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Hepatitis B virus X protein up-regulates tumor necrosis factor-α expression in cultured mesangial cells via ERKs and NF-κB pathways 被引量:16
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作者 Hong-Zhu Lu Jian-Hua Zhou 《Asian Pacific Journal of Tropical Biomedicine》 SCIE CAS 2013年第3期217-222,共6页
Objective:To investigate the effects of hepatitis B virus(HBV)X protein(HBx)on the expression of tumor necrosis factor-α(TNF-α)in glomerular mesangial cells(GMCs)and the underlying intracellular signal pathways.Meth... Objective:To investigate the effects of hepatitis B virus(HBV)X protein(HBx)on the expression of tumor necrosis factor-α(TNF-α)in glomerular mesangial cells(GMCs)and the underlying intracellular signal pathways.Methods:The plasmid pCI-neo-X that carries the X gene of hepatitis B virus was transfected into cultured GMCs.HBx expression in the transfected GMCs was assessed by Western-blot.TNF-αprotein and mRNA were assessed by ELISA and semi-quantitative RT-PCR,respectively.Three kinase inhibitors-U0126,an inhibitor of extracellular signal-regulated kinases(ERKs);lactacvstin,an inhibitor of nuclear factor-κB(NF-κB);and SB203580,a selective inhibitor of p38 MAP kinase(p38 MAPK)were used to determine which intracellular signal pathways may underlie the action of HBx on TNF-αexpression in transfected GMCs.Results:A significant increase in HBx expression in pCI-neo-X transfected GMCs was detected at 36 h and 48 h,which was not affected by any of those kinase inhibitors mentioned above.A similar increase in the expression of both TNF-αprotein and mRNA was also observed at 36 h and 48 h,which was significantly decreased in the presence of U0126 or lactacytin,but not SB203580.Conclusions:HBx upregulates TNF-αexpression in cultured GMCs,possibly through ERKs and NF-κB pathway,but not p38 MAPK pathway. 展开更多
关键词 Heptitis B virus x protein Nuclear factor-κB tumor NECROSIS factor GLOMERULONEPHRITIS ExTRACELLULAR SIGNAL-REGULATED kinase
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Effects of erythropoietin on the expression of tumor necrosis factor-alpha and Bax after facial nerve axotomy in rats 被引量:6
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作者 Wei Zhang Shengyu Lue Ziying Yu Ming Bi Bin Sun 《Neural Regeneration Research》 SCIE CAS CSCD 2011年第6期444-449,共6页
This study sought to evaluate the effect of high-dose erythropoietin (EPO; 5 000 IU/kg) on the expression of tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) and Bax in the facial nucleus after facial nerve transection in rat... This study sought to evaluate the effect of high-dose erythropoietin (EPO; 5 000 IU/kg) on the expression of tumor necrosis factor-alpha (TNF-α) and Bax in the facial nucleus after facial nerve transection in rats. A total of 42 Wistar rats of both genders were used in this study, and 40 rats were randomly divided into 2 groups: EPO group and model group. The