多聚胺阳离子脂质体转染体系的构建

目的制备多聚胺阳离子脂质体(PolyamineCationicliposome,PCL),转染哺乳动物细胞,评估其转染效率及细胞毒性,筛选高效低毒的阳离子脂质体转染体系。方法多聚胺阳离子脂质TC-Chol与中性磷脂DOPE以一定比例,制备PCL,通过转染以增强型绿色荧光蛋白为报告基因的质粒PIRES2-EGFP入Hela细胞,倒置荧光显微镜下检测转染细胞的报告基因表达,通过MTT法,检测细胞毒性,筛选阳离子脂质体与DNA结合的最佳比例及最佳转染时间。结果多聚胺阳离子脂质体与DNA的质量比为3～4∶1时可达到高效低毒,转染后48h转染效率最高。结论由TC-Chol与DOPE制备的多聚胺阳离子脂质体可提高转染效率,在一定条件下可达到相对高效低毒,为基因转染和基因治疗提供可靠的实验室依据。