伊红、台盼蓝检测河蟹精子存活率的比较

对台盼蓝和伊红染色法检测河蟹(Eriocheir sinensis)精子存活率的方法进行了评价研究。结果表明,两种染色法死、活精子分别呈现出明显不同的染色特征:活精子无色透明,顶体中央凸起呈圆锥状,光镜下辐射臂及细胞边界清晰;死亡精子顶体着色,且中央有一染色较深的圆斑,核杯染色不明显,细胞体积变大,边界模糊。通过不同染色时间和不同染料浓度的比较发现,两种染色法最适染液浓度分别是0·25%的伊红和0·5%的台盼蓝,染色时间均以15min为佳。在此基础上,将新鲜精子和60℃水浴处理致死精子以不同的体积比混合,配成含致死精子比例为10%～90%的9个梯度样品,用伊红和台盼蓝分别测定各样品精子死亡率,并进行相关性分析。结果发现,各样品实测精子死亡率均略高于样品的理论死亡率,同时两种染色法实测值与样品理论值呈显著正相关(P<0·05),两种染色法之间亦呈显著正相关(P<0·05)。上述结果表明,伊红和台盼蓝可用于河蟹精子的活体染色,且两种染色法在对河蟹精子染色中具有一定的稳定性和可比性。

γ射线对舞毒蛾虫卵处理效果的研究

为检验物理灭虫的效果,以林木害虫舞毒蛾(Lymantria dispar)虫卵为试验材料,用不同剂量的γ射线照射舞毒蛾虫卵,研究照射后幼虫孵化率的宏观变化情况和经过台盼蓝活体染色后幼虫细胞的微观变化情况。结果表明,随着γ射线辐照剂量的增加,幼虫孵化率逐渐降低,幼虫细胞的死亡数量逐渐上升;总体上看,宏观试验和微观试验所得结论吻合良好;当γ射线辐照剂量超过300 Gy时,幼虫孵化率变化最为明显,幼虫细胞也几乎全部染上蓝色,辐照生物效应显著。

贝类精子质量检测与评价方法研究Ⅰ:染色法检测马氏珠母贝精子的存活率的研究

用曙红Y、台盼蓝染料对马氏珠母贝(Pinctada martensii)精子进行染色,通过对不同制片方法、不同的染色时间和不同染料浓度的染色效果进行比较,筛选出可通过染色特征来检测精子死活及活精率的适宜方法,结果显示:(1)经染色后,死、活精子呈现出明显不同的特征:活精子均不着色,头部呈梨形、无色透明状;死精子着红色(曙红Y染色)或蓝色(台盼蓝染色),体积变大,头部近圆形。(2)曙红Y、台盼蓝最适染色浓度分别为0.04%和0.2%;最佳染色时间均为15min。(3)检测到的精子死亡率即实测精子死亡率,与"理论死亡率"之间有明显的相关性,相关系数为R=0.99(P<0.01),并且两种染色法的观察结果一致,表明这些检测结果客观可信;(4)染料对活精子毒性的检测显示,染色45min内,精子死亡率无显著性增加(P>0.05),说明在该时间范围内,染液对精子的毒性较小,精子存活率的检测结果稳定可靠。这些研究表明,曙红Y、台盼蓝两种染色法准确灵敏,均适宜用于马氏珠母贝精子质量的检测与评价。

狗舌草提取物对L1210细胞的体外作用研究

利用淋巴性白血病L1 2 1 0细胞 ,以单猪屎豆碱、槲皮素和环磷酰胺为参照 ,检查狗舌草60 %乙醇提取物 (EX)对L1 2 1 0细胞生长情况的影响 ;通过L1 2 1 0细胞台盼蓝拒染率的测定 ,研究EX对L1 2 1 0细胞活力的影响。结果发现 ,一定剂量的EX、单猪屎豆碱、槲皮素和环磷酰胺具有明显的体外抑制淋巴性白血病L1 2 1 0细胞的作用 ,且这种作用具有明显的剂量依赖性。其中EX和槲皮素在体外对L1 2 1 0细胞的细胞毒性较小 ,而单猪屎豆碱在体外对L1 2 1 0细胞的细胞毒性较大。

