山豆根化学成分研究

利用多种柱层析方法,从山豆根中分得5个化合物。经过理化及波谱分析,分别鉴定为L 高丽槐素( 1)、红车轴草苷( 2 )、槲皮素( 3)、芦丁( 4 )和异鼠李素 3 芸香糖甙( 5 )。其中化合物3。

苦参的化学成分

目的研究中药苦参 (SophoraflavescensAit)的化学成分。 方法采用硅胶柱色谱的手段 ,利用理化和波谱分析方法 ,对苦参中的化合物进行分离、分析、鉴定。结果从苦参根中分离得到 2个紫檀素类化合物、一个异黄酮类化合物、一个酚酸类化合物和 β 谷甾醇。确定其结构 ,分别为高丽槐素 (maackiain ,Ⅰ )、三叶豆紫檀苷 6′ 单乙酸酯 (trifolirhizin 6′ monoacetate ,Ⅱ )、芒柄花黄素 (for mononetin ,Ⅲ )、2 ,4 二羟基苯甲酸 (2 ,4 dihydroxybenzoicacid ,Ⅳ )、β 谷甾醇 (β sitosterol,Ⅴ )。 结论三叶豆紫檀苷 6′ 单乙酰酯 (trifolirhizin 6′ monoacetate)

红车轴草对莴苣生长抑制作用研究

采用活体生物试验方法,首次比较研究了红车轴草根乙醇提取物及不同极性溶剂萃取物对莴苣的生长抑制作用,并在此基础上分离鉴定了活性化合物的化学结构,进一步对其活性作用机理进行了研究。试验表明,红车轴草根乙醇提取物对莴苣种子萌发和幼苗生长具有较强的抑制作用,4种萃取物表现出不同程度的抑制效应,其中氯仿和乙酸乙酯萃取部位抑制强度最大,是红车轴草根植物毒活性有效部位。为明确红车轴草抑制莴苣幼苗生长的活性化学物质基础,采用活性跟踪分离方法,从氯仿萃取物中分离得到1种黄酮苷类化合物,运用波谱学技术确定了其化学结构,鉴定为(6aR,11aR)-三叶豆紫檀苷。活性测定发现,该苷类化合物能够显著降低莴苣幼苗的鲜重和根长,低浓度处理使莴苣体内的抗氧化酶SOD和CAT含量升高,随着处理浓度增加,SOD、CAT含量显著降低,导致植物体内活性氧升高,造成细胞膜脂过氧化伤害,影响植物生长相关的生理过程。

HPLC测定不同地区苦参市售饮片中四种黄酮类成分的含量

目的测定不同地区苦参市售饮片中4种黄酮类成分三叶豆紫檀苷、降苦参酮、黄腐醇及苦参啶的含量。方法采用Phenomenex Luna C_(18)色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm),以乙腈-水为流动相,流速1.0 mL/min,柱温35℃,检测波长分别为310 nm(三叶豆紫檀苷)、294 nm(降苦参酮)、365 nm(黄腐醇和苦参啶)。结果25批苦参市售饮片中4种黄酮类成分三叶豆紫檀苷、降苦参酮、黄腐醇和苦参啶的含量分别为0.05%～0.32%,0.05%～0.51%,0.55×10^(-3)%～4.87×10^(-3)%和0.06%～0.23%。结论苦参市售饮片中4种黄酮类成分的含量变化较大,应将其纳入苦参药材及饮片的质量控制指标。

HPLC法测定苦参中三叶豆紫檀苷的含量

目的:建立HPLC法测定苦参中三叶豆紫檀苷的含量。方法:以SUPELCO C_(18)(25 cm×4.6 mm,5 μm)为分析柱,甲醇-水(1:1)为流动相,流速为1.0 mL·min^(-1),检测波长为310 nm,采用外标法定量测定。结果:三叶豆紫檀苷进样量在0.41—4.10μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9998)。平均回收率为98.72%,99.20%,99.47%;RSD为1.1%,1.5%,2.2%(n=3)。结论:本方法操作简便,结果准确可靠,适用于苦参中三叶豆紫檀苷含量的测定。

三叶豆紫檀苷在大鼠体内代谢的初步研究

目的对三叶豆紫檀苷在大鼠体内代谢产物进行研究,初步推测其体内代谢途径。方法收集大鼠灌胃给予三叶豆紫檀苷后的尿液和粪便,采用HPLC-MSn分析代谢物的色谱行为、电喷雾多级质谱信息,并与对照品和空白组大鼠对应代谢物比较。结果三叶豆紫檀苷大鼠灌胃给药后尿液中检测到代谢产物高丽槐素和高丽槐素-3-O-磺酸,粪便中检测到代谢产物高丽槐素。结论三叶豆紫檀苷在大鼠体内可广泛代谢,并推测了其体内代谢途径。

