Synergistic effect of pinellia total alkaloids and uncaria total alkaloids on anticonvulsant action in mice and rats

Aim To investigate the synergistic effect of the combination of pinellia total alkaloid （PTA） and uncaria total alkaloid （UTA）, and explore the mechanism of anticonvulsant action. Methods Anticonvulsant and toxic effect profiles of combinations of PTA with UTA, alone and at three fixed ratios of 1：4, 1 ：1, 4：1, were evaluated in maximal electroshock （MES）-induced seizures and acute toxicity test in mice. Respective ED50 and LD50 were calculated with Bliss＇s method. Their synergistic effect were evaluated by isobolographic analysis and allowed the determination of benefit indices （BI） for respective combinations. The model of convulsive rats kindled by penicillin topically injected into cortex was used to investigated the content of Glu, Asp, Gly and GABA in hippocampus using high performance liquid chromatography （HPLC）. Results Combinations of PTA and UTA at the ratio of 4：1 were synergistic in MES test and antagonistic in acute toxicity test, showing the best profile for combinations of PTA with UTA. In contrast, the ratios of 1 ：4 and 1 ： 1, despite synergistic in MES test, were additive in acute toxicity test. The 4：1 combination and two drugs alone significantly decreased Glu level and increased GABA level in the hippocampus, but the GABA level in the 4：1 combination group was higher than that in the two drugs alone groups. They did not have significant influence on the levels of ASp and Gly. Conclusion Combinations of PTA and UTA at 4：1 ratio demonstrated synergistic effect in anticonvulsant action and antagonistic effect in toxicity. The anticonvulsant mechanism might be related to decreasing the excitability of Glutamatergic neurons and increasing the inhibition of GABAergic neurons.

广西钩藤属植物中总生物碱含量变化研究

对广西不同品种、不同产地、不同部位、不同采收时间的钩藤进行了总生物碱含量变化研究 ,为充分开发利用广西钩藤资源提供了试验依据。

钩藤总碱与夏天无总碱合用对大鼠脑缺血再灌注的影响

目的观察钩藤总碱(钩藤)与夏天无总碱(夏天无)合用对脑缺血/再灌注损伤的保护作用。方法各组造模前灌胃给药每天2次,共5次,末次给药30min后,采用大鼠大脑中动脉缺血(2h)/再灌注(22h)制作脑缺血损伤模型,造模12h后再给药1次,并进行神经病学评分,检测脑梗塞范围及脑组织水含量,大鼠脑组织中一氧化氮合酶(NOS)、超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量的变化。结果两药合用可降低大鼠脑缺血/再灌注后神经病学评分及梗塞范围,降低脑组织MDA含量、NOS活性及升高SOD活性(P<0.05),联合用药的效应较单用钩藤或夏天无增强(P<0.05),而对中枢抑制作用较单用钩藤减轻。结论钩藤和夏天无联合应用对脑缺血/再灌注损伤有保护作用,其作用机制与抑制脑NOS活性、提高SOD活性及减少脑神经细胞脂质过氧化损伤有关。

酸性染料比色法测定钩藤的总生物碱含量

目的:探讨钩藤中总生物碱含量测定的方法。方法:采用酸性染料比色法测定钩藤中总生物碱含量。结果:酸性染料比色法的显色条件为pH3.6缓冲液5.0 ml,溴甲酚绿液5.0 ml;氯仿萃取三次,每次4.0 ml,每次萃取振摇2 min,静置5 min。钩藤碱在6.018μg～108.324μg范围内呈线性关系,回收率平均值97.19%,RSD=1.34%(n=6)。结果:该方法灵敏度高,准确度好、重现性好。

钩藤和莱菔子生物碱抗高血压血管内皮细胞损伤效应

目的探讨钩藤总生物碱配伍莱菔子水溶性生物碱抗高血压大鼠血管内皮细胞损伤的效应及初步机制研究。方法采用腹腔注射N-硝基左旋精氨酸(L-NNA)方法制备大鼠高血压模型;采用无创性套尾法测定大鼠清醒状态下尾动脉收缩压;采用酶联免疫吸附法测定大鼠血浆血管性血友病因子(vWF)、内皮素-1(ET-1)、细胞间黏附分子1(ICAM-1)、血管细胞黏附分子1(VCAM-1)和P选择素(P-S)。结果钩藤总生物碱配伍莱菔子水溶性生物碱对L-NNA诱导的高血压大鼠有显著降压效用(P<0.05),并能降低高血压大鼠血浆vWF、ET-1、ICAM-1、VCAM-1和P-S水平(P<0.05)。结论钩藤总生物碱配伍莱菔子水溶性生物碱具有良好降压和血管内皮保护效应,其机制与抑制血管内皮细胞分泌黏附因子、减轻血管壁炎症反应有关。

