盐酸多奈哌齐对血管性痴呆模型小鼠海马神经元ERK表达的影响

目的探讨盐酸多奈哌齐对血管性痴呆(VD)模型小鼠海马神经元中细胞外信号调节激酶(ERK)表达的影响。方法采用双侧颈总动脉反复缺血-再灌注法制备小鼠VD模型。将小鼠随机分为假手术组、模型组及盐酸多奈哌齐治疗组,药物组给予盐酸多奈哌齐灌胃治疗。术后第29、30天,采用跳台试验和水迷宫试验对各组小鼠进行行为学成绩测试,采用免疫组化法观察各组小鼠海马神经元ERK表达的变化。结果盐酸多奈哌齐可明显改善VD模型小鼠学习、记忆成绩(P<0.05)。模型组小鼠海马CA1区ERK1、ERK2表达及海马CA3区p-ERK表达较假手术组及治疗组减少(均P<0.05)。结论盐酸多奈哌齐通过增加乙酰胆碱含量,后者作用于毒蕈碱乙酰胆碱受体(M受体)激活ERK,从而有助于改善学习和记忆功能。海马神经元内ERK的表达减少可能参与了VD的发病机制。

盐酸多奈哌齐对血管性痴呆小鼠海马ERK2及p-ERK表达变化的影响

目的探讨盐酸多奈哌齐对血管性痴呆(VD)小鼠海马中细胞外信号调节激酶(ERK2、p-ERK)表达变化的影响。方法采用双侧颈总动脉反复缺血-再灌注法制备小鼠VD模型。将小鼠随机分为对照组、模型组及药物组,药物组给予盐酸多奈哌齐灌胃治疗。术后第29、30天,经跳台试验和水迷宫试验对各组小鼠进行行为学成绩测试,用免疫组化方法观察各组小鼠海马CA1区ERK2及海马CA3区p-ERK的表达变化。结果盐酸多奈哌齐明显改善了VD小鼠学习、记忆成绩(P<0.05)。模型组海马CA1区ERK2的阳性细胞数目较对照组,药物组减少(P<0.05),阳性细胞平均光密度值亦较对照组、药物组降低(P<0.05);CA3区p-ERK阳性部位平均光密度值较对照组、药物组降低(P<0.05)。而药物组与对照组间上述变化无显著性差异(P>0.05)。结论ERK2的表达减少可能参与了VD的发病机制,盐酸多奈哌齐通过增加乙酰胆碱含量,后者作用于毒蕈碱乙酰胆碱受体(M受体)激活ERK(p-ERK),有助于改善学习和记忆功能。

原花青素抗小鼠实验性血管性痴呆的研究

目的研究原花青素的抗小鼠实验性血管性痴呆作用,探讨其保护作用机制。方法采用脑缺血再灌注合并尾静脉放血降压的方法制备小鼠血管性痴呆模型,小鼠分为假手术组、模型组、阳性对照组和原花青素低、中、高(50、100、200mg.kg-1)剂量组。小鼠水迷宫实验和避暗实验用于检测空间学习记忆行为。生化测量脑内超氧化物岐化酶,胆碱酯酶的活性和总抗氧化能力、及丙二醛含量。结果原花青素低、中、高3个剂量组均可减少水迷宫逃避潜伏期时间,增加穿台次数;可显著增加小鼠被动避暗潜伏期,减少避暗穿箱次数。提高小鼠脑组织超氧化物歧化酶活性,提高总抗氧化能力,降低脂质过氧化物含量,抑制胆碱酯酶的活性。结论原花青素有抗小鼠血管性痴呆的作用,它改善血管性痴呆的机制可能与抗氧化、抑制胆碱酯酶活性有关。

血管性痴呆学习记忆障碍小鼠行为学变化及醒脑启智胶囊的影响

目的 :观察血管性痴呆学习记忆障碍小鼠行为学的变化 ,以及中药醒脑启智胶囊的影响 ,验证醒脑启智胶囊对血管性痴呆的疗效。方法 :复制脑缺血再灌注血管性痴呆小鼠模型 ,灌胃给药 ,并与银杏叶、尼莫地平对照 ,分别于术后 7d、15d、30d ,采用水迷宫法、跳台法检测各组小鼠行为学变化。结果 :模型小鼠学习与记忆能力下降 ,表现为学习反应时间延长 ,记忆潜伏时间缩短 ,游全程时间延长 ,错误次数增加。醒脑启智胶囊可使模型小鼠学习反应时间缩短 ,记忆潜伏时间延长 ,游全程时间缩短 ,错误次数减少 ,优于对照药物。结论 :醒脑启智胶囊对模型小鼠学习与记忆能力下降有改善或提高作用。

