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Construction of Antisense Transforming Growth Factorβ_1 Gene and Its Effect on the Proliferation by Expression in Osteosarcoma Cells 被引量:1
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作者 刘勇 郑启新 +3 位作者 杜靖远 杨述华 邵增务 肖宝钧 《Journal of Huazhong University of Science and Technology(Medical Sciences)》 SCIE CAS 2003年第2期163-165,共3页
To construct the antisense transforming growth factorβ1 (TGFβ1) gene and investigate the effect of TGFβ1 autocrine loop blockage on the proliferation of osteosarcoma cells. TGFβ1 cDNA was cloned by RT-PCR from hum... To construct the antisense transforming growth factorβ1 (TGFβ1) gene and investigate the effect of TGFβ1 autocrine loop blockage on the proliferation of osteosarcoma cells. TGFβ1 cDNA was cloned by RT-PCR from human osteosarcoma cells (MG-63) and inserted into pcDNA3 to construct an antisense expression vector, which was dubbed pcDNA3-TGFβ1(-). MTT was used to detect the proliferation of osteosarcoma cells transfected by antisense TGFβl gene. Our results showed that the proliferation of the transfected osteosarcoma cells was suppressed markedly. It is concluded that TGFβ1 autocrine loop blockage in osteosarcoma cells could inhibit cell proliferation, which might be helpful for gene therapy of osteosarcoma. 展开更多
关键词 transfoming growth factorβ1 autocrine loop OSTEOSARCOMA TRANSFECTION
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EFFECTS OF TGF β1 AUTOCRINE BLOCKAGE ONOSTEOSARCOMA CELLS
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作者 YongLiu Qi-xinZheng Jing-yuanDu Shu-huaYang Zeng-wuShao Bao-junXiao 《Chinese Medical Sciences Journal》 CAS CSCD 2004年第2期155-156,共2页
Objective To evaluate the effects of transforming growth factor β1 (TGF β1) autocrine blockage on proliferation activity and drug sensitivity of osteosarcoma. Methods Northern blot, MTT determination, and 3H thymidi... Objective To evaluate the effects of transforming growth factor β1 (TGF β1) autocrine blockage on proliferation activity and drug sensitivity of osteosarcoma. Methods Northern blot, MTT determination, and 3H thymidine incorporation were used to investigate the effects of antisense TGF β1 gene on osteosarcoma. Results The proliferation of osteosarcoma cells transfected by antisense TGF β1 gene was suppressed markedly, and adriamycin sensitivity was significantly increased. Conclusion Blockage of osteosarcoma cells TGF β1 autocrine loop inhibits cell proliferation and enhances chemother-apy sensitivity. 展开更多
关键词 transfoming growth factor β1 autocrine loop OSTEOSARCOMA
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EXPRESSION OF TRANSFORMING GROWTH FACTOR-beta mRNA IN SOME LEUKEMIC CELLS
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作者 朱永明 吴克复 +3 位作者 饶青 李长虹 褚建新 赵钧铭 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 1991年第8期678-681,共4页
Bifunctional regulatory effects of TGF-beta for cell proliferation have been focused. TGFbeta becomes a candidate as the autocrine growth inhibitor to some malignant cells. Evidence has been gained in breast cancer ce... Bifunctional regulatory effects of TGF-beta for cell proliferation have been focused. TGFbeta becomes a candidate as the autocrine growth inhibitor to some malignant cells. Evidence has been gained in breast cancer cell. However, it has not been proved in leukemia and other tumors. Recently, regulations of external TGF-beta on normal and 展开更多
关键词 transforming growth factor-BETA (TGF-beta) autocrine growth factor leukemia.
