碱酶两步法制备大米蛋白的研究

该文采用碱法和酶法两步加工碎米,制备得到纯度较高的大米蛋白。通过研究米粉粒度、pH值、温度、水料比和时间对提取率的影响,确定碱法制备大米蛋白的较佳工艺条件为:米粉粒度80目,pH 11.0,温度50℃,水料比8,时间120 m in。采用α-淀粉酶对大米蛋白进行纯化,酶解条件为:加酶量60 U/g,pH 6.0,温度50℃,时间30 m in。在上述工艺条件下制备大米蛋白,提取率为73.22%,纯度为88.75%。

棉籽蛋白两步法提取及其功能性质研究

采用碱酶两步法提取棉籽粕中的蛋白质。通过单因素实验及正交实验,确定碱提棉籽蛋白的最佳工艺条件为:pH10.5,温度60℃,时间90 min,料液比1∶18。再用碱性蛋白酶对残渣进一步提取,通过正交实验确定酶提棉籽蛋白的最适条件为:加酶量240 U/g,pH10.5,温度60℃,时间90 min,料液比1∶10。两步提取可使棉籽蛋白提取率达到88.77%。另外,对所提棉籽蛋白的溶解性、持水性、持油性、起泡性和乳化性等进行了研究,结果表明棉籽蛋白功能性质一般。

影响碱酶两步法制备大米淀粉工艺条件的研究

采用碱法和酶法加工碎米制备得到大米淀粉。确定碱法分离大米淀粉和大米蛋白的较佳工艺条件为:pH11,温度40℃,水料比6,时间120min。采用碱性蛋白酶对碱法制备得到的大米淀粉进行纯化,酶解条件为pH9,温度45℃,酶与底物比48AU/kg,时间60min。大米淀粉中的蛋白质含量由2.87%降低到0.40%。

两步酶法合成富含EPA/DHA甘油酯的研究

采用两步酶法合成富含EPA/DHA的甘油酯。首先利用游离脂肪酶催化富含EPA/DHA的脂肪酸与甘油进行酯化反应,在水添加量为底物混合物质量的3%、脂肪酸与甘油摩尔比1∶3和酶添加量为底物混合物质量的1%时,酯化反应达到平衡时富含EPA/DHA脂肪酸的酯化率可以达到67%左右。再将游离脂肪酶催化酯化反应产物中的油相回收,利用Novozym 435为催化剂,在真空状态下继续进行酯化反应6 h,富含EPA/DHA脂肪酸的酯化率可以达到96.4%,甘油酯的组成为甘油三酯52.07%、甘油二酯41.9%。

酶法大量合成^(13)C标记尿苷二磷酸葡萄糖

建立了一种经济、简便的一步酶法 ,大量合成尿苷二磷酸葡萄糖 (UDPG) .在酶法合成中 ,用UTP代替ATP ,并建立了UTP的再生系统 ;建立了反复补加法和酶回收法 ,使酶的利用率达到 85% .在 0 .5g规模上用该法合成UDP [4 13 C] 葡萄糖 ,总产率为 6 9.7% .

两步酶法提取裂壶藻油的工艺优化

采用两步酶法提取裂壶藻油并对工艺进行优化。通过单因素和正交实验,确定了提取裂壶藻油的最佳工艺条件,并通过验证实验对正交结果进行验证。得到的最佳工艺条件为:料液比1∶7,中性蛋白酶添加量9%,酶解温度45℃,酶解时间3 h,酶解pH6.5;碱性蛋白酶的添加量为12%,酶解温度70℃,酶解时间6 h,酶解pH9.5。在此条件下的清油得率可以达到90.22%。气相色谱-质谱(GC-MS)分析裂壶藻油中不饱和脂肪酸含量44.13%,DHA含量为32.06%。

