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血清ITIH4和MCL-1水平与急性缺血性脑卒中患者病情程度及预后的关系
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作者 席俊男 冯松松 +2 位作者 薛惠元 腾东 陈丽薇 《疑难病杂志》 CAS 2024年第4期429-434,共6页
目的探究急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清间α胰蛋白酶抑制因子重链4(ITIH4)、髓样细胞白血病因子-1(MCL-1)表达与病情程度及预后的关系。方法纳入2019年7月—2022年7月河南科技大学附属黄河医院神经内科诊治AIS患者128例为AIS组。根据... 目的探究急性缺血性脑卒中(AIS)患者血清间α胰蛋白酶抑制因子重链4(ITIH4)、髓样细胞白血病因子-1(MCL-1)表达与病情程度及预后的关系。方法纳入2019年7月—2022年7月河南科技大学附属黄河医院神经内科诊治AIS患者128例为AIS组。根据入院时美国国立卫生研究院卒中量表(NIHSS)评分,分为轻度亚组(NIHSS<6分,n=42)、中度亚组(NIHSS 6~<14分,n=52)和重度亚组(NIHSS≥14分,n=34)。根据出院3个月时AIS患者改良Rankins评分,分为预后不良亚组(mRS评分>2分,30例)和预后良好亚组(mRS评分≤2分,98例)。另选取同期医院体检的健康人70例为健康对照组。酶联免疫吸附试验检测血清ITIH4、MCL-1水平。Pearson相关分析血清ITIH4、MCL-1水平与病情程度及预后的相关性;多因素Logistic回归分析影响AIS患者预后的因素;受试者工作特征曲线分析血清ITIH4、MCL-1对AIS患者预后的预测价值。结果AIS组患者血清ITIH4、MCL-1水平显著低于健康对照组(t/P=43.211/<0.001,43.191/<0.001);病情程度越重,AIS患者血清ITIH4/MCL-1水平越低(F/P=107.796/<0.001,297.976/<0.001);预后不良亚组梗死面积、入院24 h NIHSS评分高于预后良好亚组(t/P=9.637/<0.001,9.752/<0.001),血清ITIH4、MCL-1水平及出院3个月简易智能状态量表(MMSE)评分、蒙特利尔认知评估量表(MoCA)评分低于预后良好亚组(t/P=26.723/<0.001,11.709/<0.001,13.674/<0.001,10.782/<0.001);AIS患者血清ITIH4、MCL-1与梗死面积、入院24 h NIHSS评分呈负相关(r/P=-0.705/<0.001,-0.685/<0.001;-0.761/<0.001,-0.619/<0.001),与出院3个月MMSE评分、MoCA评分呈正相关(r/P=0.656/<0.001,0.632/<0.001;0.751/<0.001,0.789/<0.001);出院3个月MMSE评分高、出院3个月MoCA评分高是影响AIS患者预后不良的独立保护因素[0.622(0.446~0.868),0.606(0.427~0.861)],血清ITIH4低、MCL-1低、梗死面积大、入院24 h NIHSS评分高是危险因素[OR(95%CI)=1.467(1.150~1.870),1.415(1.094~1.829),1.605(1.168~2.205),1.765(1.233~2.526)];血清ITIH4、MCL-1及两项联合预测AIS预后不良的AUC分别为0.811、0.835、0.923,两项联合预测AIS预后不良的AUC大于单一指标,差异具有统计学意义(Z=4.258、4.119,P均<0.001)。结论AIS患者血清ITIH4、MCL-1表达下调,两者表达水平与病情严重程度有关,两者联合对AIS患者预后具有较高的预测价值。 展开更多
关键词 急性缺血性脑卒中 间α胰蛋白酶抑制因子重链4 髓样细胞白血病因子-1 病情程度 预后
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粮饲兼用大豆新品种东农饲豆1的培育及栽培技术
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作者 刘欢 蒙何 +4 位作者 王绍东 王遂 佟晓红 李远明 姜妍 《大豆科技》 2023年第5期49-54,共6页
为适应畜牧企业需求,提高牛奶蛋白质含量,亟需选育饲用型或粮饲兼用型大豆新品种。东农饲豆1是东北农业大学2013年以黑龙江省主栽高产优质大豆品种合丰50为母本,以胰蛋白酶抑制剂缺失高世代品系HZ6009为父本进行有性杂交,经系谱法及胰... 为适应畜牧企业需求,提高牛奶蛋白质含量,亟需选育饲用型或粮饲兼用型大豆新品种。东农饲豆1是东北农业大学2013年以黑龙江省主栽高产优质大豆品种合丰50为母本,以胰蛋白酶抑制剂缺失高世代品系HZ6009为父本进行有性杂交,经系谱法及胰蛋白酶抑制剂缺失检测分子辅助方法选育而成的产量及品质性状优异且Kunitz型胰蛋白酶抑制剂缺失的大豆新品种。该品种高油、高产,中抗灰斑病,适宜黑龙江省第二积温带≥10℃活动积温2400℃以上区域种植。该品种的育成满足了粮油、青贮、优质饲料等多种用途,应用前景广阔。2023年通过黑龙江省品种审定委员会审定,审编号为黑审豆2023Z0006。 展开更多
关键词 胰蛋白酶抑制剂缺失 粮饲兼用 大豆 东农饲豆1
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NF-κB和AP-1对A型流感病毒性心肌炎组织中异位胰蛋白酶及促炎细胞因子表达的调控 被引量:9
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作者 潘海燕 薛陆静 +2 位作者 王逸平 孙花梅 潘闽 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2015年第5期791-796,共6页
