血清LTBP2、TM4SF1在大肠癌患者预后评估中的研究

目的探讨血清转化生长因子结合蛋白2(LTBP2)、四次跨膜蛋白1(TM4SF1)在大肠癌患者预后评估中的意义。方法将南阳市中心医院2016年7月至2019年7月手术治疗的大肠癌患者108例作为试验组,同期108例健康体检者作为对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测两组血清LTBP2、TM4SF1水平;比较不同血清LTBP2和TM4SF1表达水平的大肠癌患者临床资料的差异;采用免疫组化染色法分析大肠癌组织中LTBP2、TM4SF1的表达;Pearson相关分析明确血清LTBP2和TM4SF1表达的相关性;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清LTBP2和TM4SF1联合评估大肠癌患者预后的价值。结果试验组血清LTBP2和TM4SF1水平均高于对照组(P<0.05),二者表达水平呈正相关(r=0.305,P<0.05),大肠癌组织LTBP2和TM4SF1表达阳性率高于癌旁组织(P<0.05)。肿瘤直径>5cm、肿瘤低分化、有淋巴结转移、TNM分期Ⅲ~Ⅳ期、有脉管瘤栓的大肠癌患者血清LTBP2和TM4SF1表达水平高于患者肿瘤直径≤5 cm、肿瘤中高分化、无淋巴结转移、TNM分期Ⅰ~Ⅱ期、无脉管瘤栓的大肠癌患者(P<0.05)。血清LTBP2、TM4SF1联合预测大肠癌患者预后不良的AUC为0.886。结论大肠癌患者血清LTBP2和TM4SF1水平升高,二者联合对大肠癌患者预后不良具有较好的预测价值。

血清CEACAM1、TM4SF1水平在乳腺癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨血清癌胚抗原相关细胞粘附分子1(carcino-embryonic antigen related cellular adhesion molecule 1,CEACAM1)、四次跨膜蛋白1(transmembrane 4 L six family member 1,TM4SF1)在乳腺癌组织中的表达及诊断价值。方法收集乳腺癌96例。采用酶联免疫吸附试验检测血清CEACAM1、TM4SF1水平。统计血清CEACAM1、TM4SF1水平与临床病理参数的关系及诊断效能。结果乳腺癌血清CEACAM1、TM4SF1水平与患者年龄、肿瘤直径、病理类型、雌激素受体、孕激素受体均无关,P>0.05,与病理分化程度、TNM分期、转移情况均有关。血清CEACAM1、TM4SF1水平联合诊断效能均较单一诊断效能高,P<0.05。结论血清CEACAM1、TM4SF1水平与乳腺癌病理分化程度、TNM分期、转移情况均有关,可作为肿瘤诊断标志物,联合诊断效能更高。

TM4SF19——一种新的膀胱尿路上皮癌诊断和预后的生物标志物

近年来科学研究证实四次跨膜L6超家族中的TM4SF19在肿瘤的发生、发展中发挥着重要作用,但TM4SF19在膀胱尿路上皮癌(BLCA)中的预后和免疫侵袭中的作用仍不清楚。本研究探讨TM4SF19在肿瘤组织中的表达及其与免疫侵袭的关系,并确定其在BLCA患者中的预后作用。本研究从癌症基因组图谱(TCGA)数据库中获取了患者的表达谱和临床信息。Mann-Whitney U检验(Wilcoxon秩和检验)分析BLCA中TM4SF19的差异表达。通过功能富集分析以探索所涉及的潜在信号通路和生物学功能。使用单样本基因集富集分析评估免疫细胞浸润。采用Kaplan-Meier法和Cox回归分析来确定TM4SF19的预后价值。构建列线图来预测癌症诊断后1年、5年和10年的总生存(OS)率。结果:TM4SF19在BLCA中过度表达。TM4SF19高表达组中多条途径被显著富集,其中不乏多条肿瘤相关途径及免疫相关途径。TM4SF19表达与巨噬细胞、Th1细胞和其他免疫细胞呈正相关,但与NKCD56bright细胞和肥大细胞呈负相关。TM4SF19的表达水平与T分期、N分期、年龄显着相关。TM4SF19过度表达会导致总生存期(OS)和疾病特异性生存率显着下降。多变量Cox分析将TM4SF19确定为OS的独立危险因素。使用校准图分析了列线图的准确性,显示1年、5年和10年的实际OS值与预测OS值之间具有良好的一致性。结果表明,TM4SF19的上调与疾病的进展和不良预后相关。TM4SF19有望作为BLCA患者诊断和预后的生物标志物。