HPLC测定消银片中三叶豆紫檀苷的含量

目的:测定消银片(地黄,苦参,金银花等)中三叶豆紫檀苷的含量.方法:HPLC法,色谱柱为HiQ sil C18(25 cm×4.6 mm,10μm),流动相为甲醇-水(6:5.5,V/V),流速为1.0 mL·min-1,检测波长为310 nm.结果:三叶豆紫檀苷进样量在0.41～4.10 μg范围内呈良好的线性关系,平均回收率为99.95%,RSD为2.40%.结论:本方法简便,准确,重现性好,可作为消银片中三叶豆紫檀苷的含量测定方法.

红车轴草中(6aR,11aR)-三叶豆紫檀苷对马铃薯腐烂茎线虫的麻醉活性研究

从红车轴草(Trifolium pratense L.)根乙醇提取物中分离得到了黄酮苷类化合物(6aR,11aR)-三叶豆紫檀苷,并运用核磁共振波谱学技术鉴定了其化学结构。采用实验室活体生物试验方法,研究了(6aR,11aR)-三叶豆紫檀苷对马铃薯腐烂茎线虫的麻醉活性。结果表明,该化合物对马铃薯腐烂茎线虫二龄幼虫有一定的麻醉活性,麻醉作用的强度与其浓度及作用时间密切相关。

高效液相色谱法测定苦参中红车轴草苷的含量

目的建立测定苦参中红车轴草苷含量的高效液相色谱方法。方法HYPERSIL BDS C18色谱柱（4．6mm×200mm，5μm），流动相为甲醇-0．2％磷酸水溶液梯度洗脱（MeOH％：0 min10％，20min40％），流速为1．0mL·min^-1，检测波长为310nm，柱温为25℃。结果红车轴草苷在0．446～8．920／μg线性良好，相关系数r为0．9999，平均回收率为97．94％，RSD＜1％（n＝6）。结论本方法操作简便，分离效果好，灵敏度高，重现性好，为控制苦参药材质量提供参考。

高效液相色谱法测定山豆根中红车轴草苷的含量

目的建立测定山豆根药材中红车轴苹苷的含量测定方法。方法色谱柱为Hypersil ODS2（250mm×4．6mm，5μm），流动相为乙腈0．1％磷酸水溶液，梯度洗脱，流速为1．0mL·min^-1，检测波长为308nm，柱温为25℃。结果红车轴草苷在0．4192～8．384扯g线性关系良好，相关系数r=0．9999，平均回收率为99．3％，RSD=1．6％。结论所用方法简便、准确、重复性好，首次建立了HPLC测定山豆根中红车轴草苷的含量，提供了更好的控制山豆根药材质量的方法。

基于HPLC-QAMS法对清热通淋丸中7种成分的质量控制研究

目的建立高效液相一测多评法(HPLC-QAMS)同时测定清热通淋丸中三叶豆紫檀苷、苦参醇I、苦参酮、槐属二氢黄酮G、6′-羟基爵床脂素B、6′-羟基爵床脂素A和爵床脂素B的含量。方法采用高效液相色谱法,以Agilent Zorbax SB-C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相为乙腈-水,梯度洗脱,流速为1.0 ml/min,柱温为30℃。以苦参酮为内参物,建立其他6个成分的相对校正因子,计算含量。结果三叶豆紫檀苷、苦参醇Ⅰ、苦参酮、槐属二氢黄酮G、6′-羟基爵床脂素B、6′-羟基爵床脂素A和爵床脂素B的质量浓度分别在0.91~22.75μg/ml(r=0.999 5)、1.89~47.25μg/ml (r=0.999 3)、5.67~141.75μg/ml (r=0.999 7)、1.29~32.25μg/ml (r=0.999 5)、1.48~37.00μg/ml (r=0.999 6)、2.56~64.00μg/ml (r=0.999 4)、4.09~102.25μg/ml (r=0.999 8)范围内线性关系良好,平均加样回收率(RSD)分别为97.99%(1.42%)、98.44%(0.85%)、99.47%(0.92%)、96.98%(1.21%)、99.50%(0.74%)、100.00%(1.04%)和98.39%(1.32%),建立的高效液相一测多评法用于测定清热通淋丸中7种指标性成分的含量,一测多评法所得结果与外标法无明显差异。结论所建立的HPLC-QAMS法结果准确,可用于清热通淋丸的质量控制。