目的:探讨核因子κB(NF-κB)及激活蛋白1(AP-1)对A型流感病毒(IAV)性心肌炎心肌组织中异位胰蛋白酶及促炎细胞因子表达的调控作用。方法:40只8周龄雄性BALB/c小鼠随机分为4组:正常对照组经鼻假感染15μL生理盐水;感染对照组经鼻感染40... 目的:探讨核因子κB(NF-κB)及激活蛋白1(AP-1)对A型流感病毒(IAV)性心肌炎心肌组织中异位胰蛋白酶及促炎细胞因子表达的调控作用。方法:40只8周龄雄性BALB/c小鼠随机分为4组:正常对照组经鼻假感染15μL生理盐水;感染对照组经鼻感染40空斑形成单位(PFU)IAV;NF-κB抑制剂组经鼻感染40 PFU的IAV,腹腔注射吡咯烷二硫代氨基甲酸(PDTC)10 mg/kg,每天1次;AP-1抑制剂组经鼻感染40 PFU的IAV,腹腔注射去甲二氢愈创木酸(NDGA)2.5 mg/kg,每天1次。感染后第9天处死小鼠,切取心脏组织分别进行病理及生化检查。结果:IAV感染可诱导心肌组织中异位胰蛋白酶及促炎细胞因子白细胞介素(IL)-6、IL-1β及肿瘤坏死因子(TNF)-α表达显著上调,引发心肌急性炎症反应。PDTC能显著抑制心肌中NF-κB激活以及异位胰蛋白酶和促炎细胞因子表达上调,有效抑制IAV复制,减轻心肌炎症反应(P<0.01)。NDGA能有效抑制AP-1活性(P<0.01),轻度抑制促炎细胞因子表达上调(P<0.05),但对异位胰蛋白酶表达、IAV复制及心肌炎症程度无显著影响(P>0.05)。结论:IAV感染心肌组织后主要通过激活NF-κB诱导心肌中异位胰蛋白酶及促炎细胞因子表达上调,AP-1通路可能仅部分参与了促炎细胞因子的表达调控。 展开更多
关键词 A型流感病毒 病毒性心肌炎 核因子κB 激活蛋白1 胰蛋白酶
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中药814对地鼠实验性肺气肿的保护作用 被引量:8
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作者 张宏 斯勤 +2 位作者 陈祥银 孙仁宇 孟亚娟 《浙江中西医结合杂志》 2001年第4期214-217,共4页
目的 :进一步探讨慢性阻塞性肺疾病 (COPD)的发病机理 ,寻找防治用药。方法 :给地鼠气道内 1次滴注猪胰弹性蛋白酶复制肺气肿动物模型 ,以及附加烟雾吸入。分别用中药 814灌胃治疗 1个月及 3个月。观察肺组织形态 ,肺动脉压 (PAP) ,血清... 目的 :进一步探讨慢性阻塞性肺疾病 (COPD)的发病机理 ,寻找防治用药。方法 :给地鼠气道内 1次滴注猪胰弹性蛋白酶复制肺气肿动物模型 ,以及附加烟雾吸入。分别用中药 814灌胃治疗 1个月及 3个月。观察肺组织形态 ,肺动脉压 (PAP) ,血清 a1-抗胰蛋白酶 (a1- AT) ,丙二醛 (MDA) ,β-葡萄糖醛酸酶(β- g) ,肺组织前列腺素类 (PGs)的变化。结果 :1个月时形成中度肺气肿 ,PAP、β- g、MDA、PGE2 、及TXB2 / 6- keto- PGF1a均显著升高 (P<0 .0 5或 <0 .0 1)。而 3个月时 a1- AT下降 (P<0 .0 5)。至 3个月时或附加烟雾吸入组 ,上述指标多无进一步的显著变化。中药 814对肺组织形态学改变 ,PAP,β- g,MDA及 TXB2 / 6- keto- PGF1a的升高以及 a1- AT的下降有一定的缓解作用。结论 :抗蛋白酶与蛋白酶之间的失衡是 COPD发病学的关键因素 ,中药 展开更多
关键词 肺气肿 烟雾吸入 肺动脉压 a1-抗胰蛋白酶 中医药疗法
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胰蛋白酶可诱导肺上皮细胞分泌单核细胞趋化蛋白-1
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作者 王海燕 何韶衡 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2005年第4期776-779,共4页
目的:探讨胰蛋白酶对人上皮细胞单核细胞趋化蛋白- 1(MCP - 1)分泌的影响。方法:人肺上皮细胞系A5 4 9细胞分别接种于12孔培养板各孔内,并分别用不同浓度的胰蛋白酶和/或胰蛋白酶抑制剂进行刺激。刺激时间为2h、8h和16h。用ELISA方法检... 目的:探讨胰蛋白酶对人上皮细胞单核细胞趋化蛋白- 1(MCP - 1)分泌的影响。方法:人肺上皮细胞系A5 4 9细胞分别接种于12孔培养板各孔内,并分别用不同浓度的胰蛋白酶和/或胰蛋白酶抑制剂进行刺激。刺激时间为2h、8h和16h。用ELISA方法检测上清液中的MCP - 1水平。结果:经过16h的培养,胰蛋白酶可引起浓度相关性MCP - 1释放高于基础量,胰蛋白酶在浓度3μg/L时就可引起MCP - 1的释放量增加,10 0 μg/L时诱导MCP- 1的释放量达高峰,为基础分泌量的3倍,胰蛋白酶浓度增加到30 0 μg/L时,MCP - 1的释放量反而下降。大豆胰蛋白酶抑制剂可以抑制胰蛋白酶对MCP - 1的释放作用。时间相关曲线表明,胰蛋白酶从2h起即可引起MCP - 1释放,16h达高峰。结论:胰蛋白酶可促进人肺上皮细胞分泌MCP - 1,大豆胰蛋白酶抑制剂可抑制此作用。 展开更多
关键词 胰蛋白酶 上皮细胞 单核细胞化学吸收蛋白质1
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alpha-1抗胰蛋白酶在Stanford A型主动脉夹层血管重构中的作用及分子机制的研究 被引量:5
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作者 李继军 夏利民 +4 位作者 宋凯 田爱丽 陆树洋 亚尔麦麦提.穆萨 阿迪力江.居麦 《中国免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2018年第12期1870-1874,共5页
