Tuftsin放射免疫分析法及其初步应用研究

报道Ｔｕｆｔｓｉｎ放免分析方法的建立以及人和动物切脾术后血清Ｔｕｆｔｓｉｎ水平的变化。将Ｔｕｆｔｓｉｎ与ＢＳＡ相联，制得免疫原，免疫家兔得抗Ｔｕｆｔｓｉｎ抗血清；对氨苯乙酰－Ｔｕｆｔｓｉｎ通过改良氯胺Ｔ法与￣（１２５）Ｉ标记，得碘化标记物；放免测量方法为液相一步平衡法。曲线测量范围是０．５～１００μｇ／ｍｌ，灵敏度为４０ｎｇ／管，平均批内和批间变异系数分别为６．８％和１０．８％，平均回收率为８９．６％。测定３０例脾切除患者血清Ｔｕｆｔｓｉｎ水平为４０６±１７９ｎｇ／ｍｌ（±ｓ），而对照组（４０例健康献血员）则为５５７±２５６ｎｇ／ｍｌ；１０只家兔术后１月血清Ｔｕｆｔｓｉｎ为２０６±７５ｎｇ／ｍｌ，而对照组（ｎ＝１０）为３１８±９６ｎｇ／ｍｌ。脾切除组与对照组差异显著（Ｐ＜０．０１），结果表明人和家兔切脾术后血清Ｔｕｆｔｓｉｎ水平明显下降，提示Ｔｕｆｔｓｉｎ与脾脏之间存在着某种内在的必然的联系。

脾切除后IL-2对兔血清tuftsin水平影响的实验研究

通过建立兔动物模型并注射白细胞介素－２（ＩＬ－２），采用放射免疫分析方法检测兔血清ｔｕｆｔｓｉｎ水平的变化。半脾切除、未手术组兔血清ｔｕｆｔｓｉｎ水平较注射前显著升高，其中未手术组升高更明显，全脾切除组与注射前比较无变化。提示ＩＬ－２对血清ｔｕｆｔｓｉｎ水平的影响依赖于脾淋巴细胞的生物学效应。

Tuftsin对荷肝癌小鼠免疫功能的影响

白细胞介素2、NK细胞活性和淋巴细胞转化率等指标可以反映机体免疫功能及预后。作者观察了荷肝癌小鼠应用tuftsin注射及不用tuftsin时上述三项指标的对比。结果表明,不用tuftsin的荷癌鼠三项免疫指标均明显低于应用tuftsin的荷癌鼠。差异有显著性,实验提示,tuftsin具有抗肿瘤作用,可以提高荷癌动物的抗肿瘤免疫力,tuftsin对三项免疫指标的影响,是其抗肿瘤作用机理之一。作者认为,tuftsin可望作为治疗恶性肿瘤的一部分。同时测定血清tuftsin对预后了解有一定意义。

Tuftsin促进肝癌细胞凋亡的实验研究

目的 通过研究Tuftsin与肝癌细胞凋亡的关系,探讨脾脏及Tuftsin因子的抗肿瘤作用及其机制.方法 昆明种小鼠36只随机分为6组：假手术组(A组)、全脾切除组(B组)、全脾切除后给予Tuftsin组(C1、C2组)、1／3脾切除组(D组)、2／3脾切除组(E组).比较这六组小鼠移植性肝癌生长情况；采用流式细胞仪检测各组的腹腔巨噬细胞诱导肝癌细胞凋亡率及Tuftsin直接诱导肝癌细胞凋亡(另设F组)情况.结果 B组移植性肝癌重量大于A、C1、C2、D、E组的重量；B组肝癌细胞凋亡率低于A、C1、C2、D、E、F组；A、D、E的肝癌细胞凋亡率无明显差别；巨噬细胞上清液(C1组)与巨噬细胞悬液(C2组)引起的肝癌细胞凋亡率无明显差异；巨噬细胞诱导的肝癌细胞凋亡率与残脾量成正相关,与移植性肝癌重量成负相关.结论 全脾切除能减少肝癌细胞凋亡,促进移植性肝癌生长,但保留1／3以上的脾脏就能诱导足量的肝癌细胞凋亡,抑制移植性肝癌生长；Tuftsin能直接、间接诱导肝癌细胞凋亡；Tuftsin间接诱导肝癌细胞凋亡主要是通过腹腔巨噬细胞上清液中的活性因子起作用.