TM4SF1在人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231中的表达及其对细胞增殖、迁移能力的影响

目的:探讨TM4SF1在人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231中的表达情况以及靶向抑制TM4SF1基因后2种细胞的增殖、迁移能力的变化。方法:采用RT-PCR检测MCF-7和MDA-MB-231细胞中TM4SF1 mRNA表达情况,以正常乳腺上皮细胞MCF-10A的TM4SF1 mRNA表达作为参照;应用TM4SF1 siRNA瞬时转染MCF-7、MDAMB-231细胞,应用Western blot方法分析转染效果和TM4SF1蛋白表达情况;CCK-8法检测沉默TM4SF1前后2种细胞增殖能力的变化;划痕实验检测细胞的迁移能力。结果:MCF-7细胞中TM4SF1 mRNA表达量为(1.159±0.218),MDA-MB-231细胞中表达量为(1.396±0.199),均高于MCF-10A细胞中的表达量(0.016±0.004)(P均<0.05);且恶性程度较高的细胞MDA-MB-231高于低度恶性的MCF-7细胞(P<0.05)。特异性转染TM4SF1 siRNA后,该基因表达被抑制,同时MCF-7和MDA-MB-231细胞的体外迁移能力下降(P均<0.05),而细胞的增殖能力变化差异无统计学意义(P>0.05)。结论:TM4SF1在人乳腺癌细胞MCF-7和MDA-MB-231中高表达,并增强乳腺癌细胞的迁移能力。

敲低TM4SF1通过靶向PI3K/AKT通路抑制鼻咽癌细胞转移

目的探讨敲低TM4SF1对PI3K/AKT通路及鼻咽癌细胞转移能力的影响。方法通过对鼻咽癌细胞HONE1转染siNC和siTM4SF1,将HONE1细胞分为正常对照组和TM4SF1敲低组,用qRT-PCR和Western blot验证TM4SF1敲低效率,采用划痕修复实验和转移小室(Transwell)检测TM4SF1敲低后HONE1细胞的转移能力,Western blot检测TM4SF1敲低后HONE1细胞的AKT、p-AKT、E-cad、N-cad、Vimentin和MMP2蛋白水平。随后使用AKT特异性抑制剂MK2206(100 nmol/L)和siTM4SF1处理HONE1细胞,将HONE1细胞分为正常对照组、MK2206组以及siTM4SF1+MK2206组,采用Transwell实验检测HONE1细胞的转移能力。结果与正常对照组相比,TM4SF1敲低组的TM4SF1蛋白及mRNA表达水平显著降低(P<0.05),并且TM4SF1敲低组HONE1细胞转移能力明显下降(P<0.05),p-AKT、N-cad、Vimentin和MMP2蛋白水平明显下降(P<0.05),E-cad蛋白水平明显升高(P<0.05)。与正常对照组相比,MK2206组HONE1转移能力显著降低(P<0.05),且siTM4SF1+MK2206组相比于MK2206组转移能力进一步降低(P<0.05)。结论敲低TM4SF1可以通过PI3K/AKT通路抑制鼻咽癌细胞增殖和转移能力。

