u-PA与u-PAR在前列腺癌中的表达

①目的 探讨尿酸氧化酶型纤溶酶原激活物 (u PA)、尿酸氧化酶型纤溶酶原激活物受体 (u PAR)在前列腺癌 (Pca)中的表达及其意义。②方法 用免疫组化方法检测 37例Pca组织标本、19例前列腺增生症 (BPH)组织标本中u PA ,u PAR的表达。③结果 BPH组织中u PA ,u PAR表达均为阴性。低分化Pca组织中u PA ,u PAR阳性表达率明显高于中、高分化组 (P =0 .0 39,0 .0 2 5 ) ,Pca伴骨转移组织中u PA ,u PAR阳性表达率明显高于无骨转移组 (P =0 .0 0 16 ,0 .0 0 2 9)。④结论 u PA ,u PAR阳性表达与Pca细胞分级、转移有关 ,可以作为判断Pca恶性程度的指标之一。

肝硬化和肝癌患者血浆MMP-3、TIMP-1、u-PA和u-PAR水平与临床关系的研究

目的探讨乙型肝炎后肝硬化和肝癌患者血浆基质金属蛋白酶3(MMP-3)、基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)、尿激酶型纤溶酶原激活物(u-PA)及其受体(u-PAR)的水平变化及其临床意义。方法应用ELISA法测定血浆MMP-3、TIMP-1、uPA和u-PAR的水平。结果①与正常对照组比较,肝硬化代偿期组血浆MMP-3和u-PAR水平升高,差别有显著性(P【0.01);肝硬化失代偿期组与正常对照组比较血浆u-PA、u-PAR、TIMP-1水平和TIMP-1/MMP-3比值均明显升高,差异有显著性(P【0.01和P【0.05);肝癌患者血浆u-PA、u-PAR、TIMP-1水平和TIMP-1/MMP-3比值水平均明显升高,差异有显著性(P【0.01)。②肝硬化失代偿期组与代偿期组比较血浆u-PA、u-PAR和MMP-3水平均明显增高,TIMP-1/MMP-3比值亦明显增高,差异均有显著性(P【0.01)。③肝癌组与肝硬化代偿期组比较血浆u-PA、u-PAR、MMP-3、TIMP-1水平和TIMP-1/MMP-3比值均明显增高,差异均有显著性(P【0.01);肝癌组与肝硬化失代偿期组比较血浆u-PA、u-PAR和MMP-3水平均无显著性差异(P】0.05),而血浆TIMP-1水平和TIMP-1/MMP-3比值明显增高,差异有显著性(P【0.01)。结论乙型肝炎后肝硬化和肝癌患者血浆MMP-3、TIMP-1、u-PA和u-PAR水平变化与疾病的病理进程有密切相关。

多孔微载体无血清培养rCHO细胞生产u-PA

在 30L搅拌式反应器中无血清培养分泌尿激酶型纤溶酶原激活剂 (u PA)的DNA重组CHO细胞 ,定期部分更换Cytopore多孔微载体 ,使生长在多孔微载体中的细胞不断更新繁殖 ,解决大规模细胞培养中的细胞凋亡问题。在 91d连接换液培养过程中 ,细胞密度可维持在 (1 3～ 2 6 )× 10 7/mL ,活细胞比率维持在 90 %以上。在7 5L搅拌罐中培养细胞 ,利用外部周期性压力振荡刺激并结合载体更新技术 ,可减轻密度效应对细胞生长和表达的影响 ,在一定程度上提高细胞在高密度培养条件下的表达水平。在 6 7d连续换液培养中 ,细胞最高密度为 2 6 4× 10 7/mL ,活细胞比率维持在 95 %以上。与稳压操作相比 ,利用周期变压刺激技术可提高产量 10 %～ 2 0 % ,且可降低葡萄糖厌氧代谢生成乳酸的转化率 ,利用 4步纯化工艺 ,从含u PA约 135g的 2 10 0L上清中获得约 80 gu PA(单链比例约为 90 % )。

