三棱、莪术含药血清对培养的人脐静脉血管内皮细胞生长和VEGF表达的影响

目的探讨三棱、莪术含药血清对血管内皮生长因子(vascularendothelialgrowthfactor,VEGF)诱导的血管内皮细胞增殖和VEGF表达影响。方法以三棱、莪术含药血清作用于VEGF诱导的人脐静脉血管内皮细胞(humanumbili-calveinendothelialcell-1,HUVEC-1),倒置相差显微镜观察细胞形态学改变,MTT法观察细胞增殖情况,Westernblot和RT-PCR方法分别检测内皮细胞VEGF蛋白和mRNA的表达。结果三棱、莪术5.0g·kg-1·d-1、2·5g·kg-1·d-1大鼠含药血清可使正常人脐静脉血管内皮细胞排列紊乱,明显梭形化。5.0g·kg-1·d-1大鼠10%、5%、2.5%含药血清组和2.5g·kg-1·d-1大鼠10%含药血清组HUVEC-1细胞的增殖显著低于空白血清相同浓度组(P<0·05)。5.0g·kg-1·d-1、2.5g·kg-1·d-1大鼠5%的含药血清使HUVEC-1细胞VEGF蛋白、VEGFmRNA表达均显著降低。结论三棱、莪术含药血清可抑制VEGF诱导的血管内皮细胞增殖,其机制与抑制血管内皮生长因子表达密切相关。

VEGF和VEGFR2在结直肠癌组织中的表达及临床意义

【目的】探讨VEGF和VEGFR2在结肠恶性病变中的表达及意义。【方法】采用免疫组化法检测62例结直肠癌和30例正常结直肠组织VEGF和VEGFR2表达水平并比较。【结果】62例结直肠癌组织中VEGF、VEGFR2阳性表达率明显高于正常结直肠组织（P〈0．05）；VEGF和VEGFR2在结直肠癌中的表达与患者年龄、性别、肿瘤大小、远处转移、肿瘤发生部位均无相关性（P〉0．05），与肿瘤浸润深度和淋巴结转移相关（P〈O．05）。VEGF与组织学分化程度呈负相关，分化程度越差，阳性表达率越高；VEGFR2与TNM分期呈正相关（P〈0．05）。【结论】VEGFR2和VEGF是评价结直肠癌恶性程度、临床病理分期、淋巴结转移的有价值指标；通过对其进行联合检测，有助于预测结直肠癌患者的浸润、转移情况及预后，指导临床采用合理的治疗方案。

血管内皮生长因子与卵巢过度刺激综合征的相关性研究

目的 探讨血管内皮生长因子 (VEGF)与卵巢过度刺激综合征 (OHSS)的相关性。 方法 2 5例促排卵治疗患者、10例OHSS患者与 5例自然周期不孕症患者的血清样本 ,以及 2 2例促排卵患者、7例OHSS患者的卵泡液标本和 2例OHSS患者的胸、腹水标本 ,5例未促排卵不孕患者的腹腔液标本 ,6例卵巢癌患者的腹水标本 ;采用酶联免疫法 (ELISA)测定血管内皮生长因子 (VEGF)水平 ,用免疫组化法检测VEGF及其两型受体 (flt 1与KDR)在卵巢中的分布与表达。 结果 血清VEGF含量在促排卵与自然周期患者中均无周期性变化 ,OHSS患者血清含量也未见升高 ,治疗后也无降低。卵泡液与胸、腹水中VEGF含量均高于血清水平。VEGF随着卵泡的成熟与黄体的形成在卵巢上的表达逐渐增强 ,黄体中富含VEGF及其受体flt 1与KDR。 结论 VEGF作为局部的非特异性因子可能参与OHSS患者胸。

早期康复治疗对小量脑出血病人功能恢复的作用及其可能机制

[目的]探讨早期康复治疗对小量脑出血病人功能恢复的作用及其可能机制。[方法]选取在我院就诊并住院的180例病人,将其随机分成常规治疗组、非早期康复组和早期康复组,所有病人均采取常规内科药物治疗方案,早期康复组的病人给予早期康复治疗,非早期康复组在住院后第14天给予康复治疗,比较在治疗前以及治疗4周后的Barthel指数以及Fugl-Meyer评分,并检测3组病人在治疗前后血清中血管内皮生长因子(VEGF)和循环内皮祖细胞(EPCs)水平的变化。[结果]与常规治疗组和非早期康复组比较,早期康复组病人治疗后Barthel指数与Fugl-Meyer评分均提高(P<0.05);与常规治疗组比较,早期康复组病人血清中VEGF和循环EPCs水平也明显升高(P<0.05)。[结论]小量脑出血病人接受早期康复治疗可有效改善其日常生活自理能力以及肢体运动功能,作用机制可能与血清中VEGF和循环EPCs水平的升高有关。

