VEGF和抑癌基因maspin在胃癌组织中的表达及意义

目的观察血管内皮生长因子(VEGF)和抑癌基因maspin在胃癌组织中的表达情况,研究它们与胃癌临床特征的关系。方法应用免疫组化法检测102例胃癌患者手术切除的癌组织和癌周正常组织中VEGF和maspin表达水平。结果VEGF在正常胃组织中未见表达,在胃癌组织中的表达率为50.0%,两者比较差异有显著性意义(P<0.01)。maspin在正常胃组织中表达率为87.3%,在胃癌组织中的表达率为52.0%,两者比较差异有显著性意义(P<0.01)。VEGF蛋白表达水平与胃癌浆膜浸润、TNM分期、淋巴结转移、5年生存率有关(P<0.05),maspin蛋白表达水平与胃癌浆膜浸润、淋巴结转移、5年生存率有关(P<0.05)。结论同时检测胃癌组织中VEGF与maspin表达水平,对判断胃癌浸润转移潜能及评估患者预后有一定参考价值。

Maspin BCSG1及c-erbB-2表达与乳腺癌预后的关系

目的:探讨Maspin、BCSG1、c-erbB-2蛋白在乳腺癌中的表达及其与预后的关系。方法:选取临床病理资料完整并随访5年以上的137例乳腺癌病例,采用SP免疫组织化学技术检测乳腺癌组织中的Maspin、BCSG1、c-erbB-2蛋白的表达情况,结合临床及病理形态学资料用COX模型分析Maspin、BCSG1、c-erbB-2表达对预后的影响。结果:Maspin、BCSG1、c-erbB-2蛋白在乳腺癌组织中的阳性表达率分别为48.9%,67.2%,27.7%三者与生存时间显著相关(P<0.01)。结论:Maspin、BCSG1、c-erbB-2蛋白在乳腺癌中的表达与患者的生存期密切相关,可作为预测乳腺癌预后的参考指标。

蛋白质组学技术识别Maspin在支气管上皮永生化细胞和恶性转化细胞中的差异表达

背景与目的:Maspin蛋白是一种抑制肿瘤的丝氨酸蛋白酶抑制剂,它在抑制肿瘤生长和转移中发挥一定作用。本研究是利用蛋白质学技术鉴定Maspin在支气管上皮细胞恶性转化过程中的差异表达。方法:利用固相pH梯度等电聚焦双向电泳、肽质量指纹谱技术以及生物信息学技术,对Maspin在永生化细胞系及恶性转化细胞系的表达进行功能蛋白组学分析。结果:在分子量14.4～94kDa、等电点PI3～10范围内,2-D电泳分离出1500多个蛋白质点。凝胶图像分析显示Maspin蛋白在永生化细胞中的表达比恶性转化细胞表达高。Northernblot证实永生化细胞的MaspinmRNA丰度高于恶性转化细胞。结论:肺癌组织中Maspin在细胞转录和翻译水平的表达异常,这可能是肺癌发生的原因之一。