PAI-1、u-PA、VEGF、CD34在动脉粥样硬化鼠急性脑缺血中的表达及意义

目的:探讨PAI-1、u-PA、VEGF、CD34在动脉粥样硬化大鼠急性脑缺血中的表达及意义。方法:将大鼠随机分成正常饮食组(A组)和高脂饮食组(B组),分别制备大鼠局灶性大脑中动脉栓塞/再灌注(MCAO/R)模型;观察大鼠神经病学评分,HE染色法检测脑缺血区病理改变,免疫组化法检测缺血区PAI-1、u-PA、VEGF、CD34表达,并应用流式细胞仪计数外周血CD34+血管内皮祖细胞(EPC)。结果:脑缺血后再灌注24h,PAI-1、u-PA、VEGF的表达增高,B组PAI-1、VEGF表达较A组明显,u-PA相反;再灌注48h后,外周血CD34+EPC计数B组(0.89%)较A组(1.11%)降低(P<0.05),脑缺血区CD34+细胞B组也少于A组。结论:PAI-1、u-PA及VEGF高表达促进了动脉粥样硬化的形成并加重急性脑缺血/再灌注损伤,CD34+低表达及EPC减少使血管再生能力降低。

COX-2、u-PA和TSP-1在胃癌及周围淋巴结中的表达及意义

目的:研究COX-2、u-PA和TSP-1在胃癌及周围淋巴结中的表达状况,探讨它们在胃癌浸润和淋巴结转移中的作用和意义。方法:用组织芯片技术和免疫组化法检测COX-2、u-PA和TSP-1的表达。结果:COX-2、u-PA和TSP-1在胃癌组阳性表达率分别为67.7%、78.1%和78.6%,均显著高于对照组(40.0%、6.7%和40.0%,P<0.05)。COX-2表达与浸润深度有关(P<0.05)。u-PA表达与浸润深度和淋巴结转移均有关(P<0.05)。TSP-1表达与浸润深度和淋巴结转移均无关(P>0.05)。COX-2、u-PA和TSP-1在转移淋巴结和对应癌组织间的表达差异无显著性(P>0.05)。COX-2和u-PA、TSP-1的表达呈正相关,u-PA和TSP-1的表达无相关关系。结论:胃癌中COX-2、u-PA和TSP-1高表达;COX-2表达与胃癌的浸润深度有关,u-PA表达与浸润深度和淋巴结转移有关。

基质降解酶u-PA,PAI-1与人肺癌细胞浸润转移的相关关系的研究

观察体外细胞株ＰＧ、ＰＡａ细胞的ｕ－ＰＡ，ＰＡＩ－１活性和抗原表达，结果发现ＰＧ、ＰＡａ细胞均能够产生ＰＡ及ＰＡＩ，免疫细胞化学法定位ＰＡ主要为ｕ－ＰＡ，ＰＡＩ主要为ＰＡＩ－１。在ＰＧ为ｕ－ＰＡ高表达，而ＰＡａ为低ｕ－ＰＡ表达，ＰＡＩ－１在ＰＧ、ＰＡａ细胞中均高表达。对ＰＧ瘤细胞在ＢＡＬＢ／ＣＡ裸鼠皮下种植性瘤组织的免疫组化结果显示，ｕ－ＰＡ阳性～强阳性表达，ＰＡＩ－１为阴性表达。说明ｕ－ＰＡ是ＰＧ、ＰＡａ高低不同的转移能力的重要机制之一。

通过加速贮存试验估算u-PA产品在不同温度时的贮存寿命

通过在 6 0℃、70℃、80℃的加速贮存试验 (MIS)观察了 u- PA冻干产品的热稳定性 ,并对其活性的热降解速度和不同温度时贮存寿命进行了估算。在 3 7℃ ,2 5℃ ,4℃ ,0℃贮存时 ,活性单位损失 5 0 %所需的时间为 1 73 d、2 .78a,70 .8a,1 1 8a:活性单位损失 1 0 %需的时间分别为 2 0 d、1 0 0 d、7.6 4 a、1 1 a。

