尤瑞克林对糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注后半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-12表达的影响

目的探讨尤瑞克林(urokallikrein)对糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-12(cysteinyl aspartate specific proteinase-12,caspase-12)表达的影响及其对糖尿病合并急性脑缺血再灌注损伤神经细胞的保护机制。方法将82只雄性SD大鼠随机分为假手术组(10只)、缺血组(36只)和尤瑞克林组(36只)。以无菌链脲佐菌素(STZ)腹腔注射制作糖尿病大鼠模型,采用Zea-Longa法制作大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO/R)模型,比较各组大鼠脑缺血2h再灌注12、24、48h神经功能评分、缺血半暗带细胞凋亡数目及caspase-12表达的差异。结果与假手术组比较,缺血组和尤瑞克林组大鼠脑缺血再灌注12、24、48h神经功能评分、细胞凋亡数及caspase-12表达水平均升高(均P<0.05),而尤瑞克林组神经功能评分、细胞凋亡数及caspase-12表达水平低于缺血组(均P<0.05)。结论尤瑞克林对糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的抑制作用可能通过下调caspase-12表达而实现。

尤瑞克林对局灶性脑缺血大鼠Bcl-2家族蛋白表达的影响

目的通过观察尤瑞克林对局灶性脑缺血大鼠Bcl-2、Bax蛋白表达的影响,探讨尤瑞克林保护缺血性脑组织的可能作用机制,为尤瑞克林治疗缺血性脑血管病在临床上的应用提供理论依据。方法选用健康SD大鼠130只,雌雄各半,随机分为假手术组、局灶性脑缺血组及同一时间尤瑞克林治疗组(3、6、12、24、48、96h);每组10只。以线栓法阻塞大鼠大脑中动脉,制备局灶性脑缺血模型,术后30min尤瑞克林组舌下静脉注射尤瑞克林8.75×10-3、PNA单位·kg-1。行神经功能缺失评分,免疫组化SABC法对凋亡相关基因bcl-2、bax蛋白进行定量分析,电镜观察大脑皮层顶叶缺血半暗带区神经细胞超微结构变化。结果尤瑞克林组与单纯缺血对照组同一时间比较:在6、12、24、48、96h五个时间段Bcl-2蛋白表达升高(P<0.05)、同时在6个时间段Bax蛋白表达均降低(P<0.05),透射电镜示:尤瑞克林组与模型组同时间段对照比较:核膜较光滑无内陷,核切迹不明显,核染色质可见少量成块。结论尤瑞克林对脑缺血保护作用机制可能与调节NO,从而促进血管新生,提高Bcl-2蛋白表达,同时抑制Bax蛋白表达对脑缺血损伤起保护作用的分子机制之一。

人尿制品乙肝表面抗原(HBsAg)的检测

目的建立尿激酶、乌司他丁及尤瑞克林等3种人尿制品乙肝表面抗原(HBsAg)的检测方法。方法采用ELISA法对尿激酶、乌司他丁、尤瑞克林进行了HBsAg的检测。结果尿激酶原料药及注射用尿激酶、乌司他丁原料药及注射用乌司他丁、注射用尤瑞克林HBsAg均为阴性。结论该法简单、安全,可作为尿激酶、乌司他丁及尤瑞克林的常规HBsAg检测方法。

