葛根异黄酮对MPP＋诱导的PC12细胞凋亡的保护作用

目的探讨葛根异黄酮(Total isoflavones from puerarialobata,TIP)对甲基-苯基-吡啶离子(1-methyl-4-phenylpyr-idinium,MPP+)诱导的PC12细胞凋亡的保护作用及其机制。方法用不同浓度TIP预处理体外培养的PC12细胞后,加入MPP+诱导多巴胺能神经损伤模型,用MTT法检测PC12细胞活力,采用实时定量RT-PCR检测Bcl-2和BaxmRNA的表达水平。结果MPP+处理48~96 h,细胞活力较空白对照组降低,阴性对照组Bax 2-ΔΔCt升高,而Bcl-22-ΔΔCt降低,差异具有统计学意义(P<0.05)。与阴性对照组比较,葛根异黄酮组Bax 2-ΔΔCt降低,而Bcl-2 2-ΔΔCt升高,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论葛根异黄酮对MPP+诱导的PC12细胞凋亡具有抑制作用,下调Bax和上调Bcl-2 mRNA表达可能是其作用的机制之一。

葛根异黄酮对MPP^+诱导的PC12细胞P53 mRNA表达的影响

目的观察葛根异黄酮对甲基-苯基-吡啶离子诱导的帕金森病细胞模型P53基因表达的影响。方法将葛根异黄酮溶解在培养基使终浓度为50mg·L-1、100mg·L-1和200mg·L-1。并设不加药物的阴性对照组。PC12细胞与葛根异黄酮共孵育30min后,加入含250μmol·L-1MPP+的DMEM培养基,继续孵育96h。采用实时定量RT-PCR法检测P53基因表达。结果与对照组比较,MPP+组P53 mRNA表达上调(P<0.05),各浓度的葛根异黄酮组P53 mRNA表达下调(P<0.05)。结论葛根异黄酮对甲基-苯基-吡啶离子诱导的帕金森病细胞模型P53 mRNA的表达具有下调作用。

近红外光谱法快速分析葛根中的有效成分

本文应用近红外光谱技术建立了快速检测葛根中有效成分的方法。研究了优化分析葛根总异黄酮、葛根素和大豆苷含量数学模型的各种条件 ,包括建模样品集的选择、化学值的定标、测量的方法及条件等 ,结果表明 :建模样品集的化学值 (又称真值 )与近红外预测值的相关系数分别为 :葛根总异黄酮r=0 975 ,葛根素r=0 984 ,大豆苷r =0 96 6 ;检验样品集的化学值与近红外预测值的相关系数分别为 :0 982 ,0 975和0 981。说明所建模型具有实际应用价值。

葛根总黄酮提取新工艺的研究

采用微波辅助浸取新工艺从葛根中提取总黄酮.通过单因素和正交实验相结合的方法,研究了新工艺的实验条件.结果表明:在常压下,当微波功率为700 W,葛根粒度为80目,预泡1 h,固液比为1:25,乙醇溶剂浓度为60%,微波辐射40 s,间歇辐射3次,可得到最佳提取率83.92%,比传统回流浸取和超声浸取葛根总黄酮工艺具有快速、节能和浸取率高等优点.

短波近红外光谱法测定葛根中总异黄酮含量

目的建立短波近红外光谱法测定葛根中总异黄酮含量的方法。方法应用吸光光度法测定葛根中总异黄酮的含量，并在此基础上建立葛根中总异黄酮含量的短波近红外数学模型。结果在850—1100nm分析谱区内，建模样品集的标准值与短波近红外预测值的相关系数r=0．981，检验样品集的标准值与短波近红外预测值的相关系数r=0．972。结论应用短波近红外光谱法测定葛根中总异黄酮含量的方法是可行的。

微波辅助加压浸取枳椇中总黄酮

采用单因素实验和正交实验进行了微波辅助加压浸取枳椇中总黄酮的研究。获得的最优工艺条件为:微波功率700 W、乙醇水溶液质量分数50%、压强131.733 kPa和液固比10 mL/g,在此条件下,总黄酮提取率高达97.28%,比常压浸取装置的提取率提高了22%。自行设计和制造的微波辅助加压浸取装置具有结构简单、操作方便、制造成本低、节约能耗、加热速率快和提取率高等优点。

葛根中总异黄酮的微波辅助萃取研究

通过正交试验,对微波辅助萃取葛根总异黄酮的工艺条件进行了研究,结果表明:用90%的乙醇,葛根粒度为40目,固液比为1:15,预浸泡1～2h,微波辐射40s,葛根总黄酮的浸出率达96%以上,与传统的热浸提相比,不仅产率高,而且速度快、节能。

乙醇水溶液微波辅助浸取枳椇总黄酮

采用自行设计制造的萃取装置进行了乙醇水溶液常压微波辅助浸取枳椇总黄酮的单因素实验研究,获得的最适宜工艺条件为:微波功率700 W、辐射(时间)至溶液沸腾,辐射1次;乙醇的质量分数50%;固液比1:10;预泡时间1 h和颗粒尺寸60目,在此条件下,总黄酮提取率高达为80%左右。

