％增加到55％）；流速1.0mL／min；柱温30℃；检测波长240nm。结果马钱苷和莫诺苷分别在o．088-0．528μg（r=0.9998）和0.088-0．352μg（r=0．9995）之间范围内线性关系良好；平均回收率（n=6）分别为98．7％（RSD=1．3％）、98．6％（RSD=0.8％）。结论所建立的方法简便、准确、分离效果好、重复性好。可以用干控制山菜萤环烯醚萜总菩的席号．

山茱萸提取物对3T3-L1脂肪细胞葡萄糖消耗与脂肪分解的影响

目的观察山茱萸环烯醚萜苷类提取物对3T3-L1成熟脂肪细胞葡萄糖消耗及异丙肾上腺素(ISO)诱导脂肪分解的影响,探讨其分子机制。方法葡萄糖氧化酶法测定0.04、0.2、1g/L浓度山茱萸提取物干预24h后对脂肪细胞葡萄糖消耗量的影响;比色法测定干预2d后ISO 30min诱导脂肪细胞脂肪分解的甘油释放量;Real-time PCR法检测干预2d后脂肪细胞AMPK、GLUT4和HSL mRNA表达水平,Western blot检测药物对AMPK、ACC蛋白磷酸化的影响。结果 1g/L山茱萸提取物干预成熟脂肪细胞24h后可增加葡萄糖消耗,干预2d后可明显抑制不同浓度ISO诱导的脂肪分解,0.2、0.04g/L提取物可抑制低浓度ISO诱导的脂肪分解;各浓度提取物干预2d可不同程度上调AMPK、GLUT4mRNA水平,下调HSL mRNA表达,1g/L浓度时AMPK、ACC磷酸化水平升高。结论山茱萸提取物可能通过上调AMPK基因表达的相关途径增加3T3-L1脂肪细胞葡萄糖消耗并抑制ISO诱导的脂肪分解。

山茱萸环烯醚萜总苷对2型糖尿病心脏病变大鼠胰岛素抵抗及血脂含量的影响

目的:观察山茱萸环烯醚萜总苷(ICO)对2型糖尿病心脏病变大鼠胰岛素抵抗及血脂含量的影响。方法:大鼠以高脂饲养结合STZ腹腔注射造模,2周后灌胃给予ICO(0.1,0.2g/kg)或氨基胍(AG,0.1g/kg)治疗,连续16周。检测体重、空腹血糖、血清Ins、Ins-Ab、CHOL、TG、HDL-C及LDL-C含量;分离心脏进行形态学观察。结果:模型组大鼠体重、血糖、Ins-Ab、IR、CHOL、TG、LDL-C明显升高,Ins水平显著降低;光镜检查显示心肌肥大伴程度不等的间质水肿和组织细胞增生,心内膜或心包膜有轻度炎症及纤维化。ICO及AG组大鼠体重、血糖、Ins-Ab、IR、CHOL、TG、LDL-C均明显降低,心肌肥大程度减轻。结论:ICO对2型糖尿病心脏病变有一定的保护作用。

山茱萸环烯醚萜总苷对实验性糖尿病肾病变的保护作用

目的 研究山茱萸环烯醚萜总苷 (HXMTZG)对链脲佐菌素 (STZ)诱导的大鼠糖尿病肾病变 (DN)的保护作用。方法大鼠ipSTZ 6 0mg/kg ,1周后血糖值高于 16 .7mol/L者则纳为糖尿病大鼠。将糖尿病大鼠随机分为模型组、氨基胍 (AG)组 (0 .1g/kg ,ig)和HXMTZG组 (0 .5、1.0g/kg ,ig) ,同期另设正常组 ,各组连续灌胃给药 12周。实验结束后测定血糖和尿微量白蛋白 (UMA) ,取肾脏经HE和PAS糖原染色后进行光镜检查。结果 模型组大鼠血糖、UMA排出量均高于正常组 ,HXMTZG及AG对血糖基本无降低作用 ,但两者均能显著降低UMA的排出 (P <0 .0 1) ;光镜检查显示模型组呈现早 -中期糖尿病肾病变 ,而HXMTZG及AG组均能不同程度地减轻肾小球系膜增生、GBM增厚、糖原沉积及AE透明变等。结论HXMTZG能延缓实验性DN大鼠的发生与发展 。