目的:探究α-1抗胰蛋白酶在A型主动脉夹层发病和治疗中的作用与机制。方法:取2012年4月~2016年4月在我院行手术治疗的Stanford A型主动脉夹层患者8例、升主动脉瘤患者8例、正常组8例的资料信息,比较各组血管组织中AAT的蛋白和基因表达... 目的:探究α-1抗胰蛋白酶在A型主动脉夹层发病和治疗中的作用与机制。方法:取2012年4月~2016年4月在我院行手术治疗的Stanford A型主动脉夹层患者8例、升主动脉瘤患者8例、正常组8例的资料信息,比较各组血管组织中AAT的蛋白和基因表达水平同时检测血清中AAT含量的变化。使用人原代血管内皮细胞验证AAT对于血管内皮细胞在胰酶刺激下发生细胞凋亡的保护作用,采用皮下缓释angⅡ和血管注射胰酶构建比格犬血管夹层模型,给予AAT治疗后检测Caspase家族蛋白及基因的表达水平。结果:使用RT-PCR及Western blot检测,发现在A型血管夹层患者和主动脉瘤及正常人血管组织中均有不同程度的AAT表达,其中在主动脉瘤患者中AAT表达水平较正常组显著升高(P<0. 05),在A型主动脉夹层患者中AAT表达较正常组显著下调(P<0. 05);在人原代血管内皮细胞中使用AAT预孵育12 h后原代在MMP-2/9压力的作用下,其组织表达的Caspase家族蛋白Caspase-3、Caspase-8较PBS预孵育组显著下调。在动物模型体内,AAT治疗能够显著下调Caspase家族蛋白的mRNA和蛋白水平(P<0. 05)。结论:AAT能够通过抑制Caspase家族蛋白的激活进而抑制血管内皮细胞的凋亡,最终保护血管组织,阻止其形成动脉夹层。 展开更多
关键词 α-1抗胰蛋白酶 STANFORDA型主动脉夹层 Caspase家族蛋白
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蝎毒素LmKTT-1a与胰蛋白酶相互作用研究
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作者 罗凡 陈宗运 +3 位作者 吴英亮 蒋滨 姜凌 刘买利 《波谱学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2014年第1期100-107,共8页
LmKTT-1a是最近发现的一个蝎毒素,该多肽分子不仅具有钾离子通道调节剂的功能,还具有胰蛋白酶(Trypsin)抑制剂的活性,是第一个被发现的双功能蝎毒素.虽然前期工作已对LmKTT-1a的溶液结构和钾离子通道调节剂的功能进行了研究,但未阐明L... LmKTT-1a是最近发现的一个蝎毒素,该多肽分子不仅具有钾离子通道调节剂的功能,还具有胰蛋白酶(Trypsin)抑制剂的活性,是第一个被发现的双功能蝎毒素.虽然前期工作已对LmKTT-1a的溶液结构和钾离子通道调节剂的功能进行了研究,但未阐明LmKTT-1a和Trypsin的作用方式和位点.文中利用液体NMR的手段,采用化学位移扰动分析的方法,确定了LmKTT-1a的loop区域V10~F17等氨基酸位点可能参与了与Trypsin的相互作用.进一步采用定点突变的方法验证了NMR实验的结果,并确认了LmKTT-1a与Trypsin相互作用最关键的氨基酸位点是KI4.该研究结果有助于进一步理解LmKTT-1a具有双功能活性的结构基础. 展开更多
关键词 核磁共振(NMR) 相互作用 化学位移扰动分析 蝎毒素 LmKTT-1a 胰蛋白酶
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Alpha-1-antitrypsin deficiency resulting in a hitherto unseen presentation of hepatocellular carcinoma:Polycythemia but with normal alpha fetoprotein 被引量:1
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作者 David Ryan Owen Ramachandran Sivakumar +1 位作者 Eui-Sik Suh Murugiah Seevaratnam 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2006年第30期4906-4907,共2页
红血球增多症是已知的帕拉肝细胞瘤的肿瘤的表明,但是仅仅面对 alpha-fetopro (法新社) 。我们在场当法新社不在时的红血球增多症的一个盒子,并且为违背这条规则作为原因建议并发的 alpha-1-antitrypsin 缺乏。我们也在肝细胞瘤为在... 红血球增多症是已知的帕拉肝细胞瘤的肿瘤的表明,但是仅仅面对 alpha-fetopro (法新社) 。我们在场当法新社不在时的红血球增多症的一个盒子,并且为违背这条规则作为原因建议并发的 alpha-1-antitrypsin 缺乏。我们也在肝细胞瘤为在红血球增多症和法新社之间的明显的经常的连词建议一个原因。 展开更多
关键词 α-1-抗胰蛋白酶 肝细胞癌 治疗 临床
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Notch 1在体外培养的大鼠根尖蕾细胞中的表达 被引量:1
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作者 白玉娣 杨富生 +2 位作者 方军 轩昆 吴补领 《牙体牙髓牙周病学杂志》 CAS 2008年第5期247-250,共4页
目的:分离、培养和纯化大鼠切牙根尖蕾细胞,观察Notch 1在根尖蕾细胞中的表达。方法:分离出生后7dSD大鼠下颌切牙胚,切取根尖唇侧部分,酶消化法原代培养,差别胰酶消化法纯化上皮细胞。角蛋白14和波形丝蛋白染色鉴定细胞来源。Notch 1免... 目的:分离、培养和纯化大鼠切牙根尖蕾细胞,观察Notch 1在根尖蕾细胞中的表达。方法:分离出生后7dSD大鼠下颌切牙胚,切取根尖唇侧部分,酶消化法原代培养,差别胰酶消化法纯化上皮细胞。角蛋白14和波形丝蛋白染色鉴定细胞来源。Notch 1免疫细胞化学染色。结果:原代培养的细胞经2~3次差别胰酶消化后可获得纯化的根尖蕾上皮细胞。免疫细胞化学染色角蛋白14阳性,波形丝蛋白阴性,并且在根尖蕾细胞中存在Notch1阳性细胞。结论:体外培养的根尖蕾细胞中存在Notch 1表达阳性的细胞,Notch信号途径可能参与了根尖蕾中干细胞增殖和分化的调控。 展开更多