狼疮性肾炎中u-PA和PAI-1的表达及其意义

目的 了解尿激酶型纤溶酶原激活物 (u PA)及其I型抑制因子 (PAI 1)在狼疮性肾炎 (LN)肾小球病变中的表达及其意义。方法 对 5 0例不同类型的LN和 10例原发性肾小球轻微病变的肾活检组织 ,采用免疫组化及图象分析法比较观察了u PA和PAI 1在肾小球的表达强度 ,并与肾小球增殖细胞核抗原 (PCNA)阳性细胞数和Ⅳ型胶原染色强度作相关分析。结果 u PA和PAI 1在各型LN病变肾小球中的表达 ,均比肾小球轻微病变明显增强 (P <0 .0 5或 <0 .0 1) ,并以LN IV型为最明显。PAI 1的染色反应强于同组的u PA ,两者有显著差异 (P <0 .0 5 )。肾小球u PA和PAI 1的表达均与PCNA阳性细胞核数呈正相关 (P <0 .0 5 )。而且PAI 1的表达还与肾小球内IV型胶原沉积呈正相关 (P <0 .0 5 )。结论 狼疮性肾炎中u PA和PAI 1的异常表达与肾小球的病变程度和病理类型相关 ,并可能是影响狼疮性肾炎发生发展的重要因素。

基质降解酶u-PA、PAI-1与人口腔鳞状细胞癌细胞侵袭转移的相关性研究

目的 探讨体外培养细胞系TSCCa和GNM细胞的u -PA及PAI - 1活性和表达与口腔鳞状细胞癌侵袭转移的关系。方法 采用酶联免疫反应法和免疫组化法测定了两细胞系中u -PA及PAI - 1的活性和表达 ,同时对GNM细胞在BALB/CA裸鼠皮下种植瘤组织的u -PA及PAI - 1抗原表达进行了测定。结果 两细胞系均能产生u -PA及PAI- 1,但u -PA在两细胞系中的表达不同 ,在GNM细胞u -PA为高表达 ,在TSCCa细胞中u -PA为低表达 ,PAI- 1在两细胞系中均为高表达 ;种植瘤组织中u -PA呈阳性～强阳性表达 ,PAI- 1为阴性表达。结论 u

人口腔鳞癌裸鼠移植瘤中u-PA系统的表达及意义

目的 研究u -PA系统三种主要成分 (u -PA、PAI- 1及PAI- 2 )在口腔鳞癌细胞裸鼠移植瘤侵袭转移过程中的表达及作用。方法 将 2株口腔鳞癌细胞GNM细胞和TSCCa细胞接种入裸鼠体内 ,建立体内转移模型 ,应用免疫组化法、流式细胞仪检测移植瘤组织中u -PA系统各因子的表达。结果 GNM细胞所形成移植瘤的侵袭转移能力最强 ;免疫组化和流式细胞仪检测均表明u -PA系统各因子在两株移植瘤肿瘤的胞浆和胞膜均有相当的表达 ,在GNM细胞所形成移植瘤中u -PA呈高水平表达或弱阳性表达。结论 u -PA的异常表达可能是反映两株细胞移植瘤裸鼠体内侵袭转移能力差异的指标之一。

肝素对大鼠thy-1肾炎肾小球细胞增生和u-PA/PAI-1表达的影响

目的 研究u PA及其抑制物PAI 1在大鼠thy 1肾炎中的表达及意义 ,并探讨肝素治疗对其表达的影响。方法 应用ABC免疫酶标法及图像分析技术 ,观察对照组、肾炎组和肝素组动物模型肾小球u PA和PAI 1的表达情况 ,并与光镜下肾小球细胞计数作相关性分析。结果 肝素组动物在其治疗后 7、14、2 1d时 ,肾小球细胞数明显减少 ,与肾炎组比较P值分别小于 0 .0 5或 0 .0 1:肾炎组、肝素组肾小球u PA和PAI 1的表达均高于对照组 ;于实验 3、7、14和 2 1d时 ,肾炎组动物的肾小球细胞数增多与u PA和PAI 1的表达呈正相关 (P <0 .0 5或 0 .0 1) ;肝素组于实验 3、7d时 ,肾小球细胞数的减少与PAI 1表达降低有关 (P <0 .0 5 )。结论 大鼠thy 1肾炎的肾小球细胞数增多与其u PA和PAI 1表达程度呈正相关 ;肝素治疗可减轻大鼠thy 1肾炎肾小球细胞增生 ,其作用机制可能与病程早期对肾小球PAI