山茱萸环烯醚萜总苷对晚期糖基化终末产物诱导的肾系膜炎症反应的调节

目的探讨山茱萸环烯醚萜总苷对晚期糖基化终末产物(AGEs)诱导的大鼠肾系膜HBZY-1细胞炎症反应的影响以及可能的作用机制。方法采用巨噬细胞和肾系膜细胞共培养体系,评估巨噬细胞的迁移能力;采用ELISA试剂盒评估炎症因子的分泌水平;采用Western blot分析法评估炎症相关蛋白的表达。结果与AGEs诱导的模型组相比,山茱萸环烯醚萜总苷显著抑制AGEs诱导的巨噬细胞迁移能力,不同剂量山茱萸环烯醚萜总苷(1.0、0.5、0.25mg/mL),对巨噬细胞迁移抑制率分别为42.09%±7.25%、26.44%±10.23%、20.84%±6.84%;山茱萸环烯醚萜总苷显著抑制AGEs诱导的炎症因子IL-6,IL-10,MCP-1和TNF-α的分泌水平;Western blot分析显示山茱萸环烯醚萜总苷及AGEs受体特异性抗体显著下调AGEs诱导的ICAM-1和TGF-β1的蛋白表达。结论山茱萸环烯醚萜总苷可剂量依赖性地减轻AGEs诱导的大鼠肾系膜细胞HBZY-1炎症反应,对糖尿病肾病的发生发展具有一定的保护作用。

山茱萸环烯醚萜总苷对实验性糖尿病心脏病变的保护作用

目的研究山茱萸环烯醚萜总苷(ICO)对实验性糖尿病心脏病变的保护作用。方法以高脂饲养结合STZ腹腔注射造模。于造模后2周分别灌胃给予降糖通脉(JTTM)胶囊(0.8 g/kg)I、CO(0.05、0.10、.2 g/kg)治疗,连续16周。检测空腹血糖、血清NO、NOS、血浆ET含量,取心脏计算心指数,并采用光镜观察其形态学改变。结果模型组大鼠空腹血糖升高,血清NO、NOS水平明显降低,血浆ET水平明显升高,心指数增加(P<0.05,P<0.01)。光镜检查显示模型大鼠心肌肥大,伴程度不等的间质水肿和组织细胞增生;心内膜或心包膜有轻度炎症及纤维化。应用ICO及JTTM后,糖尿病大鼠血糖降低,血清NO、NOS水平升高,血浆ET水平降低,心指数降低,心肌肥大程度减轻。结论ICO对糖尿病心脏病变有一定的保护作用。

星点设计-效应面法优化栀子的提取工艺

目的以星点设计-效应面法优选栀子的提取工艺。方法以乙醇浓度,回流时间和溶剂量为自变量,以总环烯醚萜苷含量为因变量对自变量各水平进行多元线性回归和二项式拟合,用效应面法选择较佳工艺条件,并进行预测分析。结果确定较优提取工艺为乙醇浓度55%,提取时间60 min,乙醇用量10倍,提取2次,提取率实测值与预测值偏差为-2.65%,二项式拟合复相关系数r=0.982 9。结论星点设计-效应面法优选栀子的提取工艺,方法简便,预测性良好。