RP-HPLC法测定山豆根中三叶豆紫檀苷的含量

目的:建立RP-HPLC测定山豆根中三叶豆紫檀苷含量的方法。方法:色谱柱为Symmetry shield RP C18柱,流动相为甲醇-水(50:50),检测波长为310nm。结果:三叶豆紫檀苷在0.49～4.9μg范围内与峰面积有良好的线性关系;精密度试验相对标准偏差为1.31%;加样回收率为96.69%～98.57%;山豆根中三叶豆紫檀苷含量为0.019%。结论:本法操作简便,结果准确,可用于山豆根中三叶豆紫檀苷含量的测定。

不同产地苦参饮片水煎液中三叶豆紫檀苷含量测定

目的:建立苦参饮片水煎液中三叶豆紫檀苷含量测定方法。方法:采用HPLC法,Alltech Apollo C1(84.6 mm×150 mm,5μm)为色谱柱,以乙腈-水(30∶70)为流动相,流速:1.0 mL.min-1,检测波长:310 nm,柱温:25℃。结果:三叶豆紫檀苷回归方程Y=676.08X+7.5(r=0.9994),三叶豆紫檀苷在0.982-4.64μg线性关系良好;方法的平均回收率为99.09%,RSD%=1.31%。结论:所建立的方法准确、灵敏、重复性好,可用于考察不同产地苦参饮片水煎液中主要黄酮成分含量。

山豆根药材UPLC-UV指纹图谱及3种成分含量测定研究

目的建立山豆根药材UPLC-UV指纹图谱和同时测定其中三叶豆紫檀苷、高丽槐素、山豆根素含量的方法。方法采用Waters Acquity UPLC HSS T3色谱柱(2.1 mm×100 mm,1.8μm),以乙腈-0.1%磷酸水溶液为流动相,梯度洗脱,检测波长为203 nm,流速为0.3 mL·min^(-1),柱温为25℃,进样量为1μL,建立山豆根药材UPLC-UV指纹图谱分析方法及同时测定三叶豆紫檀苷、高丽槐素、山豆根素含量的方法,测定16批山豆根药材的指纹图谱及3种成分的含量。结果指纹图谱及含量测定方法学验证均良好,16批山豆根药材UPLC指纹图谱的相似度在0.926~0.989,确定10个共有峰,三叶豆紫檀苷含量为0.056%~0.226%,高丽槐素含量为0.04%~0.151%,山豆根素含量为0.163%~0.585%。结论本研究为山豆根整体质量评价提供了新的方法,可用于山豆根药材质量控制。

一测多评法测定山豆根中3个非生物碱成分含量

目的:建立山豆根中高丽槐素、红车轴草苷和越南槐醇3个成分含量的一测多评方法,为山豆根的质量评价提供参考。方法:以高丽槐素为内参物,计算红车轴草苷、越南槐醇相对校正因子,利用相对校正因子计算2个成分的含量,同时与外标法测定结果对比,验证一测多评法的可行性和适用性。结果:建立了以高丽槐素为内参物,红车轴草苷和越南槐醇的相对校正因子分别为1.609和0.774的山豆根药材多成分一测多评定量方法,相对校正因子重复性良好,与外标法测得值之间差异无统计学意义。结论:建立的一测多评方法精密度、稳定性及重复性较好,可用于山豆根中高丽槐素、红车轴草苷、越南槐醇3种非生物碱成分的定量分析。

不同干燥方法对山豆根主要有效成分含量的影响

目的:比较不同干燥方法对山豆根有效成分含量的影响,为山豆根的产地初加工提供科学依据。方法:分别采用晒干、冷冻干燥、不同温度(60,80,100℃)烘干加工处理山豆根,采用高效液相色谱法测定山豆根中主要功效成分氧化苦参碱、苦参碱、金雀花碱、三叶豆紫檀苷和芒丙花素的含量。以Waters Sunfire ODS C18柱(250 mm×4.6 mm,5μm)为色谱柱,流动相为乙腈-0.01 mol·L^-1醋酸铵(氨水调节p H至8.0),流速为0.8 ml·min^-1,检测波长为210 nm(金雀花碱、氧化苦参碱、苦参碱)、280 nm(三叶豆紫檀苷、芒丙花素),柱温为30℃。结果:综合评价结果表明,不同干燥方法下有效成分含量由高至低的排序为:80℃烘干>100℃烘干>60℃烘干>冷冻干燥>自然晒干。结论:80℃干燥方式为5种干燥方式中最优的山豆根干燥方法,可为山豆根的产地加工提供借鉴。

