微生物非培养鉴定技术在临床标本检查中的应用研究

感染性疾病的病原学诊断仍以微生物的分离培养作为"金标准",但能培养成功的仅为少数。绕过分离培养环节,以微生物rRNA/rDNA基因作为种属鉴别序列,设计通用引物(universal primer,up),用PCR扩增标本中微生物的16S rRNA或16S～23S rRNA序列,通过毛细管电泳(CE)进行单链构象多态性(SSCP)和限制性片段长度多态性(RFLP)分析,筛选基因的点突变以达到快速鉴定微生物(到属和种)。用PCR-CE-SSCP和PCR-CE-RFLP分析系统检测了呼吸道、消化道、女性生殖道标本中感染的病原菌;用PCR-CE-SSCP系统检测了男性泌尿道溶脲脲原体两个生物群。建立PCR-CE-RFLP分析系统,用非培养法鉴定技术检测脓汁、肠道和泌尿生殖道标本,检测并鉴定了临床标本中的多种病原菌;对人体肠道菌群进行定性和定量分析,用该法可协助腹泻的病原学诊断;检测生殖道常见的致病菌;用PCR-CE-SSCP系统建立了检测溶脲脲原体两个生物群的方法。微生物的非培养鉴定技术比传统方法缩短20h,为临床感染症的诊断提供快速、准确的依据。结果可见,利用16S～23S rRNA间区基因PCR-CE-RFLP和PCR-CE-SSCP系统可以达到对临床常见病原菌的快速种属鉴定,比传统的细菌培养法具有快速、准确、灵敏的优点,可用于临床感染症的病原学诊断。微生物的非培养鉴定技术将替代培养法而成为病原学诊断新的金标准。

水产品腐败菌与保鲜技术研究进展

微生物是导致大部分水产品腐败变质的主要原因。但是在腐败过程中,只有极少种类的特定腐败菌参与这一过程并产生不可接受的异味。综合微生物生态学、分子生物技术、化学指标分析、感官分析和微生物的数学生长模型,对确定水产品的特定腐败菌并开发出判定、预测和延长产品货架期的方法进行了介绍。

腌制蔬菜微生物的研究进展

对腌制蔬菜微生物的研究进展进行综述,包括腌制原理,腌制过程中的主要微生物和影响微生物的环境因子,以及鉴定微生物的传统方法和基因测序技术,分析了不同鉴定技术的优缺点,为腌制蔬菜微生物研究提供科学依据。

分子生物学技术在浸矿微生物研究中的应用

分子生物学技术在浸矿微生物的研究中发挥着举足轻重的作用。总结了一些先进分子生物学技术在浸矿微生物鉴定和浸矿微生物基因工程育种两方面的应用情况,包括16S rRNA和16S rDNA基因序列分析技术、实时定量PCR技术、限制性片段长度多态性分析技术、荧光原位杂交技术、变性梯度凝胶电泳和温度梯度凝胶电泳技术、基因间隔序列分析技术、浸矿微生物质粒载体研究、外源基因导入浸矿微生物方法研究等。

基因芯片技术在食品检测中的应用研究进展

本文总结了基因芯片技术的概况、原理和特点,阐述了基因芯片技术在动物肉源和过敏原鉴定、食源性致病微生物检测和转基因食品检测方面的应用,旨在全面推广基因芯片技术、提升食品检测水平。

二代基因测序技术在微生物鉴定中的应用

目的:运用二代基因测序技术建立微生物鉴定的方法。方法:对细菌16S rRNA基因的V1-V3区进行扩增,对真菌的ITS基因的ITS1、ITS2区进行扩增。扩增产物加标签后,用iSeq100进行测序,用配套的微生物鉴定系统进行数据分析,得出鉴定结果。结果:鉴定了22株环境菌和31株标准菌。在属水平上,鉴定结果与对照菌一致率为100%;在微生物种水平上鉴定结果与对照菌的一致率为81.1%。结论:运用二代基因测序技术成功建立了细菌、酵母菌、霉菌的鉴定方法,该方法鉴定成功率和准确性高、重现性好,可用于鉴定环境菌。

单细胞拉曼技术在病原微生物检测中的研究进展

单细胞拉曼技术是基于拉曼光谱分析原理实现非培养、无标签、快速、高效、低成本揭示物质本质的新方法。近年来,单细胞拉曼技术也开始在病原微生物检测领域崭露头角。本文结合单细胞拉曼技术基本原理这一理论基础,阐述该技术在病原微生物鉴定、药物敏感性检测中的研究进展及最新技术方向,并探讨其在临床实验室应用的可行性,为未来病原微生物检测技术提供新的方向。