Urantide对ApoE^(-/-)小鼠动脉粥样硬化合并代谢相关脂肪性肝病中α-SMA、OPN的影响

目的观察Urantide对ApoE^(-/-)小鼠代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)中α-SMA、OPN的影响,探讨其在动脉粥样硬化(AS)合并MAFLD中对肝纤维化的治疗作用。方法将ApoE^(-/-)小鼠分为AS模型组、辛伐他汀组、Urantide低、中、高剂量组,C57BL/6为对照组;对照组和AS模型组给予生理盐水20 mg/kg、辛伐他汀组给予辛伐他汀5 mg/kg、Urantide组分别给予Urantide 20 mg/kg、30 mg/kg、40 mg/kg,治疗14d后,HE及油红O染色观察肝脏病理改变;Masson三色染色观察肝脏胶原纤维表达;免疫组化法检测肝脏α-SMA表达及定位;RT-qPCR检测UⅡ/UT系统基因变化;Western blotting检测肝内α-SMA、OPN、UⅡ/UT系统的表达。结果与对照组相比,AS模型组小鼠肝脏出现脂肪变性,油红O染色出现大量脂滴浸润,窦周间隙出现胶原纤维沉积,肝脏α-SMA、OPN、UII、GPR14蛋白表达升高;UII、GPR14 mRNA水平升高;经Urantide治疗后,肝脏脂滴减少、脂肪性病变显著改善,胶原纤维减少,UⅡ/UT系统和α-SMA、OPN表达显著降低。结论Urantide可能通过拮抗UⅡ/UT系统从而改善ApoE^(-/-)小鼠肝脏脂肪变性,达到治疗肝纤维化的作用。

urantide对实验性动脉粥样硬化大鼠胸主动脉损伤的影响

目的:观察urantide对动脉粥样硬化(AS)大鼠胸主动脉损伤的影响,探讨其防治AS的作用机制。方法:采用高脂饲料喂养及腹腔注射维生素D3损伤动脉内膜的方法建立大鼠AS模型,随机分为正常组、AS模型组、阳性药组及urantide组。全自动生化分析仪检测大鼠血清中的甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)和Ca2+的水平;胸主动脉HE染色观察各组大鼠胸主动脉形态学变化。RT-PCR方法检测大鼠胸主动脉中尾加压素Ⅱ(UⅡ)及其受体G蛋白偶联受体14(GPR14)mRNA的表达。结果:与正常组比较,AS模型组大鼠血清中Ca2+、TG、TC、HDL及LDL水平明显升高(P<0.01);urantide组大鼠在给药后,血清中上述各项指标均随给药时间的延长呈现逐渐降低的趋势,达到或接近阳性药组大鼠的水平,与AS模型组比较差异有统计学意义(P<0.01)。与正常组比较,AS模型组大鼠胸主动脉出现典型AS病变;与AS模型组比较,urantide组大鼠AS病理改变逐渐减轻。与正常组比较,AS模型组大鼠UⅡ及GPR14mRNA的表达水平增高(P<0.01);与AS模型组比较,urantide组大鼠随给药时间的增加,UⅡ及GPR14mRNA表达水平降低(P<0.01)。结论:urantide对AS大鼠胸主动脉损伤有一定的保护作用。

urantide对实验性动脉粥样硬化大鼠肝脏的影响

目的观察urantide对动脉粥样硬化(AS)大鼠肝脏的影响,探讨其防治AS的作用机制。方法采用高脂饲料喂养及腹腔注射维生素D3损伤动脉内膜的方法建立大鼠动脉粥样硬化模型,随机分为正常组、AS组、阳性药组、urantide组,通过HE染色方法观察各组肝脏的病变情况。结果 AS组肝系数明显增加(P<0.01);urantide组肝系数较AS组明显减少(P<0.01)。AS组大鼠肝脏脂肪变性细胞数≥50%,为Ⅳ级重度脂肪变性;而urantide组肝细胞脂肪变性逐渐减少,变形细胞数≥25%(<50%),为Ⅲ级中度脂肪变性,接近阳性药组水平。结论 urantide对AS大鼠肝脏有一定的保护作用,为临床应用urantide治疗AS提供实验依据。