Tuftsin放射免疫分析方法的建立

将ＢＳＡ与Ｔｕｆｔｓｉｎ联接制备成免疫原，免疫兔获得抗血清并加以纯化；制备￣（１２５）Ｌ－ｔｕｆｒｓｉｎ标记化合物，血清样品经胰蛋白酶消化后作放免分析。结果：抗血清滴度１：６００，最大结合率为３３％，标准曲线量程为０．５～１００μｇ／ｍｌ，批间ＣＶ＝１０．８％，批内ＣＶ＝６．８％，平均回收率为８９．６％。笔者认为抗血清的制备及样品的处理是方法学的关键环节，本文对其环节进行了改进。

外伤性脾切除对血清Tuftsin水平的影响

应用放射免疫分析方法对１０例外伤性脾切除病人和２０例正常对照组进行血清Ｔｕｆｔｓｉｎ水平测定，显示脾切除组Ｔｕｆｔｓｉｎ水平明显低于正常对照组。提示脾脏在Ｔｕｆｔｓｉｎ的产生过程中起着决定性作用。脾切除后患者易感染性增强和易发生脾切除后凶险感染（ＯＰＳＩ）与Ｔｕｆｔｓｉｎ水平降低有关。因此，外伤性脾破裂病人最大限度保留脾脏，以维持足量的Ｔｕｆｔｓｉｎ水平。

TUFTSIN对小鼠腹水型肉瘤免疫作用的实验研究

通过建立实验动物模型，接种S180瘤细胞，对Tuftsin的抗肿瘤作用进行研究。实验结果表明，Tuftsin能抑制带脾行瘤小鼠的瘤体生长，并延长生存期。该作用在脾切除的小鼠中更为明显，可望用于恶性肿瘤的治疗。Tuftsin是一种便产生于脾脏的四肽物质，具有免疫调节作用。国外已开始将人工合成的Tuftsin用于治疗晚期恶性肿瘤、AIDS病患者。

Tuftsin对小鼠腹腔巨噬细胞吞噬功能的影响

将实验鼠随机分为4组:(1)正常小鼠注射tuftsin组;(2)正常对照组;(3)切脾后注射tuftsin组;(4)脾切除组。以5%淀粉液诱导各组小鼠腹腔巨噬细胞产生,并观察其对鸡红细胞的吞噬功能。结果发现腹腔巨噬细胞功能在(1)组最强,(4)组最弱,(2)组与(3)组相比无显著性差异。提示,脾切除降低腹腔巨噬细胞功能,tuftsin则可增强其活力,tufsin还可以补偿脾切除后已减弱的腹腔巨噬细胞功能。

高选择性Tuftsin-丙烯酸分子印迹复合膜的吸附分离行为研究

Tuftsin是一种对人体具有特殊生理作用的生物活性肽.该文以Tuftsin为模板分子,以丙烯酸为单体,在多孔聚偏氟乙烯基膜上制备高选择性Tuftsin-丙烯酸分子印迹复合膜(T-AA MICM),并研究其吸附分离行为.研究结果表明:分子印迹复合膜具有优良的吸附性能和特异性选择吸附性能,Tuftsin在分子印迹复合膜上的吸附过程主要是单分子吸附过程,其吸附动力学行为规律符合准2级吸附方程.

脾切除后IL-2对兔血清Tuftsin水平的影响

对兔动物模型注射白细胞介素－２前后，采用放射免疫分析方法检测兔血清Ｔｕｆｔｓｉｎ水平的变化。半脾切除、未手术组兔血清Ｔｕｆｔｓｉｎ水平较注射前显著升高，其中未手术组升高更明显，全脾切除组与注射前比较无显著变化；全脾切除组注射白细胞介素－２前后均低于半脾切除组和手术组。提示ＩＬ－２对血清Ｔｕｆｔｓｉｎ水平的影响可能依赖于脾细胞的生物学效应，全脾切除后此效应消失。

Tuftsin 的结构与功能

Tuftsin 有合成与天然之分,其结构为苏-赖-脯-精,能提高吞噬细胞的吞噬杀菌活性,对多形核白细胞有趋化作用,可提高天然杀伤细胞的细胞毒。有抗癌作用,于体内、体外均可抑制肿瘤生长。能止痛和缓解吗啡成瘾综合症。本文阐述了Tuftsin 的产生过程、理化性质、作用机理、功能及临床意义。

一种人工合成Tuftsin类似肽大鼠组织分布和排泄研究

目的研究Tuftsin类似肽(T肽)单次皮下注射后在大鼠体内的组织分布特点和排泄情况。方法 Wistar大鼠,单次皮下注射剂量21.6 mg.kg-1T肽。采用竞争ELISA方法检测各时间点的组织器官、尿、粪和胆汁中的药物含量。结果组织分布试验结果表明,药物主要分布在大鼠的血清、肾、脾和小肠组织中,除小肠达峰时间为给药后2 h之外,其它药物含量均于给药后15 min达最高;排泄实验结果表明,0～144 h内尿和粪中排泄的原型药物分别占给药总量的2.21%和0.03%;0～96 h内大鼠胆汁中排泄的原型药物为给药总量的0.02%。结论 T肽给药后在Wistar大鼠体内广泛分布,在血清、肾和脾组织中含量较高,在粪和胆汁中检测出T肽的含量很少。