骨肉瘤中u-PA、MMP-9表达的意义

目的 探讨骨肉瘤中尿激酶型纤溶酶原激活物(u PA)和基质金属蛋白酶9 (MMP 9)的表达与其复发、转移的关系。方法 采用免疫组织化学方法对46例骨肉瘤标本的u PA及MMP 9 表达进行检测,11 例骨软骨瘤作为对照。结果 u PA及MMP 9 在骨肉瘤中的阳性表达率分别为52.2 %和76.1%,骨肉瘤组织与骨软骨瘤组织间存在显著性升高(P<0.05);复发组与转移组的u PA表达有显著性升高(P<0.05);u PA、MMP 9的表达与骨肉瘤病理分级呈正相关,且u PA和MMP 9间表达呈正相关。结论 u PA和MMP 9共同促进骨肉瘤肿瘤细胞的生长和侵袭,有助于判断骨肉瘤预后。

Glioma-conditioned Medium Blocks Endothelial Cells' Apoptosis Induced by Hypoxia and Promotes Its Angiogenesis via Up-regulation of u-PA/u-PAR

Objective： To investigate the role of urokinase-type plasminogen activator/urokinase-type plasminogen receptor（u-PA/u-PAR） system in glioma angiogenesis under hypoxic conditions, we studied the effect of glioma-conditioned medium on the hypoxia induced changes in human endothelial-like ECV304 cells proliferation, apoptosis, cord formation in vitro and u-PA/u-PAR expression. Methods： MTT assay was used to examine the changes in cell proliferation. Cell apoptosis was analyzed by Hoechst 33258 staining. Matrigel cord-like formation assay was used to evaluate the angiogenesis ability of ECV304 cells in vitro. Expressions of u-PA/u-PAR mRNA were detected by quantitative real-time RT-PCR. Results： Hypoxia inhibited ECV304 cells proliferation and induced cell apoptosis. Hypoxic conditioned medium（H-CM） while not normoxic conditioned medium（N-CM） of U251 glioma ceils partially blocked the effect of hypoxia on ECV304 cells proliferation and apoptosis. H-CM of U251 glioma ceils also promoted the cord formation of ECV304 cells seeded on matrigel. When u-PA or u-PAR monoclonal antibodies were added into ECV304 cells culturing medium, cord formation ability was partially inhibited. H-CM of U251 glioma cells induced uPA and uPAR expression in ECV304 cells. Conclusion： These suggest that u-PA/u-PAR system is involved in glioma angiogenesis trigged by hypoxic microenviroment.

前交叉韧带损伤后膝关节腔u-PA含量变化及意义

目的探讨前交叉韧带损伤后膝关节腔内u-PA变化情况及意义。方法 40只新西兰兔一期建立单侧前交叉韧带损伤模型。损伤术后2周、3周和4周时采用ELISA方法检测膝关节液中u-PA含量变化。损伤术后3周时采用HE染色和免疫组织化学检测关节腔内滑膜组织病理变化和u-PA表达情况。结果前交叉韧带损伤后膝关节腔内u-PA生成增加,术后3周时关节腔内u-PA含量明显高于假手术组(P<0.05)。术后3周时组织学检测显示滑膜组织病理变化明显,滑膜组织内u-PA广泛表达、阳性细胞数量增多(P<0.01)。结论前交叉韧带损伤后膝关节腔内u-PA含量增加,可能与滑膜组织病理改变有关。

清毒片、养正片对白血病细胞u-PA活性影响的研究

[目的]观察中药清毒片、养正片对白血病细胞u-PA活性的影响。[方法]SD大鼠24只,随机分为4组:空白组用生理盐水,清毒片组用清毒片,养正片组用养正片灌胃,化疗组用阿糖胞苷腹腔注射,观察含药血清对HL-60u-PA活性的影响。[结果]与空白对照组相比较,阿糖胞苷和清毒片、养正片药物血清对HL-60细胞培养液上清中u-PA的活性都有一定程度的影响,而以阿糖胞苷含药血清降低u-PA活性的效果较好。[结论]清毒片、养正片的临床治疗作用可能与其降低患者体内白血病细胞u-PA活性表达水平的作用有关。

u-PA和TGF-β_1在喉癌中的表达及临床意义

目的探讨u-PA和TGF-β1在喉癌中的表达及其与喉癌生物学行为之间的关系。方法采用SABC免疫组化染色方法检测了84例喉癌与10例正常喉组织中的u-PA和TGF-β1的表达情况。结果在喉癌组织中u-PA的表达水平与临床分期和有无淋巴结转移的相关性有统计学意义(P<0.05),与组织学分型和发生部位的相关性无统计学意义(P>0.05)。在大部分喉癌组织中(89.29%)TGF-β1表达较高,与临床分期和有无淋巴结转移的相关性有统计学意义(P<0.05),但与组织学分型和发生部位的相关性无统计学意义(P>0.05)。此外,u-PA和TGF-β1在喉癌中的表达和在正常喉黏膜中的表达差异均有统计学意义(P<0.05)。结论u-PA和TGF-β1与喉癌生物学行为关系密切,它们的异常表达可能是喉癌发生、发展过程中的一个重要环节。

