2005年上海地区细菌耐药性监测

目的了解上海地区14所医院临床分离株对抗菌药物的耐药情况。方法采用纸片扩散法(K-B 法)对30 635株临床分离株进行药敏试验。结果 30635株临床分离株中革兰阳性菌占34.7%,革兰阴性菌占65.3%。MRSA 和 MRCNS 的检出率分别为65.6%和82.2%。青霉素敏感肺炎链球菌(PSSP)成人患者和儿童患者中的检出率分别为81.8%和28.0%,青霉素不敏感株的检出率分别为18.2%(PISP 18.2%和 PRSP0)和72.0%(PISP 51.4%和 PRSP 20.1%)。发现3株万古霉素耐药的屎肠球菌,2株为 van A 基因、1株为 van B 基因。未发现 VRSA 或 VISA 株。产 ESBLs 的大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌和奇异变形杆菌的检出率分别为39.8%、44.3%和11.5%。亚胺培南和美罗培南对肠杆菌科细菌和不动杆菌属的抗菌活性最强。结论 MRSA 和 MRCNS 仍然是目前革兰阳性菌中主要的问题;未发现 VISA 和 VRSA,但发现了3株万古霉素耐药屎肠球菌。出现少数铜绿假单胞菌(3.41%)和鲍曼不动杆菌(6.47%)泛耐药株。对临床分离株的耐药情况应进行流行病学调查及采取相应控制措施。

反相高效液相色谱法测定人血清中万古霉素的浓度

目的建立反相高效液相色谱法测定人血清中万古霉素(糖肽类抗菌药)的浓度。方法色谱柱为Shimadzu Shim-pack VP-ODS柱,流动相为甲醇-乙腈-0.05mol·L-1磷酸二氢钾缓冲液(pH3.2)=6.5∶8.5∶85,流量0.8mL·min-1,紫外检测波长236nm;盐酸去甲万古霉素为内标。结果血清万古霉素在1～100mg·mL-1内线性良好,回归方程y=24.09x-0.08(n=7,γ=0.9993),日内和日间精密度RSD<10%。结论该测定方法可靠,可用于临床血清万古霉素的浓度监测。

神经外科术后患者静脉持续输注较大剂量万古霉素时血清药物浓度的研究

目的探讨神经外科术后患者静脉持续输注较大剂量万古霉时血清药物浓度变化规律,并初步观察其安全性。方法选择开颅术后保留脑室引流管,主管医生决定使用万古霉素的患者。开始以万古霉素1.0 g泵入1 h,后以3 g/24 h匀速持续泵入,顺序采静脉血标本,测定万古霉素浓度。结果共有24例患者入选,万古霉素负荷量1.0 g泵入结束即刻血药浓度为(34.27±19.50)mg/L,16 h浓度最低[(14.82±12.23)mg/L],24 h后相对稳定[(18.53±13.30)^(25.72±19.09)mg/L]。万古霉素血清稳态药物浓度可以达到耐甲氧西林金黄色菌葡萄球菌对万古霉素敏感折点(2 mg/L)10倍以上,以最低抑菌浓度为1 mg/L计算,血清AUC/MIC>400。所有入组患者未发现明显不良反应。结论较大剂量万古霉素(3 g/d)与既往常规剂量(2 g/d)相比,静脉持续输注时,血浆药物浓度可以达到良好的药代/药效动力学指标,且初步观察该治疗是安全的,但仍需进一步大样本的临床研究证实。

万古霉素手性选择剂结合区段灌注技术的氨基酸毛细管电泳手性分离

结合区段灌注技术,以万古霉素为手性选择剂构建毛细管电泳手性分离体系,研究了氨基酸对映异构体的分离。选择的最佳分离条件为:①含3mmol.L-1万古霉素和2mmol.L-1HDB的pH 7为200mmol.L-1硼酸缓冲溶液的分离区段;②灌注长度为压力3.45kPa,时间2.5min。以含2mmol.L-1 HDB的pH 7为200mmol.L-1硼酸缓冲溶液为运行缓冲溶液对19种氨基酸衍生物进行手性分离。试验结果显示其中15对氨基酸对映异构体得到了良好分离。

