金黄色葡萄球菌耐药基因及致病毒素基因的相关性研究

目的研究携带TSST-1和PVL基因的金黄色葡萄球菌耐药特点、分布特征及与致病性的关系。方法临床收集74株金黄色葡萄球菌,采用PCR法检测TSST-1、PVL和mecA基因,纸片扩散法进行17种抗菌剂的耐药性检测。结果 74株金黄色葡萄球菌中mecA基因检出率为55.4%,其中22株检出PVL基因(30.3%),PVL阳性的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)为15株(36.6%),甲氧西林敏感的金黄色葡萄球菌(MSSA)为7株(21.2%),两者间差异无统计学意义(P>0.05)。5株金黄色葡萄球菌中检出TSST-1基因(6.3%),均为MRSA。MRSA耐药性严重,并呈多重耐药性,携带基因PVL和TSST-1的MRSA除对万古霉素敏感外,对其他抗菌剂均耐药。结论携带基因TSST-1和PVL的金黄色葡萄球菌耐药性及致病力更强,增加了临床抗感染治疗的难度。

金黄色葡萄球菌耐药基因及致病毒素基因的研究

目的研究金葡菌耐药基因及致病因子中毒休克综合征毒素-Ⅰ(TSST-Ⅰ)基因和杀白细胞毒素(PVL)基因的分布特征。方法收集临床分离的74株金葡菌,PCR法检测毒素基因TSST-Ⅰ、PVL和mecA耐药基因。结果74株金葡菌PCR法对其行mecA基因检测,检出率为55.4%(41/74)。PVL阳性菌株的分离率为29.7%(22/74),PVL阳性的MRSA为15株(15.41,36.6%),PVL阳性的MSSA为7株(7 33,21.2%),差异无统计学意义(P>0.05)。TSST-Ⅰ基因检出率为6.8%,MSSA中未检出TSST-Ⅰ基因。结论MRSA呈多重耐药性,易造成医院内暴发流行,携带PVL和TSST-Ⅰ的金葡菌其致病力更强,应加强医院感染控制,防止其播散流行。

金黄色葡萄球菌致病毒素基因与耐药性的相关性研究

目的研究金黄色葡萄球菌的致病毒素基因与耐药性的关系。方法对临床收集的74株金黄色葡萄球菌,采用聚合酶链反应(PCR)检测耐药基因mecA和致病毒素基因中毒休克综合征毒素-1(TSST-1)、杀白细胞毒素(PVL),采用纸片扩散法进行药敏试验,对红霉素耐药和克林霉素敏感的菌株做D-试验。结果 74株金黄色葡萄球菌中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)的检出率为55.4%。MRSA除对万古霉素、呋喃妥因敏感外,对其他抗菌药物均高度耐药,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)对抗药物的耐药性较轻,两组间的耐药性差异有统计学意义(P<0.05)。PVL基因阳性的MRSA耐药性与PVL基因阴性的MRSA比较,两组间耐药性差异无统计学意义(P>0.05)。PVL基因阳性的MSSA耐药性比不携带PVL基因的MSSA强,两者间差异有统计学意义(P<0.05)。携带TSST-1基因的MRSA除对万古霉素、呋喃妥因无耐药菌株外,对其他16种抗菌药物100%耐药。D-试验阳性菌株占所检菌株的10.8%,占红霉素耐药、克林霉素敏感菌株的88.9%。只有1株PVL基因阳性的MRSA D-试验阳性。结论 MRSA的耐药性非常严重,表现为对多种抗菌药物同时耐药,并且具有较高的红霉素诱导克林霉素耐药率;PVL和TSST-1可增强金黄色葡萄球菌的致病力及MSSA的耐药性,增加了临床抗感染治疗的难度。

皮肤软组织及创伤感染金黄色葡萄球菌分离株的毒素基因检测

目的了解皮肤软组织及创伤感染的金葡菌携带的杀白细胞素(Panton—Valentine Leukocidin,PVL)基因、表皮剥脱性毒素(ETs)基因、中毒性休克综合征毒素-1(TSST-1)的tst基因的特点。方法对连续收集的皮肤软组织感染中分离的90株金葡菌,采用多重PCR同时检测金葡菌特异性16SrRNA基因、mecA基因、PVL基因,采用PCR法检测TSST-1及EtsA、B基因。结果金葡菌mecA基因阳性47株(占金葡菌52.2%)为耐甲氧西林金葡菌(MRSA)。有1株MRSA的EtsB基因阳性,1株MRSA的TSST-1阳性,有7株金葡菌携带PVL基因,其中3株为mecA基因阳性株(MRSA)。结论金葡菌可分泌多种毒素,携带PVL毒素的金葡菌常可以引起严重的侵袭性感染,尤其对产毒的MRSA感染引起足够的重视,是防控的重点。