Urantide对动脉粥样硬化大鼠肝功能及组织形态学的影响

目的:探讨urantide对动脉粥样硬化(AS)大鼠肝功能及组织形态学的影响。方法:采用腹腔注射维生素D3(VD3)及高脂饮食的方法复制Wistar大鼠AS模型,随机分为正常对照组、AS模型组、阳性药组和uran-tide组。生化分析仪检测各组大鼠肝功能指标;HE染色观察大鼠胸主动脉和肝脏的病理学变化;RT-qPCR和Western blot法检测大鼠肝脏中尾加压素Ⅱ(UII)及其受体GPR14的mRNA和蛋白表达水平。结果:AS模型组大鼠血清中丙氨酸转氨酶(ALT)、天冬氨酸转氨酶(AST)、γ-谷氨酰转移酶(γ-GT)、乳酸脱氢酶(LDH)、总胆红素(TBIL)、间接胆红素(IBIL)和碱性磷酸酶(ALP)水平较正常对照组显著升高(P <0.05);urantide组大鼠上述各项指标较模型组均显著降低(P <0.05);各组血清中直接胆红素(DBIL)、总蛋白(TP)、球蛋白(GLB)和白蛋白(ALB)水平均无显著变化。Urantide可延缓AS大鼠肝细胞脂肪变性,修复肝细胞损伤。AS组大鼠肝脏中UII和GPR14mRNA及蛋白表达水平均较正常组显著增高(P <0.05);随着给药时间的延长,urantide治疗组大鼠肝脏中UII和GPR14 mRNA及蛋白表达水平较AS模型组显著降低(P <0.05)。结论:Urantide可明显减轻AS大鼠肝脂肪变性所引起的肝功能损伤。

Urantide对实验性动脉粥样硬化大鼠白细胞介素-6表达的影响

目的观察Urantide对大鼠动脉粥样硬化白细胞介素-6(IL-6)表达的影响。方法采用高脂饲料喂养及腹腔注射VD3损伤动脉内膜的方法建立大鼠动脉粥样硬化模型,随机分为4组:对照组、模型组、氟伐他汀组、Urantide组,免疫组织化学法检测主动脉壁内IL-6的表达水平,以Introduction to Image-Proplus 6.0软件进行图像分析;体外培养的血管平滑肌细胞(VSMC),随机分为4组:对照组、尾加压素Ⅱ组、氟伐他汀组、Uran-tide组,酶联免疫吸附法检测各组IL-6的浓度。结果在胸主动脉内膜及中膜斑块内,模型组IL-6阳性颗粒较对照组微量表达,Urantide各实验组及氟伐他汀均可增加IL-6的表达;Urantide各浓度组对VSMC培养上清中IL-6的表达均有下调趋势。结论 IL-6在体内和体外的实验结果并不相一致,体内实验表现为抗炎症性,Urantide对其表达无下调作用;而体外实验其表现为致炎性,Urantide对IL-6表达有下调作用。

Urantide对心肌缺血性损伤的保护作用

研究UT受体拮抗剂——urantide对心肌缺血性损伤的保护作用及其机制。小鼠心肌缺血采用皮下注射（sc）异丙肾上腺素（Iso）法,观察心电图ST段的变化,测定小鼠血清中乳酸脱氢酶（LDH）、一氧化氮合酶（NOS）的活性以及丙二醛（MDA）、一氧化氮（NO）的含量,HE染色观察心肌组织病理损伤情况。建立乳鼠原代心肌细胞缺氧再给氧模型,采用ELISA法观察urantide对细胞培养上清液中肌钙蛋白I（cTnI）的影响,比色法测LDH活性;MTT法观察细胞存活率及激光共聚焦检测细胞内钙离子浓度的变化。实验揭示urantide（3-30μg·kg^-1）可明显抑制小鼠心电图ST段的抬高;urantide（10及30μg·kg^-1）可显著降低小鼠血清中LDH活性和MDA含量,明显升高NOS活性和NO含量,同时减轻异丙肾上腺素诱导的心肌病理损伤。在乳鼠原代心肌细胞缺氧再给氧模型中,urantide（1×10^-6和1×10-7mol·L^-1）能明显增加细胞存活率,降低培养上清液中LDH的活性;urantide（1×10^-6--1×10^-9mol·L^-1）能显著降低细胞培养上清液中cTnI的增高和细胞内钙离子浓度的上升。上述结果表明,urantide对心肌缺血及缺氧再给氧所致心肌细胞的损伤具有一定的保护作用,其作用机制可能与增加NOS活性、促进NO合成及抑制钙超载有关。