小儿白血病临床输血的效果

目的了解白血病临床输血的效果，指导合理输血。方法总结近两年经输血治疗的３３例白血病，了解输血的效果，比较不同血液成分的疗效。结果３３例白血病共输血３６６例次，浓缩ＲＢＣ和ＢＰＣ输注对Ｈｂ和ＢＰＣ降低的疗效明显优于全血输注；ＩＶＩＧ、ＣＳＦ等血液成分对感染和ＷＢＣ降低有较好的疗效。结论成分输血的疗效优于全血，ＩＶＩＧ和ＣＳＦ等血液成分有较好的疗效。强调合理应用成分输血，可节省血液资源，提高输血疗效。

干细胞冷冻中细胞浓度对冻存效果影响的观察

目的：观察细胞浓度对造血干细胞冻存效果的影响。方法：使用速率降温仪对１３份由病人采集的外周血干细胞及７份骨髓造血干细胞进行冷冻，观察推荐浓度的细胞（×１０＾７／ｍｌ）和高浓度的细胞（×１０＾８／ｍｌ）冷冻复温后有核细胞回收率、台盼蓝拒染率，ＣＦＵ－ＧＭ存活率。结果：推荐浓度的细胞与高浓度的细胞在冷冻复温后有核细胞回收率、台盼蓝拒染率和ＣＦＵ－ＧＭ存活率无明显差异。结论：可适当提高冷冻时的细胞浓度，

台盼蓝法测定发酵液中ε-聚赖氨酸产量

ε-聚赖氨酸是一种抑菌效果好、耐高温的天然防腐剂,在食品中有良好的应用前景。建立台盼蓝法测定发酵液中ε-聚赖氨酸产量,以台盼蓝试剂为显色剂,考察了显色剂浓度、反应温度、反应时间、pH值等因素对检测结果的影响。结果表明:最优的试验条件为显色剂质量浓度为3 g/L、pH值为6、反应温度为50℃、反应时间为40 min,标准曲线为Y=-0.0128X+3.1488;线性范围为10~100 mg/L,ε-聚赖氨酸工作曲线线性决定系数(R 2)为0.9998,最低检测限(LOD)为2.03 mg/L,最低定量限(LOQ)为6.14 mg/L,不同浓度标准品的测定结果变异系数(CV)均小于2%,检测样品的加标回收率为98.96%~101.53%;测定结果不受发酵液中底物影响,且能够有效地缩短检测时间。台盼蓝法的建立对ε-聚赖氨酸高产菌株的高通量选育具有重要的意义。

菌根真菌在越橘毛根中的定殖特点研究

为进一步研究植物-菌根真菌共生体形成的特殊根系结构,本研究以菌根真菌侵染21 d后的越橘毛根为试验材料,利用锥虫蓝染色对真菌侵染特点进行观察。结果表明:在越橘毛根细胞内存在大量的菌根真菌菌丝团,说明菌根真菌已成功在越橘根系定殖。菌根真菌侵染21 d后,其在越橘毛根中的侵染率为32%,属中度侵染。

2种方法检测干细胞活率效果的比较

目的:比较碘化丙锭(PI)拒染试验和台盼蓝拒染试验对干细胞活率检测的效果。方法:选择18例干细胞动员后的采集物,在采集后的第1、3、5、7、9、11天,同时进行PI拒染试验和台盼蓝拒染试验。结果:PI拒染率与台盼蓝拒染率结果差异均无统计学意义,相关性检验显示2者呈显著正相关(r=0.996);精密度检验显示,PI拒染试验优于台盼蓝拒染试验(平均CV1.46%vs5.10%)。结论:PI拒染试验在干细胞活率检测中优于台盼蓝拒染试验。