EPO group was treated with EPO once a day for 5 days at a dose of 5 000 IU/kg body weight. The model group was treated with saline of the same amount. At day 3 after EPO (or saline) treatment, the right facial nerves of the 40 rats were transected at the level of the stylomastoid foramen, with the left sides untreated. The remaining 2 rats that did not undergo axotomy served as the control group. The surviving motor neurons in operated rats were counted in coronal paraffin sections of the facial nucleus. The expression of TNF-a and Bax in the facial nucleus was detected by immunohistochemical staining at days 3, 7, 14, 21, and 28 after axotomy. At days 14, 21, and 28 after facial nerve axotomy, a significantly greater proportion of facial motor neurons survived in the EPO group than in the model group. After axotomy, the expression of TNF-a and Bax increased in motor neurons in both the EPO and the model groups. TNF-o expression reached its peak level at day 14 after axotomy, while Bax expression reached its peak level at day 21. TNF-α expression was much lower in the EPO group than in the model group at all time points. No significant difference in Bax expression was found between the EPO and the model groups. These results indicate that high-dose EPO treatment attenuates the increase in TNF-α expression in the facial nucleus and reduces the loss of motor neurons after facial nerve transection in rats. However, high-dose EPO treatment has little effect on Bax expression. 展开更多
关键词 ERYTHROPOIETIN tumor necrosis factor-a Bcl-2-associated x protein facial motor neuron
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X-染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1通过自噬途径调控Caspase 1介导的胃肠道间质瘤细胞焦亡
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作者 周江浩 谢书海 陈勇 《河北医学》 CAS 2024年第5期744-750,共7页
目的:探究X-染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1(XAF1)对人胃肠道间质瘤(GIST)细胞中半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase 1)介导的细胞焦亡的影响及机制。方法:实时荧光定量PCR和Western blot检测人正常胃黏膜上皮细胞系(RGM-1)和GIST细胞系(GIST-T... 目的:探究X-染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1(XAF1)对人胃肠道间质瘤(GIST)细胞中半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase 1)介导的细胞焦亡的影响及机制。方法:实时荧光定量PCR和Western blot检测人正常胃黏膜上皮细胞系(RGM-1)和GIST细胞系(GIST-T1、GIST-430、GIST-882)中XAF1的表达水平;采用脂质体介导转染法将pcDNA3.1-XAF1重组质粒染进GIST-882细胞,以构建高表达XAF1的GIST-882细胞。GIST-882细胞分为对照组、pcDNA3.1组(转染pcDNA3.1空载体质粒)、pcDNA3.1-XAF1组(转染pcDNA3.1-XAF1重组质粒)、pcDNA3.1-XAF1+Rap组(转染pcDNA3.1-XAF1重组质粒并给予自噬激活剂雷帕霉素处理),免疫荧光染色检测各组细胞内微管相关蛋白1轻链3(LC3)表达情况,Western blot检测各组细胞中LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值与Beclin1蛋白表达水平,ELISA法检测各组细胞上清中白细胞介素,IL-1β、IL-18含量,乳酸脱氢酶(LDH)释放实验检测各组细胞LDH释放率,Western blot检测各组细胞中Caspase-1及其活化形式cleaved-Caspase-1、NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)、消皮素D(GSDMD)蛋白表达水平。结果:与RGM-1细胞比较,GIST-T1、GIST-430、GIST-882细胞中XAF1 mRNA和蛋白相对表达量显著减少(P<0.05);细胞转染后,pcDNA3.1-XAF1组GIST-882细胞中XAF1 mRNA和蛋白相对表达量均显著高于pcDNA3.1组、对照组(P<0.05)。