钩藤碱、钩藤总碱合用双肼苯哒嗪对清醒动物降压效应的研究

钩藤碱６０ｍｇ·ｋｇ－１合用双肼苯哒嗪３ｍｇ·ｋｇ－１十二指肠给药，１ｈ时降低清醒大鼠血压２３％，降低高血压模型大鼠血压２８％，降压幅度超过一药单用及等剂量钩藤总碱与双肼苯哒嗪合用的幅度，合并用药可克服单用后药的加快心率作用。双肼苯哒嗪０．８ｍｇ·ｋｇ－１ｉｖ加快心率，增加分钟心肌张力—时间指数，合用钩藤碱１５ｍｇ·ｋｇ－１增强了前药的降压效果，而心率、分钟心肌张力—时间指数未见明显变化。

毛钩藤不同采收期总生物碱含量变化研究

目的通过测定不同采收期毛钩藤中总生物碱含量的变化,研究毛钩藤的最佳采收期。方法以p H=3.4的醋酸-醋酸钠缓冲溶液条件下用溴甲酚绿与生物碱显色后在410 nm波长处用紫外-可见分光光度计进行测定[1]。结果毛钩藤中的总生物碱在全年气温相对较高时段呈现含量相对较低,而在气温相对较低时段呈现含量相对较高现象。结论毛钩藤药材的采收期应选择在每年气温相对较低的时段采收,质量相对较好。

钩藤总生物碱提取工艺研究

目的:优选钩藤总生物碱的提取工艺。方法:以钩藤总碱含量和提取液干膏率为综合评价指标,对乙醇用量、浓度、提取时间及次数四因素进行正交考察。结果:钩藤总碱的最佳提取工艺为10倍量75%乙醇提取3次,提取时间2h。结论:提取工艺可稳定可行。

钩藤总生物碱对慢性束缚应激小鼠的抗抑郁作用

目的研究钩藤总生物碱(TAU)对慢性束缚应激(CRS)抑郁模型小鼠的抗抑郁作用。方法将小鼠束缚在特制的离心管内,每天8 h、连续10 d,制作小鼠抑郁模型,并灌胃给予不同剂量的TAU(80、40、20 mg/kg)和氟西汀(Fluoxetine,FLU 10 mg/kg)治疗。以自主活动实验、强迫游泳实验和糖水偏好实验评价各组小鼠抑郁行为,用ELISA法测定小鼠血清皮质酮(CORT)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和NO的含量。结果 TAU能显著增加小鼠体质量,缩短抑郁模型小鼠强迫游泳不动时间及提高小鼠糖水偏好值,改善小鼠抑郁行为;且TAU能显著降低抑郁小鼠血清CORT、TNF-α和NO水平。结论 TAU具有明显的抗抑郁作用,其机制可能是通过调节下丘脑-垂体-肾上腺(HPA)轴功能,减少血清中TNF-α和NO含量。

钩藤中不同成分降压作用的差异

目的 :比较钩藤中提取的异钩藤碱、钩藤碱、钩藤总碱及非生物碱部分的降压作用。方法 :大鼠麻醉后经颈总动脉插管记录外周血压和经股静脉微量输注实验用药。结果 :实验表明钩藤中 4种成分的降压强度为异钩藤碱(4 2 .0 % ) >钩藤碱 (32 .1% ) >钩藤总碱 (2 1.3% ) >钩藤非生物碱 (12 .4% )。结论 :提示钩藤中主要降压成分为异钩藤碱和钩藤碱。

大叶钩藤总生物碱抗抑郁作用初步研究

目的:研究大叶钩藤总生物碱的抗抑郁活性。方法:采用小鼠悬尾实验、小鼠强迫游泳实验和利血平致抑郁小鼠自主活动实验,考察大叶钩藤总生物碱的抗抑郁活性。结果:大叶钩藤总生物碱低(50mg/kg)、中(100mg/kg)、高(200mg/kg)剂量组均能减少小鼠悬尾和强迫游泳不动时间,并能增加利血平致抑郁小鼠自主活动次数,与空白对照组、模型对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:大叶钩藤总生物碱具有明显的抗抑郁作用。