Urantide对实验性动脉粥样硬化大鼠C反应蛋白表达的影响

目的观察urantide对动脉粥样硬化大鼠C反应蛋白表达的影响,探讨其防治动脉粥样硬化的作用机制。方法采用高脂饲料喂养及腹腔注射维生素D3损伤动脉内膜的方法建立大鼠动脉粥样硬化模型,随机分为四组:对照组、模型组、氟伐他汀组、urantide组,免疫组织化学法检测主动脉壁内C反应蛋白的表达水平。体外培养血管平滑肌细胞,随机分为四组:对照组、尾加压素Ⅱ组、氟伐他汀组、urantide组,酶联免疫吸附法检测各组培养上清中C反应蛋白浓度。结果在胸主动脉内膜及中膜斑块内,模型组C反应蛋白阳性颗粒较对照组表达明显增加,urantide组及氟伐他汀组C反应蛋白的表达减少;urantide各浓度组对血管平滑肌细胞培养上清中C反应蛋白的表达均有下调趋势,其中10-6mol/L urantide下调作用最强(P<0.01)。结论尾加压素Ⅱ在动脉粥样硬化中能促进炎症反应标志因子C反应蛋白的大量表达,而这种促进作用可以被尾加压素Ⅱ受体拮抗剂urantide抑制,该研究为临床应用urantide治疗动脉粥样硬化提供新的视角和实验依据。

urantide对大鼠血管平滑肌细胞增殖的影响

目的:探讨在尾加压素Ⅱ(UⅡ)受体拮抗剂urantide干预下,UⅡ在大鼠血管平滑肌细胞(VSMC)中的表达,阐明其可能的作用机制。方法:采用贴块法对大鼠胸主动脉血管平滑肌细胞进行体外培养,实验分为正常对照组(C组)、UⅡ组(M组)、阳性药对照组(Flu组)及urantide干预组(浓度分别为1×10-10、1×10-9、1×10-8、1×10-7和1×10-6 mol·L-1),采用MTT法检测VSMC增殖活性,采用流式细胞术测定VSMC增殖指数(PI)及S期细胞分数(SPF)。结果:与正常对照组比较,UⅡ组在各时间点VSMC增殖活性均增加(P<0.01);PI及SPF明显增加(P<0.01);与UⅡ组比较,1×10-10～10-6 mol·L-1urantide组VSMC增殖活性明显降低(P<0.05或P<0.01),PI及SPF均明显减少(P<0.05或P<0.01),其中以1×10-6 mol·L-1urantide作用最明显。结论:urantide可阻断UⅡ对动脉粥样硬化(AS)主要病变细胞VSMC的促丝裂作用,本研究为临床应用urantide治疗AS提供了新的视角和实验依据。

Urantide干预下转化生长因子-β_1对动脉粥样硬化大鼠羟脯氨酸表达的影响

目的研究在尾加压素Ⅱ(UⅡ)受体拮抗剂Urantide干预下,转化生长因子-β1(TGF-β1)在大鼠动脉粥样硬化(AS)胸主动脉中的表达情况,探讨在AS时TGF-β1与羟脯氨酸(HYP)之间的关系。方法采用高脂饲料喂养及腹腔注射VD3损伤动脉内膜的方法建立大鼠AS模型,随机分为4组:对照组、模型组、氟伐他汀组、Urantide组,生物化学方法检测血清及尿液中HYP含量;免疫组织化学法检测主动脉壁内TGF-β1的表达水平。结果 Urantide组血清中HYP在给药3 d后即明显低于模型对照组,7 d进一步降低,14 d时血清中HYP含量降低接近于阳性药对照组(P<0.01)。在胸主动脉内膜及中膜斑块内,Urantide各给药组TGF-β1阳性染色强度和范围较模型对照组明显增强(P<0.01)。结论随Urantide给药时间的增加,TGF-β1使动脉壁内的胶原蛋白分泌减少,缓解大鼠AS症状。