注射用盐酸万古霉素有关物质检查方法的改进

目的:改进注射用盐酸万古霉素有关物质的检查方法。方法:采用辛烷基硅烷键合硅胶色谱柱(C8,4.6 mm×250 mm,5μm);采用梯度洗脱,流动相A的组成为三乙胺缓冲液-乙腈-四氢呋喃(96∶3∶1),流动相B的组成为三乙胺缓冲液-乙腈-四氢呋喃(70∶29∶1);流速为1 mL·min-1,检测波长为280 nm,并与盐酸万古霉素进口注册标准所载的方法进行比较。结果:采用注册标准方法与本文方法对3个批号的注射用盐酸万古霉素有关物质进行检测,结果无显著性差异(P>0.05);且该方法分离效果好。结论:本方法可用于检测注射用盐酸万古霉素的有关物质。

载万古霉素-羟基磷灰石抗感染钛钢板的研制

目的探讨一种携载并缓释万古霉素(VCM)的抗感染骨折内固定钢板的制备;并通过扫描电镜(SEM)、X射线能谱仪(EDX)、红外光谱分析仪(FT-IR)等检测其特征、抑菌实验检测其对金黄色葡萄球菌抑制作用等,期望能为临床上预防以及治疗开放性骨折手术后的细菌感染提供一种途径。方法以羟基磷灰石(HA)为载体,采用仿生溶液(Simulated body fluid,SBF)生长法(Biomimetic growth),在钛合金板基体表面制备了携载VCM的HA抗感染涂层,通过SEM,EDX和FT-IR等检测方法对钛钢板表面涂层进行检测;选用金黄色葡萄球菌(S.aureus)作为试验菌,分别观察载VCM-HA缓释钛钢板和载HA钛钢板的体外抗菌效果。结果钢板表面获得载VCM-HA涂层;抑菌试验证明,钢板周围出现明显抑菌圈,表明VCM被成功携载于涂层中。结论载VCM-HA钛钢板能有效的携载万古霉素,且保持了其抑菌活性。

16种抗菌药物对临床分离的金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、屎肠球菌体外抗菌活性:全国多中心横断面研究

目的 评估16种常用抗菌药物对临床分离的金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、屎肠球菌的体外抗菌活性。方法收集2019年1月1日—12月31日全国18个省、24家医院临床分离的金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、屎肠球菌。采用自动化仪器对菌株进行体外药敏试验,并采用WHONET 5.6软件统计菌株对万古霉素、去甲万古霉素、夫西地酸、利奈唑胺等16种抗菌药物的药敏结果。结果 共收集金黄色葡萄球菌255株、粪肠球菌117株、屎肠球菌114株。标本类型以血液最常见(22.2%,108/486),其次为尿液(18.9%,82/486)。药敏试验结果显示,万古霉素、去甲万古霉素、利奈唑胺、替考拉宁对金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、屎肠球菌均保持了良好的抗菌活性。其中,金黄色葡萄球菌和粪肠球菌对万古霉素、替考拉宁全部敏感;屎肠球菌对万古霉素和替考拉宁的耐药率分别为4.4%和2.6%;金黄色葡萄球菌、屎肠球菌、粪肠球菌对利奈唑胺的耐药率分别为0、0和4.3%。去甲万古霉素与万古霉素对金黄色葡萄球菌、屎肠球菌、粪肠球菌均具有相似的抗菌活性,半数最低抑菌浓度(50%minimum inhibitory concentration, MIC_(50))均为1 mg/L,90%最低抑菌浓度(90%minimum inhibitory concentration, MIC_(90))均为2 mg/L。在金黄色葡萄球菌中,甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌的检出率为35.7%,其对夫西地酸的耐药率为13.2%,而甲氧西林敏感金黄色葡萄球菌对夫西地酸的耐药率仅为3.0%。结论 16种抗菌药物对金黄色葡萄球菌、粪肠球菌、屎肠球菌的抗菌活性存在较大差异,该数据为抗菌药物的合理使用提供了一定参考。