宫颈癌组织中maspin、AKT、p-AKT表达变化及其与肿瘤微淋巴管密度的相关性

目的观察宫颈癌组织中maspin、蛋白激酶B(AKT)、磷酸化蛋白激酶B(p-AKT)的表达变化,并分析其与肿瘤微淋巴管密度(LMVD)的相关性。方法收集127例份宫颈石蜡组织标本,其中慢性宫颈炎组织20例份(炎症组)、CINⅠ级组织20例份(CIN1组)、CINⅡ级组织20例份(CIN2组)、CINⅢ级组织20例份(CIN3组)、宫颈癌组织47例份(宫颈癌组,其中无淋巴结转移32例为宫颈癌1组、有淋巴结转移15例为宫颈癌2组)。采用免疫组化SP法检测各组maspin、AKT、P-AKT,测算肿瘤微淋巴管密度(LMVD)。结果宫颈癌1组、宫颈癌2组maspin蛋白阳性表达比例低于其余各组(P均<0.05)。宫颈癌1组、宫颈癌2组AKT、p-AKT阳性表达比例高于其余三组(P均<0.05)。宫颈癌2组p-AKT阳性表达比例高于宫颈癌1组(P<0.05)。宫颈癌组织中maspin与AKT表达呈负相关关系(r_s=-0.472,P=0.001),maspin与p-AKT表达也呈负相关关系(r_s=-0.598,P=0.000)。宫颈癌1组、宫颈癌2组LMVD分别为(19.44±2.95)、(23.24±2.46)支/mm^2,淋巴结转移与LMVD呈正相关关系(r_s=0.44,P=0.000)。宫颈癌组织中LMVD与maspin表达呈负相关关系(r_s=-0.554,P=0.000),LMVD与p-AKT表达呈正相关关系(r_s=0.39,P=0.007)。结论宫颈癌组织中maspin表达下调,AKT、p-AKT表达上调,且maspin表达与AKT、p-AKT表达均呈负相关关系;宫颈癌组织中LMVD与maspin表达呈负相关关系,LMVD与p-AKT表达呈正相关关系。maspin表达下调可能参与了宫颈癌的发生发展,机制可能与AKT通路异常激活、促进肿瘤微淋巴管生成有关。

Maspin在非小细胞肺癌组织中的表达及意义

目的探讨Maspin在非小细胞肺癌中的表达及意义。方法采用免疫组化法检测99份非小细胞肺癌组织中Maspin蛋白的表达情况,分析其临床病理意义。结果肺癌组织中Maspin的阳性表达率显著低于正常肺组织(P<0.05);Maspin表达与肺癌病理类型、组织学分化程度、淋巴结转移及临床分期有关。Cox回归生存分析显示Maspin蛋白表达及临床分期是非小细胞肺癌的独立预后影响因素(P<0.05)。结论 Maspin蛋白表达在非小细胞肺癌的侵袭、转移过程中起重要作用,Maspin蛋白可作为预测非小细胞肺癌预后的参考指标。

Maspin蛋白在乳腺癌与癌旁组织中的表达及其意义

目的:探讨Maspin蛋白在乳腺癌与癌旁组织中的表达及其意义。方法:采用免疫组化SP法检测104例浸润性乳腺癌、26例癌旁原位癌成分、63例癌旁导管上皮增生性病变(不典型增生20例、单纯性增生43例)及10例正常乳腺组织中Maspin蛋白的表达情况,同时分析浸润性乳腺癌组织中Maspin蛋白表达与病理组织学分级、淋巴结转移及ER、PR、c-erbB-2、Cath-D、VEGF表达的关系。结果:正常乳腺上皮细胞Maspin蛋白阳性反应主要位于细胞核,所有正常乳腺上皮细胞核均呈高表达(++～+++,100%),乳腺上皮单纯性增生、不典型增生、原位癌和浸润性乳腺癌细胞核Maspin蛋白高表达率分别为76.7%、65.0%、69.2%,和49.0%。从正常乳腺上皮到癌旁不典型增生细胞核Maspin蛋白高表达率呈渐趋下降趋势,不典型增生与原位癌的表达无明显差异,浸润性乳腺癌表达最低,Logistic回归模型分析不同组织细胞核Maspin蛋白高表达间存在显著差异(P<0.05);而单纯性增生、不典型增生、原位癌和浸润性乳腺癌细胞浆Maspin蛋白高表达率分别为51.2%、85.0%、69.2%和63.5%,正常乳腺上皮未见细胞浆表达。不同组织Maspin蛋白的细胞浆表达同样有显著差异(P<0.01),其中癌旁不典型增生较乳腺癌有更高的细胞浆表达。进一步研究发现浸润性乳腺癌细胞核Maspin蛋白表达与乳腺?