金黄色葡萄球菌毒素基因的检测及临床应用

目的:了解医院获得性金黄色葡萄球菌(HA-SA)和社区获得性金黄色葡萄球菌(CA-SA)所携带肠毒素、表皮剥脱性毒素(ETs)、中毒性休克综合征毒素-1(TSST-1)及杀白细胞素基因(PVL)的特点。方法:应用PCR法检测肠毒素A、B、C、D、E基因,ETs A、B基因,TSST-1以及PVL。结果:116株金黄色葡萄球菌中,85株为HA-SA,检出肠毒素A基因6株,肠毒素C基因1株,肠毒素D基因1株,PVL2株;31株为社区获得性金黄色葡萄球菌,检出肠毒素A基因1株,肠毒素B基因1株,肠毒素D基因1株,PVL7株;所有菌株均未检测到肠毒素E、ETs A、B和TSST-1基因。CA-SA PVL检出率显著高于HA-SA,两者比较差异有统计学意义(P<0.005),而肠毒素、ETs和TSST-1基因检出率比较差异均无统计学意义(P>0.05)。结论:金黄色葡萄球菌可分泌多种毒素,在分离金黄色葡萄球菌的同时,应注意其毒素检测。

多重PCR法检测金黄色葡萄球菌耐药基因及致病毒素基因

目的:了解金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)耐药基因及所携带致病毒素基因PVL与TSST-1的特点。方法:应用多重PCR法检测mecA基因、TSST-1基因及PVL基因。结果:84株金葡球经多重PCR法对其mecA基因进行检测,检出率为58.3%(49/84)。PVL基因阳性菌株的分离率为23.8%(20/84),PVL阳性的MRSA为13株(13/49,26.5%),PVL阳性的MSSA为7株(7/35,20.0%),差异无统计学意义(P>0.05);未检出TSST-1基因。结论:金葡菌的耐药性呈上升趋势,且金葡菌可产生多种毒素,在分离金葡菌的同时,应加强其耐药基因及毒素基因的检测。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药性,SCCmec分型及毒素基因的检测

目的调查北京大学第一医院致病性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌SCCmec分型情况、耐药状况、PVL、TSST-1基因携带率,初步了解临床耐甲氧西林金黄色葡萄球菌的耐药原因,为临床感染控制提供依据。方法收集2007年9月至2008年3月住院患者首次分离的53株有致病意义MRSA,用全自动微生物分析仪进行药敏试验,应用PCR方法检测MRSA的SCCmec基因型、PVLT、SST-1基因。结果53株MRSA呈多重耐药特点,SCCmec分型以ⅢA为主(47.2%),PVL基因均为阴性,12株(22%)MRSA TSST-1阳性。结论53株MRSA的多重耐药性与SCCmec结构密切相关,SCCmec分型技术是探索MRSA多重耐药性与耐药结构有效的分子生物学手段,TSST-1基因阳性株在临床分离的金黄色葡萄球菌中占有较高的比例。

耐甲氧西林金黄色葡萄球菌耐药基因及致病毒素基因的研究

目的研究金黄色葡萄球菌耐药基因及致病因子中毒休克综合征毒素-1（TSST-1）基因和杀白细胞毒素（PVL）基因的分布特征及致病性。方法收集临床分离的80株金黄色葡萄球菌，PCR法检测毒素基因TSST-1，PVL和mecA耐药基因。结果80株金黄色葡萄球菌经PCR法，mecA基因检出率为56．3％（45／80），其中2006年为65．8％（25／38），2007年为47．6％（20／42），2007年的mecA基因检出率低于2006年。PVL^＋菌株的分离率为30．3％，PVL阳性的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）为13株（13／45，28．9％），金黄色葡萄球菌（MSSA）为11株（11／35，31．4％），差异无统计学意义（P〉0．05）。TSST-1基因检出率为6．3％（5／80），MSSA中未检出TSST-1基因。结论产PVL和TSST-1的MRSA致病力更强，增加了临床治疗的难度，对MRSA引起的感染应加强控制，防止其在医院播散流行。