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阻断转化生长因子β_1自分泌环基因治疗骨肉瘤的机制研究 被引量:9
4
作者 刘勇 杜靖远 +3 位作者 杨述华 郑启新 邵增务 郭晓东 《中国临床康复》 CAS CSCD 2003年第11期1648-1649,F003,共3页
目的阻断骨肉瘤细胞TGF-β1自分泌环能抑制肿瘤细胞的增殖活性,从而达到基因治疗骨肉瘤的目的,探讨阻断TGF-β1自分泌环基因治疗骨肉瘤的机制。方法将反义TGF-β1基因转染骨肉瘤细胞MG-63后,采用RT-PCR的方法检测肿瘤细胞BMP-2、IGF-1、... 目的阻断骨肉瘤细胞TGF-β1自分泌环能抑制肿瘤细胞的增殖活性,从而达到基因治疗骨肉瘤的目的,探讨阻断TGF-β1自分泌环基因治疗骨肉瘤的机制。方法将反义TGF-β1基因转染骨肉瘤细胞MG-63后,采用RT-PCR的方法检测肿瘤细胞BMP-2、IGF-1、bFGF基因表达的变化。结果阻断TGF-β1自分泌环后,骨肉瘤细胞BMP-2、IGF-1、bFGF基因表达明显降低或消失。结论通过阻断自分泌环以降低骨肉瘤细胞表达的TGF-β1后,肿瘤细胞其他各种细胞因子的表达明显抑制,肿瘤细胞生物学活性降低。研究阻断TGF-β1自分泌环抑制肿瘤生长和发展的机制,将为开辟骨肉瘤基因治疗的新方向奠定基础。 展开更多
关键词 转化生长因子β1 骨肉瘤 肿瘤细胞增殖活性 基因治疗 BMP-2 IGF-1 基因表达 bFGF
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转化生长因子调控表皮生长因子受体在雄激素非依赖型前列腺癌细胞中表达的意义 被引量:4
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作者 陈卫国 严春寅 +3 位作者 浦金贤 侯建全 温端改 郭震华 《中华男科学杂志》 CAS CSCD 2004年第8期595-597,共3页
目的 :探讨转化生长因子 (TGF)α对前列腺癌雄激素非依赖型细胞系中表皮生长因子受体 (EGFR)表达的调控。 方法 :采用逆转录 多聚酶链式反应和Western印迹法对TGFα刺激前列腺癌雄激素非依赖型细胞系PC3、ARCaP后EGFRmRNA表达及其蛋... 目的 :探讨转化生长因子 (TGF)α对前列腺癌雄激素非依赖型细胞系中表皮生长因子受体 (EGFR)表达的调控。 方法 :采用逆转录 多聚酶链式反应和Western印迹法对TGFα刺激前列腺癌雄激素非依赖型细胞系PC3、ARCaP后EGFRmRNA表达及其蛋白水平进行定量分析。 结果 :TGFα引起PC3、ARCaP的EGFRmRNA表达升高 ,分别为 5 .0 1± 0 .4 5和 9.0 5± 0 .6 3,明显高于对照组 (P <0 .0 5 )。PC3细胞系TGFα治疗后EGFR蛋白水平为 2 .2 8±0 .5 3,明显高于对照组 (P <0 .0 5 ) ;而ARCaP细胞系TGFα治疗后EGFR仅为 1 .2 4± 0 .2 2 ,和对照组比较无差别 (P >0 .0 5 )。 结论 :TGFα可以明显提高前列腺癌细胞的EGFR表达量 ;TGFα 展开更多
关键词 前列腺肿瘤 表皮生长因子受体 转化生长因子α自分泌环
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羧甲基壳聚糖对体外培养人成纤维细胞自分泌生长因子及其形态结构的影响 被引量:5
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作者 肖海军 侯春林 刘亚平 《第二军医大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2006年第8期848-852,共5页
