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Turnip mosaic virus pathogenesis and host resistance mechanisms in Brassica
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作者 Guanwei Wu Xinxin Fang +2 位作者 Tianqi Yu Jianping Chen Fei Yan 《Horticultural Plant Journal》 SCIE CAS CSCD 2024年第4期947-960,共14页
Turnip mosaic virus(TuMV)is a devastating potyvirus pathogen that infects a wide variety of both cultivated and wild Brassicaceae plants.We urgently need more information and understanding of TuMV pathogenesis and the... Turnip mosaic virus(TuMV)is a devastating potyvirus pathogen that infects a wide variety of both cultivated and wild Brassicaceae plants.We urgently need more information and understanding of TuMV pathogenesis and the host responses involved in disease development in cruciferous crops.TuMV displays great versatility in viral pathogenesis,especially in its replication and intercellular movement.Moreover,in the coevolutionary arms races between TuMV and its hosts,the virus has evolved to co-opt host factors to facilitate its infection and counter host defense responses.This review mainly focuses on recent advances in understanding the viral factors that contribute to the TuMV infection cycle and the host resistance mechanism in Brassica.Finally,we propose some future research directions on TuMV pathogenesis and control strategies to design durable TuMV-resistant Brassica crops. 展开更多
关键词 turnip mosaic virus BRASSICA Resistance genes Host factors Infection biology
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磷脂酶Dα1在TuMV激活叶绿素降解相关基因表达中的功能分析
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作者 林佳宇 张世杰 +3 位作者 徐传涛 杜林林 孙炳剑 孙航军 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2024年第5期783-790,共8页
【目的】研究磷脂酶Dα1(phospholipase Dα1)及其产物磷脂酸(phosphatidic acid,PA)在芜菁花叶病毒(turnip mosaic virus,TuMV)促进植物叶绿素降解相关基因表达过程中的作用。【方法】通过UV-2800紫外分光光度计检测TuMV对本氏烟叶绿... 【目的】研究磷脂酶Dα1(phospholipase Dα1)及其产物磷脂酸(phosphatidic acid,PA)在芜菁花叶病毒(turnip mosaic virus,TuMV)促进植物叶绿素降解相关基因表达过程中的作用。【方法】通过UV-2800紫外分光光度计检测TuMV对本氏烟叶绿素含量的影响。利用Real-time qPCR检测TuMV侵染或瞬时表达6K2蛋白对本氏烟叶绿素降解相关基因NbNYE1(Nicotiana benthamiana NON-YELLOWING1)、NbNYE2(Nicotiana benthamiana NON-YELLOWING2)和NbPAO(Nicotiana benthamiana pheide a oxygense)mRNA相对表达水平的影响。