UT受体拮抗剂urantide对急性肝功能衰竭小鼠肝组织NF-κB信号通路分子的影响

目的探讨urantide对急性肝功能衰竭(ALF)小鼠肝内NF-κB信号通路分子的影响。方法 24只雄性BALB/c小鼠被随机分为4组(6只/组),分别行urantide或0.9%氯化钠溶液尾静脉注射预处理。半小时后,以脂多糖(LPS)/D-半乳糖胺(D-GalN)或0.9%氯化钠溶液腹腔注射进行攻击。12h后采集肝组织标本,分别进行胞质蛋白和核蛋白抽提;蛋白质表达采用Western印迹方法;NF-κB与DNA的结合活性通过EMSA检测。结果胞质IκB-α蛋白水平在4组之间的差异无统计学意义(P>0.05),而p-IκB-α蛋白水平在模型组(urantide-,LPS/D-GalN+)和预处理模型组(urantide+,LPS/D-GalN+)较正常对照组(urantide-,LPS/D-GalN-)和预处理对照组(urantide+,LPS/D-GalN-)显著升高[(0.63±0.10)、(0.31±0.05)比(0.14±0.02)、(0.14±0.01),P<0.01],且在预处理模型组较模型组显著降低[(0.31±0.05)比(0.63±0.10),P<0.01];NF-κBp65蛋白水平在模型组和预处理模型组较正常对照组和预处理对照组显著升高[(1.11±0.32)、(0.69±0.14)比(0.10±0.03)、(0.13±0.01),P<0.01],而与模型组相比,预处理模型组p65蛋白水平降低[(0.69±0.14)比(1.11±0.32),P<0.05];NF-κB与DNA的结合活性在模型组和预处理模型组较正常对照和预处理对照组显著升高[(4.68±1.03)、(1.60±0.37)比(1.00±0.16)、(1.01±0.10),P<0.01],而与模型组相比,预处理模型组NF-κB的DNA结合活性则显著降低[(1.60±0.37)比(4.68±1.03),P<0.01]。结论 UT受体拮抗剂urantide可抑制LPS/D-GalN攻击诱导的NF-κB通路分子的表达和活性。

Urantide减轻高脂饮食引起的大鼠非酒精性脂肪肝损伤

目的探讨多肽化合物urantide对高脂饮食引起动脉粥样硬化大鼠非酒精性脂肪肝的保护作用。方法 72只SD大鼠随机分为:对照组(Con)、模型组(Mod)[用腹腔注射维生素D3(VD3)及高脂饮食方法复制大鼠动脉粥样硬化模型]、阳性药组(辛伐他汀,Sim)、urantide 3(Ut 3)、 7(Ut 7)及14 d组(Ut 14),给药剂量为30μg/kg。给药结束后,检测血清学及肝功能指标;HE染色胸主动脉、肝脏;RT-qPCR检测肝脏中尾加压素Ⅱ(UⅡ)、G蛋白偶联受体14(GPR14)的mRNA表达;免疫组织化学检测肝组织UⅡ、GPR14蛋白质表达。结果模型组大鼠血清中谷丙转氨酶氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)等水平较对照组显著升高(P<0.05);urantide治疗组大鼠上述各项指标较模型组均显著回降(P<0.05);模型组大鼠肝脏中UⅡ及GPR14 mRNA与蛋白表达均较对照显著增高(P<0.05);与模型组大鼠相比,urantide治疗组随着给药时间的增加,UⅡ及GPR14 mRNA与蛋白表达显著回降(P<0.05)。结论 Urantide对高脂饮食所引起动脉粥样硬化大鼠非酒精性脂肪肝具有明显的保护作用。