石杉碱甲对血管性痴呆小鼠海马神经细胞[Ca^(2+)]_i及钙调蛋白、蛋白激酶Ⅱ信使核糖核酸表达的影响

目的 :观察石杉碱甲对血管性痴呆 (VD)小鼠海马神经细胞 [Ca2 + ] i 和钙调蛋白 (CaM) ,Ca2 +钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ (CaMPKⅡ )mRNA表达的影响。方法 :采用双侧颈总动脉线结法 ,制作小鼠VD模型 ,并设假手术对照组 ,石杉碱甲为治疗组 ;术后d 2 9,30测试学习、记忆成绩。利用激光共焦显微镜检测各组海马神经细胞 [Ca2 + ] i;用RT PCR技术检测CaM ,CaMPKⅡmRNA。结果 :模型组[Ca2 + ] i 荧光强度 (44±s 3)显著高于假手术组(2 6± 4) (P <0 .0 1 )和石杉碱甲组 (2 8.5± 2 .5) (P<0 .0 1 ) ;模型组CaMmRNA含量 (0 .76± 0 .2 1 )显著低于假手术组 (1 .1 3± 0 .2 3) (P <0 .0 1 )和石杉碱甲组 (0 .97± 0 .1 9) (P <0 .0 5) ,CaMPKⅡmRNA含量(0 .43± 0 .0 7)显著低于假手术组 (0 .67± 0 .1 0 )(P <0 .0 1 )和石杉碱甲 (0 .61± 0 .0 8) (P <0 .0 1 )。结论 :石杉碱甲可降低VD小鼠海马神经细胞[Ca2 + ] i,提高CaM ,CaMPKⅡmRNA表达水平 。

血管性痴呆小鼠海马胆碱乙酰转移酶免疫组织化学变化特征

目的 观测血管性痴呆小鼠海马神经元胆碱乙酰转移酶免疫组织化学变化特征。方法 双侧颈总动脉线结 ,反复缺血—再灌注法制备模型 ,利用跳台试验和水迷宫试验观测其行为学改变 ,采用免疫组织化学技术观测小鼠海马神经元胆碱乙酰转移酶的表达变化。结果 模型组小鼠学习、记忆成绩较假手术组明显降低 (P <0 .0 1) ,其海马胆碱乙酰转移酶表达也明显下降 (P <0 .0 1)。结论 血管性痴呆小鼠学习、记忆成绩下降与其海马胆碱乙酰转移酶低水平表达有关。

血管性痴呆小鼠海马神经元ERK的表达变化

目的:观察血管性痴呆(VD)小鼠海马神经元中细胞外信号调节激酶(ERK)的表达变化,探讨其在VD发病中的作用机制。方法:采用双侧颈总动脉反复缺血/再灌注法制备小鼠VD模型,设立假手术组作为对照。术后第29、30 d,经跳台试验和水迷宫试验对两组小鼠进行行为学成绩测试,用免疫组化方法观察两组小鼠海马神经元中ERK的表达变化。结果:VD模型小鼠学习、记忆成绩较假手术组显著下降(P<0.05)。模型组小鼠海马CA1区ERK1、ERK2的表达及海马CA3区p-ERK的表达较假手术组减少,均有显著性差异(P<0.05)。结论:海马神经元内ERK的表达减少可能参与了血管性痴呆的发病机制,因此,应用能促进ERK表达的药物可能成为治疗VD的有效方法之一。

多奈哌齐对血管性痴呆小鼠学习记忆及海马磷脂酰肌醇3激酶表达的影响

目的探讨盐酸多奈哌齐对血管性痴呆(VD)小鼠学习记忆能力及对海马磷脂酰肌醇3激酶(PI3K)表达的调节作用。方法采用双侧颈总动脉反复缺血-再灌注法制备小鼠VD模型。90只雄性昆明小鼠随机分为3组,假手术组(30只)、模型组(30只)及盐酸多奈哌齐组(30只)。在术后第29天、第30天,经跳台试验和水迷宫试验进行行为学测试,用免疫组化和Western blot方法检测各组小鼠海马PI3K的表达变化。结果盐酸多奈哌齐治疗组小鼠的学习和记忆成绩明显高于VD模型组小鼠(P<0.05);免疫组化和Western blot结果发现,盐酸多奈哌齐治疗组小鼠海马CAl区PI3K蛋白阳性表达的平均光密度值显著高于VD模型组(P<0.05)。结论盐酸多奈哌齐能够上调VD小鼠PI3K的表达,有助于改善学习和记忆功能。