胶质瘤中hTERT、maspin和bFGF表达的相关性及意义

背景与目的:人端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase,hTERT)是端粒酶激活的决定因子,与肿瘤的形成和恶性程度有关,其表达受多种因素的调控。本研究检测胶质瘤中hTERT、maspin和碱性成纤维细胞生长因子(basic fibroblast growth factor,bFGF)蛋白的表达,并分析它们的相关性及其与临床病理因素之间的关系。方法:应用原位杂交法、免疫组织化学SP法分别检测128例胶质瘤和8例正常脑组织中hTERT及maspin、bFGF蛋白的表达;检测结果的半定量评定参照Gatalica的H-score(H=I×P)系统;两组间率的比较用χ2检验;不同级别胶质瘤中hTERT、maspin和bFGF的表达采用Spearman等级相关分析;hTERT与maspin和bFGF表达之间的关系采用直线相关分析。结果:(1)胶质瘤中hTERT、maspin、bFGF阳性率分别为51.6%(66/128)、46.9%(60/128)、62.5%(80/128)。8例正常脑组织均不表达hTERT、bFGF,7例表达maspin。Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ级胶质瘤中,hTERT阳性率分别为32.6%(14/43)、54.5%(30/55)、73.3%(22/30);maspin阳性率分别为58.1%(25/43)、49.1%(27/55)、26.7%(8/30);bFGF阳性率分别为39.5%(17/43)、72.7%(40/55)、76.7%(23/30)。hTERT、maspin和bFGF在正常脑组织和不同级别胶质瘤中的表达差异均有显著性(P﹤0.05),hTERT和bFGF表达与病理分级呈正相关(ρ=0.515,P﹤0.01;ρ=0.611,P﹤0.01),maspin表达与病理分级呈负相关(ρ=-0.425,P﹤0.05)。(2)hTERT表达与maspin蛋白表达呈负相关(r=-0.658,P<0.01),与bFGF蛋白表达呈正相关(r=0.627,P<0.01);maspin和bFGF蛋白表达呈负相关(r=-0.501,P<0.01)。(3)hTERT表达与年龄、性别、肿瘤直径和细胞密度无关(P>0.05),与核分裂相、血管密度、坏死显著相关(P<0.05)。结论:hTERT、maspin和bFGF三者间的表达有相关性,均与胶质瘤恶性程度有关。

子宫内膜癌中Maspin、uPA、ER、PR的表达及临床意义

目的探讨子宫内膜癌中Maspin蛋白、u PA蛋白及雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)间表达的相关性及临床意义。方法对2004年6月至2014年6月病理科存档的蜡块,子宫内膜癌50例、不典型增生的子宫内膜50例及正常增殖期子宫内膜30例,采用免疫组化SP法,检测Maspin蛋白、u PA蛋白、ER、PR的表达情况,结合临床病理特征分析4种蛋白间表达的相关性。结果 Maspin蛋白、ER、PR在增殖期子宫内膜,不典型增生的子宫内膜,子宫内膜癌中阳性表达率逐渐降低,且组间比较有统计学意义(P<0.05),而u PA的阳性表达率逐渐升高(P<0.05)。Maspin、u PA、ER、PR的阳性表达率在手术病理分期、肌层浸润深度及有无淋巴结转移组中的差异均有统计学意义(P<0.05)。Maspin和ER、PR的表达呈一致性,Maspin与u PA呈负相关(r=-0.341,P<0.05),u PA和ER呈负相关(r=-0.293,P<0.05)。结论 ER、PR的减少,Maspin蛋白表达的缺失,伴随u PA蛋白表达上调,四者均参与了子宫内膜癌的发生、发展、浸润等过程,有可能成为判断子宫内膜癌治疗及预后的指标。