大孔吸附树脂分离提取大叶钩藤总生物碱

选择6种大孔吸附树脂(AB-8,NKA-9,NKA-Ⅱ,DA-201,D-101,D 001)分离提取大叶钩藤(Uncar iam acrophy llaW all.)中的总生物碱,考察大孔吸附树脂对大叶钩藤总生物碱的吸附能力。结果筛选出D-101的吸附效果最好,静态吸附容量为112.5m g/m l,动态吸附容量为82.7 m g/m l,选用D-101大孔吸附树脂能很好地提取分离大叶钩藤总生物碱。提取大叶钩藤总生物碱时,用8倍树脂体积的0.08m ol/L盐酸作洗脱剂,成本低、总生物碱洗脱完全,工艺稳定性试验产品含量达36.7%。

钩藤总碱对大鼠肝脏和肝功能的影响研究

目的:研究钩藤总碱对大鼠肝脏和肝功能的影响,为探讨钩藤总碱肝毒性提供实验依据。方法:选用健康7周龄Wistar大鼠40只,雌雄各半,随机分为对照组、钩藤总碱小剂量组、中剂量组和大剂量组,分别给予生理盐水、2.5mg/kg、10mg/kg和15mg/kg钩藤总碱水溶液,于给药后第12周处死取颈动脉血,检测肝脏各项指标。结果:各组大鼠肝指数差异比较有统计学意义(P<0.05),钩藤总碱各剂量组肝指数均高于对照组,其中钩藤总碱大剂量组肝指数最高;各组大鼠血脂指标TG、LDL-C和HDL-C差异比较无统计学意义(P>0.05);钩藤总碱各剂量组ALT和AST水平均高于对照组,其中钩藤总碱大剂量组ALT和AST水平最高,而各组TP、ALB和T-BIL差异比较无统计学意义(P>0.05)。结论:钩藤总碱具有肝毒性作用,故在临床治疗时应合理用药。

正交设计筛选钩藤总碱骨架缓释片的制备工艺研究

目的筛选钩藤总碱骨架缓释片的最佳制备工艺条件。方法应用正交设计法考察不同因素水平对钩藤总碱骨架缓释片释放速率的影响。结果乙基纤维素(EC)的黏度对本制剂的释药影响不大,EC用量增加,释药速率减慢,致孔剂用量增加,释药速率加快。结论钩藤总碱骨架缓释片的释药过程符合H iguchi方程,影响药物释放的主要因素是EC的用量和致孔剂的用量。

钩藤总生物碱提取溶剂的选择探讨

[目的]选出提取钩藤总生物碱的适宜溶剂 ;[方法]用不同的溶剂对钩藤的总生物碱进行提取 ;[结果]溶剂不同 ,提取的总生物碱量不同 ;

钩藤总生物碱的含量测定研究

目的:建立测定钩藤总生物碱含量的方法。方法:用紫外分光光度法测定钩藤总生物碱提取物中的钩藤总生物碱含量。采用高效色谱法测定钩藤总生物碱提取物中的钩藤碱含量。结果:钩藤碱的进样量0.168~0.840μg,其峰面积与进样量具有良好的线性关系(r=0.999 5),平均回收率98.98%,RSD=1.31(n=5)。结论:该方法灵敏、准确,可用于钩藤总生物碱的含量测定。

贵州不同产地钩藤的总生物碱含量测定

为贵州钩藤总生物碱含量的测定及质量标准制定提供参考,以钩藤碱为对照品,采用酸性染料比色法在pH 3.6的邻苯二甲酸氢钾-盐酸缓冲液条件下,于波长413nm处测定总生物碱的含量。结果表明:钩藤碱含量(x)在0.022 4~0.358 4mg与吸光度(y)有良好的线性关系,其回归方程y=0.500 1x-0.043 4,R^2=0.99 9;平均回收率为97.11%,RSD为1.93%,该方法灵敏度高,准确度好,重现性好。贵州不同来源钩藤的总生物碱平均含量存在差异,即贵州黎平无柄果钩藤(2.218 3 mg/g)>贵州开阳钩藤(1.834 9mg/g)>贵州剑河无柄果钩藤(1.456 9mg/g)>贵州黎平钩藤(1.089 5mg/g)。

