N-甲基-D-天门冬氨酸受体介导缺氧SD大鼠PO/AH区神经元Ca^(2+)浓度的变化

目的研究N-甲基-D-天门冬氨酸(NMDA)受体特性,探讨NMDA对缺氧大鼠PO/AH区神经元Ca2+浓度的影响。方法给大鼠应用NMDA受体激动剂NMDA和拮抗剂丙戊酸,观察其在正常和缺氧条件下对PO/AH区神经细胞内Ca2+浓度的影响。结果在正常条件下,细胞内Ca2+荧光比值为0.95,第40秒加入NMDA后[Ca2+]i的荧光强度迅速增高,25s后达到峰值2.054,并稳定在此水平,其升幅为(109±52)%,加入激动剂后30 s内达到峰值3.783,并持续稳定在此水平,加入NMDA后[Ca2+]i升高了(286±91)%;缺氧条件下神经元[Ca2+]i在加入丙戌酸后由平台向下的降幅为(103±45)%。结论[Ca2+]i的升高主要是由于NMDA受体通道开放,细胞外游离Ca2+易化扩散入胞内所致,丙戊酸可有效地降低NMDA受体活性,从而使细胞内游离Ca2+浓度明显下降,具有保护神经元免受缺氧损伤的作用。

丙戊酸钠促进猪再克隆胚胎体外发育

对VPA处理的最佳处理时间和处理浓度进行探索,希望通过VPA处理来改善再克隆胚胎的发育能力。结果表明,使用1mmol/L VPA处理16h,可以获得较高的囊胚形成率。然后通过免疫荧光检测发现,囊胚时期acH3K9的乙酰化水平在处理组中高于非处理组。多能性因子Oct4、Nanog、Sox2和Klf4的实时定量检测结果则显示,它们之间的表达水平同样差异不显著。结果表明VPA能够显著提高猪再克隆胚胎体内发育能力。

丙戊酸对小鼠树突状细胞免疫调控作用研究

目的 :评估去乙酰化酶(HDAC)抑制剂丙戊酸(VPA)对小鼠树突状细胞(DC)免疫调节的作用。方法:利用C57BL/6小鼠骨髓前体细胞体外诱导DC生成,评估0.5、1 mmol/L VPA对DC分化、抗原递呈能力及细胞因子释放的调控作用,及DC通过该免疫调节表型在混合淋巴细胞反应中对同种反应性CD8+、CD4+T淋巴细胞增殖分化的影响。结果:0.5、1 mmol/L VPA明显干扰DC分化(P<0.05),0.5、1、2、4 mmol/L VPA处理的成熟DC与磷酸盐缓冲液(PBS)处理的对照组DC其早期及晚期凋亡比例比较差异无统计学意义。经VPA处理后DC抗原递呈能力无明显改变,其促炎因子白介素(IL)-12 p70在基因(1 mmol/L组基因相对表达量峰值620.03±58.82、55.22±5.02,对照组2349.30±346.34、147.26±8.29,P<0.001)及蛋白水平(1 mmol/L组蛋白分泌量26.90±5.22,对照组979.98±57.22,P<0.001)显著下调。混合淋巴细胞反应体系中VPA处理的DC免疫调节效应体现在对同种反应性CD4+T细胞增殖抑制(羟基荧光素二醋酸盐琥珀酰亚胺酯低表达群体为13.15%±6.26%,对照组23.54%±9.81%,P<0.05)及诱导凋亡作用(膜联蛋白Ⅴ16.75%±3.06%,7-氨基放线菌素7.38%±1.88%,对照组为4.33%±2.14%、1.16%±0.88%,P<0.01及P<0.05),而对初始CD4+T淋巴细胞向各亚群的分化无显著影响。与经VPA处理DC共培养的CD8+T细胞其细胞毒作用轻度受抑。结论:0.5、1 mmol/L VPA可诱导小鼠DC产生低表达促炎因子IL-12,可诱导同种反应性CD4+T淋巴细胞增殖抑制和凋亡增多的免疫耐受表型。