肝病患者血浆MMP-3、TIMP-1、u-PA和u-PAR水平的临床研究

目的:分析肝病患者血浆MMP-3、TIMP-1、u-PA和u-PAR水平变化与临床意义。方法:选取2012年10月-2014年10月笔者所在医院收治的60例乙型肝炎后肝硬化患者临床资料,其中代偿期组30例、失代偿期组30例;同期选取60例乙型肝炎后肝癌组患者、60例正常对照组对象;通过酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血浆,对比MMP-3、TIMP-1、u-PA和u-PAR水平变化。结果:肝硬化患者血浆u-PA、u-PAR水平明显升高(P<0.05);肝硬化代偿期患者MMP-3水平明显增高(P<0.05);肝硬化失代偿期组患者u-PA、TIMP-1、TIMP-1/MMP-3水平明显升高(P<0.05)。肝癌患者血浆u-PA、u-PAR、TIMP-1/MMP-3水平明显升高(P<0.05)。肝癌患者各血浆水平明显升高(P<0.05)。肝癌患者TIMP-1、TIMP-1/MMP-3水平明显升高(P<0.05)。结论:肝病患者血浆MMP-3、TIMP-1、u-PA和u-PAR水平与疾病病理进程紧密相关,必须严格掌握各项检测指标,为临床诊治提供充分的依据。

非小细胞肺癌组织中ETS-1和U-PA的表达及意义

ETS-1(E26transformation specific-1)可以上调U-PA(urokinase-type plasminogen activator)的表达,但两者相关性的大小尚不清楚.通过采用免疫组化和RT-PCR(reverse transcriptase polymerase chain reaction)检测非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)和癌旁正常组织中ETS-1和U-PA的表达.免疫组化结果显示,50例NSCLC组织中,ETS-1和U-PA蛋白阳性率分别为70%(35/50)和64%(32/50),均显著高于对应的癌旁正常组织15%(3/20)和10%(2/20)(P<0.001).ETS-1阳性率随着肿瘤侵润深度的增加,淋巴结转移和临床分期的增加而增加(P<0.05).U-PA阳性率随着淋巴结转移和临床分期的增加而增加(P<0.05).ETS-1和U-PA蛋白表达呈正相关(r=0.059,P<0.01).在17例癌组中和癌旁组中,ETS-1、U-PA mRNA的相对表达强度分别为(0.564±0.059)和(0.318±0.089)(P=0.000)、(0.773±0.191)和(0.401±0.193)(P=0.000).结果表明,ETS-1和U-PA的过量表达与NSCLC的发展密切相关,两者的表达呈正相关,ETS-1可能通过上调U-PA的表达,促进肺癌的进展.

脑缺血再灌流脑微血管损害及u-PA表达的实验研究

目的探讨脑缺血再灌流后继发的脑水肿、出血的发生机制。方法应用光镜、透射电镜、免疫组织化学、显微镜－计算机图像分析等技术，观察大鼠局部脑缺血２小时再灌流不同时间，脑微血管结构、Ⅳ型胶原抗原及尿激酶型纤溶酶原激活物（ｕ－ＰＡ）表达。结果局部脑缺血再灌流２４小时，缺血侧ＭＣＡ区脑微血管外细胞间质水肿最严重，基底膜节段性溶解、缺损，有红细胞漏出，微血管壁及管外细胞间质ｕ－ＰＡ大量表达达高峰，同时微血管基底膜Ⅳ型胶原抗原减少。随再灌流时间延长，微血管基底膜损害加重，Ⅳ型胶原抗原逐渐消失，ｕ－ＰＡ表达减少。结论脑缺血再灌流后脑微血管结构损害是导致脑水肿、出血的主要病理基础，而脑微血管壁和管外细胞间质ｕ－ＰＡ表达可能是引起微血管损害的主要机制之一。