桃柁酚对金黄色葡萄球菌生物膜形成及cidA表达的影响

为研究桃柁酚对金黄色葡萄球菌(S.aureus)生物膜形成的影响及其机制,本研究通过结晶紫半定量法和激光共聚焦显微镜检测桃柁酚对S.aureus生物膜形成的影响,利用实时定量RT-PCR分析桃柁酚对cidA及其调控基因的作用,并测定了桃柁酚对胞外DNA(eDNA)释放的作用及对HaCaT细胞的细胞毒性。结果表明,桃柁酚可以有效减少eDNA的释放并抑制S.aureus生物膜的形成,并且抑制趋势呈剂量依赖关系。此外,在1/8×MIC药物浓度时,桃柁酚可以诱导eDNA的释放并诱导生物膜形成。桃柁酚可以通过影响agr和sar调控系统,作用于cidA基因进而影响eDNA释放及生物被膜的形成。而且,4×MIC浓度的桃柁酚对人体无毒害作用。本研究为治疗S.aureus感染提供新的方法,并为进一步研究桃柁酚的作用机制奠定了基础。

不同产地罗汉松实中总二萜含量测定

建立测定罗汉松实中总二萜含量的紫外分光光度法,考察不同产地罗汉松实中总二萜的含量水平。以桃拓酚为对照品,紫外可见分光光度计于204 nm波长处测定国内6个不同产地罗汉松实中的总二萜含量。桃拓酚质量浓度在1.96~11.76μg/mL范围内与吸光度呈良好线性关系(r=0.9943),回归方程为y=0.1462x+0.002;平均加样回收率为96.46%,RSD为1.76%(n=6)。6个不同产地罗汉松实中总二萜含量在0.71%~1.17%之间。建立的含量测定方法简便、稳定、准确,可用于罗汉松实总二萜含量测定。

陆均松中的化学成分

陆均松(Dacrydium pierrei Hickle)系一种材用树种,其种子含油17.5%树皮中含有多种蜕皮激素。为摸清罗汉松科植物资源的化学成分,从陆均松枝叶中分离出9个化合物,通过化学及波谱方法分别鉴定为苏铁双黄酮(Ⅰ),穗花杉双黄酮-4′,4″′,7,7″-四甲醚(Ⅱ),反式璎珞酸(Ⅲ),19-羟基-桃柘酚(Ⅳ),12-甲氧基脱氢枞酸(Ⅴ),(+)扁枝烯(Ⅵ),胡萝卜甙(Ⅶ),β-谷甾醇(Ⅷ)及正三十四烷醇(Ⅸ)。

桃柁酚对金黄色葡萄球菌生物膜及icaA表达的抑制作用

为研究桃柁酚对金黄色葡萄球菌生物膜及icaA表达的抑制作用,用微量肉汤稀释法测定桃柁酚对10株金黄色葡萄球菌浮游菌和生物膜的最小抑菌浓度和最小杀菌浓度,并利用激光共聚焦显微镜观察桃柁酚抑制生物膜的情况;通过实时荧光定量RT-PCR技术检测桃柁酚对细菌生物膜形成过程中相关基因的水平变化;采用斑点免疫印迹法检测细胞间多糖黏附素在生物膜形成过程中的作用。结果显示,桃柁酚对金黄色葡萄球菌浮游菌和生物膜的最小抑菌浓度值范围分别为1～2μg/mL和4～16μg/mL;能杀灭和清除已形成的生物膜;桃柁酚可通过影响agr和sar调控系统,抑制细胞间多糖黏附素合成基因icaA的表达进而抑制细胞间多糖黏附素的合成。表明桃柁酚能有效抑制金黄色葡萄球菌浮游菌和生物膜,是一种抑制金黄色葡萄球菌生物膜的有效药物。