猪支气管黏膜上皮细胞的分离培养和传代研究

利用气管-支气管扎结灌注酶冷消化法分离气管黏膜上皮细胞,比较胰蛋白酶和链霉蛋白酶消化效果,并研究含不同细胞生长因子和血清浓度的培养体系来寻找经济、易重复的气管上皮细胞最适培养技术。用抗8/18细胞角蛋白免疫组化法鉴定气管上皮细胞,用流式细胞仪检测细胞凋亡来分析本研究中气管上皮细胞最大传代次数。研究结果表明胰蛋白酶消化气管所得的目的细胞量小、活性差、细胞贴壁和生长困难,链霉蛋白酶灌注冷消化法可获得数量大、活性高、纯度好的目的细胞;基础的上皮细胞培养体系中含低浓度血清、转铁蛋白和人表皮生长因子可以有效保证气管上皮原代和传代生长。本研究所分离的气管上皮细胞可连续传到第6代,传代细胞活性好、纯度高,可为进一步的气管上皮细胞永生化研究提供材料和奠定技术基础。

多层螺旋CT(MSCT)仿真支气管镜对儿童气管、支气管异物的诊断价值

目的 评价多层螺旋CT仿真支气管镜 (CTVB)对儿童气管、支气管异物的诊断价值。方法 对 12例临床高度怀疑气管、支气管异物的患儿行多层螺旋CT(MSCT)仿真支气管镜检查 ,自下咽部至膈面行轴位容积扫描 ,扫描后将容积数据传至GEAW 4 0工作站 ,运用Navigator功能软件获得CTVB图像 ,部分病例进行MPVR重建 ,结合CT原始图像进行诊断 ,并与纤维支气管镜检查对照。结果 6例位于主支气管 ;2例位于气管 ,异物有花生米碎片 3例 ;玉米 2例 ;花生壳、黄豆及桃酥碎片各 1例 ;痰栓 4例。经纤维支气管镜取出异物或吸痰等治疗。结论 CTVB是一种非侵入性、无痛苦、安全、易为儿童所接受的检查方法 ,对儿童气管、支气管异物的诊断、术前筛选、定位、了解手术路径及术后复查等有很大的价值。

大鼠气管-支气管上皮细胞的分离、鉴定和培养

目的探讨大鼠气管-支气管上皮细胞的分离、鉴定和培养的方法。方法采用链酶蛋白酶消化联合细胞刷刷洗气管-支气管分离上皮细胞,激光共聚焦显微镜下鉴定,于无血清完全F12培养基中培养。结果实验中可得到大约106个细胞/鼠,并且有较高的成活率和细胞纯度,在无血清完全F12培养基中细胞生长良好。结论消化后刷洗法是一种实用的大鼠气管-支气管上皮细胞提取方法,无血清完全F12培养基是一种可行的培养体系。

胸腔胃-气管(主支气管)瘘临床与影像学诊断体会

目的 :探讨胸腔胃 气管 (主支气管 )瘘的特异性临床表现和影像学征象。方法 :回顾性分析 5例具有完整临床资料的胸腔胃 气管瘘临床、CT和口服碘水造影表现。结果 :胸腔胃 气管瘘临床表现有进食水后呛咳和平卧位呛咳 ,坐立位减轻 ,肺部感染、发热、消瘦、乏力和水、电解质紊乱等 ;口服碘水造影可显示瘘口的位置、大小以及肺部感染情况 ;CT检查可详细观察胸部情况 ,了解瘘与邻近结构的详细解剖 ,测量气管 /支气管内径。结论 :根据临床表现和食管造影可以确诊胸腔胃 气管瘘 ,CT为无创伤、无刺激性检查确诊手段 。