Urantide对心肌缺血/再灌注损伤的保护作用

目的研究UT受体(urotensinⅡreceptor,UTS2R)拮抗剂——urantide对心肌缺血/再灌注(I/R)损伤的保护作用及其机制。方法大鼠心肌缺血/再灌注损伤采用冠状动脉左前降支结扎和松开法(LAD法)。实验大鼠随机分为6组:假手术组、模型组、urantide3、10、30μg.kg-13个剂量组,以及1.6mg·kg-1维拉帕米(Verapamil,Ver)阳性药对照组。除假手术组外,其余组别大鼠均实施30min缺血,60min再灌注。受试药于缺血前10min经舌下静脉给药,记录心肌缺血/再灌注过程中各组心率和心电图ST段变化值。实验结束后,测定大鼠血清中MDA、NO的含量以及NOS、LDH的活性;取心脏行伊文思兰和TTC双染色,计算IS/AAR。另取一批大鼠,实验方法同前。实验结束后剪取左心室缺血区,提取蛋白后采用Westernblot方法检测iNOS的蛋白表达情况。结果urantide(10,30μg.kg-1)对心率无明显影响,但可明显抑制缺血/再灌注后心电图ST段的抬高;明显降低血清中MDA的含量和LDH的活性,明显升高血清中NO总量和总的NOS活性;同时明显降低IS/AAR。3μg.kg-1urantide预处理对上述指标均无影响。Westernblot显示urantide(10,30μg.kg-1)能抑制iNOS的表达。结论urantide对心肌缺血/再灌注损伤具有保护作用,作用机制可能与抗脂质过氧化、促进NO合成有关。

Urantide对动脉粥样硬化大鼠肝细胞外调节蛋白激酶1/2的作用及机制

目的:观察Urantide对动脉粥样硬化(AS)大鼠肝中细胞外调节蛋白激酶1/2(ERK1/2)表达的影响,探讨AS大鼠脂肪肝中调控ERK1/2的分子机制。方法:维生素D3(VD3)腹腔注射及特制高脂饲料饮食建立大鼠AS模型,随机分为正常组、AS组、辛伐他汀组、Urantide组。H-E染色观察大鼠胸主动脉、肝的形态学改变;生化检测大鼠血清中总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)的含量;免疫印迹法检测各组大鼠肝组织中尾加压素Ⅱ(UⅡ)、G蛋白偶联受体14(GPR14)、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)、ERK1/2蛋白质表达水平;免疫荧光法检测各组大鼠肝细胞中p-ERK1/2的表达水平。结果:与正常组相比,AS组大鼠胸主动脉出现典型的AS病理学改变,肝出现典型的脂肪变性;AS组大鼠血清中TC、TG、LDL含量显著升高,HDL含量显著降低;大鼠肝中UⅡ、GPR14、p-ERK1/2、ERK1/2的蛋白表达水平显著升高。与AS组相比,辛伐他汀组及Urantide组大鼠肝的脂肪变性明显减轻;肝中UⅡ、GPR14、p-ERK1/2蛋白表达显著降低,ERK1/2蛋白表达水平无显著变化。结论:Urantide可通过抑制UⅡ/GPR14的生物学效应抑制ERK1/2的活化进而达到治疗脂肪肝的作用。

urantide抑制动脉粥样硬化大鼠单核细胞趋化蛋白-1的表达

目的研究urantide对动脉粥样硬化(AS)大鼠胸主动脉及血管平滑肌细胞(VSMC)中单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)的表达的影响。方法 (1)在体实验:采用给予高脂饮食及ip给予维生素D3制备AS模型。AS大鼠分别尾静脉注射urantide 30μg.kg-1.d-1,分为3,7和14 d组。于各实验结束时间点测量体质量,检测血中甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)和Ca2+;免疫组化法检测胸主动脉中MCP-1表达。(2)体外实验:贴块法制备的血管平滑肌细胞(VSMC)中加入尾加压素Ⅱ(UⅡ)10μmol.L-1+urantide 0.1,1,10 nmol.L-1,0.1和1μmol.L-1作用48 h,ELISA法检测细胞中MCP-1含量。结果 (1)在体实验:与AS模型组比较,只有14 d urantide给药组的体质量显著增加(P<0.05);3 d组、7 d组及14 d组血清中Ca2+,TG,TC,HDL及LDL均随给药时间的延长呈现逐渐降低的趋势(P<0.01),达到或接近阳性药氟伐他汀组水平;在大鼠胸主动脉内膜及中膜斑块内,与AS模型对照组相比,urantide 3 d组、7 d组及14 d组MCP-1阳性染色强度和范围均减少。(2)体外实验:urantide各浓度组对VSMC培养上清中MCP-1的表达均有下调趋势(P<0.05)。结论 urantide在大鼠动脉粥样硬化中可抑制炎症因子MCP-1的表达。