化脓链球菌致中毒性休克综合征临床分析

目的了解化脓链球菌致中毒性休克综合征(STSS)的实验室检查特征,为临床诊治和流行病学调查提供参考依据。方法回顾性分析1例化脓链球菌感染致STSS患者的临床诊治经过和实验室检查数据,对分离株进行emm基因分型,并检测其常见超抗原基因。结果该患者因左脚趾皮肤溃破致左下肢严重感染,并伴多器官功能衰竭及STSS。伤口分泌物分离出化脓链球菌,对青霉素敏感。分离株为emm 1.1型,携带speA、speC、spek、ssa和smeZ等5种超抗原基因。临床采取清创、负压封闭引流技术(VSD)和青霉素联合克林霉素抗感染等综合治疗,患者痊愈出院。结论化脓链球菌致STSS可引起严重的临床症状,与其携带多种超抗原基因有关。外科治疗和有效抗感染是保证治疗成功的关键。

tst基因阳性金黄色葡萄球菌的流行及基因分型

目的:检测金黄色葡萄球菌染色体上编码中毒休克综合征毒素-I(TSST-I)的tst基因,研究tst基因携带情况以及临床感染特点。方法:应用PCR方法对临床分离的金黄色葡萄球菌mecA基因和tst基因进行体外扩增;多重PCR对tst基因阳性耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)进行SCCmec基因分型。结果:460株金黄色葡萄球菌检测出mecA基因阳性180株,阳性率为39.1%(180/460);tst基因阳性菌株105株,阳性率为22.8%(105/460)。105株tst基因阳性菌株中耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)53株,甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌(MSSA)52株,分别占29.4%和18.6%,MRSA较MSSA tst基因检出率高,差异有统计学意义(P<0.05)。tst基因阳性MRSASCCmec基因分型以SCCmecII和SCCmecIII为主,分别占30.2%(16/53)、60.4%(32/53),另有5株未分型。结论:tst基因阳性菌株在临床分离的MRSA中占有较高比例,SCCmec基因分型以SCCmecII和SCCmecIII为主,临床医生应予以足够重视。

金黄葡萄球菌中毒休克综合征毒素1的研究

目的应用PCR技术，检测金黄葡萄球菌的mecA基因和染色体上编码中毒休克综合征毒素1（TSST-1）的tst基因，了解tst基因的携带情况。方法用PCR法对我院2006年8月-2007年5月临床分离的84株金黄葡萄球菌mecA基因和tst基因进行体外扩增，建立快速、特异、灵敏的检测产TSST-1耐甲氧西林金黄葡萄球菌（MRSA）的方法。结果成功的对金黄葡萄球菌mecA基因和埘基因进行了检测，并进行基因测序。在我院84株受检金黄葡萄球菌中，41株金黄葡萄球菌的mecA基因扩增呈阳性，阳性株占48．81％。16株tst基因阳性，阳性株占19．05％。10株金黄葡萄球菌同时扩增出mecA基因和tst基因，阳性株占24．39％（10／41）。结论tst基因阳性株在临床分离的耐甲氧西林金黄葡萄球菌中占有较高的比例，应予以足够重视。

金黄色葡萄球菌中毒休克综合征毒素1在大肠杆菌中的分泌型表达

中毒休克综合征毒素１（Ｔｏｘｉｃｓｈｏｃｋｓｙｎｄｒｏｍｅｔｏｘｉｎ－１，ＴＳＳＴ－１）在中毒休克综合征（Ｔｏｘｉｃｓｈｏｃｋｓｙｎｄｒｏｍｅ，ＴＳＳ）的发病过程中起重要作用。本研究应用ＰＣＲ和ＤＮＡ重组技术，构建了ＴＳＳＴ－１分泌型表达载体ｐＲＴＳ２０并在大肠杆菌细胞周质表达出分子量为２２×１０３的重组ＴＳＳＴ－１，表达量约占周质总蛋白的６％～８％。Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹杂交表明，表达产物具有特异的抗原活性。对ＴＳＳＴ－１生物学特性、结构功能关系有待进一步研究。本文对ＴＳＳＴ－１抗毒素的制备具有一定的参考意义。