TM4SF1真核表达载体的构建及其对结直肠癌细胞株生物学功能的影响

目的构建TM4SF1的真核表达载体并研究其对结直肠癌细胞株HCT116、DLD1迁移及侵袭功能的生物学特性影响。方法根据GenBank:BC034145.1中的TM4SF1的序列设计两条引物,用逆转录的方法获得开放阅读框(ORF区),并将其连接到质粒上,经鉴定后瞬时转染结直肠癌细胞株HCT116及DLD1,应用Western blot及细胞免疫化学方法检测其转染效果及表达情况,采用划痕及transwell实验观察其对细胞迁移及侵袭能力的影响。结果成功构建PEZ-M29/TM4SF1真核表达载体,Western blot及细胞免疫化学实验结果显示TM4SF1表达上调可以促进结直肠癌细胞株的迁移及侵袭能力。结论成功构建TM4SF1真核表达载体,TM4SF1的上调表达可提高结直肠癌细胞株HCT116、DLD1的迁移及侵袭能力,提示TM4SF1与结直肠癌侵袭转移密切相关,为进一步阐明TM4SF1在结直肠癌转移中的作用及相关机制奠定基础。

TM4SF1 mRNA在上皮性卵巢癌组织中的表达及其临床价值

目的:探讨有4个跨膜区的L6超家族成员1(transmembrane 4Lsix family member 1,TM4SF1)基因在上皮性卵巢癌(卵巢癌)组织中的表达及其临床价值。方法:用RT-PCR法检测TM4SF1基因在36例卵巢癌、15例卵巢良性肿瘤、13例正常卵巢组织中的表达。结果:TM4SF1基因在卵巢癌中表达为(0.173±0.054)、良性肿瘤为(0.134±0.015)、正常卵巢组织为(0.118±0.008)。癌组织中的表达水平高于卵巢良性肿瘤(P=0.031);癌组织中的表达水平高于正常卵巢组织(P=0.004);良性卵巢肿瘤组织中的表达水平高于正常卵巢组织(P=0.012);手术—病理分期为Ⅰ-Ⅱ期癌组织中的表达水平(0.124±0.02)低于Ⅲ期(0.164±0.024)(P<0.05);高分化癌组织中的表达水平为(0.091±0.052),中—低分化癌组织表达为(0.113±0.024)(P>0.05)。结论:TM4SF1基因的表达与卵巢癌相关,可能在卵巢癌的发生、发展过程中起一定作用。

TM4SF1与脑胶质瘤病理分级及预后的相关性

目的探讨跨膜四蛋白超家族成员1(TM4SF1)与脑胶质瘤病理分级及预后的相关性。方法应用生信分析方法,计算机检索TCGA数据库,采用GEPIA分析TM4SF1表达胶质瘤病理分级及生存预后的关系。收集2014年3月至2017年4月手术切除的脑胶质瘤83例[低级别胶质瘤(LGG)35例和高级别胶质瘤(HGG)48例]和23例颅脑损伤内减压术切除的非肿瘤脑组织为对照,采用免疫组化染色法检测组织TM4SF1表达情况,术后随访4年,记录无进展生存期(PFS)和总生存期(OS)。结果生信分析显示:胶质瘤组织TM4SF1 mRNA表达量明显高于正常脑组织(P<0.05);而且,HGG组织TM4SF1 mRNA表达量明显高于LGG组织(P<0.05)。TM4SF1高表达HGG病人OS较低表达病人明显缩短(P<0.05);TM4SF1高表达LGG病人PFS、OS较低表达病人均明显缩短(P<0.05)。临床病例分析显示:胶质瘤TM4SF1高表达率[50.60%(42/83)]明显高于非肿瘤脑组织[13.04%(3/23);P<0.01];HGG组织TM4SF1高表达率[60.42%(29/48)]明显高于LGG组织[37.14%(13/35);P<0.05];多因素Cox比例回归风险模型分析显示,TM4SF1高表达是胶质瘤病人生存预后不良的独立危险因素(P<0.05);生存曲线分析显示,TM4SF1高表达病人中位PFS和OS较低表达病人明显缩短(P<0.05)。结论脑胶质瘤TM4SF1呈高表达,与肿瘤病理分级、不良生存预后有关。

