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Cloning and Characterization of a Lycium chinense Carotenoid Isomerase Gene Enhancing Carotenoid Accumulation in Transgenic Tobacco
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作者 李招娣 季静 王罡 《Transactions of Tianjin University》 EI CAS 2015年第5期468-476,共9页
Carotenoid isomerase (CRTISO)is a key enzyme that catalyzes the conversion of cis-lycopene to all- trans tycopene. In this study, we isolated and characterized the CRTISO gene from Lycium chinense (LcCRTISO) for t... Carotenoid isomerase (CRTISO)is a key enzyme that catalyzes the conversion of cis-lycopene to all- trans tycopene. In this study, we isolated and characterized the CRTISO gene from Lycium chinense (LcCRTISO) for the first time. The open reading flame of LcCRTISO was 1 815 bp encoding a protein of 604 amino acids with a molecular mass of 66.24 kDa. Amino acid sequence analysis revealed that the LcCRTISO had a high level of simi- larity to other CRTISO. Phylogenetic analysis displayed that LcCRTISO kept a closer relationship with the CRTISO of plants than with those of other species. Semi-quantitative PCR analysis indicated that LcCRTISO gene was expressed in all tissues tested with the highest expression in maturing fruits. The overexpression of LcCRTISO gene in transgenic tobacco resulted in an increase of total carotenoids in the leaves with [3-carotene and lutein being the predominants. The results obtained here clearly suggested that the LcCRTISO gene was a promising candidate for carotenoid production. 展开更多
关键词 Lycium chinense carotenoid isomerase functional expression carotenoid biosynthesis transgenictobacco
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苹果类泛素蛋白MdRAD23C2基因的分离及功能鉴定
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作者 豆芳芳 龚小庆 邹养军 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2019年第11期67-76,共10页
【目的】研究苹果类泛素蛋白RAD23基因(MdRAD23C2)的功能,为抗旱苹果新品种的培育奠定基础。【方法】以秦冠苹果(Malusdomesticacv.‘Qinguan’)为材料,克隆MdRAD23C2基因,对其进行生物信息学和定位分析,通过实时定量PCR分析其在不同逆... 【目的】研究苹果类泛素蛋白RAD23基因(MdRAD23C2)的功能,为抗旱苹果新品种的培育奠定基础。【方法】以秦冠苹果(Malusdomesticacv.‘Qinguan’)为材料,克隆MdRAD23C2基因,对其进行生物信息学和定位分析,通过实时定量PCR分析其在不同逆境胁迫下(干旱、盐、碱和ABA)的表达模式。构建过表达载体转化农杆菌,采用叶盘法转化烟草,选取相应的转基因烟草株系,分析干旱胁迫下转基因烟草的相对电导率和丙二醛、叶绿素、过氧化氢(H2O2)、超氧阴离子(O-·2)含量以及二氨基联苯胺(DAB)、氮蓝四唑(NBT)染色情况,探讨MdRAD23C2过表达对转基因烟草抗旱能力的影响。【结果】苹果MdRAD23C2基因编码序列长1146bp,编码381个氨基酸,其定位于细胞核和细胞膜中,可响应干旱、盐和碱等逆境胁迫。干旱处理2周,野生型烟草株系萎蔫程度明显,且DAB和NBT染色加深,相对电导率、丙二醛、H2O2和O-·2含量均极显著高于转基因型烟草,而叶绿素含量极显著低于转基因型烟草,说明过量表达MdRAD23C2的烟草株系对干旱胁迫的耐受性明显增强。【结论】分离克隆了苹果MdRAD23C2基因,该基因可提高转基因植物对干旱胁迫的耐受性。 展开更多
关键词 类泛素蛋白 秦冠苹果 转基因烟草 干旱胁迫 抗旱育种
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早酥梨抗黑星病相关基因PbzsREMORIN的克隆及功能分析 被引量:4
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作者 付镇芳 姚春潮 +1 位作者 张朝红 王跃进 《园艺学报》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期13-22,共10页
以高抗黑星病的早酥梨为试材,利用从梨抗黑星病抑制消减文库中筛选出病原菌诱导特异表达基因片段,通过RACE技术克隆获得其全序列,命名为PbzsREMORIN(GenBank登录号为HQ901373)。该基因全长897bp,开放阅读框(ORF)597bp,编码198个氨基酸;... 以高抗黑星病的早酥梨为试材,利用从梨抗黑星病抑制消减文库中筛选出病原菌诱导特异表达基因片段,通过RACE技术克隆获得其全序列,命名为PbzsREMORIN(GenBank登录号为HQ901373)。该基因全长897bp,开放阅读框(ORF)597bp,编码198个氨基酸;生物信息学分析表明该基因具有remorin家族保守结构域;实时荧光定量RT-PCR结果表明,该基因受梨黑星病病原菌的诱导;用基因枪法将基因与GFP的融合蛋白转化到洋葱鳞茎表皮细胞中,瞬时表达显示remorin蛋白定位于细胞膜、细胞质和细胞核中;将目的基因转入烟草品种NC89,共获得27个转基因烟草株系;离体叶片接种烟草青枯病病原菌结果表明,过量表达该基因增强了NC89对烟草青枯病病原菌的抗性。该基因可能在植物与病原菌互作过程中起重要作用。 展开更多
关键词 黑星病 remorin 基因表达 转基因烟草
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