目的:观察羧甲基壳聚糖对体外培养的人成纤维细胞形态结构及其分泌生长因子功能的影响,探讨其减轻创面过度愈合、防止术后粘连的可能机制。方法:体外培养的人成纤维细胞,经不同浓度(0.01、0.1、1.0、10 mg/ml)羧甲基壳聚糖作用4 d后,或... 目的:观察羧甲基壳聚糖对体外培养的人成纤维细胞形态结构及其分泌生长因子功能的影响,探讨其减轻创面过度愈合、防止术后粘连的可能机制。方法:体外培养的人成纤维细胞,经不同浓度(0.01、0.1、1.0、10 mg/ml)羧甲基壳聚糖作用4 d后,或经0.1 mg/ml羧甲基壳聚糖培养不同时间(1、2、3、4、56、d)后,采用间接酶联免疫吸附法(ELISA)和放射免疫法测定其自分泌转化生长因子-β1(TGF-β1)及表皮生长因子(EGF)的变化规律;并通过光镜及透射电镜观察不同浓度及不同作用时间后人成纤维细胞形态结构的变化。结果:羧甲基壳聚糖(≥0.1 mg/ml)可抑制成纤维细胞自分泌TGF-β1,且随浓度的增大及作用时间的延长而增强(P<0.05);但对EGF的自分泌无明显影响(P>0.05)。羧甲基壳聚糖(≥0.1 mg/ml)体外能够抑制成纤维细胞的增殖,引起超微结构的变化。结论:羧甲基壳聚糖浓度(≥0.1 mg/ml)体外可能通过改变人成纤维细胞超微结构,选择性抑制其自分泌TGF-β1,从而抑制细胞增殖,减轻组织粘连。 展开更多
关键词 羧甲基壳聚糖 转化生长因子-Β1 表皮生长因子 自分泌 粘连
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反义转化生长因子β1表达载体的构建及其对骨肉瘤细胞增殖活性的影响 被引量:2
7
作者 刘勇 杜靖远 +3 位作者 杨述华 郑启新 邵增务 肖宝钧 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 2004年第1期90-92,共3页
目的 :构建反义TGFβ1基因 ,探讨阻断肿瘤细胞TGFβ1自分泌环对细胞增殖活性的影响。方法 :采用RT PCR获取人TGFβ1cDNA后 ,构建反义TGFβ1表达载体pcDNA3 TGFβ1( -)。将pcDNA3 TGFβ1( -)转染骨肉瘤细胞MG -63 ,采用流式细胞仪检测... 目的 :构建反义TGFβ1基因 ,探讨阻断肿瘤细胞TGFβ1自分泌环对细胞增殖活性的影响。方法 :采用RT PCR获取人TGFβ1cDNA后 ,构建反义TGFβ1表达载体pcDNA3 TGFβ1( -)。将pcDNA3 TGFβ1( -)转染骨肉瘤细胞MG -63 ,采用流式细胞仪检测阻断TGFβ1自分泌环对肿瘤细胞增殖活性的影响。结果 :pcDNA3 TGFβ1( -)转染骨肉瘤细胞后 ,反义基因转染细胞MG TGFβ1( -)的G0 /G1期细胞从 5 6 2 %和 60 1%增至 71 6% ,S期细胞从 19 1%和 17 8%降至 12 9% ,细胞增殖活性明显降低。结论 :通过阻断TGFβ1自分泌环以降低骨肉瘤细胞表达的TGFβ1,可以明显抑制肿瘤细胞增殖活性。进一步的深入研究 ,必将为骨肉瘤疗效的提高开辟新的研究方向。 展开更多
关键词 转化生长因子Β1 骨肉瘤 自分泌环 转染 肿瘤细胞 细胞增殖活性
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阻断转化生长因子β1自分泌环对骨肉瘤细胞恶性表型的影响 被引量:1
8
作者 刘勇 郑启新 +3 位作者 杜靖远 杨述华 邵增务 肖宝钧 《中国矫形外科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第17期1329-1330,共2页
[目的]观察阻断转化生长因子β1(TGFβ1)自分泌环对骨肉瘤细胞恶性表型的影响。[方法]将反义TGFβ1基因转染骨肉瘤细胞MG-63,G418筛选14d后获得转染细胞系MG-TGFβ1(-)。取MTT法检测转染细胞增殖活性,并观察细胞软琼脂克隆形成数和裸鼠... [目的]观察阻断转化生长因子β1(TGFβ1)自分泌环对骨肉瘤细胞恶性表型的影响。[方法]将反义TGFβ1基因转染骨肉瘤细胞MG-63,G418筛选14d后获得转染细胞系MG-TGFβ1(-)。取MTT法检测转染细胞增殖活性,并观察细胞软琼脂克隆形成数和裸鼠体内致瘤能力。[结果]与MG-63和空载体转染细胞MG-pcDNA3相比,MG-TGFβ1(-)细胞增殖活性明显受到抑制。MG-TGFβ1(-)的软琼脂克隆形成数(28·2±5·6)比MG-63组(48·6±8·1)和MG-pcDNA3组(45·2±4·7)明显减少,裸鼠体内形成肿瘤的体积(83·4±27·4)mm3也明显小于MG-63组(191·3±21·5)mm3和MG-pcDNA3组(204·2±30·7)mm3。[结论]反义TGFβ1基因转染骨肉瘤细胞可以逆转肿瘤细胞的恶性表型,进一步的研究将有助于提高骨肉瘤的治疗效果。 展开更多
关键词 转化生长因子Β1 反义基因治疗 骨肉瘤 细胞恶性表型 骨肉瘤细胞 自分泌环 阻断 TGFβ1 细胞增殖活性 转染细胞系
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体外培养人成纤维细胞转化生长因子-β_1自分泌规律的研究 被引量:1