TM4SF1对人脐静脉内皮细胞管腔形成的影响

目的研究TM4SF1对内皮细胞体外管腔形成的影响。方法应用qRT-PCR方法检测人脐静脉内皮细胞(HUVECs)中TM4SF1的mRNA表达量;应用siRNA方法瞬时转染HUVECs,采用qRT-PCR方法检测转染48 h与72 h后TM4SF1的沉默效果,选择最佳的转染时间,应用In VitroAngiogenesisAssay Kit观察siControl与siTM4SF1转染后HUVECs体外管腔形成情况。结果 qRT-PCR实验结果显示,HUVECs中表达TM4SF1的RQ值为(0.71±0.11),已知高表达TM4SF1胰腺癌细胞株MPanc96表达TM4SF1的RQ值为(0.56±0.13),两种细胞中TM4SF1表达量差异无统计学意义(P>0.05);siRNA瞬时转染HUVECs 48 h与72 h后,TM4SF1表达分别下降了47.06%与93.14%,HUVECs瞬时转染72 h后进行体外管腔形成实验,通过对管腔形成情况进行评级,siControl转染后HUVECs管腔形成情况为5级(多个闭合管状结构相连形成筛状),siTM4SF1转染后为2级(细胞排列形成夹角)。结论 TM4SF1在HUVECs中高表达,沉默TM4SF1后可以明显抑制HUVECs的体外管腔形成,提示TM4SF1与肿瘤血管形成相关。

基于广东地区汉族人群的TM4SF4基因与胆结石的遗传学关联研究

目的探讨基于广东地区汉族人群TM4SF4基因与胆囊结石的遗传关联性。方法基于广东地区汉族群体的580名胆结石患者和1140名健康对照,调查覆盖整个TM4SF4基因区域的12个单核苷酸多态性位点(SNP)基因型在胆结石病例和健康对照组中的分布情况,从而对其遗传学关联性进行分析。结果在我们所选择的12个SNP中,只有rs9843304位点与胆结石的疾病状态的关联具有统计学意义(OR=1.27,P=0.001)。rs9843304位点的C等位基因可以显著的提高胆结石在人群中的发病危险度。而随后针对4种血脂指标与rs9843304位点的关联分析则并未获得具有统计学意义的结果。结论rs9843304位点对于广东地区汉族人群胆结石疾病的影响可能是独立的遗传学因素。

TM4SF1蛋白在上皮性卵巢癌组织中的表达及其临床意义

目的 探讨跨膜四超家族成员1（transmembrane 4 super family 1，TM4SF1）蛋白在人卵巢组织中的表达及其与上皮性卵巢癌临床病理因素的关系。方法 采用免疫组化SP法检测16例正常卵巢上皮组织、23例上皮性卵巢良性肿瘤组织及55例上皮性卵巢癌癌组织中TM4SF1蛋白的表达情况，分析其与上皮性卵巢癌临床病理因素及预后的关系。结果 ①TM4SF1蛋白在上皮性卵巢癌癌组织中的阳性表达率（90.90%）高于上皮性卵巢良性肿瘤组织（65.22%）及正常卵巢上皮组织（25.00%）的阳性表达率，差异有统计学意义（P〈0.05）。②TM4SF1蛋白在正常卵巢上皮细胞中的表达主要位于上皮细胞的细胞膜和细胞膜近基底膜处及细胞质中，在卵巢良性肿瘤组织中的表达主要集中在肿瘤细胞的细胞膜近基底膜处及细胞膜其他部位，而在卵巢癌细胞中则主要分布于癌细胞的细胞质中。③Ⅲ～Ⅳ期卵巢癌患者TM4SF1蛋白的阳性表达率高于Ⅰ～Ⅱ期患者，中低分化癌患者TM4SF1蛋白的阳性表达率高于高分化癌患者（P〈0.05）。④TM4SF1蛋白的阳性表达率与组织学类型、腹水量的多少无明显相关（P〉0.05），而与FIGO分期及组织学分级明显相关（P〈0.05）。⑤Cox比例风险回归模型多因素分析显示TM4SF1蛋白在卵巢癌癌组织中的阳性表达不是影响患者生存的独立预后因素。结论 TM4SF1蛋白在上皮性卵巢癌癌组织中呈高表达，可能与卵巢癌的发生、发展相关。