关键词 根尖蕾 差别胰酶消化 SD大鼠 NOTCH 1
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Effect of endothelin-1 receptor antagonists on histological and ultrastructural changes in the pancreas and trypsinogen activation in the early course of caerulein-induced acute pancreatitis in rats 被引量:3
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作者 Anna Andrzejewska Jan W.Dlugosz Albert Augustynowicz 《World Journal of Gastroenterology》 SCIE CAS CSCD 2005年第8期1115-1121,共7页
AIM: To assess the effect of non-selective ETA/B (LU 302872)and selective ETA (LU 302146) antagonist on pancreatic histology and ultrastructure of acinar cells in connection with trypsinogen activation in early caerul... AIM: To assess the effect of non-selective ETA/B (LU 302872)and selective ETA (LU 302146) antagonist on pancreatic histology and ultrastructure of acinar cells in connection with trypsinogen activation in early caerulein-induced AP.METHODS: Male Wistar rats with caerulein-induced AP,lasting 4 h, were treated i.p. with 10 and 20 mg/kg b.w.of each antagonist. Edema, inflammatory infiltration,necrosis and vacuolization of acinar cells in the pancreas were scored at 0-3 scale. Free active trypsin (FAT), total potential trypsin (TPT) after activation with enterokinase,and index of trypsinogen activation (%FAT/TPT) were assayed in pancreatic homogenates.RESULTS: In untreated AP, the edema, inflammatory infiltration, necrosis and vacuolization increased as compared to control healthy rats (P<0.01). None of the treatment exerted any meaningful effect on the edema and inflammatory infiltration. The selective antagonist increased slightly the necrosis score to 0.82±0.06 at higher dose (P<0.05) vs 0.58±0.06 in untreated AP. The nonselective antagonist increased slightly the vacuolization score to 2.41±0.07 at higher dose (P<0.01) vs 1.88±0.08in untreated AP. The decrease in the number of zymogen granules, disorganization of endoplasmic reticulum,autophagosomes and cytoplasmic vacuoles were more prominent in treated AP than in untreated AP groups.%FAT/TPT in untreated AP increased about four times (18.4±3.8 vs4.8±1.3 in control group without AP, P<0.001).Treatment of AP with both antagonists did not affect significantly augmented trypsinogen activation.CONCLUSION: The treatment with endothelin-1 receptors (non-selective ETA/B and selective ETA) antagonists has essential effect neither on the edema and inflammatory infiltration nor on trypsinogen activation observed in the early course of caerulein-induced AP. Nevertheless a slight increase of the necrosis and vacuolization score and some of the ultrastructural data could suggest the possibility of their undesired effects in caerulein-induced AP at investigated doses. 展开更多