9
作者 张洁 林苹 +4 位作者 黄鲁刚 陆燕蓉 周宏远 黄孝忠 宁其志 《中国修复重建外科杂志》 CAS CSCD 2002年第5期319-321,共3页
目的 探讨体外培养人成纤维细胞转化生长因子 -β1 (TGF-β1 )的自分泌规律。方法 应用健康人包皮环切术所得包皮 ,通过体外成纤维细胞传代培养共 12代 ,运用 EL ISA法 ,分别检测不同代次成纤维细胞 TGF-β1 浓度 ,并测定第 6代成纤... 目的 探讨体外培养人成纤维细胞转化生长因子 -β1 (TGF-β1 )的自分泌规律。方法 应用健康人包皮环切术所得包皮 ,通过体外成纤维细胞传代培养共 12代 ,运用 EL ISA法 ,分别检测不同代次成纤维细胞 TGF-β1 浓度 ,并测定第 6代成纤维细胞在不同时间培养上清液中 TGF-β1 的浓度。结果 自第 3代开始 ,成纤维细胞培养上清液可检测到 TGF-β1 ,并逐渐升高 ,至第 6代达分泌高峰 (45 0 ng/ L ) ,第 11、12代不能测到 ;而第 6代成纤维细胞 ,培养上清液中 TGF-β1 含量以第 5天的检测值最高 (6 80 ng/ L ) ,是第 1天检测值 (2 80 ng/ L )的 2 .5倍。结论 成纤维细胞 TGF-β1 自分泌能力 ,是由弱到强再逐渐减弱的过程 。 展开更多
关键词 体外培养 人成纤维细胞 转化生长因子-Β1 自分泌 ELISA法 创伤修复
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TGF-β作为自身负调节因子对J6-1细胞基因表达的影响 被引量:2
10
作者 张晓红 吴克复 +2 位作者 郑国光 李长虹 宋玉华 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 1996年第1期56-60,共5页
用转化生长因子β(TGF-β)的反义寡核苷酸和抗血清证明TGF-β1是J6-1细胞的自身负调节因子,对J6-1细胞的增殖和癌基因及生长因子表达有调节作用。此外,由J6-1细胞膜提取液分离到TGF-β活性组分,提示J6-1细胞表面存在膜相关的TGF-β,为J... 用转化生长因子β(TGF-β)的反义寡核苷酸和抗血清证明TGF-β1是J6-1细胞的自身负调节因子,对J6-1细胞的增殖和癌基因及生长因子表达有调节作用。此外,由J6-1细胞膜提取液分离到TGF-β活性组分,提示J6-1细胞表面存在膜相关的TGF-β,为J6-1细胞的接触性调节提供又一个“自家并置性刺激”机理。在J6-1细胞培养液中外加rhTGF-β可增强膜结合型M-CSF的表达,提示J6-1细胞调节机理中TGF-β与M-CSF的密切关系。 展开更多
关键词 转化生长因子 自分泌 白血病细胞系
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转化生长因子α,β对人结肠腺癌细胞株HT_(29)细胞生长调节影响的研究 被引量:1
11
作者 朱兆文 曾林芳 +1 位作者 王永潮 李通 《解剖学报》 CAS CSCD 北大核心 1996年第3期284-289,共6页
用生长曲线、3H-TdR参入及细胞周期分析等方法,研究了TGF-α,β在体外对人结肠腺癌细胞株HT(29)细胞的生长调节作用,为进一步探讨TGF-α,β对HT(29)细胞的生长调节作用机制,采用Dot杂交分析探讨了T... 用生长曲线、3H-TdR参入及细胞周期分析等方法,研究了TGF-α,β在体外对人结肠腺癌细胞株HT(29)细胞的生长调节作用,为进一步探讨TGF-α,β对HT(29)细胞的生长调节作用机制,采用Dot杂交分析探讨了TGF-α,β对HT(29)细胞c-myc基因mRNA表达的影响。结果发现TGF-α可促进HT(29)细胞生长和增殖,而TGF-β则抑制其生长和增殖,TGF-α可增加其c-myc基因表达,而TGF-β则抑制其c-myc基因表达。本研究还采用肿瘤细胞无血清培养技术以及分子生物学方法,观察了HT(29)细胞自分泌生长以及在其自分泌生长调控中TGF-α,β,βmRNA表达。研究发现HT(29)细胞具有自分泌调控生长能力,在无血清培养条件下TGF-αmRNA表达增加,而TGF-βmRNA表达则受到某种程度的抑制。上述研究结果表明TGF-α,β分别作为正、负生长调节因子在HT(29)细胞自分泌生长调节中可能具有重要作用。TGF-α,β平衡失调同结、直肠癌发生、发展具有密切关系。 展开更多