近红外光谱法快速测定葛根中的五种成分

本文应用近红外光谱技术建立了快速检测葛根中有效成分的方法。研究了优化分析葛根总异黄酮、葛根素、大豆苷、淀粉和粗蛋白含量数学模型的各种条件,结果表明:建模样品集的化学值(又称真值)与近红外预测值的相关系数分别为:葛根总异黄酮R= 0.9752,葛根素R=0.9839,大豆苷R=0.9659,淀粉R=0.9628,粗蛋白R=0.9829;检验样品集的化学值与近红外预测值的相关系数分别为:0.9818,0.9752,0.9772,O.9737和0.9798。说明所建模型具有实际应用价值。

微波辅助萃取枳椇总黄酮研究

[目的]研究从枳椇中提取总黄酮。[方法]采用微波辅助萃取技术,应用自制的压力萃取器,通过单因素试验和响应面试验方法优化工艺参数。[结果]确定了最优工艺参数为微波功率840 W、乙醇水溶液浓度52%、萃取时间54 s、液固比9.4 ml/g、浸泡时间1 h和颗粒粒径2.5×10-4m,在此条件下,总黄酮萃取率为98.05%。建立了以萃取率为响应值,微波功率、乙醇水溶液浓度、萃取时间和液固比为影响因素的二次多项回归方程,该模型与试验结果十分吻合。[结论]建立的数学模型和优化的工艺参数可用来预测不同工艺条件下的总黄酮萃取率,为中试和工业化生产提供理论依据。

葛根异黄酮对去卵巢大鼠血管内皮功能的保护作用

目的观察葛根异黄酮对去卵巢大鼠血管内皮功能的影响及机制。方法雌性SD大鼠行双侧卵巢切除术后,分别灌胃给予150mg/kg和50mg/kg葛根异黄酮,时间为12周。酶联免疫吸附法检测血清雌二醇(E2)和内皮素(ET)含量。硝酸还原酶法检测血清一氧化氮(NO)水平。在分离的各组动脉环标本上,观察乙酰胆碱诱发的内皮依赖性血管舒张反应和硝普钠诱发的非内皮依赖性血管舒张功能变化。Western blot方法观察各组内皮组织样品的内皮型一氧化氮合酶(eNOS)表达变化。结果与假手术组比较,去卵巢组大鼠的血清E2、ET和NO水平出现显著改变,而且其动脉环对乙酰胆碱的舒张功能出现显著性障碍,但对硝普钠的舒张效应无影响。在去卵巢术后给予大小剂量的葛根异黄酮干预后,血清E2、ET和NO水平以及内皮舒张功能,与去卵巢组比较有统计学意义(P<0.05)。此外,葛根异黄酮也可上调去卵巢大鼠内皮组织的eNOS表达。结论葛根异黄酮具有保护去卵巢大鼠血管内皮功能作用,其机制与类雌激素样作用、上调eNOS表达和降低ET水平等因素有关。

广西不同产地粉葛、野葛的多糖和异黄酮含量比较

为比较广西不同产地所产粉葛、野葛原料的品质,对其所含水分、多糖、总异黄酮、葛根素和大豆苷的含量进行测定并比较。使用烘干法测定各产地粉葛、野葛的水分,用紫外分光光度法测定多糖和总异黄酮含量,使用高效液相色谱法测定葛根素和大豆苷的含量。结果显示,广西各个产地的粉葛、野葛的水分含量均低于14%,符合《中国药典》2015年版的规定,其中产于广西桂林的粉葛水分含量最低,为7.13%;产于玉林市的野葛多糖和总异黄酮含量最高,分别为1.1060、5.1630 g/100 g;产于玉林市的野葛葛根素和大豆苷含量较高,分别为41.7675、5.7884 mg/g。产于广西的粉葛异黄酮成分含量远低于野葛,综合考察水分含量、多糖和总异黄酮含量,发现产于广西玉林市的野葛品质最佳。

不同产地粉葛不同部位中7种化学成分的含量测定与比较

测定并比较了不同产地粉葛不同部位中总异黄酮、葛根素、多糖、淀粉、硒、水分、灰分等含量。采用紫外分光光度法测定粉葛中总异黄酮、多糖和淀粉含量,高效液相色谱法测定葛根素含量,原子荧光法测定硒含量,国标方法测定水分和灰分。结果发现,安康平利粉葛芦头中总异黄酮和葛根素含量最高,分别为3.72%、1.91%;叶中硒含量最高,为311.620μg·kg^-1;根中多糖和淀粉含量较高,分别为41.92%、30.96%;而广西粉葛根部葛根素含量略高于安康平利粉葛根部。不同产地粉葛不同部位中7种化学成分含量差异较大,粉葛不同部位可以发挥药用、食用的不同作用,实现综合利用。

葛根中抑制磷酸二酯酶4活性成分的筛选研究

实验选取与抗炎免疫密切相关的磷酸二酯酶4为靶点,应用超滤液质联用技术和酶体外活性抑制实验筛选并鉴定了葛根中抑制磷酸二酯酶4活性成分.实验结果表明葛根提取物具有抑制磷酸二酯酶4的作用,IC50值为0.04g/L.葛根素抑制磷酸二酯酶4作用最强,其次为大豆苷和大豆苷元,IC50值分别为52.79,71.54和122.17μmol/L.超滤液质联用实验筛选结果与体外活性实验一致.3′-羟基葛根素和3′-甲氧基葛根素在2个实验中均没有抑制磷酸二酯酶4的作用.