与对照组比较,pcDNA3.1-XAF1组GIST-882细胞内LC3荧光强度明显减弱,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin1蛋白相对表达量显著减少(P<0.05),细胞上清液IL-1β、IL-18含量及LDH释放率显著升高(P<0.05),Caspase-1、cleaved-Caspase-1、NLRP3、GSDMD蛋白相对表达量也显著增加(P<0.05);与pcDNA3.1-XAF1组比较,pcDNA3.1-XAF1+Rap组GIST-882细胞内LC3荧光强度明显增强,LC3Ⅱ/LC3Ⅰ比值、Beclin1蛋白相对表达量显著增加(P<0.05),同时,细胞上清液IL-1β、IL-18含量及LDH释放率显著下降(P<0.05),Caspase-1、cleaved-Caspase-1、NLRP3、GSDMD蛋白相对表达量也显著减少(P<0.05)。结论:XAF1在GIST细胞中表达下降,提高XAF1表达能通过抑制自噬从而促进Caspase 1介导的GIST细胞焦亡,发挥抗肿瘤作用。 展开更多
关键词 胃肠道间质瘤 x-染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1 自噬 半胱氨酸蛋白酶-1 焦亡
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血清CTRP3、CXCL14水平与子宫内膜异位症术后复发的关系
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作者 李维艳 严玉萍 +2 位作者 张燕 路静 赵晓化 《山东医药》 CAS 2024年第19期20-24,共5页
目的探讨血清补体1q/肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP3)、C-X-C基序趋化因子配体14(CXCL14)水平对子宫内膜异位症(EM)术后复发的预测价值。方法选取手术治疗的EM患者132例为EM组,并根据术后3年内是否复发将患者分为复发组52例、未复发组80例... 目的探讨血清补体1q/肿瘤坏死因子相关蛋白3(CTRP3)、C-X-C基序趋化因子配体14(CXCL14)水平对子宫内膜异位症(EM)术后复发的预测价值。方法选取手术治疗的EM患者132例为EM组,并根据术后3年内是否复发将患者分为复发组52例、未复发组80例;健康体检妇女76名为对照组。酶联免疫吸附法检测血清CTRP3、CXCL14;收集EM组相关资料;单因素分析与多因素Logistic回归分析血清CTRP3、CXCL14对EM患者术后复发的影响;受试者工作特征(ROC)曲线分析血清CTRP3、CXCL14水平对EM患者术后复发的预测价值。结果EM组血清CTRP3、CXCL14水平低于对照组(P均<0.05)。年龄增加、EM生育指数评分升高、CTRP3升高、CXCL14升高为EM患者术后复发的独立保护因素(P均<0.05),ASRM分期Ⅲ、Ⅳ期为独立危险因素(P<0.05)。血清CTRP3、CXCL14水平联合预测EM患者术后复发的曲线下面积为0.855,大于二者单独预测的0.764、0.769(P均<0.05)。结论血清CTRP3、CXCL14水平降低与EM患者术后复发密切相关,二者联合预测EM患者术后复发的价值较高。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 补体1q/肿瘤坏死因子相关蛋白3 C-x-C基序趋化因子配体14 术后复发
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急性胰腺炎小鼠胰腺和远隔脏器组织TRAF6、XIAP表达变化及其与细胞凋亡的关系 被引量:2
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作者 谭贞菊 周翔宇 陈霞 《山东医药》 CAS 2023年第32期45-49,共5页
目的观察急性胰腺炎小鼠胰腺和远隔脏器组织中肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)和X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)表达变化,并分析其与多脏器细胞凋亡的关系。方法将30只雄性C57BL/10SnJ小鼠随机分为对照组、急性水肿性胰腺炎(AEP)组、急性坏... 目的观察急性胰腺炎小鼠胰腺和远隔脏器组织中肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)和X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)表达变化,并分析其与多脏器细胞凋亡的关系。方法将30只雄性C57BL/10SnJ小鼠随机分为对照组、急性水肿性胰腺炎(AEP)组、急性坏死性胰腺炎(ANP)组,每组10只。AEP组建立AEP模型,ANP组建立ANP模型,对照组注射等量磷酸盐缓冲盐水。采用RT-qPCR法检测各组胰腺组织中的TRAF6、XIAP mRNA,Western blotting法检各组胰腺、肠、肝、肺、肾组织中的cleaved Caspase-3、TRAF6、XIAP蛋白。采用TUNEL法测算胰腺、小肠、肝、肺、肾组织细胞凋亡率。结果ANP组、AEP组胰腺及多个远隔脏器组织中TRAF6、XIAP蛋白表达与对照组比较差异均有统计学意义(P均<0.05);AEP组胰腺组织中XIAP mRNA表达低于ANP组(P<0.05);AEP组胰腺、肠、肝、肺、肾组织中TRAF6蛋白表达高于ANP组,XIAP蛋白表达低于ANP组(P均<0.05)。AEP组胰腺、肠、肝、肺、肾组织细胞凋亡率及cleaved Caspase-3表达高于ANP组和对照组(P均<0.05)。胰腺炎小鼠胰腺及多个远隔脏器组织中cleaved Caspase-3蛋白表达与TRAF6蛋白表达呈正相关,与XIAP蛋白表达呈负相关(P均<0.05)。结论急性胰腺炎小鼠胰腺和远隔脏器组织中TRAF6、XIAP表达异常,且与细胞凋亡指标存在相关性;TRAF6、XIAP在AEP与ANP中的表达趋势有所差异,TRAF6、XIAP对细胞凋亡的调控作用可能与急性胰腺炎严重程度有关。 展开更多
关键词 急性水肿性胰腺炎 急性坏死性胰腺炎 急性胰腺炎 细胞凋亡 肿瘤坏死因子受体相关因子6 x连锁凋亡抑制蛋白
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乙型肝炎病毒X蛋白通过激活ERKs和NF-κB上调大鼠系膜细胞表达TNF-α 被引量:7