maspin在食管鳞状细胞癌中的表达及其与微血管密度的关系

目的研究旨在寻找能预测食管鳞状细胞癌(esophageal squamous cell carcinoma,ESCC)浸润、转移及术后生存率的生物因子。方法采用免疫组织化学ElivisionTM plus法检测100例ESCC和30例正常食管组织中maspin的表达和微血管密度(microvessel density,MVD)情况。结果在正常食管组织和ESCC组织中,maspin的阳性表达率分别为100%和43.0%,差异有显著性(P<0.01);maspin的表达水平与肿瘤的分化程度、浸润深度、淋巴结转移和临床分期有关(全部P<0.01);MVD计数与肿瘤的大小、分化程度、淋巴结转移以及临床分期有关(全部P<0.01);且maspin的表达与MVD计数呈负相关(P<0.01)。结论 maspin的表达和MVD计数与ESCC组织的分化程度、转移和预后等均有关;maspin和MVD联合检测对ESCC的进展及预后判断有重要意义。

MASPIN真核表达载体的构建及对胃癌细胞SGC7901的诱导凋亡作用

背景与目的:MASPIN基因与多种恶性肿瘤的发生密切相关,在细胞的生长、浸润、转移和凋亡中起着十分重要的作用。本研究通过构建MASPIN基因真核表达载体,分析MASPIN过表达对胃腺癌细胞株SGC7901凋亡的影响。方法:构建MASPIN/PCR2.1表达载体,转染胃癌细胞株SGC7901。RT-PCR和Western bolt检测MASPIN基因、Bax/Bcl-2基因表达变化;琼脂糖凝胶电泳检测凋亡特征性DNA梯形带;采用AnnexinV-FIFC/PI检测凋亡率。结果:酶切证实成功构建真核表达质粒MASPIN/PCR2.1;转染重组质粒组MASPIN mRNA(33.6±1.2)和蛋白水平(23.4±1.6)的表达明显高于未处理组(13.7±2.0、12.0±1.3)和空质粒组(15.0±1.5、12.3±1.5,P<0.05);凝胶电泳观察到特征性DNA梯带;各组细胞均有凋亡率的增加且呈时间依赖性:转染重组质粒∕TRAIL作用组最高,12、24、48h分别达到8.0%、16.3%、25.8%,转染重组质粒组为3.0%、8.2%、14.4%,TRAIL作用组为4.1%、9.8%、15.9%(P<0.05);48h转染重组质粒∕TRAIL组BaxmRNA和蛋白表达(55.3±2.1、75.4±1.3)高于转染重组质粒组(34.3±1.2、40.7±1.8,P<0.05)和TRAIL作用组(43.2±1.8、36.2±1.3,P<0.05);48h转染重组质粒∕TRAIL组、转染重组质粒组、TRAIL作用组Bcl-2mRNA表达为28.3±2.5、34.3±1.2、32.8±2.1(P<0.05),蛋白表达为17.4±1.5、45.1±2.1、42.8±1.5(P<0.05)。结论:上调MASIPIN基因的表达能显著增加胃癌细胞对凋亡刺激的敏感性。其机制可能通过上调Bax,下调Bcl-2基因的表达诱导胃癌细胞凋亡。

南蛇藤提取物增强抑癌基因Maspin抑制人胃癌细胞株MGC803侵袭能力的研究

目的:构建高表达抑癌基因Maspin的人胃癌MGC803细胞,研究不同浓度的南蛇藤提取物能否增强Maspin抑制胃癌细胞的侵袭能力。方法:克隆重组GV208-Maspin-EGFP慢病毒表达载体,感染人胃癌MGC803细胞。加入不同浓度的南蛇藤提取物(10、20、40μg·m L-1),Transwell小室法检测药物对高表达Maspin的人胃癌MGC803细胞侵袭能力的影响。结果:成功构建高表达Maspin的人胃癌MGC803细胞模型。各药物组Transwell小室下方穿膜细胞的数目减少,呈现一定的药物浓度依赖性。结论:南蛇藤提取物可增强抑癌基因Maspin抑制人胃癌细胞株MGC803侵袭的能力。