敲除NbPLDα1(Nicotiana benthamiana phospholipase D alpha 1)或正丁醇降低磷脂酶D产生的磷脂酸含量,检测对TuMV诱导的NbNYE1、NbNYE2和NbPAO mRNA相对表达水平的影响。体外喷施磷脂酸对NbNYE1、NbNYE2和NbPAO mRNA相对表达水平的影响。【结果】TuMV侵染导致野生型本氏烟叶片叶绿素含量下降48%。TuMV侵染的野生型本氏烟中NbNYE1、NbNYE2和NbPAO表达量分别为健康野生型本氏烟的7.61、15.80和5.19倍。TuMV侵染的NbPLDα1敲除突变体本氏烟中NbNYE1、NbNYE2和NbPAO表达量分别为健康野生型本氏烟的2.35、7.83和1.29倍。正丁醇处理后,TuMV侵染的野生型本氏烟NbNYE1、NbNYE2和NbPAO表达量与健康野生型本氏烟无明显差异。喷施磷脂酸的叶片中NbNYE1、NbNYE2和NbPAO表达量分别为清水处理野生型本氏烟的12.39、3.64和8.26倍。此外,瞬时表达6K2蛋白叶片中NbNYE1、NbNYE2和NbPAO表达量分别为瞬时表达GFP野生型本氏烟的5.64、4.67和3.45倍。【结论】TuMV促进叶绿素降解相关基因表达依赖磷脂酶Dα1及其产物磷脂酸,病毒编码的6K2蛋白是促进叶绿素降解相关基因的关键致病因子。 展开更多
关键词 芜菁花叶病毒 本氏烟 叶绿素降解 6K2蛋白 磷脂酸 磷脂酶D
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南京萝卜黄瓜花叶病毒和芜菁花叶病毒的检测及序列分析
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作者 邓智亭 王满 +3 位作者 席敏敏 季英华 徐秋芳 王长春 《浙江师范大学学报(自然科学版)》 CAS 2024年第4期437-445,共9页
为明确呈现褪绿和花叶症状的南京萝卜的具体病原,应用反转录PCR法对采集的萝卜病样进行了14种病毒的检测及序列分析.结果表明:南京萝卜病样感染了黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus,CMV)和芜菁花叶病毒(turnip mosaic virus,TuMV),进... 为明确呈现褪绿和花叶症状的南京萝卜的具体病原,应用反转录PCR法对采集的萝卜病样进行了14种病毒的检测及序列分析.结果表明:南京萝卜病样感染了黄瓜花叶病毒(cucumber mosaic virus,CMV)和芜菁花叶病毒(turnip mosaic virus,TuMV),进一步对该萝卜样品中扩增到的CMV外壳蛋白基因(coat protein,CP)序列分析发现,CMV CP基因序列与已公开的苦瓜、烟草和茄子等分离物的CP序列高度同源,序列相似性高达98%,系统进化树表明CMV CP序列属于ⅠB亚组;该萝卜病样的TuMV CP序列与来自韩国、朝鲜及日本等国家的TuMV分离物CP序列同源性最高,相似性达99.65%;系统进化树表明,TuMV CP序列属于TuMV的Basal-BR亚组.研究结果鉴定了南京地区萝卜病样感染的病毒种类,通过CP基因序列分析明确了感染南京萝卜的CMV与TuMV与其他分离物之间的亲缘关系,为制定相应的防控措施提供了理论基础. 展开更多
关键词 萝卜 黄瓜花叶病毒 芜菁花叶病毒 病毒检测 序列分析
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不结球白菜抗病育种的研究——Ⅱ.TuMV 抗源鉴定与筛选 被引量:14
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作者 曹寿椿 朱月林 +1 位作者 黄保健 张金平 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 1990年第2期28-32,共5页
1984~1988年以87个不结球白菜自(近)交系为原始材料,进行了芜菁花叶病毒(TuMV)抗性鉴定,并选留无症或轻症单株进行了4轮系谱选择.试验结果表明,未经筛选的原始材料均为高感,在高感群体中选择无症或轻症单株进行系谱选择后,抗病性逐渐提... 1984~1988年以87个不结球白菜自(近)交系为原始材料,进行了芜菁花叶病毒(TuMV)抗性鉴定,并选留无症或轻症单株进行了4轮系谱选择.试验结果表明,未经筛选的原始材料均为高感,在高感群体中选择无症或轻症单株进行系谱选择后,抗病性逐渐提高,选择效应随品种和世代而异。经4轮系谱选择后获得15个抗芜菁花叶病毒的株系,作为抗源加以保存和有效利用。 展开更多
关键词 白菜 不结球白菜 抗病育种 抗源
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芜菁花叶病毒(TuMV)特性的研究进展 被引量:10