单个人心房肌细胞的分离、鉴定及影响因素分析

目的探讨分离、鉴定单个人心房肌细胞的最佳方法及其影响因素。方法人心房肌组织取自5例先天性心脏病（PCHD）、8例冠心病（CHD）、15例瓣膜性心脏病（VHD）手术患者，采用两步酶解法分离制备心房肌细胞，光学显微镜下观察细胞形态，全细胞膜片钳技术记录乙酰胆碱敏感钾电流（Ik,Ach）情况。结果两步酶解法分离所得杆状、横纹清楚、折光性好、静止、贴壁良好的心肌细胞产率为30％～50％。PCHD记录Ik,Ach成功率最高（9／10个细胞），其次为CHD（6／10个细胞），VHD最低（3／10个细胞）。结论两步酶解法可用于人心房肌细胞的分离，全细胞膜片钳技术有助于细胞活性的鉴定，其分离数量和活性受酶解情况、年龄、病种等因素影响。

血清肌酐二步酶法检测新技术研究

目的探讨二步酶法测定肌酐的实验方法。方法以肌酐酰氨基水解酶为试剂Ⅱ,以N-(2-羟基-3-磺丙基)-3,5-二甲氧基苯胺钠盐(HDAOS)和4-氨基安替比林(4-AAP)色原物作为试剂Ⅰ,建立二步酶法测定血清肌酐。通过内空白法消除内源性肌酸和改变光谱吸收方法消除脂血、溶血、黄疸干扰。采用二步酶法测定36例患者血清肌酐,并与高效液相色谱(HPLC)法和一步酶法比较;同时测定200名健康体检者血清肌酐,以建立参考范围。结果患者组肌酐二步酶法结果[(84.2±26.6)μmol/L]明显低于一步酶法[(116.6±29.6)μmol/L,t=32.12,P<0.01];与HPLC法测定结果[(83.9±26.8)μmol/L]差异无统计学意义(t=0.541 6,P>0.05),且呈良好相关性(Y二步酶法=1.042XHPLC法-0.182 1,r2=0.982 4)。二步酶法测定血清肌酐的线性范围达4 500μmol/L,平均回收率为100.8%,批内和批间变异系数(CV)分别为2.91%～4.20%和3.20%～4.60%,应用二步酶法每天测定室内质控定值血清[低(78.0μmol/L)、中(206.0μmol/L)、高(900.0μmol/L)],共测定180 d,其日间总CV分别为4.46%、5.27%、7.24%。二步酶法试剂至少能稳定180 d。健康人群血清肌酐的参考范围男性为56～132μmol/L,女性为41～109μmol/L。结论以肌酐酰氨基水解酶为试剂Ⅱ和以HDAOS、4-AAP为色原物(试剂Ⅰ)的二步酶法可以消除肌酸和脂血、溶血、黄疸血的干扰,可用于临床肌酐常规测定。

酶法合成^(13)C标记尿苷二磷酸葡萄糖的核磁鉴定

建立了一种经济、简便的一步酶法 ,大量合成尿苷二磷酸葡萄糖 .在酶法合成中 ,用UTP代替ATP ,并建立了UTP的再生系统 ;建立了反复补加法和酶回收法 ,使酶的利用率达到最高 .UDP [4 13 C] 葡萄糖首次用该法在 0 5g规模上合成 .总产率为 69 7% .UDP [4 13 C] 葡萄糖的核磁共振 (NMR)结果表明 ,文献报道的UDPG的1H和13 C核磁共振谱中葡萄糖 4位C的归属是错误的 ,从而纠正了文献中关于UDPG核磁共振谱归属中的部分错位 .