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作者 卢宏柱 樊启红 +2 位作者 刘丹 邓开琴 周建华 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2011年第2期144-148,共5页
目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)X基因转染大鼠系膜细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)高表达的细胞外蛋白调节激酶(ERKs)、核因子κB(NF-κB)、P38 MAPK信号传导机制。方法将含有HBV X基因的质粒pCI-neo-X导入体外培养的大鼠系膜细胞,分别采用特... 目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)X基因转染大鼠系膜细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)高表达的细胞外蛋白调节激酶(ERKs)、核因子κB(NF-κB)、P38 MAPK信号传导机制。方法将含有HBV X基因的质粒pCI-neo-X导入体外培养的大鼠系膜细胞,分别采用特异性抑制剂U0126阻断ERK1/2通路,Lactacystin阻断NF-κB通路和SB203580阻断P38 MAPK通路,观察培养细胞TNF-α及其mRNA表达,以不加抑制剂作为对照。RT-PCR检测TNF-αmRNA表达,ELISA检测培养上清液中TNF-α表达。Western blot检测乙型肝炎病毒X蛋白(HBx)表达。结果转染pCI-neo-X后,系膜细胞TNF-αmRNA及上清液TNF-α表达均增高,通过阻断ERK1/2或NF-κB通路,细胞TNF-αmRNA及上清液TNF-α表达均下降。而阻断P38 MAPK通路对系膜细胞TNF-αmRNA及上清液TNF-α表达无明显影响。结论 HBx蛋白通过激活ERKs和NF-κB信号通路使系膜细胞高表达TNF-α,而与P38 MAPK通路无关。 展开更多
关键词 乙型肝炎病毒 x蛋白 系膜细胞 细胞外蛋白调节激酶 肿瘤坏死因子α 核因子-ΚB
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LXRα通过下调IRF3、GRIP1负性调控Kupffer细胞中LPS诱导的炎症反应机制 被引量:4
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作者 欧志兵 黄庆勇 +3 位作者 孙科 魏思东 龚建平 涂兵 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期848-851,共4页
目的通过观察肝X受体α(LXRα)激动剂对脂多糖(LPS)刺激后Kupffer细胞干扰素调节因子3(IRF3)、糖皮质激素受体反应蛋白1(GRIP1)、LXRα表达的影响,探讨LXRα负性调控炎症反应的相关机制。方法采用胶原酶原位灌注法分离和培养雄性KM小鼠... 目的通过观察肝X受体α(LXRα)激动剂对脂多糖(LPS)刺激后Kupffer细胞干扰素调节因子3(IRF3)、糖皮质激素受体反应蛋白1(GRIP1)、LXRα表达的影响,探讨LXRα负性调控炎症反应的相关机制。方法采用胶原酶原位灌注法分离和培养雄性KM小鼠肝脏中的Kupffer细胞,所得细胞在含20%小牛血清和1%青霉素/链霉素的1640培养基中培养。将分离的Kupffer细胞随机分为4组:空白对照组、TLR4配体激活剂LPS(1μg/ml)组、LXRα配体激活剂T0901317(5μg/ml)组、LPS和T0901317共同处理组。收集培养细胞,采用Western boltting法检测Kupffer细胞的LXRα、GRIP1及IRF3蛋白表达水平。ELISA检测Kupffer细胞培养上清液中干扰素(IFN)β、肿瘤坏死因子(TNF)-α和白细胞介素(IL)-1β含量。结果LXRα蛋白质表达水平在T0901317处理组最高,LPS处理组最低。联合处理组中,LXRα表达明显低于T0901317处理组(P<0.05),但又显著高于其他两组(P<0.05)。IRF3及GRIP1蛋白表达量在LPS组最高,联合处理组表达明显降低,两组间均有显著差异(P<0.05);在LPS组及联合处理组中,IRF3及GRIP1蛋白表达量均高于对照组及T0901317处理组(P<0.05)。IFNβ在LPS处理组的含量较对照组和T0901317处理组明显增高(P<0.05);联合处理组IFNβ含量比LPS处理组明显降低(P<0.05);IFNβ表达T0901317处理组表达最低。TNF-α在LPS处理组的含量较其他3组明显增高(P<0.05);对照组、T0901317处理组和联合处理组水平较低,且他们3组之间无明显差别(P>0.05)。IL-1β的表达趋势与TNF-α相同。结论在应用LPS处理之前预防性应用LXRα激动剂,能明显抑制Kupffer细胞的IRF3及GRIP1表达,通过抑制IRF3、GRIP1的表达而发挥抗炎效应,从而抑制LPS所诱导的Kupffer细胞活化。 展开更多
关键词 KUPFFER细胞 x受体Α 干扰素调节因子3 糖皮质激素受体反应蛋白1 干扰素Β 肿瘤坏死因子-α 白细胞介素-1β
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乙型肝炎病毒X基因对大鼠肾小球系膜细胞增殖和肿瘤坏死因子α表达的影响 被引量:5
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作者 卢宏柱 周建华 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2008年第3期316-319,323,共5页
目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)X基因表达的蛋白HBx对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞(GMC)表达肿瘤坏死因子α(TNF-α)及细胞增殖的影响。方法扩增HBVX基因,与pCI-neo载体连接,构建pCI-neo-X真核表达载体。采用脂质体法将其转染大鼠GMC,用Wes... 目的探讨乙型肝炎病毒(HBV)X基因表达的蛋白HBx对体外培养的大鼠肾小球系膜细胞(GMC)表达肿瘤坏死因子α(TNF-α)及细胞增殖的影响。方法扩增HBVX基因,与pCI-neo载体连接,构建pCI-neo-X真核表达载体。采用脂质体法将其转染大鼠GMC,用Western blot法检测HBx的表达;以半定量RT-PCR测定体外培养大鼠GMCTNF-α mRNA的表达;采用ELISA法测定培养上清液中TNF-α的含量;MTT法测定细胞增殖。结果HBx在转染pCI-neo-X的GMC中表达,转染后36、48h HBx表达明显。转染pCI-neo-X组GMC TNF-α mRNA的表达明显高于未转染和空载体转染组。细胞转染pCI-neo-X后培养36、48h,上清液中TNF-α浓度分别为(185.3±70.7)、(140.3±42.1)pg/ml,而未转染组分别为(41.7±10.3)、(43.7±10.6)pg/ml,空载体转染组分别为(44.l±10.1)、(33.3±8.6)pg/ml,均明显低于转染pCI-neo-X组(均P<0.05)。转染pCI-neo-X后可诱导GMC出现增生反应,且在转染后36、48h最明显,与未转染和空载体转染组差异均有显著性意义(P<0.05)。结论HBx可诱导大鼠GMC增生,并在基因和蛋白水平上调GMC TNF-α表达。HBx对GMC的增殖作用可能与其诱导TNF-α的高表达有关。 展开更多