TM4SF与整合素共同调节肿瘤转移

转移是恶性肿瘤死亡的主要原因,TM4SF(跨膜四超蛋白家族)与整合素结合形成跨膜复合体,通过调节细胞的黏附和移动,对肿瘤的侵袭及转移过程起着重要作用。文中对近年来关于TM4SF的结构、与整合素结合的形式和特点,以及与肿瘤转移的有关机制进行了综述。

乳腺癌患者血清CEACAM1、TM4SF1水平变化及其临床意义

目的探讨乳腺癌患者血清癌胚抗原相关细胞黏附分子1(CEACAM1)、四跨膜蛋白超家族成员1(TM4SF1)水平变化及其临床意义。方法选择女性乳腺癌患者100例(观察组)、体检健康的女性志愿者50例(对照组),采集空腹外周静脉血,离心留取血清,采用ELISA法检测血清CEACAM1、TM4SF1、CEA、CA15-3。分析乳腺癌患者血清CEACAM1、TM4SF1水平与临床病理特征的关系,采用受试者工作特性(ROC)曲线分析血清CEACAM1、TM4SF1水平对乳腺癌的诊断价值。结果观察组血清CEACAM1、TM4SF1、CEA、CA15-3水平均显著高于对照组(P均<0.01)。乳腺癌患者血清CEACAM1、TM4SF1水平与组织分化程度、TNM分期、局部或远处转移有关(P均<0.05),而与年龄、肿瘤直径、病理类型、雌激素受体、孕激素受体无关(P均>0.05)。血清CEACAM1、TM4SF1水平单独和联合诊断乳腺癌的曲线下面积(AUC)分别为0.770、0.787、0.872,血清CEACAM1、TM4SF1水平联合诊断乳腺癌的AUC大于二者单独(P均<0.05)。结论乳腺癌患者血清CEACAM1、TM4SF1水平升高,且其水平与组织分化程度、TNM分期、局部或远处转移有关;CEACAM1、TM4SF1可作为诊断乳腺癌的血清生物学标志物。

慢病毒介导干扰TM4SF1基因表达对血管内皮细胞体外生物学行为的影响

目的:探讨RNAi下调4跨膜区的L6超家族成员1(TM4SF1)基因表达对人脐静脉血管内皮细胞(HUVEC)的增殖、周期、迁移及血管生成的影响。方法:构建靶向沉默TM4SF1基因表达的慢病毒载体(LV-RNAi),感染高表达TM4SF1的HUVEC。实验分组:干扰组(LV-TM4SF1-RNAi)、阴性对照组(LV-CON-RNAi)、空白对照组(HUVEC),经流式细胞仪分选出稳定感染的细胞株。实时荧光定量PCR(RT-q PCR)检测细胞TM4SF1 mRNA表达水平;免疫荧光细胞化学及Western blot法检测蛋白定位及表达;CCK-8法检测细胞增殖能力;FCM检测细胞周期;Transwell小室检测细胞迁移能力;基质胶成管实验检测细胞血管生成能力。结果:成功构建的慢病毒载体高效稳定地感染了HUVEC。干扰组中TM4SF1 mRNA和蛋白表达明显低于阴性对照组和空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。接种72h时,干扰组细胞的增殖能力(0.59±0.06)显著低于阴性对照组(0.94±0.04)和空白对照组(1.04±0.05),差异均有统计学意义(P<0.05)。干扰组细胞G0/G1期的比例[(69.30±5.48)%]显著多于阴性对照组[(54.40±4.09)%]和空白对照组[(51.69±4.16)%],差异均有统计学意义(P<0.05)。干扰组细胞的迁移能力、细胞成管能力均显著低于阴性对照组和空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:下调TM4SF1基因表达可使HUVEC的增殖、迁移及血管生成能力受抑制,有可能成为抗血管生成的一个潜在靶点。