Urantide对动脉粥样硬化大鼠脂肪肝组织中STAT3磷酸化的影响

目的:探讨尾加压素Ⅱ受体拮抗剂Urantide对动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)大鼠脂肪肝组织中信号转导与转录激活因子3(signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)表达的影响。方法:30只雄性Wistar大鼠随机分为正常组、AS组、Urantide组。AS组和Urantide组均给予腹腔注射维生素D3(vitamin D3,VD3)150μg/(kg·d)连续3 d,并饲喂高脂饲料诱导AS,Urantide组在造模成功后给予尾静脉注射Urantide 30μg/(kg·d)连续2周。测量各组大鼠体重及肝重,计算肝系数;HE染色观察大鼠胸主动脉、肝的形态学改变;生化检测大鼠血清中丙氨酸氨基转移酶(alanine aminotransferase,ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(aspartate aminotransferase,AST)的含量。RT-qPCR方法检测肝脏STAT3 mRNA表达水平;免疫印迹检测肝脏STAT3、p-STAT3蛋白水平;免疫荧光法检测肝细胞中p-STAT3水平。结果:与正常组相比,AS组大鼠胸主动脉出现典型的AS病理学改变,肝出现典型的脂肪变性,AS组大鼠肝系数、血清ALT、AST含量以及肝p-STAT3的蛋白水平显著升高。与AS组相比,Urantide组大鼠AS病变和肝脂肪变性明显减轻;大鼠肝系数、血清ALT、AST含量以及肝p-STAT3水平显著降低。各组大鼠肝中STAT3的mRNA及蛋白表达水平无显著变化。结论:Urantide可通过抑制STAT3的活化缓解肝损伤,治疗脂肪肝。

Urantide对动脉粥样硬化大鼠氧化应激及Toll样受体4、髓样分化因子88、核因子κB信号通路表达的影响

目的探讨Urantide对动脉粥样硬化(AS)大鼠氧化应激及Toll样受体4/髓样分化因子88/核因子κB(TLR4/MyD88/NF-κB)信号通路表达的影响。方法采用腹腔注射维生素D3联合高脂饲料喂养SD大鼠构建AS模型,将成功建模的100只大鼠随机分为模型组、辛伐他汀组、Urantide3 d组、Urantide7 d组、Urantide14 d组,并同时设置正常对照组20只。辛伐他汀组给予辛伐他汀灌胃,连续14 d,Urantide组给予尾静脉注射Urantide,分别连续注射3 d、7 d、14 d,模型组及对照组给予生理盐水灌胃。干预结束后采用HE染色观察各组胸主动脉组织,检测各组血清白介素1β(IL-1β)、白介素6(IL-6)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)、超氧化物歧化酶(SOD)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、丙二醛(MDA)、活性氧(ROS)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平以及胸主动脉组织TLR4、MyD88、NF-κB蛋白和mRNA相对表达量。结果HE染色结果显示,模型组出现典型AS病理改变。相较于对照组,模型组、辛伐他汀组、Urantide组TC、TG、LDL-C、MDA、ROS、IL-1β、IL-6、TNF-α水平及TLR4、MyD88、NF-κB蛋白和mRNA相对表达量有所上升(均P<0.05),而HDL-C、SOD、GSH-Px水平有所下降(均P<0.05),且相较于模型组,辛伐他汀组和Urantide组TC、TG、LDL-C、MDA、ROS、IL-1β、IL-6、TNF-α水平及TLR4、MyD88、NF-κB蛋白和mRNA相对表达量更低,而HDL-C、SOD、GSH-Px水平更高(P<0.05),且Urantide组随着干预时间增加,TC、TG、LDL-C、MDA、ROS、IL-1β、IL-6、TNF-α水平及TLR4、MyD88、NF-κB蛋白和mRNA相对表达量更低,而HDL-C、SOD、GSH-Px水平更高(P<0.05)。结论Urantide可显著改善AS大鼠胸主动脉的病理损伤及氧化应激损伤,其可能机制与TLR4/MyD88/NF-κB信号通路有关。

