鸡胚气管环纤毛对不同类型AIBV毒株的敏感性

以鸡胚气管环纤毛运动作指示系统，应用鸡胚气管环组织培养不同血清型的７个标准ＡＩＢＶ毒株及５个不同致病型的分离毒株。采用５０ＣＤ５０病毒量ＩＢＶ毒株感染鸡胚气管环培养物，观察感染后不同时间气管环纤毛的存活率。结果表明，鸡胚气管环纤毛对不同血清类型的ＡＩＢＶ毒株敏感性各具特征。

鸡传染性支气管炎病毒在鸡胚肾细胞和气管环培养中的适应性比较

将６株鸡传染性支气管炎病毒（ＩＢＶ）分别接种鸡胚肾细胞（ＣＥＫＣ）和气管环培养（ＴＯＣ）。６株病毒无论是否已经适应于鸡胚，都在气管环培养中能引起病变。病毒适应于ＣＥＫＣ，是与病毒在鸡胚和细胞培养上的传代次数有关。分别用ＳＰＦ鸡胚、非免疫鸡胚和普通鸡胚制备的ＴＯＣ测定ＩＢＶ－Ｍ４１株的ＩＤ５０，结果用ＳＰＦ鸡胚和非免疫鸡胚制备的ＴＯＣ测定的ＩＤ５０都获得较高滴度，而在普通鸡胚制备的ＴＯＣ中ＩＤ５０明显低。

传染性支气管炎病毒M41和Ma5的气管环培养特性研究

本试验以鸡胚气管环纤毛运动作为指示系统,研究传染性支气管炎病毒IBV-M41和IBV-Ma5的气管环培养特性。用100 TOC-ID50病毒量的两毒株分别感染鸡胚气管环培养物,观察感染后不同时间气管纤毛的存活率。结果表明,IBV-M41毒株致死气管环上皮细胞的速度要比毒株IBV-Ma5快,说明2个毒株的培养特性与毒力一致。

对虾养殖生态系中有机碳的初步研究

对于围隔养殖对虾生态系中有机碳的变动进行了研究 ,结果表明 :溶解有机碳 (DOC)含量波动在 5 .2 99～ 13.39mg/ L之间 ,平均为 8.5 3mg/ L± 2 .2 5 mg/ L;颗粒有机碳 (POC)含量波动在0 .6 5～ 6 .6 3mg/ L之间 ,平均为 3.2 5 mg/ L± 1.76 mg/ L;总有机碳 (TOC)含量波动在 6 .92～ 2 0 .0 2mg/ L之间 ,平均为 11.78mg/ L± 3.82 mg/ L ;其中 DOC∶ POC∶ TOC为 0 .72∶ 0 .2 8∶ 1。各种有机碳组分的含量明显高于自然海水中各种有机碳的含量 ;各种有机碳组分的含量在养殖期间总体上呈上升的趋势 ;其变化与 DCOD的变化呈显著线性正相关的关系。

鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的血清学分型研究

本文运用气管环血清中和试验对１２个ＩＢＶ毒株进行了血清型研究。以气管环纤毛运动为指示系统，以能中和２．０ｌｏｇ１０ＣＤ５０同源病毒血清效价为１个抗体单位，含２０个抗体单位的血清与等量病毒作用测定血清对纤毛运动保护百分率，以欧氏距离数字分类分型，并用ＳＰＳＳ软件聚类分型分析。结果表明ＳＡＩＢ１属Ｍ４１型，ＳＡＩＢ３属Ｔ型；ＸＪＩＢ接近Ｍ４１型，ＳＨＩＢ、ＳＡＩＢ２接近Ｔ型。ＸＪＩＢ，ＳＨＩＢ，ＳＡＩＢ２具有过渡性（变异性）特征。

传染性支气管炎病毒自然衰减曲线的测定

研究传染性支气管炎病毒（infectious bronchitis virus,IBV）在自然环境中的衰减规律,有助于养殖场中IBV的防控和检测。本试验模拟养殖场的空气环境,应用气管环组织培养（TOC）法对IBV进行散布试验。试验通过采集不同时间段的空气样品,对SPF鸡胚气管环进行攻毒试验,以气管环纤毛运动情况及上皮细胞完整性为判定依据,绘制IBV自然衰减曲线。结果显示,IBV在进入自然环境1 h内其存活率显著下降,1~4 h趋于平缓,4 h后其存活率极低。

传染性支气管炎病毒的鉴定

试验采用鸡胚接种和气管环培养相结合的方法,对IBV毒株进行培养鉴定,IBV经鸡胚传一代后再上鸡胚气管环培养可引起气管环纤毛运动停止,应用此法可以快速地进行IBV检测。