TM4SF1在恶性肿瘤研究中的进展

TM4SF1是跨膜四蛋白超家族(TM4SFs)的一个远亲,在多种上皮性来源的恶性肿瘤及供应肿瘤的血管内皮细胞中呈高表达。TM4SF1调控血管内皮细胞的功能及肿瘤病理血管的生成,并参与肿瘤细胞新陈代谢及微环境的形成,调控肿瘤细胞的生长、侵袭、转移,并与不良预后相关。TM4SF1在癌细胞中选择性表达的特性,使其成为肿瘤放射免疫治疗和抗体靶向治疗中的一个有潜力的靶点。本文对TM4SF1的结构、功能及与人类肿瘤侵袭转移的相关研究进展及其临床应用前景进行综述。

胃癌根治性手术前后TM4SF1水平及病理特征变化研究

目的探讨胃癌根治性手术前后TM4SF1(跨膜4超家族成员1)水平及病理特征变化。方法选取天津市宁河区医院2016年6月到2019年6月共收治的80例胃癌患者进行回顾性分析,所有患者均行胃癌根治术,分析胃癌患者根治术前胃癌组织及邻近非胃癌组织中TM4SF1表达,胃癌患者根治术后胃粘膜中TM4SF1水平表达与胃癌根治术前TM4SF1表达水平对比,并对比所有患者胃癌根治术前和手术1年后的临床病理特征。结果在同一切段中,TM4SF1在GC组织中呈阴性表达,在相邻非癌组织中呈阳性表达。在我们的患者队列中,免疫组化分析显示,在GC组织中TM4SF1的表达率(11.25%,9/80)显著低于非癌性胃粘膜组织(72.50%,58/80);TM4SF1在胃底黏膜组织中的表达率(89.65%,52/58)高于心脏(16.67%,1/6)和幽门(16.67%,2/12)黏膜组织。胃底和化生粘膜中TM4SF1的阳性表达率无显著差异(75.00%,3/4);与匹配的非癌组织样本(7.69%,1/13)相比,这些配对样本在根治术前中表现出较低的TM4SF1表达(61.54%,8/13)。这些数据表明胃癌根治术前TM4SF1水平低于胃癌根治术后;为了探讨胃癌根治术对胃癌患者的治疗效果,对比分析了根治性手术前与根治性手术后1年两组患者的病理特征,结果显示,手术前与手术后胃癌患者的肿瘤Borrmann分型、肿瘤pTNM分期、肿瘤pN分期患者不同分期人数对比差异显著。结论TM4SF1的低表达与胃癌的发生发展、肿瘤的进展和侵袭以及胃癌患者的整体生存率差有关,且胃癌根治性手术后患者TM4SF1水平发生改变,患者的病理特征也出现明显改变。TM4SF1是GC的抑癌因子,也是GC患者新的预后标志物。

TM4SF的生物学功能及肿瘤转移抑制作用

Transmembranne 4 Superfamily(TM4SF)属于细胞膜糖蛋白的特殊家族。其结构特征是其成员具有4个高度保守的穿膜结构区。TM4SF参与细胞增生的调节。最近研究表明,TM4SF对肿瘤的转移也具有调节作用。TM4SF可与整合素粘附受体结合成复合体并可调节整合素的粘附功能。与转移抑制有关的TM4SF成员主要有KA11/CD82、MRP-1/CD9和ME491/CD63。

TM4SF3蛋白在三阴性乳腺癌中的表达及预后意义

目的:观察TM4SF3蛋白在三阴性乳腺癌患者体内的表达情况,分析TM4SF3的表达和三阴性乳腺癌患者预后的关系。方法:应用半定量免疫组化技术检测2007–2010年佛山市第一人民医院肿瘤医院82例临床资料完整的三阴性乳腺癌患者的TM4SF3蛋白表达水平,采用卡方检验和Kaplan–Meier法分析TM4SF3在患者体内的表达水平和临床特征和肿瘤进展时间的关系。结果:在乳腺癌患者癌组织中,TM4SF蛋白表达水平与患者发生淋巴结转移、远处转移和TNM分期有关,而与年龄、肿瘤大小,Ki–67均无关。TM4SF蛋白高表达患者的肿瘤进展时间比低表达组短。结论:TM4SF3在三阴性乳腺癌患者体内的蛋白表达水平与淋巴结转移,远处转移以及三阴性乳腺癌患者预后相关。TM4SF3可能参与了三阴性乳腺癌的转移和进展,并可能是三阴性乳腺癌治疗的潜在靶点。