尤瑞克林对局灶性脑缺血大鼠神经细胞凋亡的影响

目的观察尤瑞克林对缺血性脑卒中大鼠bcl-2、bax蛋白表达的影响,探讨尤瑞克林抑制神经细胞凋亡保护缺血性脑损伤的可能作用机制,为尤瑞克林治疗缺血性脑卒中在临床上的应用提供更深层次的理论依据。方法选用健康SD大鼠,随机分为假手术组、单纯缺血组、尤瑞克林低、中、高3个剂量组,每组12只。制作大鼠局灶性脑缺血模型,术后30min及23.5h尤瑞克林低、中、高剂量组舌下静脉注射尤瑞克林3.75×10-3、8.75×25-3、17.25×10-3PNA单位/kg,余2组以同样给药途径予等剂量0.9%氯化钠溶液。24h后行神经功能缺损评分;免疫组化法行凋亡相关基因bcl-2、bax蛋白定量分析。结果单纯缺血组动物神经功能缺损评分最为严重,尤瑞克林不同剂量组神经功能缺损评分均明显低于单纯缺血组(P<0.05或<0.01)。尤瑞克林各组与单纯缺血组比较,bcl-2蛋白表达升高(P<0.05或<0.01)、同时bax蛋白表达降低(P<0.05或<0.01),且随剂量升高呈量效关系。结论尤瑞克林对缺血性脑损伤具有保护作用,其作用机制可能与提高bcl-2蛋白表达、抑制bax蛋白表达而减轻细胞凋亡来减少脑缺血后迟发性神经元损伤。

尤瑞克林对糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注后细胞色素C及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3表达的影响

目的对尤瑞克林(urokallikrein)干预糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注损伤后细胞色素C(Cytochrome-C,Cyt-C)及半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(cysteinylaspartate specific proteinase-3,caspase-3)表达的变化进行观察,探讨尤瑞克林对糖尿病合并急性脑缺血再灌注损伤神经细胞的保护机制。方法 82只雄性Sprague-Dawley(SD)大鼠随机分为3大组:假手术组10只,缺血组36只,尤瑞克林组36只。以无菌链脲佐菌素(streptozotocin,STZ)腹腔注射制作糖尿病大鼠模型,继而制作大脑中动脉闭塞再灌注(MCAO/R)模型。采用Bederson评分标准进行神经功能评分,原位缺口末端标记法(TUNEL法)检测细胞凋亡数目,免疫组织化学染色法检测Cyt-C及caspase-3表达。结果①尤瑞克林组的神经功能评分在各再灌注时间点均低于缺血组;②尤瑞克林组的凋亡细胞数在各再灌注时间点均少于缺血组;③尤瑞克林组的Cyt-C及caspase-3表达在各再灌注时间点均低于缺血组。结论尤瑞克林对糖尿病大鼠局灶性脑缺血再灌注后神经细胞凋亡的抑制作用可能是通过下调Cyt-C及caspase-3的表达而实现。

尤瑞克林对2型糖尿病大鼠局灶性脑缺血的神经保护作用及机制探讨

目的:探讨尤瑞克林对2型糖尿病局灶性脑缺血大鼠的神经保护作用及其可能的机制。方法:制备2型糖尿病大鼠局灶性脑缺血模型,尤瑞克林低、中、高剂量组于造模后30 m in舌下静脉一次性注射尤瑞克林3.50×10-3,8.75×10-3和17.5×10-3PNAU.kg-1,24 h后行神经行为学评分和HE染色,免疫组化SABC染色法测定诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的含量。实验另设正常大鼠单纯缺血组、模型组,每组12只大鼠。结果:与正常大鼠单纯缺血组比较,2型糖尿病局灶性缺血模型组大鼠神经行为学评分明显升高(P<0.01),HE染色神经细胞受损明显(P<0.01),脑组织海马iNOS活性明显降低(P<0.01)。与模型组比较,尤瑞克林低、中、高剂量组均不同程度降低神经行为学评分及iNOS活性(P<0.01),改善神经细胞的受损程度(P<0.01),其中以中、高剂量组明显(P<0.05),但中、高剂量组间无明显差异(P>0.05)。结论:2型糖尿病能加重缺血性脑损伤的程度,尤瑞克林对2型糖尿病局灶性脑缺血大鼠具有神经保护作用,其机制可能与降低iNOS的活性,减少神经毒性NO的含量有关。