关键词 组织学 胰蛋白酶原 酶活性 急性胰腺炎 小鼠 医学实验
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On the Activities of Pancreatic Proteases and Alpha-1 Proteinase Inhibitor in Meat-Type Chicken
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作者 Vladimir G. Vertiprakhov Alena A. Grozina +3 位作者 Ivan A. Egorov Tatiana N. Lenkova Vardges A. Manukyan Tatiana A. Egorova 《Open Journal of Animal Sciences》 2017年第3期289-296,共8页
The study was aimed at the evaluation of the effects of breed, age, different digestion stimulators, and dietary crude protein (CP) level on the activities of proteolytic enzymes in pancreatic tissue and duodenal chym... The study was aimed at the evaluation of the effects of breed, age, different digestion stimulators, and dietary crude protein (CP) level on the activities of proteolytic enzymes in pancreatic tissue and duodenal chymus (in vivo), serum trypsin and α1-proteinase inhibitor (A1PI) concentrations in meat-type chicks. The study of age dynamics of trypsin and A1PI concentrations was performed on the chicks of hybrid cross “Smena-8”and two parental lines (Plymouth Rock and Cornish) fed standard commercial corn-wheat-SBM diets. Twenty birds per breed were euthanized at 1, 7, 14, 21, 28 and 35 days of age to obtain blood samples and pancreatic homogenate. Experiments on the effects of different digestion promotors (probiotic, acidifier, phytobiotic, enzymatic preparation) and different CP levels (finisher diet, CP 20%, vs. ground corn, CP 8.5%) were performed on 12 hybrid chicks with fistulated duodenum from 14 to 50 days of age. The following conclusions were made: 1) At 1 day of age high proteolytic activity in pancreatic tissue and maximal serum concentrations of trypsin and A1PI were found in both hybrid and parental lines. Since 7 to 35 days of age A1PI concentration was nearly constant, serum trypsin concentration decreased while proteolytic activity in pancreatic tissue exhibited undulate increase;2) Proteolytic activity in pancreatic tissue was higher in hybrids compared to the parental lines from 7 to 35 days of age (p 0.05);3) Supplementation of diet with exogenous enzymes stimulated the digestion due to the increase in protease activity in duodenal chymus by 9.1% compared to unsupplemented control (p 0.05);4) Proteolytic activity in duodenal chymus significantly responded to the substitution of ground corn for the complete diet by 2-fold decrease while serum trypsin concentration responded by 2.5-fold increase (p 0.001). This fact can indicate that physiological functions of digestive proteases are not confined to the digestive processes. 展开更多