脑力苏胶囊对血管性痴呆小鼠GSH-Px表达的影响

目的:研究脑力苏胶囊对血管性痴呆(VD)小鼠一般情况和GSH-Px表达的影响,探讨该方药对大脑的部份保护作用及其防治机制。方法:采用反复夹闭颈总动脉方法建立血管性痴呆小鼠模型。将造模成功后的小鼠随机分成5组:假手术组;模型对照组;西药治疗组;脑力苏胶囊高剂量组和脑力苏胶囊低剂量组。造模成功后,给药第11天观察小鼠一般情况变化,第14天后快速断头取脑,制成10%的组织匀浆液,4℃下离心,取血浆测定谷胱甘肽过氧化物酶(GHS-Px)活性的变化。结果:实验结果显示造模后的VD小鼠体重增长速度均有不同程度的降低,各治疗组小鼠的体重增加明显;治疗组GSH-PX水平与模型组比较均出现不同程度的升高,以脑力苏各组表现明显(P<0.01)。结论:脑力苏胶囊可能通过提高脑组织中GHS-Px活性,从而提高血管性痴呆小鼠的学习记忆能力。

醒脑启智胶囊对血管性痴呆小鼠脑组织海马细胞p75受体蛋白的影响

目的探讨中药醒脑启智胶囊对血管性痴呆小鼠脑组织海马细胞p75受体蛋白的影响。方法120只昆明种小鼠随机分为假手术组、模型组、醒脑液高剂量组、醒脑液低剂量组、银杏叶液对照组、尼莫地平液对照组,每组20只,采用双侧颈总动脉结扎反复脑缺血再灌注的方法制备血管性痴呆小鼠模型。术后15d进行行为学实验和脑组织的病理形态学观察,并用流式细胞术检测各组海马细胞p75受体蛋白的变化。结果①行为学实验显示,模型组小鼠学习成绩与记忆成绩下降,各治疗组小鼠的学习成绩与记忆成绩均有提高(P<0.05或P<0.01);②光镜下病理形态学显示,术后模型组小鼠脑组织海马区呈缺血性病理改变,各治疗组小鼠病变轻于模型组;③流式细胞术检测显示模型组小鼠脑组织海马细胞p75受体蛋白高于假手术组(P<0.01);各用药组与模型组比较,p75受体蛋白降低(P<0.01)。结论醒脑启智胶囊对血管性痴呆小鼠有明显治疗作用,其作用机制之一是调节海马细胞p75受体蛋白的表达。

血管性痴呆小鼠海马ERK2及p-ERK的表达特征

目的观察血管性痴呆(VD)小鼠海马中细胞外信号调节激酶(ERK2、p-ERK)的表达变化,探讨其在VD发病中的作用机制。方法采用双侧颈总动脉反复缺血-再灌注法制备小鼠VD模型,设立假手术组作为对照。术后第29、30天,经跳台试验和水迷宫试验对各组小鼠进行行为学成绩测试,用免疫组化方法观察各组小鼠海马CA1区ERK2及海马CA3区p-ERK的表达变化。结果VD模型小鼠学习、记忆成绩较假手术组显著下降(P<0.05);模型组小鼠海马CA1区ERK2的表达及海马CA3区p-ERK的表达较假手术组减少,差异有统计学意义(P<0.05)。结论海马神经元内ERK的表达减少可能参与了血管性痴呆的发病机制,因此应用能促进ERK表达的药物可能成为治疗VD的有效方法之一。

盐酸多奈哌齐对血管性痴呆小鼠海马神经细胞神经元蛋白激酶C表达变化的影响

目的探讨盐酸多奈哌齐对血管性痴呆(Vascular dementia,VD)小鼠海马神经元蛋白激酶C(protein kinase C,PKC)变化的影响。方法将3月龄雄性昆明小鼠随机分为假手术组、模型组、多奈哌齐治疗组。采用双侧颈总动脉结扎,反复缺血-再灌注制备VD模型,药物治疗30d。术后第29、30天,分别进行跳台试验和水迷宫试验观察各组小鼠行为学改变。采用免疫组织化学法观察各组海马CA1区神经元PKC表达的变化。结果药物治疗组小鼠学习、记忆成绩较模型组明显改善(P<0.05)。模型组PKC免疫反应阳性神经元平均光密度值为(0.2730±0.0709),与假手术组(0.3206±0.0642)和药物组(0.3036±0.0688)相比均显著降低(P<0.05),而药物组与假手术组间无明显差别(P>0.05)。结论反复缺血-再灌注导致VD小鼠海马神经元PKC表达减少;多奈哌齐通过抑制中枢神经系统中乙酰胆碱的降解,可增加VD小鼠海马神经元PKC表达,从而改善VD小鼠学习、记忆能力,推测此也是该药物改善VD小鼠学习、记忆障碍的一个重要环节。