关键词 转化生长因子Α 转化生长因子Β C-MYC基因 自分泌生长 结.直肠癌
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奥曲肽对人肝癌细胞系SMMC-7721转化生长因子-α的影响
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作者 李建生 刘文斌 +4 位作者 许戈良 胡何节 李煜 汤志刚 翟志敏 《中国癌症杂志》 CAS CSCD 2005年第3期282-284,287,共4页
目的:探讨奥曲肽对肝癌细胞SMMC-7721转化生长因子-α(TGF-α)自分泌及对其促进细胞增殖的影响.方法:运用放射免疫法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测TGF-α的表达,运用免疫组化法和RT-PCR检测表皮生长因子受体(EGFR)的表达,细胞增殖... 目的:探讨奥曲肽对肝癌细胞SMMC-7721转化生长因子-α(TGF-α)自分泌及对其促进细胞增殖的影响.方法:运用放射免疫法和逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测TGF-α的表达,运用免疫组化法和RT-PCR检测表皮生长因子受体(EGFR)的表达,细胞增殖变化以流式细胞术和集落形成实验检测.结果:加入奥曲肽后,上清液中TGF-α含量在相应时间点均较对照组明显减少,抑制率为15.0%~26.7%; TGF-α mRNA指数较对照组降低.TGF-α使EGFR mRNA及蛋白表达增加,而奥曲肽则抑制它们的表达.奥曲肽和TGF-α同时作用于细胞时,细胞增殖指数(PI)值和集落形成率比TGF-α单独作用时明显降低.结论:人肝癌细胞系SMMC-7721中存在TGF-α自分泌环路,并促进该细胞增殖,奥曲肽能抑制此细胞系TGF-α自分泌,从而抑制细胞增殖. 展开更多
关键词 奥曲肽 肝肿瘤 转化生长因子-Α 自分泌 培养的肿瘤细胞
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MORPHOLOGICAL EVIDENCE FOR THE AUTOCRINE HYPOTHESIS
13
作者 刘明 《Chinese Science Bulletin》 SCIE EI CAS 1990年第24期2091-2093,共3页
Autocrine secretion is a concept which emerges in the search for the molecular basis of malignant tumour. Tumour cells can produce endogenous polypeptide growth factors which act on their producer cells via functional... Autocrine secretion is a concept which emerges in the search for the molecular basis of malignant tumour. Tumour cells can produce endogenous polypeptide growth factors which act on their producer cells via functional external receptors. This process has been termed 'autocrine secretion'. Autocrine hypothesis explains the malignant growth of tumour cells satisfactorily. Transforming growth factor-α (TGF-α)is one of the typical autocrine growth factors. TGF-α can induce the reversible phenotypic transformation of normal rat kidney cells in the presence of other growth factors. This suggests that TGF-α may play an im- 展开更多
关键词 autocrine BRONCHIAL CARCINOMA transforming growth factor electron microscope.