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作者 赵建平 周钗美 +1 位作者 陈集双 郭得平 《微生物学通报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第6期100-104,共5页
芜菁花叶病毒 (TuMV)是世界范围内广泛分布的重要病毒。从生物学和理化特性、基因组结构、侵染和繁殖。
关键词 芜菁花叶病毒 基因组结构 转基因抗性
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用OPD-H_2O_2-HRP伏安酶联免疫法检测植物病毒ArMV、CMV、SBMV和TuMV 被引量:3
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作者 焦奎 孙刚 +5 位作者 张书圣 刘澄凡 张成良 张作芳 刘靖宇 魏澎 《分析测试学报》 CAS CSCD 1999年第4期9-12,共4页
首次将邻苯二胺(OPD) -H2O2-辣根过氧化物酶(HRP)伏安酶联免疫分析体系 ,应用于植物病毒南芥菜花叶病毒(ArMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、南方菜豆花叶病毒(SBMV)和芜箐花叶病毒(TuMV)的血清学检测。该法测定以上植物病毒感染病叶澄清液的最... 首次将邻苯二胺(OPD) -H2O2-辣根过氧化物酶(HRP)伏安酶联免疫分析体系 ,应用于植物病毒南芥菜花叶病毒(ArMV)、黄瓜花叶病毒(CMV)、南方菜豆花叶病毒(SBMV)和芜箐花叶病毒(TuMV)的血清学检测。该法测定以上植物病毒感染病叶澄清液的最高稀释比(体积比)分别为1∶500000 ,1∶500000,1∶2500000和1∶2500000,而酶联免疫吸附分析(ELISA)测定的最高稀释比分别为1∶2500 ,1∶12500 ,1∶100000和1∶25000。该法测定以上植物病毒的灵敏度和测定范围均优于经典的ELISA光度法。 展开更多
关键词 南芥菜 花叶病毒 黄瓜 南方菜豆花 芜箐 病毒
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甘蓝型油菜芜菁花叶病毒分离物TuMVH_1的生物学研究 被引量:5
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作者 陈集双 张耀洲 +1 位作者 徐平 李德葆 《中国油料》 CSCD 北大核心 1994年第1期24-28,共5页
采自杭州甘蓝型油菜上的芜菁花叶病毒分离物TuMVH1,经寄主反应测定,不侵染茄科普通烟和心叶烟,对多数供试甘蓝型油菜和十字花科蔬菜品种(品系)有强的致病力。枯斑指示植物检测和ELISA检测,选择城青2号大白菜作为毒原... 采自杭州甘蓝型油菜上的芜菁花叶病毒分离物TuMVH1,经寄主反应测定,不侵染茄科普通烟和心叶烟,对多数供试甘蓝型油菜和十字花科蔬菜品种(品系)有强的致病力。枯斑指示植物检测和ELISA检测,选择城青2号大白菜作为毒原繁殖寄主,提纯病毒的得率为6—7mg病毒/100g鲜病叶,用提纯病毒制备的免抗血清经环状沉淀反应测得其效价为1/20000,免疫电镜观察,TuMVH1与同源抗血清有强的阳性反应,与另一个芜菁花叶病毒抗血清亦有阳性反应。提纯病毒经蛋白酶K处理,酚:氯仿抽提后在琼脂糖凝胶电泳中测定其RNA分子量约为9.4kb。在接种TuMVH;30天的城青2号大白菜和甘蓝型油菜的植株细胞中观察到分散的线状病毒粒子和典型的风轮状内含体。TuMVH1风轮状内含体的结构介于Edwardson等所描述的亚型和Ⅳ型之间。 展开更多
关键词 芜菁花叶病毒 血清学 病变 油菜
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HC-Pro基因片段介导的高抗TuMV 被引量:2
8
作者 叶艳英 曾钢 +3 位作者 曹鸣庆 马荣才 吴才君 姚磊 《作物学报》 CAS CSCD 北大核心 2014年第3期550-555,共6页
芜菁花叶病毒(turnip mosaic viruses,TuMV)是侵染重要经济作物的主要病毒之一,寄主范围十分广泛,尤其是对十字花科作物的危害最为严重。为了获得对TuMV持久稳定的高度抗性,本研究以TuMV HC-Pro基因的453 bp保守序列为靶标,构建了植物表... 芜菁花叶病毒(turnip mosaic viruses,TuMV)是侵染重要经济作物的主要病毒之一,寄主范围十分广泛,尤其是对十字花科作物的危害最为严重。为了获得对TuMV持久稳定的高度抗性,本研究以TuMV HC-Pro基因的453 bp保守序列为靶标,构建了植物表达RNAi载体pBBBTu-HC-Pro,并转化了TuMV的天然宿主拟南芥。对转基因拟南芥用北京地区流行的TuMV强致病株BJ-C4进行了抗病接种鉴定。鉴定的13个单拷贝转基因株系中有4个对TuMV的BJ-C4株表现出高度抗性,抗性比对照提高约80%以上,且抗性可以稳定遗传。经半定量和荧光定量PCR方法检测,在高抗转基因植株体内几乎检测不到病毒的累积,抗病效果明显。该载体在利用基因工程抗TuMV育种中具有广阔的应用前景。 展开更多