maspin和p53在妊娠滋养细胞疾病中的表达及临床意义

目的：探讨maspin和p53在妊娠滋养细胞疾病中的表达及临床意义. 方法：采用免疫组化PV9000法检测22例正常妊娠者,82例葡萄胎者（经随访35例发生恶变）,11例妊娠滋养细胞肿瘤患者的maspin及p53的表达. 结果：葡萄胎未恶变组与正常早期妊娠组比较、葡萄胎恶变组与葡萄胎未恶变组比较,maspin的阳性表达率降低,而p53的阳性表达率升高,差异有统计学意义（均P〈0.05）. 在血人绒毛膜促性腺激素β亚单位（β-hCG）〉105 U/L、子宫体积〉孕周、卵巢黄素化囊肿〉6 cm组maspin表达分别低于血β-hCG≤105 U/L、子宫体积≤孕周、卵巢黄素化囊肿≤6 cm组（P〈0.05）,而在血β-hCG〉105 U/L及卵巢黄素化囊肿〉6 cm组中p53表达升高（P〈0.05）,maspin与p53的表达有关（P〈0.05）.35例葡萄胎恶变者中,maspin在国际妇产科联盟（FIGO）预后评分≥7分组的表达较〈7分组降低,差异有统计学意义（P〈0.05）;p53在解剖学分期Ⅲ期组中的表达较Ⅰ~Ⅱ期组升高,差异有统计学意义（P〈0.05）. 结论：maspin的表达下调及p53的高表达可能是葡萄胎恶性转化的早期事件, 两者的联合检测可能对预测葡萄胎恶变及预后判定有一定参考价值.

子宫内膜癌组织中Maspin蛋白的表达

目的:检测子宫内膜癌组织中Maspin蛋白的表达,探讨Maspin在子宫内膜癌发生发展中的作用。方法:采用免疫组织化学SP法检测40例子宫内膜腺癌、18例内膜不典型增生及10例正常子宫内膜组织中Maspin蛋白的表达,分析其与子宫内膜癌患者临床病理特征的关系。结果:正常子宫内膜组织、内膜不典型增生组织和内膜癌组织中Maspin蛋白的阳性表达率分别为90.0%、55.6%和42.5%,3组间相比,差异有统计学意义(χ2=7.312,P<0.05)。子宫内膜癌组织中Maspin的表达与手术-病理分期及淋巴结转移有关(P均<0.05)。结论:Maspin的表达降低可能与子宫内膜癌的发生发展和转移有关。

Maspin在乳腺癌组织中的表达及临床病理意义

目的探讨Maspin蛋白在乳腺癌中的表达及其意义。方法采用免疫组化Envision二步法检测82例浸润性乳腺癌、16例导管内癌、20例单纯性导管上皮增生及15例正常乳腺组织中Maspin蛋白的表达情况,并分析其临床病理意义。结果Maspin在正常乳腺组织、单纯性导管上皮增生、导管内癌及浸润性乳腺癌中表达率分别为100%、90%、75%、45.1%,呈逐级下降趋势,差异有显著意义(P<0.05)。浸润性乳腺癌组织中Maspin蛋白表达与TNM分期及淋巴结转移呈负相关,并与患者的生存时间显著相关(P<0.05)。结论Maspin蛋白的表达在乳腺癌的发生、演变过程中起重要作用。并与患者的生存期密切相关,可作为预测乳腺癌预后的参考指标。