关键词 CHICKS Pancreas TRYPSIN Alpha-1 PROTEINASE Inhibitor (Antitrypsin) Serum DUODENAL Fluid
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α_1-抗胰蛋白酶等对修饰胰蛋白酶的作用
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作者 卢四方 杨云焕 《中国医科大学学报》 CAS CSCD 1992年第3期175-178,共4页
用葡聚糖T2000修饰的胰蛋白酶,对α_1-抗胰蛋白酶的抑制作用、对尿素的变性作用以及对胃蛋白酶的消化作用的耐受力均高于天然胰蛋白酶。
关键词 修饰 α_1-抗胰蛋白酶 胰蛋白酶
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定点突变对决明Kunitz抑制剂抑制活性的影响
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作者 唐婕 黄斌翰 +2 位作者 李文杰 周嘉裕 廖海 《西南农业学报》 CSCD 北大核心 2023年第12期2591-2597,共7页
【目的】决明Kunitz胰蛋白酶抑制剂1(Cassia obtusifolia Kunitz trypsin inhibitor 1,CoTI1)是一类具有β-三叶草结构的功能多肽,探究定点突变对其抑制活性的影响,对CoTI1的结构研究具有重要意义。【方法】基于CoTI1结构分析,分别将位... 【目的】决明Kunitz胰蛋白酶抑制剂1(Cassia obtusifolia Kunitz trypsin inhibitor 1,CoTI1)是一类具有β-三叶草结构的功能多肽,探究定点突变对其抑制活性的影响,对CoTI1的结构研究具有重要意义。【方法】基于CoTI1结构分析,分别将位于顶部盖子β2和β3折叠之间的Cys44,以及位于底部β-桶β9折叠内的Tyr134和Lys135这3个位点的氨基酸残基突变为丙氨酸(Ala),将各突变体进行蛋白表达之后再检测其对牛胰蛋白酶和菜青虫类胰蛋白酶的抑制作用。【结果】与野生型CoTI1相比,CoTI1^(C44D)对牛胰蛋白酶的抑制活性升高41.00%,CoTI1^(Y134D)和CoTI1^(K135D)对牛胰蛋白酶的抑制活性分别下降45.66%和36.73%;CoTI1^(C44D)、CoTI1^(Y134D)和CoTI1^(K135D)对菜青虫类胰蛋白酶的抑制活性分别下降46.94%、49.00%和38.11%。【结论】Cys44、Tyr134和Lys135参与了β-三叶草结构的形成,是稳定CoTI1的空间结构及抑制活性的重要残基,为CoTI1的结构研究奠定了重要的理论基础。 展开更多
关键词 决明 Kunitz胰蛋白酶抑制剂1 β-三叶草结构 定点突变 抑制活性
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Western blotting in the diagnosis of duodenal-biliary and pancreaticobiliary refluxes in biliary diseases 被引量:6
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作者 Chun-Chih Chen 《Hepatobiliary & Pancreatic Diseases International》 SCIE CAS 2009年第6期608-613,共6页
BACKGROUND: Currently adopted diagnostic methods for duodenal-biliary and pancreaticobiliary refluxes carry many flaws, so the incidence of the two refluxes demands further larger sample size studies. This study aimed... BACKGROUND: Currently adopted diagnostic methods for duodenal-biliary and pancreaticobiliary refluxes carry many flaws, so the incidence of the two refluxes demands further larger sample size studies. This study aimed to evaluate Western blotting for the diagnosis of refluxes in biliary diseases. METHODS: An oral radionuclide (99)mTc-DTPA test (radionuclide, RN) was conducted for the observation of duodenal-biliary reflux prior to measuring bile radioactivity and Western blotting for detecting bile enterokinase (EK). Pancreaticobiliary reflux was assessed by biochemical and Western blotting tests for biliary amylase activity and trypsin-1, respectively. In accordance with bile sample origin, our samples were classified into ductal bile and gall bile groups; based