关键词 芜菁花叶病毒 HC-PRO 基因片段 RNAI 抗性
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利用改良SOE-PCR技术定点突变TuMVC4-VPg基因 被引量:3
9
作者 李国亮 钱伟 +7 位作者 张淑江 李菲 章时蕃 张慧 谢露露 武剑 王晓武 孙日飞 《中国蔬菜》 北大核心 2017年第10期39-44,共6页
芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,Tu MV)是白菜类蔬菜生产上的重要病害,其中Tu MV VPg基因在Tu MV侵染白菜类蔬菜的过程中起着至关重要的作用,且不同Tu MV株系的致病性不同。本试验采用改良的重叠延伸PCR(SOE-PCR)技术,以Tu MV C4-VP... 芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,Tu MV)是白菜类蔬菜生产上的重要病害,其中Tu MV VPg基因在Tu MV侵染白菜类蔬菜的过程中起着至关重要的作用,且不同Tu MV株系的致病性不同。本试验采用改良的重叠延伸PCR(SOE-PCR)技术,以Tu MV C4-VPg基因序列为模板,定点突变Tu MV C4-VPg与Tu MV CDN1-VPg基因间5个差异核苷酸位点(决定5个氨基酸差异)。结果表明:通过SOE-PCR技术获得了5个Tu MV C4-VPg基因的单点突变体,即Tu MV C4-VPg-Ⅰ、Tu MV C4-VPg-Ⅱ、Tu MV C4-VPg-Ⅲ、Tu MV C4-VPg-Ⅳ和Tu MV C4-VPg-Ⅴ。 展开更多
关键词 白菜类蔬菜 芜菁花叶病毒 VPg基因 重叠延伸PCR技术 单点突变
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青菜和芥菜感染芜菁花叶病毒(TuMV)后的光合特性变化 被引量:3
10
作者 付东亚 洪健 +1 位作者 陈集双 蒋德安 《浙江农业大学学报》 CSCD 北大核心 2003年第6期599-602,共4页
研究了青菜(BrassicachinensisL.cv.Suzhou)和芥菜(B.junceaL.cv.Wenzhou)受芜菁花叶病毒(TuMV)侵染后的光合特性变化。结果表明:感病青菜和芥菜的叶绿素含量、净光合速率、气孔导度与健康对照相比出现了不同程度的下降,胞间CO2浓度也... 研究了青菜(BrassicachinensisL.cv.Suzhou)和芥菜(B.junceaL.cv.Wenzhou)受芜菁花叶病毒(TuMV)侵染后的光合特性变化。结果表明:感病青菜和芥菜的叶绿素含量、净光合速率、气孔导度与健康对照相比出现了不同程度的下降,胞间CO2浓度也有所下降;叶绿体的电子传递活力尤其是光系统 (PS )电子传递活力显著下降。叶绿素荧光动力学参数测定显示,感病青菜叶片的Fv/Fo和Fv/Fm值明显降低,而感病芥菜的叶片Fv/Fo和Fv/Fm值受影响程度较轻。根据以上结果认为,TuMV对两种寄主植物的光合作用均造成了伤害,并且对PS 的伤害程度大于PS 。 展开更多
关键词 青菜 芥菜 芜菁花叶病毒 叶绿素含量 净光合速率 气孔导度 光合作用
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外壳蛋白基因片段介导的高抗TuMV研究 被引量:1
11
作者 曾钢 叶艳英 +3 位作者 曹鸣庆 马荣才 唐乐尘 姚磊 《中国农业科技导报》 CAS CSCD 北大核心 2013年第2期83-88,共6页
为了获得对芜菁花叶病毒(TuMV)高度稳定的抗性,选取TuMV的外壳蛋白(CP)基因近3'端保守区共377 bp的核苷酸序列,构建了抗TuMV的发卡结构RNAi载体,并转化了TuMV的天然宿主拟南芥。转基因植株用北京地区TuMV主要流行的强致病株系BJ-C4... 为了获得对芜菁花叶病毒(TuMV)高度稳定的抗性,选取TuMV的外壳蛋白(CP)基因近3'端保守区共377 bp的核苷酸序列,构建了抗TuMV的发卡结构RNAi载体,并转化了TuMV的天然宿主拟南芥。转基因植株用北京地区TuMV主要流行的强致病株系BJ-C4人工接种。鉴定的8个转基因株系中有3个株系表现出对TuMV的高度抗性。定量PCR结果显示,高抗转基因株系体内几乎检测不到病毒的积累。 展开更多
关键词 芜菁花叶病毒 外壳蛋白基因 发卡结构 RNA干扰 抗性
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芥蓝与菜薹杂种后代对TuMV的抗性 被引量:4
12
作者 郑岩松 方木壬 张曙光 《中国蔬菜》 北大核心 2003年第5期18-20,共3页
研究了芥蓝以及芥蓝×菜薹种间杂种后代对芜菁花叶病毒(TuMV)油菜株系的抗性。结果表明,芥蓝对广州地区TuMV油菜株系具有近于免疫的抗性。芥蓝×菜薹种间杂种回交后代抗TuMV油菜株系的选择效应受回交亲本影响很大:用抗病品种与... 研究了芥蓝以及芥蓝×菜薹种间杂种后代对芜菁花叶病毒(TuMV)油菜株系的抗性。结果表明,芥蓝对广州地区TuMV油菜株系具有近于免疫的抗性。芥蓝×菜薹种间杂种回交后代抗TuMV油菜株系的选择效应受回交亲本影响很大:用抗病品种与杂种回交的后代,经两次系统选择后,已获得16个经济性状较好的白菜抗病品系;但用感病品种与杂种回交两代之后,抗病性明显下降,经两代系统选择未能获得抗病的菜薹品系。 展开更多