子宫内膜癌中Maspin的表达及其与雌激素受体表达的相关性研究

目的：检测Maspin蛋白在正常子宫内膜、不典型增生及内膜癌组织中的表达，及其与雌激素受体（En）表达的关系，探讨Maspin在子宫内膜癌发生中的作用及其作用机制。方法：免疫组化SP法检测40例子宫内膜腺癌、18例不典型增生及10例正常子宫内膜（对照组）中Maspin蛋白的表达及其与子宫内膜癌患者临床病理特征和ER蛋白表达的关系。结果：Maspin阳性表达在正常子宫内膜组最高（9／10，90％），高于内膜不典型增生组（10／18，55．6％）和内膜癌组（17／40，42．5％），差异有统计学意义（P〈0．05），在内膜癌中FIGOⅠ期的表达（13／20，65．0％）明显高于Ⅱ-Ⅲ期（4／20，20．0％；P〈0．05），无淋巴结转移者（17／34，50．0％）明显高于有淋巴结转移者（0／6；P=0．030），但与组织学分级及肌层浸润程度无关（P〉0．05）。ER在正常子宫内膜、内膜不典型增生及内膜癌组织的阳性表达率分别为（10／10，100．0％）、（13／18，72．2％）和（20／40，50．0％），各组间差异有统计学意义（P〈0．05）；内膜癌组织中FIGOI期的表达（14／20，70．0％）明显高于Ⅱ-Ⅲ期（6／20，30．0％；P〈0．05）；内膜癌高、中、低分化组中ER表达率分别为（11／15，73．3％）、（8／18，44．4％）、（1／7，14．3％），组间差异有统计学意义（P〈0．05）；无淋巴结转移者（20／34，58．8％）明显高于有淋巴结转移者（0／6；P=0．020），肌层浸润≤1／2者（16／24，66．7％）明显高于肌层浸润〉1／2者（4／16，25．0％；P〈0．05）。子宫内膜癌中，Maspin的表达与ER的表达存在正相关关系（r=0．394，P〈0．05）。结论：从正常子宫内膜、内膜不典型增生到内膜癌，Maspin蛋白表达逐渐降低，且其低表达与子宫内膜癌临床分期晚、淋巴结转移有关，并与ER蛋白表达呈一致性，提示Maspin蛋白的表达可能受雌激素调控，参与了子宫内膜癌发生发展和转移过程。

胃肠道间质瘤中Maspin、uPA、VEGF和VEGF-C的表达及其意义

目的探讨胃肠道间质瘤(GIST)组织中Maspin、uPA、VEGF和VEGF-C的表达及临床意义。方法应用免疫组织化学方法和逆转录PCR法检测GIST组织中Maspin、uPA、VEGF及VEGF-C的表达情况,并分析各指标表达与GIST生物学行为之间的关系以及Maspin与uPA、VEGF、VEGF-C表达的相关性。结果 42例GIST组织中,Maspin、uPA、VEGF和VEGF-C蛋白的表达率分别为61.9%(26/42)、64.3%(27/42)、59.5%(25/42)和54.8%(23/42)。逆转录PCR检测显示,Maspin、uPA、VEGF和VEGF-C mRNA在GIST组织中均有表达,且与其相应蛋白表达的趋势基本一致。随着GIST侵袭危险性增加,Maspin表达显著降低,uPA蛋白及VEGF、VEGF-C表达均显著增加(P<0.05),而uPA mRNA表达无显著性差异(P>0.05)。随着GIST出现复发转移,Maspin表达显著降低,VEGF和VEGF-C表达显著增加(P<0.05),而uPA表达无显著性差异(P>0.05)。Maspin与uPA、VEGF、VEGF-C表达均呈显著负相关(r=-0.429,P<0.05;r=-0.312,P<0.05;r=-0.292,P<0.05)。结论 Maspin表达下调或缺失促进uPA、VEGF和VEGF-C表达上调在GIST演进过程中可能扮演重要角色,4种蛋白均有可能是预测GIST生物学行为及预后的重要辅助因子;Maspin基因有可能是GIST靶向治疗新的研究靶点。

慢病毒载体构建稳定的maspin表达敲减食管癌细胞株

目的前期研究表明maspin在食管癌组织中表达下调。文中利用慢病毒载体介导短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)感染食管癌细胞株,诱导maspin基因沉默,构建稳定的maspin表达敲减细胞株。方法合成maspin特异shRNA序列(shMas1和shMas2),构建shMas1和shMas2慢病毒表达载体;利用293FT细胞包装病毒后,感染食管癌细胞株HKESC-2;经嘌呤霉素筛选获得稳定感染细胞株。定量PCR和免疫印迹法检测干扰效果。结果成功构建shMaspin的慢病毒表达载体;与野生型HKESC-2细胞比较,获得的稳定maspin表达敲减细胞株shMas1/HK2和shMas2/HK2生长特性无明显变化,其maspin mRNA及蛋白质表达水平均明显降低,maspin mRNA敲减效率分别为37.8%及58.2%,maspin蛋白质表达的相对抑制率分别为49%和53%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论成功构建了稳定的maspin表达敲减的食管癌细胞株shMas1/HK2和shMas2/HK2。