关键词 肿瘤坏死因子-Α 乙型肝炎病毒x基因 系膜细胞 大鼠
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XAF1增强TRAIL诱导人结肠癌细胞株HCT116凋亡的实验研究 被引量:2
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作者 丁燕飞 成小姣 +4 位作者 朱黎明 江石湖 叶静 乔敏敏 涂水平 《胃肠病学》 2013年第4期211-215,共5页
背景:肿瘤坏死因子(TNF)相关凋亡诱导配体(TRAIL)可特异性诱导肿瘤细胞凋亡。X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)相关因子1(XAF1)是新型抑癌基因,在肿瘤细胞中呈低表达。目的:研究XAF1联合TRAIL诱导人结肠癌细胞株HCT116凋亡的作用。方法:... 背景:肿瘤坏死因子(TNF)相关凋亡诱导配体(TRAIL)可特异性诱导肿瘤细胞凋亡。X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)相关因子1(XAF1)是新型抑癌基因,在肿瘤细胞中呈低表达。目的:研究XAF1联合TRAIL诱导人结肠癌细胞株HCT116凋亡的作用。方法:构建重组腺病毒AdS/F35-XAF1、对照病毒Ad5/F35-Null,分别以相同感染复数(MOI)感染人结肠癌细胞株HCT116,并设立空白对照组,感染4 h后加入重组人TRAIL(rhTRAIL)。以RT-PCR法检测XAF1 mRNA表达;以蛋白质印迹法检测XAF1、PARP、caspase-3、-8、-9蛋白表达;以Annexin V-FITC/PI双染法检测细胞凋亡率;以MTT法检测细胞增殖抑制率。结果:Ad5/F35-XAF1组和TRAIL+Ad5/F35-XAF1组XAF1 mRNA和蛋白表达显著高于其余各组。TRAIL+Ad5/F35-XAF1组PARP、caspase-3、-8、-9蛋白可见明显凋亡裂解带,其余各组未见明显裂解带。AdS/F35-XAF1组、TRAIL组、TRAIL+Ad5/F35-Null组、TRAIL+Ad5/F35-XAF1组细胞凋亡率较空白对照组和Ad5/F35-Null组显著增加(P<0.05),以TRAIL+Ad5/F35-XAF1组增加最为显著。TRAIL+Ad5/F35-XAF1组HCT116细胞增殖抑制率显著高于TRAIL组和TRAIL+Ad5/F35-Null组(P<0.05),并呈浓度和时间依赖性。结论:XAF1可增强TRAIL诱导的HCT116细胞凋亡和抑制增殖的作用。 展开更多
关键词 x染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子1 肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体 结肠肿瘤 细胞凋亡 细胞增殖
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XAF1转录变异体在结直肠肿瘤中的差异表达 被引量:2
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作者 周永柏 吴伟 +1 位作者 王继德 张亚历 《胃肠病学》 2016年第8期455-460,共6页
背景:X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)相关因子1(XAF1)能与XIAP结合而拮抗其caspase抑制活性,从而促进细胞凋亡,已被认定是一种肿瘤抑制基因。在多种肿瘤细胞中可检测到XAF1转录变异体,但不同转录变异体在结直肠肿瘤中的表达情况尚不明确。目的... 背景:X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)相关因子1(XAF1)能与XIAP结合而拮抗其caspase抑制活性,从而促进细胞凋亡,已被认定是一种肿瘤抑制基因。在多种肿瘤细胞中可检测到XAF1转录变异体,但不同转录变异体在结直肠肿瘤中的表达情况尚不明确。目的:检测XAF1及其转录变异体在不同结直肠组织中的表达,初步探讨其在结直肠肿瘤发生、发展中的作用。方法:收集结直肠癌及其配对癌旁组织、增生性息肉、腺瘤和正常结直肠黏膜组织样本,以免疫组化法和蛋白质印迹法检测XAF1蛋白表达,RT-PCR检测XAF1转录变异体表达。结果:与正常结直肠黏膜相比,XAF1蛋白在增生性息肉、腺瘤和癌组织中的胞核表达强度显著降低(P<0.05),胞质表达强度有所增高(P>0.05),总体表达强度显著降低(P<0.05)。结直肠癌组织中的XAF1A蛋白表达显著低于相应癌旁组织(P<0.05)。转录变异体XAF1A、XAF1B、XAF1C mRNA在结直肠肿瘤中的表达均显著低于正常结直肠黏膜(P<0.05)。结论:XAF1及其转录变异体在结直肠肿瘤和正常结直肠黏膜中存在差异表达,腺瘤阶段即已出现XAF1表达下降并由胞核向胞质易位。转录后修饰可能影响XAF1基因功能。 展开更多
关键词 x连锁凋亡抑制蛋白相关因子1 基因 肿瘤抑制 RNA加工 转录后 转录变异体 结直肠肿瘤
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α干扰素对结肠癌细胞株lovo和sw1116中X染色体连锁凋亡抑制相关因子1表达调节作用 被引量:1
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作者 徐迪晖 王继德 +3 位作者 程天明 姜泊 杨洲 张宇生 《医学研究生学报》 CAS 2007年第12期1242-1244,1247,共4页