urantide对动脉粥样硬化大鼠血钙、血脂和心肌酶学指标的影响

目的:探讨urantide对动脉粥样硬化(AS)大鼠血钙、血脂和心肌酶学指标的影响,阐明其防治AS的作用机制。方法:选取180只Wistar大鼠,随机分为正常对照组、AS组、阳性药(辛伐他汀)组和urantide组(3、7和14d组),每组30只。采用腹腔注射维生素D3(VD3)和高脂饲料喂养的方法建立大鼠AS模型。各组大鼠在实验前、用药前和实验结束时分别称体质量,并应用全自动生化分析仪检测各组大鼠血清中Ca^(2+)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白(LDL)、高密度脂蛋白(HDL)、肌酸激酶(CK)和乳酸脱氢酶(LDH)水平。结果:正常对照组大鼠体质量随着饲养时间的延长而增加;与正常对照组比较,AS组大鼠用药前体质量明显降低(P<0.01);与AS组比较,各给药组大鼠给药后体质量不同程度增加(P<0.05或P<0.01)。与正常对照组比较,AS组大鼠血清中Ca^(2+)、TC、TG、LDL、CK和LDH水平均明显升高(P<0.01),而HDL水平则明显降低(P<0.01);与AS组比较,urantide组大鼠血清中Ca^(2+)、TC、TG、LDL、CK和LDH水平均明显降低(P<0.05或P<0.01),而HDL水平升高(P<0.05或P<0.01)。结论:urantide可通过下调或上调AS大鼠血清中Ca^(2+)、血脂和心肌酶学指标水平而起到防治AS的作用。

Urantide对急性肝衰竭小鼠肝组织中IRF3表达的影响

目的:探讨urotensinⅡ(UⅡ)受体拮抗剂urantide对急性肝衰竭小鼠肝组织干扰素调节因子3(interferon regulatory factor 3,IRF3)表达的影响.方法:♂Balb/c小鼠随机分为4组(每组6只).A组:健康对照组;B组:预处理对照组;C组:模型组;D组:预处理模型组.预处理组给予0.6 mg/kg urantide尾静脉注射.30 min后模型(包括预处理模型)组立即以脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)联合D-半乳糖胺(D-galactosamin,D-GalN)腹腔注射诱导急性肝衰竭.LPS/D-GalN攻击12 h后采集小鼠肝组织标本.采用RT-PCR和实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测小鼠肝组织中IRF3mRNA表达水平,免疫印迹(Western blot)检测IRF3蛋白表达含量.结果:C组小鼠肝组织中IRF3 mRNA经RTPCR和Real-time PCR检测,其相对表达水平显著高于A组和B组(均P<0.001),D组显著低于C组(均P<0.001),而A和B组之间无明显差异(P>0.05);C组IRF3蛋白表达水平显著高于A组和B组(均P<0.001),D组显著低于C组(P<0.001),而A和B组之间无明显差异(P>0.05).结论:UⅡ受体特异性拮抗剂urantide可抑制LPS/D-GalN诱导ALF小鼠肝组织IRF3 mRNA和蛋白质表达.

Urantide降低动脉粥样硬化大鼠胸主动脉中p38 MAPK表达

目的探讨尾加压素拮抗剂urantide对动脉粥样硬化(AS)大鼠胸主动脉中p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)基因和蛋白的影响。方法180只Wistar大鼠分为:正常组(NC)、模型组(AS)[采用腹腔注射维生素D3(VD3)并联合高脂饲料喂养的方法建立AS大鼠模型]、辛伐他汀组(灌胃给予辛伐他汀5μg/kg)、urantide3、7、14d组(尾静脉注射urantide30μg/kg)。给药结束后,HE染色大鼠胸主动脉;免疫组织化学染色、RT-qPCR以及Westernblot检测大鼠胸主动脉中p38MAPKmRNA和蛋白表达。结果AS组大鼠胸主动脉出现典型的AS病理改变,urantide使胸主动脉AS病变明显减轻。AS组大鼠胸主动脉中p38MAPK阳性表达以及基因和蛋白水平与NC组相比显著升高(P<0.01);Urantide各给药组大鼠胸主动脉中p38MAPK阳性表达以及基因和蛋白水平与AS组相比显著降低(P<0.01)。结论Urantide可通过抑制p38的表达而起到保护胸主动脉,防治AS的作用。