弱碱一步酶法制取糯米淀粉的研究

在弱碱条件下对糯米进行酶处理,以制备糯米淀粉,并得出优化组合为粉碎细度160目、酶解时间5 h、酶解温度35℃、pH值等于12。研究表明,本方法可以避免在淀粉制取中碱处理对淀粉颗粒性状的破坏,降低酶的使用量,同时减少二次污染,提高淀粉的得率和精度。

碱酶分步法从米粉中提取大米蛋白工艺的研究

用碱法和酶法两步加工米粉,制备大米蛋白。通过研究pH,温度,时间及料液比对大米蛋白提取率的影响,确定稀碱提取大米蛋白的较佳工艺条件为:pH11.0,温度50℃,时间2h,及料液比1∶8,然后用碱性蛋白酶对碱提残渣进行二次提取,通过正交试验确定酶提大米蛋白最适条件为:加酶量1%,pH8.0,时间1h,料液比1∶8,温度50℃。两步提取使大米蛋白提取率达到90.49%。

新工科视角下大学生科研创新训练的探究实践--NiCo_(2)O_(4)@CNT的合成及其非酶葡萄糖传感特性研究

采用简单的一步溶剂热法,成功制备出NiCO_(2)O_(4)@CNT复合材料,并将其应用于非酶葡萄糖传感催化材料。从电催化材料的制备、表征、到一系列电催化性能研究的科研创新训练,可以使本科生能够接触到除了基础专业教学实验之外的更具有创新性、实践性的创新训练,大大拓宽了本科生的思路与眼界,为今后的持续科研之路奠定了至关重要的基础。

两步酶解提取米糠蛋白的工艺研究及优化

以去除淀粉后的米糠残渣为原料,对复合酶法提取米糠蛋白工艺进行了研究及优化,以期提高米糠蛋白的产品得率和品质。首先利用复合纤维素酶破坏米糠细胞壁结构,充分释放并暴露米糠蛋白,其较优条件为:复合纤维素酶用量为0.2%、温度为60℃、pH=6.0、醪浓度为12%。在此基础上,利用碱性蛋白酶进一步水解米糠蛋白,并在单因素试验的基础上,通过响应面法进一步优化得到最优的水解条件为:温度88℃、pH=8.5、酶用量2.11%。通过上述两步酶解工艺,米糠蛋白的提取率为85.3%。

两步法制备菜粕肽及提高蛋白溶解度工艺

该实验主要通过固态发酵结合酶解两步法处理菜粕,在此新工艺条件下考察小肽含量及蛋白溶解度的变化.菜粕经黑曲霉固态发酵后小肽质量分数和蛋白溶解度显著提高,分别为7.86%和25.23%,相比于空白对照分别增长了148.08%和174.83%.之后将发酵后的菜粕置于45℃下酶解30 h,小肽质量分数和蛋白溶解度进一步提高,分别为14.12%和44.95%.相比于单步固态发酵和空白对照,小肽含量分别提高了79.64%和393.71%,蛋白溶解度分别提高了78.16%和341.99%.与此同时,酶解结束后,采用Tricine-SDS-PAGE测定菜粕中蛋白质分子质量,电泳结果显示,大分子蛋白质被分解为小分子蛋白质,其分子质量<4.6 kDa.以上结果表明,经发酵、酶解两步法处理菜粕后,相比于传统单步固态发酵,菜粕的营养价值得到进一步提高,可为菜籽粕生物肽制备提供科学依据.

酸酶两步法提取鸡胸软骨胶原蛋白的研究

以鸡胸软骨为原料,首先采用柠檬酸提取鸡胸软骨中蛋白,然后以醋酸为提取介质,用胃蛋白酶对酸提残渣中蛋白质进行进一步提取。通过单因素试验和响应面分析法对其提取工艺进行了优化,结果表明采用酸酶两步法提取鸡胸软骨胶原蛋白的最佳工艺参数为:在温度为36.7℃时,按底物质量浓度10 g/100 mL添加0.3 mol/L柠檬酸提取6.08 h,然后用胃蛋白酶提取残渣中蛋白,以0.5 mol/L醋酸为提取介质,在温度为35℃时,添加1.38%胃蛋白酶提取1.83 h。在此条件下,通过酸酶两步法提取后粗蛋白总含量可达272.82 mg/L。