Promoter hypermethylation of tissue specific tumor supressor genes and point mutation in K-ras, c-myc proto-oncogenes in urinary (transitional cell) bladder carcinoma

In a total of 83 UN specimens were investigated for proto-oncogene mutations, tumor supressor genes promoter methylation status and c-myc and Ki-67 expression. Point mutations in c-myc were detected in cases with high grade and proliferation index. Mutated K-ras proto-onco- gene profiles were detected in 17 (21%) tumoral spiecemens that examined. Tumor specimens were also showed hypermethylated promoter domain for the SFRP2, MGMT tumor supressor genes. These findings showed the combine effect of mutated c-myc and K-ras oncogene and epigenetic inactivation of tissue specific tumor supressor genes (TS) play a crucial role in tumor progression and recurrence in UN carcinogenesis.

Potential roles of tumor suppressor genes and microsatellite instability in hepatocellular carcinogenesis in southern African blacks

MAJOR POINTS OF THE COMMENTED ARTICLECumulative loss of heterozygosity(LOH)ofchromosomal regions and tumor suppressor geneshas been reported in hepatocellular carcinomas(HCCs) from China,Japan,and Korea.In thisissue of the World Journal of Gastroenterology,Martins et al report an analysis of LOH andmicrosatellite instability in HCCs from a group of

应用代表性差异分析法筛选人癌候选抑癌基因

运用ｃＤＮＡ代表性差异分析法（ｃＤＮＡｒｅｐｒｅｓｅｎｔａｔｉｏｎａｌｄｉｆｅｒｅｎｃｅａｎａｌｙｓｉｓ，ｃＤＮＡＲＤＡ），以正常人鼻咽上皮细胞及鼻咽癌ＨＮＥ１细胞作为比较的样品来源，分离了四个在鼻咽癌中缺失的ｃＤＮＡ片段．以此四个片段作探针，分别进行ＤＮＡ杂交、ＲＮＡ杂交，结果显示，这些差异性的ｃＤＮＡ序列确实来自正常人鼻咽上皮且只在其中表达和／或在鼻咽癌ＨＮＥ１中表达降低，并在鼻咽癌病人中存在不同程度的缺失．序列分析结果表明这些差异性表达的基因为具有相当抑癌基因功能的已知基因和可能与鼻咽癌相关的抑癌基因的新基因．从而说明ｃＤＮＡＲＤＡ是一种高效、敏感。

miR-26a在Y79视网膜母细胞瘤细胞系内下调抑癌基因Rb1表达

目的探讨视网膜母细胞瘤细胞系内抑癌基因Rb1表达下调的分子机制。方法本研究利用real-time PCR和Western blotting等方法分别检测miR-26a和Rb1基因的表达。结果本研究结果显示在人视网膜母细胞瘤组织细胞与正常人视网膜血管内皮细胞间比较,miR-26a表达差异有统计学意义(P<0.005)。miR-26a可以通过与Rb1基因的3'UTR作用而导致人视网膜母细胞瘤细胞内Rb1基因表达下降。结论在Y79 Rb细胞内miR-26a下调抑癌基因Rb1的表达。

P16蛋白表达与胃癌及淋巴结转移的关系

目的 :前瞻性研究抑癌基因P1 6蛋白在人胃癌及转移淋巴结中的表达与胃癌转移的关系。方法 :应用SP免疫组织化学方法检测 46例原发性胃癌及 6 9枚转移淋巴结中P1 6蛋白表达。结果 :P1 6蛋白在受检原发性胃癌中的阳性率分别为 1 7.4% (8/46 ) ,在转移淋巴结中的阳性率分别为 1 5 .9% (1 1 /6 9)。原发癌伴淋巴结转移组P1 6的阳性表达率 (6 .9% )低于不伴淋巴结转移组的阳性率 (3 5 .3 % ) ,差异有显著性 (P <0 .0 5 )。P1 6表达与肿瘤大小、部位、浸润深度、Bormann分型、年龄及性别等因素无相关性(P >0 .0 5 )。P1 6在原发性胃癌及转移淋巴结中的表达无相关性 (P >0 .0 5 )。结论 :P1 6基因蛋白对胃癌的发展及淋巴结转移有抑制作用。检测胃癌P1 6蛋白对评估胃癌生物学行为、预测胃癌淋巴结转移以及预后可能具有一定的价值。