血管性痴呆动物模型探讨

目的:探讨建立小鼠“血管性痴呆”动物模型。方法:采用小鼠双侧颈总动脉反复缺血再灌注加降血压法制作了血管性痴呆动物模型。结果:跳台试验、水迷宫试验和光镜检查证实,术后模型小鼠出现了明显的学习、记忆功能障碍,形态学可见明显的小鼠海马CA1区神经细胞减少。结论:本试验成功建立了血管性痴呆动物模型,方法简便,效果可靠,利于推广。

尼莫地平不同时间给药对血管性痴呆小鼠氧自由基代谢的影响

目的:不同时间给予尼莫地平治疗血管性痴呆(VD)小鼠,观察小鼠脑组织氧自由基水平的变化。方法:将健康昆明小鼠随机分为假手术组、模型组、尼莫地平造模后即刻给药组、尼莫地平造模3 d后给药组,后3组小鼠反复结扎双侧颈动脉同时加尾部放血制作VD模型,两个尼莫地平给药组分别于造模后即刻、造模后3 d灌服尼莫地平,模型组及假手术组均每日3次灌服注射用生理盐水,治疗10 d后检测4组小鼠脑组织丙二醛(MDA)含量及SOD活性的变化。结果:模型组小鼠脑组织中MDA含量比假手术组显著增高(P<0.05),尼莫地平两个治疗组小鼠脑组织中MDA含量均明显低于模型组(P<0.05),且尼莫地平造模后即刻给药组MDA含量比尼莫地平造模3 d后给药组更低(P<0.05);模型组小鼠中SOD活性比假手术组显著降低;尼莫地平两个治疗组脑组织中SOD活性较模型组显著增高,且尼莫地平造模后即刻给药组比尼莫地平造模3 d后给药组更高(P<0.05)。结论:尼莫地平能降低痴呆小鼠体内MDA含量,提高SOD活性,即刻给药组的疗效优于3 d后给药组,所以VD一旦确诊应尽快给予尼莫地平干预,以预防病情的进一步发展。

血管性痴呆小鼠海马ERK_1及ERK_2的表达特征

目的观察血管性痴呆(VD)小鼠海马神经元中细胞外信号调节激酶1、2(ERK_1、ERK_2)的表达特征,探讨其在VD发病中的作用机制。方法采用双侧颈总动脉反复缺血—再灌注法制备小鼠VD模型,设立假手术组作为对照。术后第29、30天,经跳台试验和水迷宫试验对2组小鼠进行行为学成绩测试,用免疫组化方法观察2组小鼠海马神经元中ERK的表达变化。结果VD模型小鼠学习、记忆成绩较假手术组显著下降(P<0.05)。模型组小鼠海马CA1区ERK_1、ERK_2的表达较假手术组湿著减少(P<0.05)。结论海马神经元内ERK表达减少可能参与了VD的发病机制,应用能促进ERK表达的药物可能成为治疗VD的有效药物之一。

通心络对血管性痴呆小鼠额叶皮质和海马环磷酸腺苷水平的影响

目的观察通心络对血管性痴呆小鼠学习记忆能力及额叶皮质和海马环磷酸腺苷(cAMP)水平的影响。方法通过双侧颈总动脉线结、连续3次缺血—再灌注,制作血管性痴呆动物模型,90只小鼠随机分为模型组(n=23)、假手术组(n=24)、喜德镇组(n=21)、通心络组(n=22);测试其学习和记忆成绩;且应用放射免疫法检测小鼠额叶皮质和海马cAMP水平。结果与假手术组比较,模型组学习和记忆成绩均降低(P<0.05),且额叶皮质和海马cAMP水平也降低(P<0.05);而与模型组比较,通心络组、喜德镇组学习和记忆成绩均改善(P<0.05),额叶皮质和海马cAMP水平升高(P<0.05)。但通心络组和喜德镇组比较,差异均无显著意义(P>0.05)。结论通心络能提高血管性痴呆小鼠额叶皮质和海马cAMP水平并改善其学习记忆能力。