星点设计-效应面法优化山茱萸总环烯醚萜苷脂质体的制备工艺

目的:优化山茱萸总环烯醚萜苷脂质体的制备工艺,并对其进行表征。方法:采用逆相蒸发法制备山茱萸总环烯醚萜苷脂质体。采用高效液相色谱法测定山茱萸总环烯醚萜苷脂质体中马钱苷和莫诺苷含量。以总皂苷(以马钱苷和莫诺苷总和计)包封率为指标,通过单因素试验筛选制备山茱萸总环烯醚萜苷脂质体的主要工艺因素后,采用星点设计-效应面法优化药物与磷脂的质量比(药脂比)、胆固醇与磷脂的质量比(胆脂比)和水合介质pH值。利用达尔文激光粒径测定仪测定最优处方下所制脂质体的Zeta电位和粒径,并在透射电镜下观察其形态。结果:确定最优处方的药脂比为0.026、胆脂比为0.107、水合介质pH为5.78。所制3批脂质体的平均包封率为11.63%(n=3),与预测值11.48%的相对误差为1.29%;平均粒径为(80.87±0.27)nm,Zeta电位为(-13.60±5.32)mV,脂质体外观呈球形或类球形。结论:优化后山茱萸总环烯醚萜苷脂质体制备工艺简单,所制脂质体粒径较小。

星点设计-效应面法优化山茱萸总环烯醚萜苷脂质体凝胶剂的制备工艺

目的优选山茱萸总环烯醚萜苷脂质体凝胶剂的制备工艺,并对其进行质量评价。方法以卡波姆-940用量、凝胶剂p H值、甘油用量为考察因素,以凝胶剂的外观、涂展性、均匀度、离心性的综合评价为指标,采用三因素三水平星点设计-效应面法优选脂质体凝胶剂的制备工艺。结果山茱萸总环烯醚萜苷脂质体凝胶剂的最佳制备工艺为卡波姆用量0.5%,pH值6.6,甘油用量15 g。根据优选的最佳工艺,平行制备3份凝胶剂,进行综合评分,综合评分结果分别为9.4、9.7、9.5。结论运用星点设计-效应面法优选出的山茱萸总环烯醚萜苷脂质体凝胶剂的制备工艺简单,方法可靠。

中药栀子总环烯醚萜苷的含量测定

[目的]建立栀子药材中栀子总环烯醚萜苷含量的测定方法。[方法]采用紫外分光光度法,以甲醇为空白,在波长238nm处测定栀子总环烯醚萜苷含量。[结果]栀子苷在7.82～31.30μg/ml范围内,线性关系良好(r=0.9997),平均回收率为109.20%,RSD值为4.73%(n=5)。江西产药材中栀子总环烯醚萜苷含量最高。[结论]该法简便、准确、重复性好,可作为栀子的质量控制方法。

山茱萸不同部位4种环烯醚萜苷成分含量比较研究

目的建立HPLC法同时测定山茱萸药材中莫诺苷、当药苷、马钱苷和山茱萸新苷I含量的方法,并比较不同部位中4种成分的差异。方法采用Diamonsil Plus C_(18)-A色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),流动相乙腈-0.3%磷酸溶液梯度洗脱,检测波长240 nm和270 nm。结果 4种成分在山茱萸果肉、果梗和果核中的含量存在显著差别。果肉中莫诺苷和马钱苷的含量显著高于果梗及果核,当药苷在果核中含量最高,山茱萸新苷I在果梗中含量最高。结论山茱萸不同部位化学成分存在显著差异,建议去核入药。

栀子总环烯醚萜苷对脑出血大鼠血红素氧合酶-1表达的影响

目的研究栀子总环烯醚萜苷对大鼠脑出血(ICH)后血肿周围脑组织血红素氧合酶-1(HO-1)表达及抗氧化能力的影响。方法将SD大鼠随机分为假手术组、脑出血模型组和栀子总环烯醚萜苷(20,10,5mg/kg)组,采用自体血注入诱发大鼠脑出血模型,每组分别在术后12,24,48,72和144h5个时间点取脑组织标本,免疫组化检测HO-1表达,同时测量脑组织SOD活性和MDA含量。结果20～10mg/kg栀子环烯醚萜苷组脑出血后HO-1表达水平及脑组织MDA含量明显低于脑出血组(P<0.05),SOD活性明显高于脑出血组(P<0.05)。结论栀子总环烯醚萜苷可以抑制脑出血后HO-1表达,增强抗氧化能力,从而减轻脑水肿。