on each individual biliary disease, we further classified the ductal bile group into five subgroups, and the gall bile group into four sub-groups. Western blotting was conducted to assess the two refluxes in biliary diseases. RESULTS: Consistencies were noted between EK and RN tests when diagnosing duodenal-biliary reflux (P<0.001). The amylase and trypsin-1 tests also showed consistency in diagnosing pancreaticobiliary reflux (P<0.001). Amylase and lipase levels within gall and ductal bile were strongly correlated (P<0.05). In the common bile duct pigment stone group, the EK and trypsin-1 positive rates were found to be insignificant (P>0.05); in the common bile duct cyst group, the EK positive rate was significantly lower than the trypsin-1 positive rate (P<0.05). CONCLUSIONS: Western blotting can accurately reflect duodenal-biliary and pancreaticobiliary refluxes. EK has greater sensitivity than RN for duodenal-biliary reflux. The majority of biliary amylase and lipase comes from the pancreas in all biliary diseases; pancreaticobiliary reflux is the predominant source in the common bile duct cyst group and duodenal-biliary reflux is responsible for the ductal pigment stone group. 展开更多
关键词 pancreaticobiliary reflux duodenal-biliary reflux trypsin-1 ENTEROKINASE biliary diseases
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一种新的胰腺炎脑损伤模型的建立 被引量:3
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作者 彭波 沙焕臣 马清涌 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期165-168,共4页
目的建立一种稳定的胰腺炎并脑损伤模型,以进一步探讨胰腺炎脑损伤的机制。方法24只成年雄性SD大鼠,随机分为假手术(sham operation,SO)组,重症急性胰腺炎(SAP)组和胰蛋白酶制模组(trypsin),每组8只大鼠。各组大鼠均于制模后12 h采集脑... 目的建立一种稳定的胰腺炎并脑损伤模型,以进一步探讨胰腺炎脑损伤的机制。方法24只成年雄性SD大鼠,随机分为假手术(sham operation,SO)组,重症急性胰腺炎(SAP)组和胰蛋白酶制模组(trypsin),每组8只大鼠。各组大鼠均于制模后12 h采集脑组织和胰腺组织标本。比较各组大鼠的死亡率;采用酶联免疫吸附试验(enzymelinked immunosorbent assay,ELISA)测定血清细胞间紧密连接蛋白(Zo-1)含量;透射电镜观察脑组织超微结构变化;HE染色观察脑组织病理学变化。结果SAP组大鼠死亡率较trypsin组明显升高,SO组无大鼠死亡;SAP组Zo-1水平均明显高于SO组(P<0.05),trypsin组Zo-1水平与SAP组呈现一致性变化(P>0.05)。SAP组和trypsin组均出现明显神经元细胞肿胀、毛细血管淤血、血管通透性增加、血栓形成、线粒体肿胀和细胞凋亡等超微结构的变化。结论胰蛋白酶可能为SAP脑损伤的元凶;用胰蛋白酶制备SAP模型大鼠死亡率低,为进一步研究脑损伤的机制和进行相关治疗研究提供了稳定的动物模型。 展开更多
关键词 重症急性胰腺炎 脑损伤模型 胰蛋白酶 ZO-1
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嗜酸乳杆菌对胃肠道酶的敏感性研究 被引量:6
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作者 冯艳丽 张锐利 《乳业科学与技术》 2005年第1期12-15,共4页
以 M RS 为培养基,模拟胃肠环境对嗜酸乳酸菌对 pH 、胃蛋白酶、胰蛋白酶、胆汁盐的敏感性进行了研究。结果表明:在 pH 1.60-5.00、温度 37 ℃,胃蛋白酶 0.592ug/m L-1.482μg/m L 条件下,活菌数能达到 108cfu/m L 以上。在 M R S 培养... 以 M RS 为培养基,模拟胃肠环境对嗜酸乳酸菌对 pH 、胃蛋白酶、胰蛋白酶、胆汁盐的敏感性进行了研究。结果表明:在 pH 1.60-5.00、温度 37 ℃,胃蛋白酶 0.592ug/m L-1.482μg/m L 条件下,活菌数能达到 108cfu/m L 以上。在 M R S 培养基自然 pH 条件下,胰蛋白酶活力在 14.24u/g-72.32u/g 范围内,胆汁盐0.2% 的情况下,活菌数能达到 107cfu/m L 以上。证明了嗜酸乳酸菌能顺利通过胃肠环境,促进人体健康。 展开更多