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胶质瘤细胞PDGFBB自分泌环活性与肿瘤细胞egr-1基因表达关系的研究 被引量:1
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作者 于士柱 浦佩玉 +3 位作者 江德华 路敦跃 管欣琴 安同岭 《中华神经外科杂志》 CSCD 北大核心 2000年第4期235-238,共4页
目的 探讨胶质瘤细胞血小板源生长因子 (PDGF)BB自分泌环活性与肿瘤细胞egr 1基因表达的关系 ,以及它们在胶质瘤发生、发展中的作用。方法 用mRNA原位杂交和免疫组化染色观察了 73例人脑胶质瘤组织。结果 胶质瘤细胞PDGFBmRNA表达水... 目的 探讨胶质瘤细胞血小板源生长因子 (PDGF)BB自分泌环活性与肿瘤细胞egr 1基因表达的关系 ,以及它们在胶质瘤发生、发展中的作用。方法 用mRNA原位杂交和免疫组化染色观察了 73例人脑胶质瘤组织。结果 胶质瘤细胞PDGFBmRNA表达水平随肿瘤恶性程度增加而升高。egr 1mRNA、EGR 1蛋白、PDGFα受体和β受体及酪氨酸磷酸化蛋白阳性肿瘤细胞密度彼此间均呈显著性正相关 ,并均随肿瘤恶性程度及肿瘤细胞PDGFBmRNA表达水平升高而同步递增。结论 胶质瘤细胞普遍存在PDGFBB自分泌环活性和egr 1基因表达异常增加 ,它们可能互为因果 ,并产生一个放大效应 ,这也许是胶质瘤发生、发展的重要因素。 展开更多
关键词 脑胶质瘤 血小板源生长因子B链 自分泌环 EGR-1
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miR-223对大鼠心肌细胞中纤维化相关信号通路分子的干预作用及机制 被引量:5
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作者 张多多 李宗奇 孔晶晶 《中华医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第29期2303-2308,共6页
目的探讨miR-223对大鼠心肌细胞纤维化相关通路的保护作用及对Twist家族碱性螺旋-环-螺旋转录因子1(Twist1)、转化生长因子β1受体2(TGFBR2)的表达调控。方法体外培养大鼠心肌细胞H9c2,以TGF-β人工诱导心肌细胞纤维化相关通路活化,分... 目的探讨miR-223对大鼠心肌细胞纤维化相关通路的保护作用及对Twist家族碱性螺旋-环-螺旋转录因子1(Twist1)、转化生长因子β1受体2(TGFBR2)的表达调控。方法体外培养大鼠心肌细胞H9c2,以TGF-β人工诱导心肌细胞纤维化相关通路活化,分为模型组、miR-223组(转染miR-223过表达慢病毒)以及miR-223-NC组(转染miR-223-NC慢病毒),同时设立正常细胞对照组。免疫组化检测α-SMA的表达情况;实时荧光定量PCR(real-time PCR)测定心肌细胞miR-223、collagenⅠ、collagenⅢ、Twist1、TGFBR2 mRNA表达水平;Western印迹法检测心肌细胞Twist1、TGFBR2、collagenⅠ、collagenⅢ及α-SMA蛋白水平;双荧光素酶报告基因验证miR-223对Twist1、TGFBR23′UTR的靶向调控。结果miR-223组α-SMA阳性心肌细胞平均吸光度(0.089±0.013)明显低于模型组和miR-223-NC组(0.134±0.018,0.132±0.016);miR-223组心肌collagenⅠ、collagenⅢ、Twist1、TGFBR2 mRNA表达水平与模型组及miR-223-NC组比较显著下降,且差异具有统计学意义(P<0.05);Twist1、TGFBR2、collagenⅠ、collagenⅢ及α-SMA蛋白水平较模型组及miR-223-NC组显著下降,且差异具有统计学意义(P<0.05);Twist1、TGFBR23′UTR野生型双荧光素酶报告质粒与miR-223 mimics共转染293T细胞,荧光素酶活性均显著降低[(0.48±0.06,0.51±0.07)比(0.92±0.17,0.94±0.12)]。结论miR-223可能通过下调Twist1、TGFBR2基因的表达抑制心肌细胞中纤维化相关信号通路活化。 展开更多
关键词 微小RNA-223 心肌纤维化 Twist家族碱性螺旋-环-螺旋转录因子1 转化生长因子β1受体2
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