尤瑞克林对2型糖尿病大鼠局灶性脑缺血的神经保护作用

目的探讨尤瑞克林对2型糖尿病大鼠局灶性脑缺血的神经保护作用及其可能的机制。方法选用健康雄性SD大鼠,随机分为单纯缺血组,糖尿病缺血组,尤瑞克林低、中、高3个剂量组,每组12只。制作2型糖尿病大鼠局灶性脑缺血模型,术后30min尤瑞克林低、中、高剂量组舌下静脉注射尤瑞克林3.50×10-3、8.75×10-3、17.5×10-3PNA单位·kg-1,余各组以同样给药途径予等剂量生理盐水。行神经行为学评分,检测大鼠缺血侧海马组织含水量及一氧化氮(NO)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)的含量。结果与单纯缺血组比较,糖尿病缺血组大鼠海马组织NO含量及iNOS活性增高,神经行为学评分明显升高(P<0.01),HE染色示神经细胞受损明显;与糖尿病缺血组比较,尤瑞克林低、中、高剂量组NO含量、iNOS活性和神经行为学评分均不同程度降低(P<0.05),神经细胞受损程度改善,其中中、高剂量组较低剂量组作用更明显(P<0.05),但中、高剂量组间无明显差异(P>0.05)。结论高血糖可加重脑缺血损伤,尤瑞克林可能通过降低iNOS的活性、减少神经毒性NO的产生,对2型糖尿病局灶性脑缺血起到神经保护作用。

尤瑞克林治疗急性脑梗死的临床疗效及对血清炎性因子水平、血液流变学的影响研究

目的探究尤瑞克林治疗急性脑梗死的临床疗效及对血清炎性因子、血液流变学的影响。方法选取2013年4月—2015年4月武汉市汉阳医院收治的急性脑梗死患者106例,随机分为治疗组和对照组,各53例。对照组患者给予基础治疗,治疗组患者在基础治疗基础上给予注射用尤瑞克林;两组患者均治疗14 d。比较两组患者临床疗效,治疗前后日常生活能力评定量表(ADL)评分、神经功能缺损程度评分、血清炎性因子〔超敏C反应蛋白(hs-CRP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)〕及N末端B型钠尿肽前体(NT-pro BNP)水平、血液流变学指标(血浆黏度、血细胞比容、全血高切黏度),观察两组患者不良反应发生情况。结果治疗组患者临床疗效优于对照组(u=2.932,P=0.003)。治疗前两组患者ADL评分和神经功能缺损程度评分比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后治疗组患者ADL评分高于对照组,神经功能缺损程度评分低于对照组(P<0.05)。治疗前两组患者血清hs-CRP、TNF-α、NT-pro BNP水平比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后治疗组患者血清hs-CRP、TNF-α、NT-pro BNP水平均低于对照组(P<0.05)。治疗前两组患者血浆黏度、血细胞比容、全血高切黏度比较,差异无统计学意义(P>0.05);治疗后治疗组患者血浆黏度、血细胞比容、全血高切黏度均低于对照组(P<0.05)。两组患者均未发生明显不良反应。结论尤瑞克林治疗急性脑梗死患者的临床疗效确切,能有效改善其日常生活能力、神经功能及血液流变学指标,降低血清炎性因子及NT-pro BNP水平。

阿替普酶联合尤瑞克林治疗急性脑梗死的效果及对神经功能与脑血管储备功能的影响

目的探讨尤瑞克林联合阿替普酶治疗急性脑梗死患者的疗效。方法采用随机数字表法将117例急性脑梗死患者分组，对照组58例采用阿替普酶溶栓治疗，观察组59例联合尤瑞克林治疗。比较两组患者治疗后的临床疗效、不良反应发生率、神经功能、脑血管储备功能（CVR）及生活质量改善情况。结果观察组总有效率（96．61％）高于对照组（84．48％），并发症发生率（8．47％）低于对照组（22．41％，P〈0．05）；观察组治疗后NIHSS评分低于对照组，Barthel指数高于对照组（P〈0．05）；观察组治疗后搏动指数（PI）低于对照组，平均血流速度（MFV）、屏气指数（BHI）及CVR均高于对照组（P〈0．05）。结论在阿替普酶静脉溶栓的基础上，联合应用尤瑞克林，能够进一步提高急性脑卒中的治疗效果，改善患者的神经功能及脑血管储备功能，提高生活质量，降低并发症发生率。