高效液相色谱法测定山豆根中红车轴草苷和高丽槐素的含量

目的建立测定山豆根药材中红车轴草苷和高丽槐素含量的HPLC方法。方法色谱柱为Kromasil C18（4.6 mm×200 mm,5μm）,流动相为乙腈-0.1%醋酸溶液,梯度洗脱,流速为1.0 mL.min-1,检测波长为310nm,柱温为25℃。结果红车轴草苷在0.200 6-3.009μg与峰面积线性关系良好,相关系数r=0.999 6,平均回收率为99.6%,RSD=1.2%;高丽槐素在0.305~4.575μg与峰面积线性关系良好,相关系数r=0.999 9,平均回收率为99.2%,RSD=1.1%。结论所用方法简便、准确、重复性好,提供了更好的控制山豆根药材质量的方法。

苦参和复方苦参注射液中三叶豆紫檀苷的定性定量分析

目的建立苦参和复方苦参注射液中三叶豆紫檀苷的定性、定量分析方法。方法采用TLC法对苦参和复方苦参注射液中三叶豆紫檀苷作鉴别。采用HPLC法测定苦参和复方苦参注射液中三叶豆紫檀苷的含量。结果 TLC图谱中可检出三叶豆紫檀苷的特征斑点;三叶豆紫檀苷含测的进样量在0.1～2.0μg范围内与峰面积呈良好的线性关系(r=0.9998),苦参和复方苦参注射液的平均回收率分别为99.84%(RSD=2.11%),99.91%(RSD=0.32%)。结论本研究方法简便、结果准确可靠,适用于苦参和复方苦参注射液的质量控制。

一测多评法同时测定开喉剑喷雾剂(儿童型)中4种成分

目的 建立一测多评法同时测定开喉剑喷雾剂(儿童型)(八爪金龙、山豆根、蝉蜕等)中4种成分的含量。方法 该药物的分析采用Platisil-ODS色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm);流动相甲醇-0.1%磷酸(三乙胺调节pH至5.0);体积流量0.8 mL/min;柱温35℃;检测波长220、275、300 nm。以岩白菜素为内标,计算其他3种成分的相对校正因子,测定其含量。结果 苦参碱、岩白菜素、三叶豆紫檀苷、马卡因分别在56.73~496.37、64.19~561.68、8.29~72.52、1.96~17.19μg/mL范围内线性关系良好(r≥0.999 6),平均加样回收率分别为99.89%、96.77%、92.12%、97.29%,RSD分别为1.57%、1.98%、0.96%、1.36%。一测多评法所得结果与外标法接近。结论 该方法简便可行,准确可靠,可用于开喉剑喷雾剂(儿童型)的质量控制。

一测多评法同时测定痔舒适洗液中7种成分的含量

目的建立能同时测定痔舒适洗液中三叶豆紫檀苷、苦参醇Ⅰ、苦参酮、贝母兰宁、山药素Ⅲ、棕矢车菊素和异泽兰黄素含量的一测多评(QAMS)法。方法色谱柱:Agilent Eclipse XDB-C 18柱(250 mm×4.6 mm,5μm);柱温:25℃;流动相:乙腈-2 mL·L^-1甲酸,梯度洗脱;流速:0.9 mL·min^-1;检测波长:295 nm(检测三叶豆紫檀苷、苦参醇Ⅰ和苦参酮),270 nm(检测贝母兰宁和山药素Ⅲ),330 nm(检测棕矢车菊素和异泽兰黄素)。以苦参酮为内参物,建立其他6种成分的相对校正因子(RCFs),计算各成分含量。结果7种成分的质量浓度分别在1.02~25.50(r 1=0.9991),1.98~49.50(r 2=0.9996),7.66~191.50(r 3=0.9993),1.59~39.75(r 4=0.9997),4.38~109.50(r 5=0.9992),0.62~15.50(r 6=0.9994),1.29~32.25μg·mL^-1(r 7=0.9995)范围内线性关系良好;平均回收率(RSD值)分别为96.94%(1.30%),99.59%(0.74%),100.13%(0.65%),98.42%(1.43%),99.37%(1.26%),97.52%(1.11%),98.50%(0.98%);痔舒适洗液中7种成分的含量QAMS法计算结果与外标法(ESM)实测值无明显差异。结论所建立的QAMS法操作便捷、结果准确,可用于痔舒适洗液的质量控制。