p16和nm23-H1基因表达与胃癌及淋巴结转移的关系

目的:进一步评估p16和nm23鄄H1基因表达在胃癌中的作用,尤其是与肿瘤淋巴结转移的关系。方法:采用免疫组织化学方法,检测p16和nm23鄄H1基因蛋白在46例原发性胃癌及69枚转移淋巴结中的表达,探索二者表达与胃癌临床病理特征的关系,评估二者作为预测肿瘤转移和临床预后的生物学指标的可能性。结果:p16和nm23鄄H1基因蛋白表达在原发性胃癌中的阳性率分别为17.4%和28.3%,在转移淋巴结中的阳性率分别为15.9%和14.5%。p16表达在伴和不伴淋巴结转移的原发性胃癌中差异显著(P<0.05)。nm23鄄H1在乳头状腺癌中呈明显高表达。p16和nm23鄄H1蛋白表达在原发性胃癌及转移淋巴结中无相关关系。结论:胃癌组织和转移淋巴结中存在p16和nm23鄄H1基因蛋白频繁缺失;p16阳性表达的病人淋巴结转移机会降低;nm23鄄H1基因蛋白表达率在乳头状腺癌中明显高于其他组织学类型;nm23鄄H1表达与胃癌淋巴结转移无关;p16和nm23鄄H1表达调节似无关联,同时检测p16和nm23鄄H1表达不比单纯检测p16表达具有更高预测胃癌淋巴结转移的价值。

p53蛋白多肽片段在大肠杆菌中的表达

在所有研究过的人体肿瘤组织或细胞中，ｐ５３似乎是突变频率最高的一个基因，研究和检测ｐ５３基因及其编码产物的变化将具有重要的意义。我们将野生型ｐ５３基因编码区３’端７０３ｂｐ的ｃＤ－ＮＡ片段插入到大肠杆菌表达载体ｐＢＶ２２０中，得到了一个重组体表达质粒ｐＲＲ３３，经热诱导表达，用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法证实ｐ５３蛋白多肽在大肠杆菌中得到了表达，它不仅可用于抗ｐ５３蛋白抗体的制备，而且也可用于对ｐ５３蛋白羧基端多肽功能的研究。

p^(16)-nm23-H1蛋白在胃癌及转移淋巴结中的表达

目的 观察抑癌基因p^(16)和转移抑制基因nm23-Hl蛋白在人胃癌及转移淋巴结中的表达,探讨两者在胃癌转移及预后评估中的作用。方法 应用 SP免疫组织化学方法检测 46例原发性胃癌及 69枚转移淋巴结中 p^(16)和 nm23-Hl蛋白表达。结果 p^(16)和nm23-Hl蛋白在受检原发性胃癌中的阳性表达率分别为17.4％(8/46/)和28.3％(13/46),在转移淋巴结中的阳性率分别为15.9％(11/69)和14.5％(10/69)。原发癌伴淋巴结转移组p^(16)的阳性表达率(6.9％)低于不伴淋巴结转移组的阳性率(35.3％),差异具有显著性(P<0.05)。原发癌伴淋巴结转移组nm23-Hl的阳性表达率(10.3%)低于不伴淋巴结转移组的阳性率(58.8％),差异具有显著性(P<0.01)。nm23-Hl在乳头状腺癌中的表达率明显高于其他组织学类型(P<0.05)。p^(16)和nm23-Hl表达与肿瘤大小、部位、浸润深度、Bormann分型、年龄及性别等因素无相关性(P>0.05)。p^(16)和nm23-Hl在原发性胃癌及转移淋巴结中的表达无相关性(P>0.05)。结论 p^(16)和nm23-Hl基因蛋白对胃癌的发展及淋巴结转移有抑制作用。检测胃癌p^(16)和nm23-Hl基因蛋白对评估胃癌生物学行为、预测胃癌淋巴结转移以及预后可能具有一定的价值。

表基因组学及其在癌研究中的进展

本文介绍了正常细胞和肿瘤细胞中表基因组学(表遗传学)研究的进展。主要内容包括:正常细胞中DNA甲基化的性质和特点,组蛋白修饰作用与DNA甲基化作用之间的协作,表遗传作用与环境因素的关系,癌细胞中DNA甲基化作用的特点以及表遗传学研究的应用。

甲状腺肿瘤中突变型 p16 表达的免疫组织化学研究

应用免疫组织化学技术对２２例甲状腺癌包括１８例乳头状腺癌和４例滤泡性腺癌及２０例甲状腺腺瘤的突变型ｐ１６表达进行研究。结果发现，突变型ｐ１６在甲状腺癌和甲状腺腺瘤表达于细胞核，甲状腺癌阳性表达率为４５％，甲状腺腺瘤阳性表达率为１０％。两者表达率有显著性差异（Ｐ＜０．０１）。乳头状腺癌及滤泡性腺癌表达率分别为４４．４％及５０％，两者之间无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。提示ｐ１６基因突变在甲状腺恶性肿瘤发生发展中具有重要作用。