关键词 芥蓝 菜薹 杂种后代 芜菁花叶病毒 抗病性 种间杂种 选择效应
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大白菜抗芜菁花叶病毒(TuMV)EST-SSR信息分析与引物筛选 被引量:1
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作者 张晓亮 张志刚 +2 位作者 赵智中 宋希云 李巧云 《中国农学通报》 CSCD 2012年第10期121-126,共6页
为了研究大白菜抗芜菁花叶病毒(TuMV),对大白菜及芸薹属中与抗性有关的EST序列进行了搜索和SSR筛选,并根据SSR两端的序列设计引物,以1对大白菜TuMV抗、感材料的基因组DNA为模板,对上述引物进行了筛选。结果表明,在132条大白菜EST和895... 为了研究大白菜抗芜菁花叶病毒(TuMV),对大白菜及芸薹属中与抗性有关的EST序列进行了搜索和SSR筛选,并根据SSR两端的序列设计引物,以1对大白菜TuMV抗、感材料的基因组DNA为模板,对上述引物进行了筛选。结果表明,在132条大白菜EST和895条芸薹属抗性EST序列中,共筛选出166个符合条件的SSR(16.2%)。其中包含6种核苷酸重复基元,占主导地位的分别是二核苷酸重复(33.7%)和三核苷酸重复(50.0%),其余重复类型所占比例较小。根据上述SSR两翼的序列,共设计引物196对。引物筛选结果表明,能够进行成功扩增的有156对,占79.6%,其中35对引物在2份材料中具有多态性。因此,利用芸薹属中抗性有关的EST序列设计SSR引物,可用于大白菜TuMV抗性有关基因的标记。 展开更多
关键词 大白菜 芜菁花叶病毒 EST-SSR
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太子参BBWV2和TuMV的巢式RT-PCR检测 被引量:2
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作者 匡云波 侯令 +3 位作者 方晓勤 王佳璐 杨燕君 叶祖云 《福建农业学报》 CAS 北大核心 2018年第3期288-292,共5页
为探求快速、灵敏的太子参脱毒检测技术,建立太子参蚕豆萎蔫病毒2(Broad bean wilt virus 2,BBWV2)和芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)的巢式RT-PCR快速检测方法,根据GenBank数据库中这2种病毒外壳蛋白(coat protein,cp)基因核... 为探求快速、灵敏的太子参脱毒检测技术,建立太子参蚕豆萎蔫病毒2(Broad bean wilt virus 2,BBWV2)和芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)的巢式RT-PCR快速检测方法,根据GenBank数据库中这2种病毒外壳蛋白(coat protein,cp)基因核苷酸序列的保守区域分别设计2对简并引物,建立和优化巢式RT-PCR扩增体系,继而进行常规RT-PCR和巢式RT-PCR灵敏度的比较,并应用巢式RT-PCR对7份田间栽培太子参病样和4份脱毒苗样品进行检测。结果显示:BBWV2、TuMV的巢式引物最佳退火温度分别为60、62℃;采用巢式RT-PCR,这两种病毒样品cDNA原液在稀释10~5倍后仍能扩增出特异性条带,比常规RT-PCR的灵敏度至少高10倍。本研究建立的巢式RT-PCR检测方法可快速、稳定、准确地检测BBWV2和TuMV,且具有更高的灵敏度,更能满足太子参脱毒检测的需要。 展开更多
关键词 太子参 太子参蚕豆萎蔫病毒2(BBWV2) 芜菁花叶病毒(tumv) 巢式RT-PCR
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亚硝酸盐处理对PVY和TuMV的钝化作用研究
15
作者 赵凯 王海娟 +2 位作者 张荠丹 郭志慧 赵明敏 《安徽农业科学》 CAS 2022年第6期129-131,148,共4页
为了探究化学试剂处理对植物病毒的钝化作用,以马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)和芜菁花叶病毒(turnip mosaic virus,TuMV)为试验对象,在模式植物本氏烟上研究了亚硝酸盐处理对病毒的钝化作用。结果表明,亚硝酸盐处理PVY后,PVY在本氏... 为了探究化学试剂处理对植物病毒的钝化作用,以马铃薯Y病毒(potato virus Y,PVY)和芜菁花叶病毒(turnip mosaic virus,TuMV)为试验对象,在模式植物本氏烟上研究了亚硝酸盐处理对病毒的钝化作用。结果表明,亚硝酸盐处理PVY后,PVY在本氏烟植株上比清水处理的对照表现出发病症状减轻,甚至不发病现象。而清水处理的对照烟草对PVY病毒比较敏感,植株逐渐形成系统性侵染并最终坏死。亚硝酸盐处理TuMV后,未观察到病毒侵染的症状,也未检测到TuMV病毒。Western blot技术检测亚硝酸盐处理组病毒含量远低于清水处理组,接近健康水平。表明亚硝酸盐对PVY和TuMV具有一定的钝化作用。 展开更多