万古霉素与替考拉宁治疗肝移植术后MRSA菌血症疗效与安全性比较

目的:比较万古霉素和替考拉宁治疗重症监护病房肝移植术后耐甲氧西林金黄色葡萄球(MRSA)感染的疗效和安全性。方法:将12例肝移植术后MRSA感染病人随机分为万古霉素治疗组和替考拉宁治疗组,比较两组病人应用抗生素后的治愈率和不良反应。结果:万古霉素与替考拉宁治疗MRSA的治愈率分别为71.4%和60.0%,细菌清除率分别为88.2%和86.7%,不良反应发生率为28.5%和60%,两组间MRSA治愈率有显著性差异(P<0.05)。结论:万古霉素对重症监护病房肝移植术后MRSA感染的早期治疗效果优于替考拉宁,可以作为此类病人的首选用药。

万古霉素产生菌发酵培养基及发酵条件的优化

通过单因素分析和正交试验,对万古霉素产生菌的发酵培养基和发酵条件进行了研究,确定最佳的发酵培养基配方为葡萄糖2.0%,淀粉3.0%,豆粕1.8%,大豆粉2.2%,氯化钠0.2%,碳酸钙0.2%,与原培养基配方相比,优化后万古霉素的摇瓶发酵效价提高了11.2%。同时优化了部分发酵条件,即二级种接种量为10%,溶氧为摇床转速220 r/min时250 mL摇瓶装液量为25 mL。将优化后的发酵工艺进罐验证,其保持了较高的适应性和连续性。

替考拉宁治疗呼吸机相关性肺炎疗效与安全性评价

目的评价替考拉宁治疗呼吸机相关性肺炎(VAP)的疗效与安全性。方法选择2010年3月-2013年1月入住医院ICU革兰阳性球菌感染导致的VAP患者87例,将其随机分为试验组和对照组,其中试验组44例患者给予国产替考拉宁400mg静脉滴注,12h给药1次,3个剂量后改为24h给药1次;对照组43例患者给予万古霉素1.0g静脉滴注,12h给药1次,比较两组患者临床疗效、细菌学疗效及不良反应发生率。结果临床痊愈率、有效率、细菌学清除率试验组分别为47.73%、79.55%、86.36%;对照组分别为53.49%、81.40%、88.40%,经χ2检验,差异无统计学意义;试验组与对照组的不良反应发生率分别为6.80%和9.30%,两组比较差异无统计学意义。结论国产替考拉宁治疗革兰阳性球菌引起的呼吸机相关性肺炎(VAP)疗效确切、安全性高,临床上确诊及高度怀疑革兰阳性球菌引起的VAP患者,可作为首选药物。

高功率密度低频超声间断辐照对载万古霉素骨水泥药物释放的促进作用

目的探讨高功率密度低频超声辐照模式对超声促进药物释放的影响。方法制备质量分数10％的载万古霉素骨水泥（vancomycin-loaded bone cenlent，VLBC）圆柱体试件。随机分为对照组、超声连续辐照组、超声间断辐照组，后两组接受超声辐照14d。浸泡28d内定时测定万古霉素浓度，计算有效抑菌浓度维持时间（T〉MIC）、14～28d亚抑菌浓度释药量、14d内累积释药量并行曲线拟合；浸泡14d后行扫描电镜观察。结果超声间断辐照组T〉MIC。较列照组及超声连续辐照组分别提高6．56d、7．09d，超声连续辐照组较对照组下降0．53d。超声间断辐照组亚抑菌浓度释药量较对照组及超声连续辐照组分别下降0．16mg、0．19mg；14d累积释药量较对照组及超声连续辐照组分别提高2．88mg、2．81mg。三组采用指数增长至最大值模型拟合效果均理想，超声间断辐照组M0、Mmax-M0、K均较对照组及超声连续辐照组提高，超声连续辐照组M0较对照组提高，但Mmax-M0、K、N较对照组降低。结论高功率密度低频超声间断辐照对VLBC的表面释放和内部弥散有明显的促进作用，连续辐照抑制VLBC的内部弥散。