多层螺旋CT胸部低剂量扫描对气道三维重建的应用研究

目的:比较低剂量与常规剂量条件下中央气道三维重建图像的差别,探讨低剂量螺旋CT扫描进行中央气道三维重建的可行性。材料和方法:32例病例行低剂量(50mAs)平扫及常规剂量(195mAs)平扫(1例)及增强扫描(31例),将两组原始数据分别普通算法及高分辨算法重叠重建出4组横断面图像,并进行气道SSD及VR重建,由两名放射科医师分析4组图像的质量、支气管显示情况、支气管病变检出情况,将结果进行统计学分析。结果:①图像质量:两组剂量间SSD图像质量无明显差异,高分辨重建图像质量≥普通算法重建图像质量;VR图像质量两种剂量之间无明显差异,高分辨算法图像质量≥标准算法重建图像质量。②支气管显示:两名医生评价结果均表明对段以上支气管显示方面无论SSD图像还是VR图像,低剂量与常规剂量组以及两种算法图像之间均无明显差异。③病变检出:无论SSD还是VR图像4组图像对支气管病变的检出无差异。④剂量差别:低剂量扫描比常规剂量扫描辐射剂量大大降低(13.6～3.6mGy)。结论:与常规剂量扫描相比,低剂量薄层扫描气道三维重建图像质量、对中央气道显示及病变检出都无明显差异,而病人接受的辐射剂量却大大降低,因此低剂量薄层扫描气道三维重建可以代替常规剂量重建图像应用于临床气道病变显示。

单纯气管支气管结核60例临床分析

目的 探索单纯气管支气管结核的临床特征及诊断。方法 分析 6 0例单纯气管支气管结核的临床表现、实验室检查、胸部 X线及胸部 CT表现及纤维支气管镜检查结果。结果 临床表现为咳嗽、喘鸣、发热。胸部 X线表现为 :肺不张、局限性肺气肿。纤维支气管镜检查结果 :黏膜炎性浸润型占 4 3.3%。黏膜溃疡或干酪坏死型占 2 8.3%。肉芽增殖型占 16 .7%。瘢痕狭窄型 11.7%。结论 纤维支气管检镜查是诊断气管支气管结核的最重要的方法。对了解病情、指导治疗。

2例气管支气管淀粉样变性分析

目的探讨气管及支气管淀粉样变性的临床表现、病理学、影像学特征和诊疗方法。方法总结广州市第一人民医院的2例气管支气管淀粉样变性病例特点,并结合相关文献进行分析和总结。结果①患者主要临床表现为反复咳嗽、咳痰、咳血及气促。②影像学特点:CT提示双侧假声带、气管管壁明显肿胀狭窄及环形增厚。③病理学检查提示气管粘膜上皮镜下可见大量片、块状红染的均质"云雾状"无结构物质沉积,淀粉染色阳性。④治疗:气管淀粉样变性的治疗有以马法兰+泼尼松治疗为主的化疗、激光、冷冻及手术治疗或对症治疗。结论该病临床表现无明显特征,容易误诊,病理学是确诊的唯一手段,治疗困难,往往预后不良。

MSCT在诊断小儿气管、支气管非金属异物的诊断价值

目的：探讨多层螺旋CT后处理技术在小儿气管、支气管非金属异物中的诊断价值。材料与方法：选取本院2012年1月~2013年12月全部经纤维支气管镜证实为小儿气管、支气管非金属异物25例进行回顾性分析,25例病人均行MSCT螺旋扫描及多平面重建（MPR）、容积显示技术（VRT）、最大强度投影（MIP）、CT仿真内镜成像（CTVE）。结果：异物位于气管内4例,右主支气管14例,右中间段支气管1例,左主支气管6例。结论：多层螺旋CT后处理技术是诊断小儿气管、支气管非金属异物可靠、安全、定位准确、诊断率高的一种方法。