抑癌基因maspin在肝癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨抑癌基因maspin在肝癌组织中的表达及其临床意义。方法选取肝癌组织及其癌旁肝组织各32例,另选择正常肝脏组织30例作为对照,采用免疫组化法检测3种组织中maspin基因的表达情况,并分析maspin基因表达与肝癌临床参数的关系。结果肝癌组织maspin基因阳性率(28.1%)显著低于癌旁组织(62.5%)和正常肝组织(86.7%);肝癌组织中maspin基因表达阳性率与肿瘤分化程度、有无肝内外转移有关(P<0.05),与年龄、性别、肿瘤直径、TMN分期和有无门静脉侵犯无关(P>0.05)。结论 maspin基因在肝癌组织中呈低表达,其表达情况可作为判断肝癌进展情况和恶性程度的指标之一。

胃癌组织Maspin,uPA,MMP-7表达的意义

目的:观察胃癌及正常胃黏膜Maspin,uPA, MMP-7表达的意义．方法:应用免疫组化SP法检测胃管状腺癌30 例,胃印戒细胞癌30例,正常胃黏膜组织20例中Maspin,uPA,MMP-7的表达情况．结果:在胃管状腺癌中Maspin,uPA,MMP-7 阳性表达率分别为50％,70％和80％;胃印戒细胞癌中阳性表达率分别为46．7％,76．7％和 90％;正常胃黏膜组织中阳性表达率分别为 90％,35％和30％．Maspin的表达与浸润深度、淋巴结转移相关,而与肿块的大小和TNM分期无关．uPA和MMP-7的表达与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期相关,而与肿块的大小无关．Maspin的表达与uPA和MMP-7的表达呈负相关(P=0．012,r=-0．322;P=0．008,r= -0．341);uPA的表达与MMP-7的表达呈正相关 (P=0．034,r=0．274)．结论:Maspin在胃癌中表达下调,uPA和 MMP-7在胃癌中过表达,他们在胃癌的浸润转移中起重要作用,可作为反应胃癌病理生物学行为的有效指标．

RNA干扰maspin基因对胃癌细胞株MKN-28凋亡的影响

目的:探讨转染maspin特异性短发夹RNA(short hairpin RNA,shRNA)重组质粒对胃癌细胞株MKN-28凋亡的影响。方法:设计并合成针对maspin基因的shRNA,并将其与真核表达载体pGenesil-1.1连接,构建重组质粒pGenesil-maspin。应用RT-PCR和Western印迹法检测转染重组质粒后MKN-28细胞中maspin、bcl-2和bax mRNA及蛋白的表达变化,应用FCM法检测转染重组质粒对MKN-28细胞的细胞周期和细胞凋亡的影响。结果:成功构建maspin特异性shRNA重组质粒pGenesil-maspin1、pGenesil-maspin2及pGenesil-HK(阴性对照);pGenesil-maspin成功转染后可明显下调胃癌细胞MKN-28中maspin和bax mRNA及蛋白的表达水平(P<0.01),并上调bcl-2 mRNA和蛋白的表达水平(P<0.01);重组质粒转染后,MKN-28细胞的细胞周期呈现G0/G1期细胞减少(P<0.01),细胞凋亡率下降(P<0.01)。结论:外源性maspin shRNA转染MKN-28细胞后能下调maspin的表达,抑制胃癌细胞的凋亡,且使细胞周期分布发生改变;其分子机制可能与上调bcl-2和下调bax的表达有关。