HPLC-QAMS法测定不同产地19批山茱萸中5种环烯醚萜苷类成分的含量

目的:测定不同产地19批山茱萸中5种环烯醚萜苷类成分的含量。方法:采用高效液相色谱(HPLC)-一测多评(QAMS)法。色谱柱为Agilent XDB-C_(18),流动相为甲醇-水,梯度洗脱,流速为1.0 m L/min,柱温为35℃,进样量为15μL,检测波长为240nm。以山茱萸中的马钱苷为内参物,建立其与山茱萸中另外4种环烯醚萜苷类成分即莫诺苷、当药苷、山茱萸苷和山茱萸裂苷之间的相对校正因子并进行适用性评价后计算4种成分的含量;另采用HPLC-外标法测定19批药材中上述5种成分的含量,比较两种方法测定结果的差异,验证QAMS法的准确性。结果:在适用性评价中,不同试验条件下4种成分的相对校正因子的RSD均小于2%;两种测定方法下,4种成分的含量比较差异均无统计学意义(P均大于0.05)。结论:本研究建立的HPLC-QAMS法可用于山茱萸中5种环烯醚萜苷类成分的含量测定,且方法准确、可靠、快速,成本更低。

不同产地山茱萸总皂苷及总环烯醚萜苷的地理变异分析

目的:对不同产地的山茱萸总皂苷和总环烯醚萜苷进行含量测定,研究不同产地地理因子对其含量影响及之间的相关性,为山茱萸优良产区筛选及质量控制提供相关的理论依据。方法:采用分光光度法和高效液相色谱法对15个产地的山茱萸总皂苷和总环烯醚萜苷含量进行测定,并利用SPSS 19.0软件分别对其含量与产地地理因子进行相关性分析和聚类分析。结果:15个产地的山茱萸总皂苷和总环烯醚萜苷含量变化幅度分别为13.55 mg/g~26.65 mg/g、23.05 mg/g~32.68 mg/g,不同产地之间的活性成分含量差异显著,其中河南西峡样品中总皂苷和浙江淳安样品中总环烯醚萜苷含量高;相关性分析发现总皂苷的含量和产地与海拔呈现极显著的正相关,和经度呈现显著的负相关,环烯醚萜苷含量与环境因子的相关性不显著;聚类分析结果显示,总皂苷与总环烯醚萜苷在东西部产地含量存在明显差异,表现为西高东低的趋势。结论:不同产地的山茱萸总皂苷和总环烯醚萜苷含量不同,存在明显的区域特征、与海拔和经纬度呈现相关性,本研究为山茱萸选择优良的种植产地提供理论支持。

栀子总环烯醚萜苷对脑出血大鼠炎症反应与神经元凋亡的影响

目的研究栀子总环烯醚萜苷对大鼠脑出血后炎症反应和神经元凋亡的影响。方法将SD大鼠随机分为假手术组、模型组、清开灵注射液组(3000mg/kg)和栀子总环烯醚萜苷高、中、低剂量组(30,15,7.5mg/kg),采用自体血注入诱发大鼠脑出血模型,在术后48h取脑组织标本,放射免疫法检测血肿周围脑组织TNF-α和IL-1β含量,免疫组化检测ICAM-1和Caspase-3的表达。结果与模型组相比较,栀子总环烯醚萜苷中、高剂量组血肿周围脑组织TNF-α和IL-1β含量明显降低,具有显著性差异(P<0.05或P<0.01),ICAM-1和Caspase-3表达明显下调,差异具有显著性(P<0.05或P<0.01)。结论栀子总环烯醚萜苷可以干预脑出血后炎症反应,阻止神经元凋亡。