关键词 嗜酸乳杆菌 胃肠道 胆汁 敏感性 胃蛋白酶 胰蛋白酶 MRS培养基 酸乳 酶活力 乳酸
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人尿激肽原酶的纯化与鉴定 被引量:2
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作者 汪炬 洪岸 +1 位作者 孙奋勇 谢秋玲 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2003年第5期772-777,共6页
采用两性离子胶体沉淀和乙醇沉淀相结合的粗提方法,经离子交换、疏水层析、亲和层析及凝胶过滤 4个步骤有效地将人尿激肽原酶(hk 1)粗提物纯化,比活提高了 175 5倍,总得率为 70 %.用以慈菇蛋白酶抑制剂为配体的亲和层析纯化hk 1,效果理... 采用两性离子胶体沉淀和乙醇沉淀相结合的粗提方法,经离子交换、疏水层析、亲和层析及凝胶过滤 4个步骤有效地将人尿激肽原酶(hk 1)粗提物纯化,比活提高了 175 5倍,总得率为 70 %.用以慈菇蛋白酶抑制剂为配体的亲和层析纯化hk 1,效果理想,整个工艺路线适合产业化生产.纯化产物在SDS 聚丙烯酰胺凝胶电泳上为单带,高压液相色谱(HPLC)上为单峰,基质辅助激光解析电离飞行时间质谱测得分子质量为 3345 0u,等电聚焦测得pI在 4 3附近,为含糖蛋白.同时测定了该酶的热稳定性和pH稳定性.纯化过程中同时分离得到另一种药用蛋白———人尿胰蛋白酶抑制剂(HUTI). 展开更多
关键词 人尿激肽原酶 纯化 鉴定 抑制剂 乙醇沉淀 胶体沉淀 离子交换 疏水层析 亲和层析
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人血痕ORM、Pi、AHSG和GC同步等电聚焦分型
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作者 侯一平 苟清 吴梅筠 《中国法医学杂志》 CSCD 1995年第1期11-14,共4页
作者在国内外首次建立了血清类粘蛋白、α1-抗胰蛋白酶、α2-HS-糖蛋白和型特异性成份等四种遗传标记同步等电聚焦免疫酶放大分型方法。累计个人识别机率为0.9878,非父排除率为0.6648,是国内外已报道同步电泳分型方法中鉴别能力... 作者在国内外首次建立了血清类粘蛋白、α1-抗胰蛋白酶、α2-HS-糖蛋白和型特异性成份等四种遗传标记同步等电聚焦免疫酶放大分型方法。累计个人识别机率为0.9878,非父排除率为0.6648,是国内外已报道同步电泳分型方法中鉴别能力最高的。本法可对稀释度为1/100的血清进行分型。对于室温保存四周的血痕盯全部正确分型。除Pi外,ORM、AHSG和GC三种遗传标记至少在24周之内皆可正确分型。 展开更多
关键词 血痕 血清类粘蛋白 PI AHSG GC 等电聚焦
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向日葵胰蛋白酶抑制剂SFTI-1 被引量:1
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作者 张威 陈婷 张友尚 《生命的化学》 CAS CSCD 北大核心 2010年第2期256-259,共4页
向日葵胰蛋白酶抑制剂(sunflower trypsininhibitor-1,SFTI-1)是近来发现的Bowman-Birk抑制剂(Bowman-Birk inhibitor,BBI)家族的新成员。由14个氨基酸残基组成的SFTI-1是具有胰蛋白酶抑制活性的天然环肽。SFTI-1的天然环状结构使它成... 向日葵胰蛋白酶抑制剂(sunflower trypsininhibitor-1,SFTI-1)是近来发现的Bowman-Birk抑制剂(Bowman-Birk inhibitor,BBI)家族的新成员。由14个氨基酸残基组成的SFTI-1是具有胰蛋白酶抑制活性的天然环肽。SFTI-1的天然环状结构使它成为药物研发中的重要前导化合物。本文综述了近年来SFTI-1在结构、功能、环化机制等方面的研究进展。 展开更多
关键词 向日葵胰蛋白酶抑制剂 结构 环化机制
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优化的α1-抗胰蛋白酶生物活性测定方法的验证
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作者 祝慈芳 吴玮 刁武平 《国际生物制品学杂志》 CAS 2013年第6期300-303,共4页
目的 验证优化的α1-抗胰蛋白酶(α1-antitrypsin,α1-AT)生物活性测定方法.方法 用发色底物法测定α1-AT活性,以牛胰蛋白酶替换冻干正常人血清来优化先前建立的方法,验证优化方法的准确性、重复性,并观察不同物质对优化方法的影响.结... 目的 验证优化的α1-抗胰蛋白酶(α1-antitrypsin,α1-AT)生物活性测定方法.方法 用发色底物法测定α1-AT活性,以牛胰蛋白酶替换冻干正常人血清来优化先前建立的方法,验证优化方法的准确性、重复性,并观察不同物质对优化方法的影响.结果 优化方法在胰蛋白酶质量浓度为0.01~0.05 g/L时线性关系良好,相关系数>0.99.优化方法具有良好的准确性和重复性,当采用优化方法测定质量浓度为0.01、0.03、0.05 g/L胰蛋白酶时,胰蛋白酶的回收率分别为99.33%、94.44%和92.67%,变异系数分别为3.79%、1.66%和1.02%.在一定范围内,聚乙二醇、蔗糖、枸橼酸钠、人白蛋白浓度变化对优化方法测定α1-AT生物活性没有影响.结论 以牛胰蛋白酶作为参考标准品的优化α1-AT生物活性测定方法可用于α1-AT制备工艺中的常规质量控制. 展开更多
关键词 Α1抗胰蛋白酶 胰蛋白酶 发色底物法
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