通痹1号方对实验性类风湿关节炎大鼠血清IL-18与VEGF水平的影响

目的研究通痹1号方对实验性类风湿关节炎(RA)大鼠血清白介素(IL)-18与血管内皮生长因子(VEGF)水平的影响。方法选取50只清洁级Wistar大鼠,按随机数表法分为正常组10只、实验组10只、对照组10只与模型组20只。模型组、对照组和实验组使用牛Ⅱ型胶原-完全弗氏佐剂法建立Wistar大鼠RA动物模型。实验组予通痹1号方灌胃,对照组予雷公藤多苷灌胃;模型组与正常组均予等体积蒸馏水灌胃。酶联免疫法检测模型组(n=10)不同时间点(建模后1 d、7 d与14 d)血清IL-18的含量;酶联免疫法检测各组大鼠药物干预前后血清IL-18与VEGF的含量。使用关节炎指数与病理评分法评价各组大鼠药物干预后病理改变情况。结果药物干预前,模型组RA大鼠血清IL-18建模后1 d、7 d、14 d分别为(24.68±3.67)pg/m L、(47.31±4.27)pg/m L、(70.91±6.13)pg/m L,呈浓度-时间正相关性(y=23.11x+1.40,R>0.99)。药物干预后,实验组和对照组大鼠血清VEGF[(86.47±5.04)pg/m L vs(101.56±7.36)pg/m L]与IL-18[(34.83±2.72)pg/m L vs(42.72±4.22)pg/m L]水平比较,实验组明显低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。此外,实验组药物干预后大鼠关节炎指数明显低于对照组[(5.50±0.85)分vs(6.60±0.84)分],差异有统计学意义(P<0.05);而且实验组大鼠病理学评分亦明显低于对照组[(1.30±0.48)分vs(1.50±0.53)分],差异有统计学意义(P<0.05)。结论通痹1号方能够抑制RA大鼠炎症进展与膝关节病变,其作用与减少RA大鼠IL-18的分泌和VEGF的过度表达相关。

抗人SDF-1多克隆抗体对糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子表达的影响

目的:研究抗人基质细胞衍生因子(SDF-1)多克隆抗体对糖尿病大鼠(DM)视网膜血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,为抗SDF-1多克隆抗体用于防治糖尿病视网膜病变(Diabetic retinopa-thy,DR)提供实验依据。方法:采用链脲佐菌素腹腔注射,建立DM动物模型。治疗组,用抗人SDF-1多克隆抗体治疗,对照组和非治疗组只给予等量生理盐水。结果:对照组大鼠视网膜VEGF的含量为(4.25±0.81)ng/ml,未治疗组大鼠视网膜VEGF的含量为(13.32±1.12)ng/ml,两组比较差异有统计学意义(P<0.01);治疗组大鼠视网膜VEGF的含量为(6.73±1.25)ng/ml,同未治疗组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论:抗人SDF-1多克隆抗体抑制糖尿病大鼠视网膜血管内皮生长因子的表达。

VEGF通过MAPK途径上调MC3T3-E1及C2C12细胞中Cbfa1基因的表达

目的研究生长因子VEGF对Cbfa1的调节作用及其与MAPK信号传导通路的关系。方法采用瞬时转染技术和RT-PCR方法。结果在MC3T3．E1细胞中，VEGF（1×10^-8～1×10^-6g·L^-1）作用24小时能够增加Cbfa1基因启动子活性，相对荧光素酶活性分别为对照组的1．29（P〈0．05），1．28（P〈0．01）和1．40（P〈0．05）。而加入PD98059（10μmol/L）后不但抑制了Cbfa1基因启动子活性的基础表达，而且完全阻断了VEGF所诱导的Cbfa1基因启动子活性的增加（P〈0．05）。C2C12细胞中不同浓度的VEGF处理组，其相对荧光素酶活性与对照组相比未见显著性差异。MC3T3-E1细胞中，VEGF处理前后，MC3T3-E1细胞中Cbfa1基因mRNA的表达水平未见显著变化。C2C12细胞中，VEGF处理后，第2天和第3天Cbfa1基因mRNA的表达由处理前的32．63±4．41，分别增加至46．56±2．70（P〈0．01）和50．35±5．62（P〈0．05）。PD98059阻断了C2C12细胞中VEGF对Cbfa1基因mRNA表达的上调作用。结论VEGF部分通过MAPK信号传导通路增加MC3T3-E1和C2C12细胞中小鼠Cbfa1基因启动子活性及mRNA的表达。