离体金黄地鼠气管器官培养的实验形态学研究

本文报告正常状态下金黄地鼠的体外器官培养变化。应用旋转培养方法,培养液用RPMI 1640及Eagle MEM,不论是否加小牛血清,培养的气管组织均可存活到8周。组织学及超微结构观察表明,培养1~4周内的气管上皮,保持着复层或单层柱状上皮结构,表面尚见纤毛,上皮细胞还没有明显的胞浆变性。细胞器如粗面内质网及线粒体等,还未见破坏。表层上皮细胞间的连接,也是常态的紧密连接。培养5周时,上皮表面大部分纤毛脱落,表层上皮细胞核变扁平、横位。7周以后,细胞结构出现退行性变化。放射自显影观察表明,上皮细胞核内仍有明显的HTdR掺入。本文认为,在一般条件下培养4周以内,气管上皮的超微结构较为完整,此时附加实验因素,开展实验病理研究是比较合适的。基础培养液Eagle MEM具有与RPMI 1640培养液相同的培养效果,无论从防止细胞增生引起培养组织的消耗,还是从经济观点考虑,在器官培养中使用基础培养液是值得推荐的。

鸡败血霉形体致鸡胚气管器官培养病变观察

将３株鸡败血霉形体（ＭＧ）菌株的培养特，分别感染离体培养的鸡胚气管环。经光学显微镜观察，发现３个菌株均具有致纤毛运动停止的作用。扫描电镜观察，在接种ＭＧ的气管环上，见到明显的纤毛脱落、细胞剥离、粘膜面凹陷等上皮受侵蚀变化，同时见霉形体附着于光秃的上皮表面或残存纤毛的顶端。在未接种ＭＧ的气管环上未见此等现象。

鸡传染性支气管炎病毒广西分离株血清型的分析

应用病毒感染的鸡胚材料免疫新西兰兔的方法制备抗鸡传染性支气管炎病毒(IBV)单因子血清,然后在鸡胚气管环培养(Tracheal organ cultures,TOC)上对广西分离的7个IBV代表性毒株和3个常用疫苗株进行交叉病毒中和试验。结果显示,10个毒株被分为6个血清型。根据试验所得的R值,应用聚类分析法分析了各血清型毒株之间的亲缘关系,显示目前在广西流行的IBV野毒株之间以及其与疫苗株间的抗原性存在很大程度的差异,分属不同的血清型。同时还对IBV基因分型和血清分型之间的关系进行了探讨。

鸡传染性支气管炎病毒广西分离毒株抗原相关性的研究

本研究将26个传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitis virus,IBV)广西分离毒株以及参考株M41和常用疫苗株H120、Ma5和4/91共30个毒株,分别与根据这些毒株S1基因高变区Ⅰ的基因分型结果而选取的属于3个不同亚群的7个代表性分离毒株和常用疫苗株H120、Ma5和4/91制备的共10个单因子血清,在鸡胚气管环培养(TOC)上进行病毒中和试验,然后根据中和试验结果对1985～2008年间课题组所分离的26个IBV广西地方流行毒株与3个常用疫苗株H120、Ma5和4/91以及参考毒株M41的抗原相关性及其血清型进行分析。结果显示,30个试验的毒株分属7个不同的血清型,其中26个分离株有两个优势血清型(占总分离株的68%),分别是血清1型(包含13个毒株)和血清2型(包含5个毒株)。此外,我们还将分离毒株的血清分型结果与重要抗原基因(包括S1、N、M和3′UTR)的分型结果之间的关系进行了比较,发现它们之间的分型结果不尽相同。研究结果表明,近年来广西存在多个血清型IBV的流行而且不同时期流行的优势血清型不同,分离毒株之间以及分离毒株与疫苗毒株之间的抗原相关性也存在着差异。

河南不同临床型鸡支气管炎病毒流行毒株的分离鉴定及其S1基因变异分析

经鸡胚接种、RT-PCR、气管环培养等方法从河南地区发病鸡群中分离、鉴定出2株鸡传染性支气管炎病毒(Infectious bronchitic virus,IBV),分别命名为HN/HL株和HN/SG株。应用RT-PCR方法对尿囊液中HN/HL株和HN/SG株以及本室保存的H120株的S1基因全序列进行了扩增,并对其进行克隆测序。结果显示,3株IBV目的片段全长分别为1828、1825、1819bp,3个序列相互之间存在多位点的变异,同时存在插入和缺失现象;对推导的氨基酸序列进行分析表明,HN/HL株S蛋白裂解识别位点序列为HRRRR,而HN/SG株和H120株S蛋白裂解识别位点同为RRFRR。将测序结果同GenBank上登录的其他IBVS1基因相比较,发现本试验的HN/HL株与疫苗H120株的同源性仅为78.1%,HN/SG株与H120株的同源性仅为81.1%,而HN/HL株与HN/SG株的同源性为87.9%。同源性及遗传进化分析还发现,已报道的腺胃型ZJ971株和QX株在分子水平上应该分别属于呼吸型和肾型IBV。