Tuftsin的合成及对裸鼠胆管癌模型的作用

目的 :用多肽合成仪固相合成Tuftsin后 ,研究在体情况下Tuftsin抗胆管癌的作用。方法 :用毛细管电泳仪检测合成Tuftsin的纯度。建立胆管癌裸鼠模型后 ,用Tuftsin治疗4周 ,观察治疗前后的肿瘤大小与重量和肝、脾及肿瘤组织的病理变化。结果 :合成Tuftsin纯度在99.9 %以上 ;Tuftsin治疗组和对照组肿瘤大小及重量差异明显 ,治疗组肝、脾组织内的单核吞噬细胞增生活跃。结论 :多肽合成仪固相法合成Tuftsin方法简单 ,纯度高 ,Tuftsin可明显抑制裸鼠胆管癌组织的生长。

tuftsin及其抑制物的化学合成和对巨噬细胞抗胆管癌作用的影响

目的研究 tuftsin及其抑制物的化学合成和对巨噬细胞抗胆管癌作用的影响。方法用多肽合成仪合成 tuftsin及抑制物后 ,用毛细管电泳片检测它们的浓度 ,用其作用于分离的大鼠脾巨噬细胞和肝脏 Kupffer细胞 ,再取细胞上清液作用于胆管癌细胞 ,并测定上清液中的 TNF和 NO含量。结果合成的 tuftsin及抑制物纯度在 99.9%以上 ,tuftsin及抑制物可分别刺激和抑制巨噬细胞杀伤胆管癌细胞 ,并分别促进和抑制巨噬细胞分泌 TNF和 NO。结论 tuftsin是一种较强的巨噬细胞刺激因子。

脾损伤患者自体脾组织移植术后血清tuftsin的变化

采用反相－高效液相色谱（ＰＲ－ＨＰＬＣ）法测定血清ｔｕｆｔｓｉｎ的含量，对３０例脾损伤自体脾组织移植术后近、远期患者的血清ｔｕｆｔｓｉｎ变化及全脾切除术后和对照组患者的同期变化进行了比较研究。结果显示：自体脾组织移植术后近期，血清ｔｕｆｔｓｉｎ浓度明显下降，但术后远期可恢复接近正常水平，而全脾切除术后却呈进行性下降趋势。提示：自体脾组织移植术后的近期，脾功能仍处于低下状态，远期可获改善并保留了脾脏继续产生ｔｕｆｔｓｉｎ的功能。因此。

Tuftsin及其放射免疫分析应用

Tuftsin(吞噬作用激素)为一种天然刺激巨噬细胞吞噬活性的四肽,依赖于脾脏产生。作者对Tuftsin的发现、产生、代谢、抗体制备、血清样本处理及放射免疫分析应用作一概述,认为脾切除血清Tuftsin的含量减少,检测Tuftsin水平可作为一项反映脾功能的免疫指标。

反相─高效液相色谱法（RP－HPLC）测定血清tuftsin及其临床应用

反相─高效液相色谱法（ＲＰ－ＨＰＬＣ）测定血清ｔｕｆｔｓｉｎ及其临床应用ＡｓｓａｙｏｎｓｅｒｕｍｔｕｆｔｓｉｎｂｙＲＰ－ＨＰＬＣａｎｄｉｔ’ｓｃｌｉｎｉｃａｌａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ张玉新，马宏敏，朱珠，蔡志民（第三军医大学附属西南医院普通外科）重庆，...

脾脏及Tuftsin在亚硝酸盐诱发胃癌过程中的作用

本文通过实验性胃癌模型的建立,观察脾脏及Tuftsin的免疫功能对肿瘤发生的影响。 大鼠随机分为切脾组、切脾后注射Tuftsin组、模拟切脾组。术后第8周起各组大鼠连续自由饮取t50mg/L浓度的MNNG溶液共32周,同时对一组切脾动物开始注射Tultsin。结果提示脾脏在肿瘤免疫中有双重作用。脾脏具有一定的防止瘤前病变及抗早期肿瘤的作用;对于进展期肿瘤,脾脏介入了肿瘤引起的机体免疫抑制状态的形成过程,有促肿瘤生长作用。脾脏特异的因子Tuftsin,可增加组织局部炎症反应从而发挥其抗肿瘤的作用,同时也提示胃粘膜慢性炎症与胃癌发生并无直接联系。作者提出了在脾外伤和胃癌手术时作保留脾脏手术的具体意见,并认为Tuftsin如能用于临床,将是肿瘤生物学治疗的一个新的途径。