山茱萸环烯醚萜苷类成分的研究进展

山茱萸为临床常用大宗药材,其环烯醚萜苷类成分是研究最深入、最具有开发前景的主要活性成分之一。文章对2015年1月至2019年10月关于山茱萸环烯醚萜苷类成分的研究进展进行综述。已有文献报道的山茱萸环烯醚萜苷类成分共66种,从药理活性、分子机制及作用通路多个方面综述其对糖尿病及并发症、脑组织、神经系统及肝损伤的保护作用、抗炎及调节毛发生长的生物活性,以期为山茱萸环烯醚萜苷类成分的深入研究、开发和利用挖掘新的思路和方向。

星点设计-响应面法优化山茱萸总苷的提取及纯化工艺

目的:采用星点设计-响应面法优化山茱萸总苷的提取及纯化工艺。方法:以乙醇浓度、液料比和提取时间为自变量,以莫诺苷、马钱苷和獐牙菜苷的收率以及提取物得率为因变量,通过对自变量的总评归一值进行多元线性回归和二项式拟合,以响应面优选最佳的超声提取工艺。以乙醇浓度、洗脱体积、上样量为自变量,以莫诺苷、马钱苷和獐牙菜苷的收率以及洗脱物得率为因变量,通过对自变量的总评归一值进行多元线性回归和二项式拟合,以响应面优选最佳的大孔树脂纯化工艺。结果:确定提取工艺条件为乙醇浓度22%～25%,液料比12～15倍,提取时间30～40 min;纯化工艺条件为乙醇浓度35%～45%,洗脱体积7～9 BV,上样量40～50 mg.g-1。2个步骤工艺验证的总评归一预测値与实测值的偏差分别为-1.8%和2.7%。结论:采用星点设计-响应面法优选山茱萸总苷提取及纯化工艺,方法简便,预测性良好。

基于莫诺苷转化的山茱萸环烯醚萜苷提取工艺

目的:基于莫诺苷转化现象研究山茱萸环烯醚萜苷的提取工艺。方法:采用正交试验法,优选山茱萸环烯醚萜苷提取工艺。结果:山茱萸中环烯醚萜苷的最佳提取工艺为:以水做提取溶剂,加10倍量水,提取3次,每次80 min,莫诺苷转移率为145%,马钱苷为92%。结论:优选所得山茱萸提取工艺稳定、合理,可大量提高莫诺苷的提取量。

山茱萸提取物对糖尿病小鼠降血糖作用的研究

目的研究山茱萸提取物环烯醚萜总苷对糖尿病小鼠血糖的影响。方法提取山茱萸环烯醚萜总苷,建立四氧嘧啶糖尿病小鼠模型。分成正常对照组、阴性对照组、阳性对照,实验组分低、中、高剂量环烯醚萜总苷。正常对照组为非糖尿病小鼠,不作处理,阴性对照组灌胃等体积生理盐水,阳性对照组灌胃优降糖[(1.5 mg/(kg·d))],环烯醚萜总苷[低剂量组3.0g/(kg·d)、中剂量组6.0g/(kg·d)、高剂量组12.0g/(kg·d)],持续60 d,测量给药后和停药30、60天时的糖尿病小鼠的血糖及糖化血红蛋白(HBA1C)和糖化血清蛋白(GSP),并进行统计学分析。结果环烯醚萜总苷给药组小鼠,低剂量组降血糖作用不显著,中、高剂量组较为显著(P<0.05)。给药停止后30、60天,中、高剂量组的血糖值及糖化血清蛋白(GSP)、糖化血红蛋白(HBA1C)较刚停药时没有显著差异,优降糖组血糖值及GSP、HBA1C有显著回升(P<0.01)。结论环烯醚萜总苷低、中、高剂量组的降血糖作用均不及优降糖组显著,但是中高剂量组血糖维持效果较优降糖组显著。