卵巢癌相关抗原TM4SF1 HLA-A2限制性CTL表位预测及鉴定

目的预测并筛选免疫反应性较强的四跨膜蛋白超家族成员1(transmembrane 4 L6 family member 1,TM4SF1)人类白细胞抗原A2(human leukocyte antigen A2,HLA-A2)限制性T淋巴细胞(cytotoxic lymphocyte,CTL)表位肽。方法联合4种软件(BIMAS、SYFPEITHI、IEDB、PROPRED I)对TM4SF1的HLA-A2限制性CTL表位进行预测,并采用预培养法酶联免疫斑点法(enzyme-linked immunospot assy,ELISOPT)、直接法ELISOPT对所测得表位肽的免疫反应性进行鉴定。结果 4种不同软件共预测出10条表位多肽,对其中4条(P1、P2、P8、P10)进行免疫反应性验证。多肽活化CTL能力结果显示,预培养法ELISPOT产生斑点形成细胞(spvt forming cell,SFC)的净值T明显高于直接法ELISPOT:[(阳性对照肽:322±8 vs 169±22,P<0.05)、(多肽P1:114±10 vs 39±7,P<0.05)、(多肽P10:156±31 vs 52±8,P<0.05)]。单个活化CTL细胞分泌INF-γ因子的水平检测结果显示,预培养法ELISPOT产生斑点的平均大小明显大于直接法ELISPOT[(阳性对照肽:21.91±2.45 vs 13.80±1.76,P<0.05)、(多肽P1:12.90±0.88 vs 8.31±1.40,P<0.05)、(多肽P10:17.50±3.85 vs 11.96±0.61,P<0.05)]。表位多肽P1、P10均具有免疫原性,P10的免疫活性更高。结论预培养法ELISPOT检测多肽的免疫反应性较直接法ELISPOT灵敏性更高,多种软件联合ELISPOT预培养法可有效筛选出免疫反应性更强的卵巢癌相关抗原TM4SF1 HLA-A2限制性CTL优势表位,其中P10的免疫活性最高。

TM4SF1水平与胃癌病理特征的相关性

目的探讨TM4SF1(跨膜4超家族成员1)水平与胃癌病理特征的相关性。方法选取68例胃癌患者,应用免疫组织化学方法分析肿瘤组织与癌旁组织TM4SF1表达水平,并对比胃癌患者TM4SF1阳性组(n=41例)和阴性组(n=27例)患者临床病理特征,最后分析TM4SF1水平与胃癌病理特征的相关性。结果免疫组化分析显示,在胃癌组织中TM4SF1的阳性表达率显著低于癌旁组织表达率(P<0.05)。TM4SF1阴性患者与TM4SF1阳性患者的性别、年龄、肿瘤大小和侵入深度对比无明显差异(P>0.05),TM4SF1阴性患者与TM4SF1阳性患者的淋巴结转移、远处转移、肿瘤TNM分期情况对比差异显著(P<0.05);Spearman相关分析结果显示:TM4SF1水平与胃癌患者的性别、年龄、肿瘤大小和侵入程度无明显相关性(P>0.05),TM4SF1水平与胃癌患者的淋巴结转移、远处转移和肿瘤TNM分期呈负相关(P<0.05)。结论胃癌组织中TM4SF1蛋白水平低于癌旁组织。TM4SF1表达与胃癌的TNM分期、淋巴结转移及远处转移有关,但其确切的作用机制仍有待进一步研究。