血管性痴呆小鼠海马神经元蛋白激酶C表达特征

目的观察血管性痴呆(VD)小鼠海马神经元蛋白激酶C(PKC)的变化特征。方法将3月龄雄性昆明小鼠60只随机分为假手术组、模型组。模型组采用双侧颈总动脉结扎、反复缺血再灌注法制备VD模型,假手术组仅暴露双侧颈总动脉但不结扎。术后第29天、30天,采用跳台实验和水迷宫实验测试2组小鼠行为学改变,并采用免疫组织化学法观察2组海马CA1区神经元PKC表达的变化。结果模型组小鼠在跳台实验和水迷宫实验中的学习、记忆成绩均低于假手术组,差异有统计学意义(P<0.05)。模型组小鼠PKC免疫反应阳性神经元平均光密度值(0.27±0.07),显著低于假手术组(0.32±0.06),差异有统计学意义(P<0.05)。结论VD小鼠海马神经元PKC表达减少,推测此现象参与了VD发病过程。

自拟地圣珠水煎剂对血管性痴呆小鼠海马IL-1β、IL-6的影响

目的观察自拟地圣珠水煎剂对血管性痴呆(VD)模型小鼠脑海马组织中IL-1β、IL-6的影响。方法 45只小鼠随机分为假手术组、模型组、中药组各15只,后2组采用夹闭小鼠双侧颈总动脉造成脑缺血再灌注脑损伤模型,而后中药组给予地圣珠水煎剂,模型组、假手术组给予等量生理盐水,2周后采用ELISA法测定小鼠模型脑海马组织中IL-1β、IL-6的水平。结果与假手术组相比,模型组小鼠脑海马IL-1β、IL-6水平显著升高(P<0.05),而与模型组比较,中药组IL-1β、IL-6水平明显降低(P<0.05)。结论地圣珠水煎剂能够通过下调脑海马组织中IL-1β、IL-6的水平,干扰炎性反应继发损伤过程,从而达到对VD的满意干预效果。

反复缺血再灌注制备小鼠血管性痴呆模型的评价

目的对应用反复缺血再灌注法制备的小鼠血管性痴呆(VD)模型进行评价,为VD的基础研究提供较为理想的动物模型。方法50只小鼠随机分为模型组(n=30)和假手术对照组,模型组采用双侧颈总动脉丝线结扎方法、经连续3次反复缺血再灌注,制备VD模型;对照组仅分离双侧颈总动脉,但不阻断血流。测试2组小鼠的学习记忆成绩;光学显微镜下观察海马CA1区神经细胞形态学变化,并采用免疫组化技术观测该区胆碱乙酰转移酶(ChAT)表达的变化。结果跳台试验中模型组小鼠术后第29d的反应时间(125.4±32.5)s较对照组(24.9±2.9)s明显延长(P<0.01),错误次数增多(P<0.01);术后第30d的潜伏时间(80±29)s较对照组(200±37)s明显缩短(P<0.01),错误次数增多(P<0.01)。水迷宫试验中模型组小鼠术后第29d、30d游完全程时间[(143±17)s,(162±11)s]较对照组[(68±8)s,(52±5)s]明显延长(P<0.01),错误次数增多(P<0.01)。海马CA1区ChAT免疫组化观察中模型组阳性神经元面密度值为0.086±0.009,较假手术组(0.123±0.015)明显降低(P<0.01)。结论反复缺血再灌注法制备的小鼠模型是研究血管性痴呆较为理想的动物模型。

补肾活血化痰对血管性痴呆小鼠GSH-Px表达的影响

目的:研究脑力苏胶囊对血管性痴呆(VD)小鼠一般情况和GSH-Px表达的影响,探讨该方药对大脑的部分保护作用及其防治机制。方法:采用反复夹闭颈总动脉方法建立血管性痴呆小鼠模型。将造模成功后的小鼠随机分成5组:假手术组、模型对照组、西药治疗组、脑力苏胶囊高剂量组和脑力苏胶囊低剂量组。造模成功后,给药第11天观察小鼠一般情况变化,第14天后快速断头取脑,制成10%的组织匀浆液,4℃下离心,取血浆测定谷胱甘肽过氧化物酶(GHS-Px)活性的变化。结果:实验结果显示造模后的VD小鼠体重增长速度均有不同程度的降低,各治疗组小鼠的体重增加明显;治疗组GSH-PX水平与模型组比较均出现不同程度的升高,以脑力苏各组表现明显(P<0.01)。结论:脑力苏胶囊可能通过提高脑组织中GHS-Px活性,从而提高血管性痴呆小鼠的学习记忆能力。