P^(53)-生命科学研究中的热点分子

对Ｐ５３基因的结构、表达调控及其蛋白质的结构和功能进行了介绍，并讨论了Ｐ５３与细胞周期、ＰＣＤ的关系及在肿瘤发生中的重要性。

p53反义RNA对肠癌细胞恶性表型的抑制作用

研究ｐ５３反义ＲＮＡ对大肠癌细胞中突变型ｐ５３致癌性的抑制效应，为肿瘤基因治疗提供新思路。方法２．１ｋｂ的人ｐ５３全长ｃＤＮＡ反向插入哺乳动物表达载体ｐＲＥＰ９，得到ｐ５３反义ＲＮＡ表达载体ｐＲＥＰ９－ｐ５３（ＡＳ），并将其导入人肠癌细胞株ＳＷ１１１６（内源性突变型ｐ５３），采用ＭＴＴ和ＦＣＭ方法测定ｐＲＥＰ９－ｐ５３（ＡＳ）表达的ｐ５３反义ＲＮＡ对ＳＷ１１１６细胞生长的影响。结果带有ｐＲＥＰ９－ｐ５３（ＡＳ）的ＳＷ１１１６细胞，与对照组ＳＷ１１１６细胞和带ｐＲＥＰ９空载体的ＳＷ１１１６细胞相比，由于ｐ５３反义ＲＮＡ的表达，其增殖速度显著下降，ＦＣＭ的结果也证明带ｐＲＥＰ９－ｐ５３（ＡＳ）的细胞部分受阻于Ｇ０／１期，而带ｐＲＥＰ９空载体的细胞则无明显变化。结论ｐ５３反义ＲＮＡ可以有效地抑制大肠癌细胞中突变型ｐ５３的致癌性。

A cDNA located on chromosome 7q32 shows loss of expression in epithelial cell line of nasopharyngeal carcinoma

To isolate and clone the tumor suppressor gene on chromosomal region 7q32 correlated with the carcinogenesis of human nasopharyngeal carcinoma (NPC) Methods The genotypes of polymorphic microsatellite markers on 7q32 in DNA from 24 biopsies of nasopharyngeal carcinoma and matched normal blood cells were identified The expression levels of 20 expressed sequence tags (ESTs) on 7q32 between human nasopharyngeal carcinoma epithelial 1 (HNE 1) and primary cultures of normal nasopharyngeal epithelial (PNNE) cells were compared using differential RT PCR and Northern hybridization The quantity of AA070437 DNA and mRNA was detected by differential PCR and differential RT PCR, respectively Results Loss of heterozygosity (LOH) was found in 25%-46% of NPC biopsies AA070437 EST expression was down regulated in HNE 1 cell compared to PNNE cells The down regulation of AA070437 was found in 30 7% of NPC biopsies and allelic loss of AA070437 was observed in 29 1% of NPC biopsies Conclusion Our results show that AA070437 EST is negatively related with the occurrence of human NPC and may represent a candidate tumor suppressor gene of NPC on 7q32

脑胶质瘤中c-myc基因扩增、H-ras及p53基因突变

研究脑胶质瘤中癌基因c-myc的扩增、H-ras的突变及抑癌基因p53的5～8外显子的突变情况以及与胶质瘤的恶性程度的关系.采用差异性PCR(DPCR)及PCR-SSCP、PCR-RFLP等方法检测22例脑胶质瘤的基因突变情况.22例脑胶质瘤中c-myc扩增率为63.6%(14/22),H-ras的突变率为36.4%(8/22),p53的突变率45.5%(10/22).提示:癌基因c-myc的扩增及抑癌基因p53的突变与脑胶质瘤的恶性程度有关(P<0.05),而癌基因H-ras的突变则与脑胶质瘤的发生有关,与脑胶质瘤的恶性程度无关(P>0.05).各类型脑胶质瘤基因突变未发现不同(P>0.05),可能与标本量少有关.

染色体3p21．3区域及其抑癌基因BLU与鼻咽癌相关性研究

人类染色体3p21．3区域被证实有与包括鼻咽癌在内的恶性肿瘤发生、发展密切相关的多个抑癌基因集聚。如BLU基因，在鼻咽癌中表现为表达下调，而在其他肿瘤则表现为启动子甲基化，体外试验或动物实验证实其具有抑制肿瘤生长作用，但具体的抑癌机制尚未完全阐明。本文就3p21．3区域及其中抑癌基因BLu在鼻咽癌的研究进展做一综述。