目的:研究α干扰素(IFN-α)对结肠癌细胞株lovo和sw1116中X染色体连锁凋亡抑制相关因子1(XAF1)表达调节作用。方法:以不同浓度(250、125、62.5和0 U/ml)的IFN-α作用细胞,荧光素酶报道系统检测IFN-α对XAF1启动子活性的影响,运用逆转录... 目的:研究α干扰素(IFN-α)对结肠癌细胞株lovo和sw1116中X染色体连锁凋亡抑制相关因子1(XAF1)表达调节作用。方法:以不同浓度(250、125、62.5和0 U/ml)的IFN-α作用细胞,荧光素酶报道系统检测IFN-α对XAF1启动子活性的影响,运用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、蛋白质免疫印迹等方法观察IFN-α对XAF1的mRNA和蛋白表达水平的影响。结果:IFN-α可提高XAF1启动子活性,在lovo和sw1116中分别达到61.7%和87.1%(P<0.05),同时在mRNA和蛋白水平上调XAF1表达,并呈剂量依赖关系(P<0.05)。结论:IFN-α可上调XAF1表达,提示XAF1可能是干扰素刺激基因(ISG)。 展开更多
关键词 x染色体连锁凋亡抑制相关因子1 抑癌基因 Α干扰素 干扰素刺激基因
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丹蛭降糖胶囊对糖尿病大鼠血清TNF-α和CXCL-5的影响 被引量:4
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作者 刘珊珊 李中南 +2 位作者 许成群 熊园园 张帆 《安徽中医药大学学报》 CAS 2014年第6期58-61,共4页
目的观察丹蛭降糖胶囊对糖尿病大鼠血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)和趋化因子(C-X-C基序)配基5(chemokine(C-X-C motif)ligand 5,CXCL-5)表达的影响,探究其降糖作用机制。方法将健康雄性SD大鼠随机分为正常... 目的观察丹蛭降糖胶囊对糖尿病大鼠血清肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor alpha,TNF-α)和趋化因子(C-X-C基序)配基5(chemokine(C-X-C motif)ligand 5,CXCL-5)表达的影响,探究其降糖作用机制。方法将健康雄性SD大鼠随机分为正常对照组,模型组,吡格列酮组,丹蛭降糖胶囊高、低剂量组。采用链尿佐菌素单次腹腔注射法复制糖尿病模型,采用双抗体夹心法测定大鼠血清TNF-α、CXCL-5水平。结果与模型组比较,吡格列酮组和丹蛭降糖胶囊高、低剂量组TNF-α、CXCL-5水平显著降低(P<0.01),3个给药组TNF-α、CXCL-5比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。与模型复制后0周末比较,2、4、8周末,吡格列酮组和丹蛭降糖胶囊高、低剂量组血糖水平均显著降低(P<0.01)。2、4、8周末,与模型组比较,吡格列酮组及丹蛭降糖胶囊高、低剂量组血糖水平均显著降低(P<0.01),但3个给药组之间血糖水平比较,差异均无统计学意义(P>0.05)。Pearson相关分析显示,8周末血糖水平与TNF-α、CXCL-5均呈正相关(P<0.01)。结论丹蛭降糖胶囊降低糖尿病大鼠血糖的机制与其降低血清TNF-α、CXCL-5水平有关。 展开更多
关键词 糖尿病 益气养阴活血法 丹蛭降糖胶囊 TNF-Α CxCL-5
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检测X线照射肝癌细胞株HepG2可溶性肿瘤坏死因子受体-p75的临床意义
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作者 高蕾 陈龙华 +2 位作者 戴九龙 南清振 白岚 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期714-716,共3页
目的研究X线照射在体外培养人肝癌细胞株HepG2后sTNFR-p75变化情况。方法ELISA法检测培养上清中sTNFR-p75水平,流式细胞仪分析细胞凋亡率,光镜及透射电镜观察细胞形态变化。结果X线照射后肝癌HepG2细胞培养上清sTNFR-p75水平显著低于照... 目的研究X线照射在体外培养人肝癌细胞株HepG2后sTNFR-p75变化情况。方法ELISA法检测培养上清中sTNFR-p75水平,流式细胞仪分析细胞凋亡率,光镜及透射电镜观察细胞形态变化。结果X线照射后肝癌HepG2细胞培养上清sTNFR-p75水平显著低于照射前sTNFR-p75水平(P<0.01);光镜及透射电镜发现细胞体积缩小,变圆,胞浆浓缩,核固缩深染凋亡小体形成;流式细胞仪分析细胞凋亡率显著增高(P<0.05)。结论X线可通过抑制sTNFR-p75脱落到上清中,诱导细胞凋亡,增强照射肿瘤的杀伤作用。 展开更多
关键词 x线 肝癌 肿瘤坏死因子受体 细胞凋亡
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X线照射对肝癌细胞株HepG2 TNFR-p75表达的研究
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作者 高蕾 陈龙华 +1 位作者 南清振 白岚 《临床军医杂志》 CAS 2009年第2期161-163,共3页
目的研究X线照射在体外培养人肝癌细胞株HepG2后,膜TNFR-p75表达变化情况。方法免疫细胞化学检测TNFR-p75蛋白的表达,流式细胞仪分析细胞凋亡率,光镜及电镜观察细胞形态变化。结果X线照射后的TNFR-p75蛋白表达显著增强(P<0.05);光镜... 目的研究X线照射在体外培养人肝癌细胞株HepG2后,膜TNFR-p75表达变化情况。方法免疫细胞化学检测TNFR-p75蛋白的表达,流式细胞仪分析细胞凋亡率,光镜及电镜观察细胞形态变化。结果X线照射后的TNFR-p75蛋白表达显著增强(P<0.05);光镜及电镜发现细胞体积缩小,变圆,胞浆浓缩,核固缩深染;流式细胞仪分析细胞凋亡率显著增高。结论X线可通过上调TNFR-p75蛋白的表达,诱导细胞凋亡来发挥其抗增殖作用。 展开更多
关键词 x线 肝肿瘤 受体 肿瘤坏死因子 凋亡
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TNF-α对HepG2细胞LXRα介导的胆固醇外流的影响及其分子机制 被引量:6
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作者 仝莎 陈曜 +3 位作者 赵蕾 黄爱龙 阮雄中 陈压西 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期193-199,共7页