钩藤地上部营养器官总生物碱积累规律研究

【目的】研究钩藤[Uncaria rhynchophylla(Miq.)Miq. ex Havil.]地上部营养器官总生物碱含量变化规律,阐明总生物碱积累及源库关系,确认钩藤药材最佳采收部位及采收期,改变仅以带钩枝条为药材的传统方式,从而避免钩藤药材资源的浪费,同时为钩藤总生物碱研究提供基础资料。【方法】运用酸性染料比色法测定钩藤主茎、侧枝、叶及钩总生物碱含量,从而阐明总生物碱的积累规律。【结果】钩藤地上部营养器官中总生物碱积累的最大值分布在6—9月及11月,钩中总生物碱积累最大值为6.599 mg/g、主茎为7.726 mg/g、侧枝为6.880 mg/g、叶为6.890 mg/g,且钩中总生物碱含量在钩藤营养生长期表现为升高趋势,在生殖生长期则呈降低趋势,而全年积累均值由大到小表现为主茎、钩≈侧枝、叶;综合各营养器官基本生理功能与其总生物碱积累规律,从而推测叶为生物碱合成源,主茎及侧枝作为运输通道,钩为库;丹寨基地不同生长年限钩藤中总生物碱积累由大到小表现为三年生、五年生、六年生、四年生,长顺基地为四年生、五年生、六年生、三年生,而3—12月地上部营养器官中总生物碱积累总量较高的是:7月8.911 mg/g、11月8.750 mg/g、6月8.237 mg/g。【结论】钩藤地上部营养器官均可作为药材采收,其采收期应在6月、7月及11月。

Cocktail探针药物法评价钩藤总生物碱对大鼠CYP450亚型的影响

目的建立同时测定细胞色素P450(CYP450)亚型CYP1A2、CYP2C9、CYP2E1和CYP3A4活性的Cocktail探针药物溶液的高效液相色谱(HPLC)检测方法,并利用该方法研究口服钩藤总生物碱(TAU)对上述4种亚酶活性的影响。方法以咖啡因、甲苯磺丁脲、氯唑沙宗和氨苯砜分别作为CYP1A2、CYP2C9、CYP2E1和CYP3A4的探针底物,以卡马西平作为内标物质,建立了乙腈-0.5%甲酸的梯度洗脱法同时测定4种探针药物的血药浓度,并对该方法进行方法学考察。雄性SD大鼠随机分为3组,分别给予空白溶剂(0.5%羧甲基纤维素)以及40、80 mg/kg的TAU,连续灌胃给药10 d,在第11天给予Cocktail探针药液后于不同的时间点采集大鼠血样。利用HPLC测定大鼠血浆中该4种探针药物浓度,血药浓度-时间数据采用DAS2.0软件进行药动学分析。结果与空白对照组比较,80 mg/kg的TAU给药组灌胃10 d后,咖啡因的AUC0-t、AUC0-∞、MRT0-t、MRT0-∞和t1/2z均显著减小,CLz/F均显著增大;甲苯磺丁脲的AUC0-t和AUC0-∞均显著减小,CLz/F显著增大;氯唑沙宗的AUC0-t、AUC0-∞、MRT0-t、MRT0-∞和t1/2z减小,CLz/F增大,但差异无统计学意义;氨苯砜的药代学参数基本无变化。40 mg/kg的TAU给药组与空白组比较,该4种探针底物的药动学参数基本无变化。结论本方法准确,灵敏度较高,适用于同时评价药物对CYP1A2、CYP2C9/11、CYP2E1和CYP3A4该4种亚酶的影响。80 mg/kg的TAU给药组给药10 d后对大鼠肝药酶CYP1A2、CYP2C9和CYP2E1均存在不同程度的诱导作用,对CYP3A4的活性基本无影响,而40 mg/kg的TAU给药组对以上4种亚酶基本无影响。提示TAU在临床使用过程中,尤其是与其他药物联用时,应注意调整用药剂量,防止药物相互作用可能造成的不良反应;本文为临床合理配伍使用该药提供参考。

正天胶囊提取工艺的研究

目的 :探讨正天胶囊 (白芍、钩藤、川芎、麻黄、细辛等 )的提取工艺。方法 :利用均匀设计法安排实验 ,以滴定测得的钩藤总碱的提取率和干膏得率为指标成分进行评价 ,利用多元回归 ,确定最佳醇提工艺参数 ;和以高效液相色谱法测得的芍药苷的含量和干膏得率为指标 ,采用正交试验法考察水煮提取工艺。结果 :最佳醇提的工艺条件为 90 %乙醇 8倍量浸渍 72h ,最优水煮工艺为加水量 1 4倍煎煮 3次 (2h ,1h ,1h)。结论 :利用最佳工艺条件能充分有效地提取药材中的有效成分。