关键词 马铃薯Y病毒 芜菁花叶病毒 亚硝酸盐 钝化作用
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The selection and application of TuMV resistant germplasm of Chinese cabbage
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作者 刘志荣 王子欣 《华北农学报》 CSCD 北大核心 1993年第S2期87-91,共5页
“8407”is a disease resistant germplasm of Chinese cabbage which is highly resis-tant to turnip mosaic virus (TuMV),selected by the Vegetable Institute,Hebei Academy of Agri-cultural and Forestry Sciences.In 1985 and... “8407”is a disease resistant germplasm of Chinese cabbage which is highly resis-tant to turnip mosaic virus (TuMV),selected by the Vegetable Institute,Hebei Academy of Agri-cultural and Forestry Sciences.In 1985 and 1989,it was approved and accepted as one of the na-tional disease resistant germplasm of Chinese cabbage by the National Expert Group.The identifi-cation in 1989 showed that“8407”was highly resistant or immune to 19 TuMV strains from 10provinces/cities across the country.Therefore,it was regarded as the best germplasm both verti-cally and horizontally resistant to TuMV of Chinese cabbage.This germplasm was selected fromChang Paodan (Inner Mongolia)of Qingmaye system after 6 generations of successive self cross.Using the disease resistant germplasm of“8407”,we developed new multi-resistant varieties of“8361”and“8612”in 1983 and 1986 respectively,which was highly resistant to TuMV and downymildew and soft rot.These varieties have been extended to an areas of over 20000 ha. 展开更多
关键词 Chinese CABBAGE disease resistant GERMPLASM turnip mosaic virus
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TURNIP MOSAIC VIRUS COAT PROTEIN GENE: CLONING AND CONSTRUCTION OF THE PLANT VECTOR 被引量:2
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作者 孔令洁 方荣祥 +1 位作者 陈正华 莽克强 《Science China Chemistry》 SCIE EI CAS 1992年第12期1444-1452,共9页