目的:观察肿瘤坏死因子α(TNF-α)对肝X受体α(LXRα)启动子活性及其下游ATP结合盒转运蛋白(ABCA1和ABCG1)表达的影响,从而探讨TNF-α加速HepG2细胞内胆固醇积聚的分子机制。方法:构建LXRα基因的启动子表达载体,观察炎症因子TNF-α对LX... 目的:观察肿瘤坏死因子α(TNF-α)对肝X受体α(LXRα)启动子活性及其下游ATP结合盒转运蛋白(ABCA1和ABCG1)表达的影响,从而探讨TNF-α加速HepG2细胞内胆固醇积聚的分子机制。方法:构建LXRα基因的启动子表达载体,观察炎症因子TNF-α对LXRα启动子活性的影响,进一步将HepG2细胞分为对照组(control)、TNF-α组(20μg/L)、高脂组(LDL,100 mg/L)及联合处理组(TNF-α20μg/L+LDL 100 mg/L)。采用实时定量PCR和Western blotting检测LXRfα、ABCA1和ABCG1的mRNA及蛋白的表达。[3H]标记胆固醇,液体闪烁计数法检测胆固醇外流量。油红O染色和定量比色法分析细胞内胆固醇的含量。结果:成功构建LXRα启动子的萤火虫萤光素酶报告质粒,证明了该启动子有明显活性,TNF-α能明显抑制LXRα启动子的活性。进一步检测发现,和对照组相比,TNF-α下调了LXRα、ABCA1和ABCG1 mRNA与蛋白表达。高脂组胆固醇外流量增加,而TNF-α组胆固醇外流量明显降低。油红O染色显示,TNF-α使细胞内脂质染色明显增加。结论:TNF-α可通过抑制LXRα启动子活性从而抑制HepG2细胞内胆固醇外流导致肝细胞内脂质异常积聚。 展开更多
关键词 HEPG2细胞 肿瘤坏死因子 x受体Α 胆固醇外流
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XIAP、XAF1、TNF-α在子宫内膜异位症发病机制中的作用 被引量:4
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作者 张丽 石彬 +2 位作者 任秀朋 赵昕 刘效群 《中国计划生育学杂志》 2012年第9期604-607,共4页
目的:探讨X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)及相关因子1(XAF1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在子宫内膜异位症(EMT)发病机制中的作用。方法:2007年6月~2008年4月行腹腔镜下子宫内膜异位囊肿剥除术患者65例(研究组),同期因输卵管因素不孕行... 目的:探讨X染色体连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)及相关因子1(XAF1)和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在子宫内膜异位症(EMT)发病机制中的作用。方法:2007年6月~2008年4月行腹腔镜下子宫内膜异位囊肿剥除术患者65例(研究组),同期因输卵管因素不孕行腹腔镜手术治疗的患者55例(对照组),均刮取子宫内膜,利用流式细胞仪检测细胞凋亡率;免疫组化检测在位及异位子宫内膜组织中XIAP和XAF1的表达;ELISA检测两组患者腹水中TNF-α浓度。结果:①对照组分泌期细胞凋亡率(7.38±0.76%)高于增生期(4.66±1.14%)(P<0.05);研究组在位和异位内膜增生期与分泌期细胞凋亡率均无周期变化,异位内膜低于在位内膜(P<0.05),在位内膜低于正常内膜(P<0.05)。②对照组和研究组在位内膜中XIAP的表达,增生期均高于分泌期(P<0.05),在研究组异位内膜中表达无周期变化。③XAF1的表达,对照组和研究组在位内膜组织中分泌期XAF1表达高于增生期(P<0.05),研究组异位内膜增生期和分泌期XAF1的表达无差异(P>0.05)。④研究组和对照组增生期与分泌期腹水中TNF-α浓度无差异(P>0.05),研究组高于对照组(P<0.05)。⑤XIAP与XAF1表达呈负相关,XAF1的表达与TNF-α水平呈正相关(P<0.05)。结论:在EMT中凋亡抑制因子表达增强,凋亡促进因子表达减弱,可能对异位内膜种植起促进作用,但TNF-α水平升高通过增强XAF1活性,在一定程度上限制了异位内膜的无限制生长,使其表现为良性疾病。 展开更多
关键词 子宫内膜异位症 x染色体连锁凋亡抑制蛋白 x染色体连锁凋亡抑制蛋白相关因子 肿瘤坏死因子-Α 发病机制
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EGFR通过调控CXCR4/CXCL12信号通路对恶性外周神经鞘膜瘤细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响 被引量:3
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作者 秦德芳 李丽 +5 位作者 张泽舜 展洪星 霍泳林 赵敏清 马丁 刘军 《重庆医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2022年第2期127-134,共8页
目的:探讨表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的表达对恶性外周神经鞘膜瘤(malignant peripheral nerve sheath tumors,MPNST)细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,以及对C-X-C型趋化因子受体4/C-X-C型趋化因子配体12... 目的:探讨表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的表达对恶性外周神经鞘膜瘤(malignant peripheral nerve sheath tumors,MPNST)细胞增殖、侵袭和迁移能力的影响,以及对C-X-C型趋化因子受体4/C-X-C型趋化因子配体12(C-X-C motif chemokine receptor 4/C-X-C motif chemokine ligand 12,CXCR4/CXCL12)信号通路的调节机制。方法:收集2017年6月至2019年6月在广州中医药大学第二临床医学院进行手术切除病灶的50例MPNST患者肿瘤组织作为观察组,50例皮肤型神经纤维瘤组织(dermal neurofibroma,DNF)作为对照组,免疫组化检测组织样本中的EGFR表达。