全脑缺血再灌注后海马EphA受体基因表达的变化特点

目的:观察EphA受体在海马全脑缺血再灌注后基因表达的改变。方法:SD大鼠50只随机分为假手术组10只及全脑缺血再灌注组40只,Pulsinelli四血管阻断法建立全脑缺血再灌注模型,采用半定量RT-PCR观察假手术组及缺血组在缺血后不同时间点(6 h、1 d、3 d、7d)EphA受体m RNA含量变化的情况,免疫荧光双标法检测EphA4受体在海马的细胞定位。结果:EphA1-A8及EphA10 RNA在正常海马组织均有表达,EphA4受体含量多。在缺血状态下,EphA1、EphA2、EphA3、EphA6、EphA7及EphA8的mRNA表达水平一过性上调,EphA4、EphA5和EphA10的m RNA表达水平逐步上调;EphA4受体亦是缺血后变化最显著的EphA受体。免疫荧光双标显示EphA4主要分布于海马CA1-CA3区及DG区Neu N阳性锥体神经元。结论:在海马不同的EphA受体对缺血呈现出不同的应答模式,EphA4是海马正常条件下表达最为丰富的EphA受体并且在缺血条件下出现最为显著地表达变化。EphA4受体主要分布于海马CA1-CA3区以及DG区NeuN阳性锥体神经元。

不同浓度七氟醚预处理对tGCI大鼠模型海马组织神经细胞的影响

目的探讨不同浓度七氟醚预处理对短暂性全脑缺血(tGCI)大鼠海马组织神经细胞的影响。方法选取成年健康WKY大鼠48只,将所有WKY大鼠随机分为模型组、2%七氟醚预处理组、4%七氟醚预处理组和6%七氟醚预处理组,各组大鼠均建立tGCI大鼠模型,其中2%七氟醚预处理组、4%七氟醚预处理组和6%七氟醚预处理组分别给予浓度2%、4%和6%七氟醚处理,模型组给予等量生理盐水,HE染色观察各组海马组织,MTT比色法测定海马神经元活性,流式细胞仪检查海马神经细胞凋亡率,Westernblot检查Bax、LC3-Ⅱ蛋白、Bcl-2表达。结果模型组海马神经元结构及排列紊乱,细胞水肿,成片神经元系统核皱缩,七氟醚预处理组海马结构有所改善,其中6%七氟醚预处理组改善明显。七氟醚预处理组海马组织神经元活力OD值明显高于模型组(P<0.05),其中6%七氟醚预处理组海马神经元活力OD值为(1.55±0.26),高于2%七氟醚预处理组和4%七氟醚预处理组(P<0.05);七氟醚预处理组海马组织神经细胞凋亡率明显低于模型组(P<0.05),其中6%七氟醚预处理组海马神经细胞凋亡率为(12.24±3.11)%,低于2%七氟醚预处理组和4%七氟醚预处理组(P<0.05);七氟醚预处理组海马组织Bax蛋白相对表达量明显低于模型组(P<0.05),而Bcl-2、LC3-Ⅱ相对表达量明显高于模型组(P<0.05)。结论七氟醚预处理对tGCI大鼠模型海马组织神经细胞有保护作用,呈剂量依赖性,可能与调控Bax、LC3-Ⅱ和Bcl-2表达有关。