Complementary DNAs to turnip mosaic virus (a radish Raphanus stativus isolate) genomicRNA were synthesized using oligo (dT) as primer and cloned into the vector λ-ZAP Ⅱ. Afterhybridization with a single-stranded cDN... Complementary DNAs to turnip mosaic virus (a radish Raphanus stativus isolate) genomicRNA were synthesized using oligo (dT) as primer and cloned into the vector λ-ZAP Ⅱ. Afterhybridization with a single-stranded cDNA probe and the sequencing of inserted DNA,positive clones with poly--A tails were obtained. One clone containing 1429-base pair insertwas sequenced. The coat protein gene was identified based on the molecular weight of theTuMV coat protein and the consensus sequences of the polyprotein processing sites ofpotyviruses. The 5’ end of the coat protein gene was modified by PCR to introduce aninitiation codon, ATG, and two restriction enzyme sites. The gene was then manipulatedinto a binary vector pBIN437 which was derived from pBI121, and the plant expressionvector is being used to transform Brassica napus. 展开更多
关键词 turnip mosaic virus COAT protein gene plant expression vector
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Turnip mosaic virus manipulates DRM2 expression to regulate host CHH and CHG methylation for robust infection 被引量:1
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作者 Xiaoyun Wu Mengzhu Chai +5 位作者 Jiahui Liu Xue Jiang Yingshuai Yang Yushuang Guo Yong Li Xiaofei Cheng 《Stress Biology》 2022年第1期328-338,共11页
DNA methylation is an important epigenetic marker for the suppression of transposable elements(TEs)and the regu-lation of plant immunity.However,little is known how RNA viruses counter defense such antiviral machinery... DNA methylation is an important epigenetic marker for the suppression of transposable elements(TEs)and the regu-lation of plant immunity.However,little is known how RNA viruses counter defense such antiviral machinery.In this study,the change of DNA methylation in turnip mosaic virus(TuMV)-infected cells was analyzed by whole genome bisulfite sequencing.Results showed that the total number of methylated sites of CHH and CHG increased in TuMV-infected cells,the majority of differentially methylated regions(DMRs)in the CHH and CHG contexts were associated with hypermethylation.Gene expression analysis showed that the expression of two methylases(DRM2 and CMT3)and three demethylases(ROS3,DML2,DML3)was