细胞实验分为正常组(Normal组):不加任何药物,常规培养;对照组(Control组):细胞转染150 nmol/L EGFR-siRNA-NC后,常规培养;实验组(EGFR-siRNA组):细胞转染150 nmol/L EGFR-siRNA后,常规培养;5-乙炔基-2-脱氧尿嘧啶核苷(5-ethynyl-2’-deoxyuridine,EdU)标记实验检测各组细胞的增殖能力;Transwell小室实验检测各组细胞的迁移和侵袭能力;裸鼠皮下种植瘤模型检测各组细胞的体内生长与转移能力;基因芯片技术与实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)分析确定沉默EGFR基因后作用的靶基因;Western blot检测各组细胞中EGFR、CXCR4、CXCL12的表达。结果:免疫组化结果显示,对照组的EGFR阳性表达率为(2.35±0.32)%,MPNST患者肿瘤组织中的EGFR阳性表达率为(78.94±12.25)%,差异具有统计意义(t=123.573,均P=0.000);与Normal组相比,EGFR-siRNA组细胞的增殖能力(t=53.147,P=0.000)、侵袭与转移能力(t=26.947、34.638,P=0.000),体内生长与转移能力(t=15.683、22.197,均P=0.000)明显降低。基因芯片和RT-qPCR分析确定CXCR4、CXCL12是EGFR作用的靶基因。与Normal组相比,EGFR-siRNA组细胞中EGFR、CXCR4、CXCL12的表达明显下降(t=2.579、2.673、2.945,均P=0.000)。结论:在MPNST中,EGFR能调控CXCR4/CXCL12信号表达,调控肿瘤的生物学恶性行为,沉默EGFR表达,癌细胞的增殖、侵袭、迁移能力明显下降。 展开更多
关键词 表皮生长因子受体 恶性外周神经鞘膜瘤 增殖 侵袭 迁移 C-x-C型趋化因子受体4/C-x-C型趋化因子配体12信号通路
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X线照射对大肠癌细胞株Lovo细胞膜TNFR-p75表达的研究 被引量:1
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作者 高蕾 南清振 白岚 《临床军医杂志》 CAS 2010年第1期1-3,共3页
目的研究X线照射在体外培养人大肠癌细胞株Lovo后,其膜TNFR-p75表达情况。方法免疫细胞化学检测TNFR-p75蛋白的表达,流式细胞仪分析细胞凋亡率,光镜及透射电镜观察细胞形态变化。结果X线照射后的TNFR-p75蛋白表达显著增强(P<0.01);... 目的研究X线照射在体外培养人大肠癌细胞株Lovo后,其膜TNFR-p75表达情况。方法免疫细胞化学检测TNFR-p75蛋白的表达,流式细胞仪分析细胞凋亡率,光镜及透射电镜观察细胞形态变化。结果X线照射后的TNFR-p75蛋白表达显著增强(P<0.01);光镜及电镜发现细胞体积缩小,变圆,核缩小,染色质凝集,染色质呈颗粒、块状均质无结构样物质,细胞间散在膜包裹的凋亡小体;流式细胞仪分析细胞凋亡率显著增高(P<0.05)。结论X线可通过上调TNFR-p75蛋白的表达抑制其脱落,诱导细胞凋亡增强照射肿瘤的杀伤作用。 展开更多
关键词 x线 结肠肿瘤 TNFR—p75 凋亡
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X线照射对大肠癌细胞株Lovo细胞TNFR-p55表达及释放的影响
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作者 高蕾 白岚 +2 位作者 石卫民 南清振 毛战斌 《南方医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2007年第12期1921-1923,共3页
目的研究X线照射在体外培养人大肠癌细胞株LoVo后,其膜TNFR-p55表达及释放sTNFR-p55情况。方法免疫细胞化学检测细胞膜TNFR-p55蛋白的表达,ELISA法检测培养上清中sTNFR-p55水平,流式细胞仪分析细胞凋亡率,光镜观察细胞形态变化。结果X... 目的研究X线照射在体外培养人大肠癌细胞株LoVo后,其膜TNFR-p55表达及释放sTNFR-p55情况。方法免疫细胞化学检测细胞膜TNFR-p55蛋白的表达,ELISA法检测培养上清中sTNFR-p55水平,流式细胞仪分析细胞凋亡率,光镜观察细胞形态变化。结果X线照射后的细胞膜TNFR-p55蛋白表达显著增强(P<0.01);照射后大肠癌Lovo细胞上清sTNFRR-p55水平显著低于照射前sTNFRR-p55水平(P<0.01);光镜发现细胞体积缩小、变圆、胞浆浓缩、核固缩深染;流式细胞仪分析细胞凋亡率显著增高(P<0.05)。结论X线可通过上调细胞膜TNFR-p55蛋白的表达,抑制其脱落释放sTNFRR-p55到上清中,诱导细胞凋亡增强照射肿瘤的杀伤作用。 展开更多
关键词 x线 大肠细胞 受体 肿瘤坏死因子 凋亡
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可溶性肿瘤坏死因子受体p75检测在X线照射大肠癌细胞株Lovo细胞中的意义
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作者 高蕾 南清振 白岚 《实用医学杂志》 CAS 北大核心 2009年第21期3549-3551,共3页
目的:研究X线照射在体外培养人大肠癌细胞株Lovo后,检测培养上清中可溶性肿瘤坏死因子受体p75(sTNFR-p75)水平变化情况。方法:ELISA法检测培养上清中sTNFR-p75水平,流式细胞仪分析细胞凋亡率,光镜及透射电镜观察细胞形态变化。结果:X线... 目的:研究X线照射在体外培养人大肠癌细胞株Lovo后,检测培养上清中可溶性肿瘤坏死因子受体p75(sTNFR-p75)水平变化情况。方法:ELISA法检测培养上清中sTNFR-p75水平,流式细胞仪分析细胞凋亡率,光镜及透射电镜观察细胞形态变化。结果:X线照射后大肠癌Lovo细胞上清sTNFR-p75水平显著低于照射前sTNFR-p75水平(P<0.01);光镜观察发现细胞体积缩小,变圆,核缩小,透射电镜观察发现部分细胞核染色质边集,染色质发生固缩。部分细胞核内染色质凝聚,核膜孔消失,核膜呈波纹状皱缩,形成凋亡小体,内含有退变的细胞器。流式细胞仪分析细胞凋亡率显著增高(P<0.05)。结论:X线照射可减少体外培养的大肠癌细胞膜上的sTNFR-p75脱落到上清中,从而提高肿瘤坏死因子(TNF)与癌细胞的结合率,进而增强照射后TNF对肿瘤的诱导凋亡作用。 展开更多
关键词 x线 大肠细胞 受体 肿瘤坏死因子 凋亡
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