基于治疗药物监测制定万古霉素给药方案路径研究

目的建立基于治疗药物监测(TDM)的万古霉素给药方案路径,使其具有临床可操作性。方法系统研究了万古霉素TDM靶标、人群差异、输注方式和剂量决定因素,最终制定万古霉素给药方案制定的路径。结果血药浓度-时间曲线下面积/最低抑菌浓度(AUC/MIC)比谷浓度作为万古霉素TMD靶标更为准确,谷浓度10~15 mg·L^(-1)可能是不足的。建立了根据患者特征选择不同方法进行万古霉素剂量计算的基本路径流程。简单计算方法结果粗略但简单快速,模型法需要借助软件和模型,结果准确度高,但相对复杂。特殊人群需要考虑其特殊特征参数。结论建立了基于TDM数据制定万古霉素给药方案的基本路径,可以提高临床可操作性,提供清晰的思路。

柱切换-液质联用法快速分析万古霉素原料的杂质谱

目的采用柱切换=液质联用法推断万古霉素原料中杂质的结构。方法采用Chromasil 100-5 C18(4.6 mm x250 mm,5μm)色谱柱,以三乙胺缓冲液(pH 3.2)-乙腈-四氢呋喃(92:7:1,V/W/V)为A相,以三乙胺缓冲液(pH 3.2)-乙腈-四氢呋喃(70:29:1,V/W/V)为B相,进行梯度洗脱分离杂质。在正离子模式下获取各杂质的质谱数据,结合糖肽类抗生素的普遍质谱裂解规律、降解反应原理,解析相关杂质的结构。结果推断出13种杂质的化学结构,其中6种为首次报道。总结了万古霉素、去甲基万古霉素、甲基化万古霉素分别与其2种β异构体的化学结构与色谱保留行为之间的规律。结论采用柱切换-LC/MSn法结合强制降解实验,可快速推断出万古霉素原料相关杂质的化学结构。

亚胺培南西司他丁钠与盐酸万古霉素联用致嗜酸粒细胞增多伴皮疹

1例80岁女性患者因股骨髁间骨折切开复位内固定术后切口引流液培养检出阴沟肠杆菌，给予亚胺培南西司他丁钠0．5g，17欠／8h静脉滴注。第3天，嗜酸粒细胞计数由用药前的230×10^6／L升至520×10^6／L。第9天，嗜酸粒细胞计数为770×10^6／L。第11天，因切口引流液培养检出凝固酶阴性葡萄球菌，加用盐酸万古霉素1g，1次／12h静脉滴注。第18天，嗜酸粒细胞计数升至1810×10^6／L，停用亚胺培南西司他丁钠。第21天，患者出现双下肢皮疹伴瘙痒，给予抗过敏治疗。第26天，患者病情好转，嗜酸粒细胞计数仍高达2990×10^6／L，停用盐酸万古霉素。其后皮疹逐渐消退。第48天，嗜酸粒细胞计数降至20×10^6／L。

1例重症患者万古霉素血药浓度过低的原因分析及方案调整

目的探讨导致1例重症患者万古霉素血药浓度过低的原因,并根据患者万古霉素血药浓度监测结果调整治疗方案,以提高疗效并降低毒副作用发生率。方法按照该患者有关参数,以万古霉素群体药动学软件(JPKD-vancomycin)预测目标浓度,并结合患者病情调整治疗方案。结果患者按最大推荐给药剂量(4 g·d^(-1))预测万古霉素谷浓度为7.73 mg·L^(-1),未达到有效血药谷浓度范围,予调整抗感染方案,患者感染情况好转。结论重症患者万古霉素药代动力学差异大,应用该药时可根据血药浓度及肾功能监测结果,及时调整给药方案,提高药物有效性及安全性。