significantly increased and decreased in TuMV-infected cells,respec-tively.Pathogenicity tests showed that the enhanced resistance to TuMV of the loss-of-function mutant of DRM2 is associated with unregulated expression of several defense-related genes.Finally,we found TuMV-encoded NIb,the viral RNA-dependent RNA polymerase,was able to induce the expression of DRM2.In conclusion,this study discov-ered that TuMV can modulate host DNA methylation by regulating the expression of DRM2 to promote virus infection. 展开更多
关键词 Counter defense DRM2 HYPERMETHYLATION RNA-directed DNA methylation turnip mosaic virus
原文传递
不结球白菜感染芜菁花叶病毒后4种防御酶活性变化及其抗病相关性 被引量:22
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作者 刘琳 侯喜林 +1 位作者 王利英 陈晓峰 《南京农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第3期14-18,共5页
以4个不同抗性的高代自交系品种003-R-5、Y3-R-2、109-S-8、003-S-13为试材,研究了不结球白菜对芜菁花叶病毒的抗性与超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)活性变化的关系,并通过苗期接种观测... 以4个不同抗性的高代自交系品种003-R-5、Y3-R-2、109-S-8、003-S-13为试材,研究了不结球白菜对芜菁花叶病毒的抗性与超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、苯丙氨酸解氨酶(PAL)、多酚氧化酶(PPO)活性变化的关系,并通过苗期接种观测不同时期叶片中4种酶的活性,结合病情指数作简单线性回归分析。结果表明,抗病品种健康植株的SOD活性低于感病品种,CAT、PAL、PPO活性则高于感病品种。接种病毒后各品种的4种防御酶活性较对照明显升高,抗病品种对病毒表现出较高的敏感性,酶活性明显高于感病品种。相关性分析表明,抗病性与接种病毒后酶活性变化幅度关系密切,4种防御酶均与抗病性呈正相关,其相关系数分别为0.776 0、0.959 1、0.977 4、0.999 1,其中PPO活性与抗病性达到极显著水平,接种后第8天PAL活性与抗病性呈显著正相关(r=0.937 5)。 展开更多
关键词 不结球白菜 芜菁花叶病毒 超氧化物歧化酶 过氧化氢酶 苯丙氨酸解氨酶 多酚氧化酶
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芜菁花叶病毒单克隆抗体的制备及检测应用 被引量:21
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作者 施曼玲 吴建祥 +1 位作者 郭维 周雪平 《微生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2004年第2期185-188,共4页
先以芜菁花叶病毒 (TuMV)免疫BALB C小鼠 ,然后取其脾细胞使之与SP2 0鼠骨髓瘤细胞融合 ,经筛选、克隆 ,获得 4株能稳定传代并分泌抗TuMV单克隆抗体 (MAb)的杂交瘤细胞 ,并以之制备腹水单抗。 4株单克隆抗体腹水ELISA效价在 10 - 5~ 1... 先以芜菁花叶病毒 (TuMV)免疫BALB C小鼠 ,然后取其脾细胞使之与SP2 0鼠骨髓瘤细胞融合 ,经筛选、克隆 ,获得 4株能稳定传代并分泌抗TuMV单克隆抗体 (MAb)的杂交瘤细胞 ,并以之制备腹水单抗。 4株单克隆抗体腹水ELISA效价在 10 - 5~ 10 - 6 之间 ,仅对TuMV起特异性反应。Westernblot分析表明 ,4株单抗都能与TuMV34kD的外壳蛋白亚基起特异反应。利用TuMV的多抗兔血清和单抗腹水建立了三抗体夹心ELISA检测TuMV的方法 ,检测病叶的灵敏度为 1∶5 12 0倍 ,检测提纯TuMV病毒绝对量为 2 1 9ng。利用三抗体夹心ELISA测定出 7种作物上有TuMV侵染。 展开更多
关键词 芜菁花叶病毒 单克隆抗体 tumv 寄主 杂交瘤细胞 田间作物 病原 检测方法
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