屋尘螨抗原对大鼠支气管上皮细胞白细胞介素6和白细胞介素8表达的影响

目的探讨屋尘螨(Derp1)抗原对大鼠原代支气管上皮细胞白细胞介素6(IL-6)和IL-8表达的影响。方法将大鼠原代支气管上皮细胞随机分为正常对照组和实验组。实验组再分为3个不同浓度组(1、5及10μg/mL),待细胞生长至融合90%的单层平面时,分别加入不同浓度的Derp1抗原液。在4、8和24 h分别观察各组细胞的形态。采用酶联免疫法(ELISA)检测其细胞上清液IL-6和IL-8的浓度含量。结果正常对照组细胞表现为单层细胞平铺状态,实验组细胞形态及细胞间隙无明显变化,屋尘螨刺激4 h,IL-6和IL-8释放水平开始升高;刺激8 h,IL-6和IL-8继续升高,以5μg/mL组和10μg/mL组更为显著(P<0.01);刺激24 h,IL-6和IL-8进一步升高但与8 h组相比无统计学意义(P>0.05)。结论 Derp1抗原刺激气道上皮细胞释放一系列炎症因子如IL-6和IL-8从而参与哮喘气道炎症反应。

螺旋CT低剂量胸部扫描技术在儿童气管病变中的应用

目的评价螺旋CT低剂量胸部扫描技术在儿童气管病变的应用价值。方法150例疑有气管病变的儿童,用3组不同的管电流(40、80、180mA)行螺旋CT胸部扫描。记录单次加权CT剂量指数(weighted CTdose index,CTDIw)、扫描长度,计算出平均剂量长度乘积(dose-length produce,DLP)。由专家对不同扫描参数的气管后处理所显示的病变与支气管镜检结果进行比较,按Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级图像等级评判图像质量,并进行统计学处理。结果40、80mA的CTDIw及DLP与180mA的比值分别为20·5%、41·0%。各组可符合临床诊断要求的后处理图像差异无统计学意义。40和80mA扫描诊断的准确性分别为98·3%、100%。结论螺旋CT低剂量胸部扫描不影响小儿气管图像后处理效果,可清楚显示病变,适用于儿童气管疾病的检查。

2种气管黏膜上皮细胞体外培养技术的研究

目的为以猪气管黏膜上皮为细胞模型的研究奠定物质基础,进一步探讨猪气管黏膜上皮细胞的体外传统培养和气液界面培养技术,从而使2种培养技术优势互补。方法对猪气管上皮分离、纯化、培养和传代,并探索上皮细胞最佳冻存复苏条件;复苏后的气管上皮细胞进行气液界面培养,绘制细胞生长曲线和观察细胞纤毛生发情况。利用免疫组化法鉴定上皮细胞。结果4步纯化法可以得到高纯度的气管上皮细胞。使用胎牛血清、DMEM/F12培养液和DMSO的体积分数为50%、40%和10%的冻存体系保存的气管上皮,复苏后细胞存活率平均可达89%。优化后的传统方式培养的上皮细胞可连续传代到第8代,但从第2代开始便观察不到纤毛,转换成气液界面连续培养2代后重新生发纤毛,细胞存活期延长。免疫组化结果显示分离培养细胞为上皮细胞。结论成功建立了2种猪气管上皮细胞培养技术,并找到适宜的气管上皮细胞冻存条件,节省了不断原代取材的成本和时间,并成功实现传统培养细胞冻存复苏后很快适应气液界面的培养并恢复细胞的天然结构,为猪气管黏膜上皮相关研究提供丰富的细胞来源。

儿童气管、支气管内特殊异物临床研究

目的:探讨气管、支气管内特殊异物的临床特点及治疗方法。方法:回顾性分析自1998年9月以来收治的789例儿童气管、支气管异物病历资料,从发病率、患者性别、年龄、病程、临床症状、辅助检查、治疗方法、异物的解剖位置、异物种类及诊疗效果等方面对其中的23例特殊异物的临床特点及治疗方法进行总结。结果:22例痊愈出院,1例死亡。结论:气管、支气管内特殊异物在临床特点及治疗方法等方面均不完全等同于普通异物。