力敏感因子对软骨内成骨的调控作用

软骨内成骨是一个复杂有序的生物学过程,依赖于一系列力敏感因子的精确调控,而生物力影响着软骨内成骨中力敏感因子的表达。对软骨细胞施加力学刺激后,印第安刺猬蛋白(IHH)表达增加,细胞增殖加快。IHH通过与甲状旁腺素-甲状旁腺素相关肽(PTHr P)受体形成的负反馈环路协调软骨细胞的增殖、成熟与分化,而IHH在调控软骨细胞增殖分化方面并非是PTHr P依赖性的。核心结合因子-α1不仅在软骨形成中,亦在血管侵入软骨过程中发挥作用,可刺激肥大软骨细胞中的血管内皮生长因子(VEGF)诱导血管侵入,促进软骨内骨化。VEGFA通过刺激内皮细胞的增殖和迁徙增加血管的通透性,而肥大软骨细胞基质降解、血管侵入是软骨内成骨的关键。VEGF在软骨内成骨过程中协调着软骨细胞增殖、破骨细胞功能、细胞外基质改建、血管增生和骨形成间的关系。生物力影响着软骨内成骨力敏感因子的表达,进而影响着软骨内成骨进程,理解其中的分子机制将有利于骨形成和骨修复研究。

喉鳞癌组织中HIF-1α、VEGF的表达及其与淋巴结转移的关系

目的观察喉鳞癌组织中缺氧诱导因子(HIF)-1α和血管内皮生长因子(VEGF)的表达情况及其与淋巴结转移的关系。方法用免疫组化法检测57例喉鳞癌组织中HIF-1α和VEGF的表达变化;10例癌旁正常组织作对照。结果喉鳞癌组织中HIF-1α和VEGF阳性表达率均高于正常组织(P<0.05);有淋巴结转移的喉鳞癌组织中HIF-1α和VEGF阳性表达率均高于无淋巴结转移者(P<0.05)。结论HIF-1α和VEGF在喉鳞癌组织中呈高表达,二者均与喉鳞癌淋巴结转移有关。

妊高征患者胎盘组织VEGF和bax的表达及其相互关系

目的 观察血管内皮生长因子 (VEGF)和促凋亡基因bax在妊娠高血压综合征 (简称妊高征 )患者胎盘组织中的表达及两者之间的相关性。方法 用SP免疫组化染色法检测 4 5例妊高征胎盘组织 (妊高征组 )和 2 0例正常妊娠胎盘组织 (对照组 )中VEGF和bax的表达。结果 在中、重度妊高征胎盘组织中VEGF表达明显低于轻度妊高征组和正常对照组 (P <0 0 5 ) ;bax在中、重度妊高征胎盘组织中表达明显高于轻度妊高征组和正常对照组 (P <0 0 5 ) ;胎盘组织中VEGF的表达水平和bax的表达水平呈负相关。结论 妊娠期胎盘滋养层细胞的促凋亡基因bax表达上升和VEGF表达下调之间密切相关 ,并参与了妊高征的发生、发展。

去铁胺对促进扩张后皮瓣微循环重建的实验研究

目的探讨去铁胺(Defemxamine,DFX)对扩张后皮瓣微循环重建的影响。方法将新西兰大耳白兔24只分成实验组和对照组,兔额部皮下植入圆柱形扩张器,制备蒂部位于耳根的矩形皮瓣,实验组分别于模型制备后即刻、第3天、第5天将DFX注射于皮瓣末端,对照组皮下注射等量的生理盐水,第7天分别进行皮瓣平均微血管数目及内径、皮瓣组织中超氧化物歧化酶(MDA)、丙二醛(SOD)含量及血管内皮生长因子(VEGF)mRNA检测。结果实验组皮瓣SOD含量、VEGFmRNA表达高于对照组(P<0.05),平均微血管数目多于对照组(P<0.05),平均微血管内径及MDA含量小于对照组(P<0.05)。结论在扩张皮瓣的局部注射DFX,可以降低自由基水平,加快新生血管形成并促进皮瓣微循环重建。

泌乳素诱导蛋白表达下调对三阴性乳腺癌细胞裸鼠体内成瘤影响研究

目的:探讨泌乳素诱导蛋白(prolactin-inducible protein,PIP)表达下调对三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)MDA-MB-453细胞在裸鼠体内成瘤的影响。方法:采用脂质体将PIP siRNA转染至乳腺癌MDA-MB-453细胞,蛋白质印迹法检测PIP的表达下调情况。采用4周龄BALB/c雌性裸鼠,建立乳腺癌MDA-MB-453细胞裸鼠皮下种植瘤模型,瘤内注射siRNA-脂质体混悬液,观察PIPsiRNA对肿瘤生长的影响。采用免疫组织化学法检测肿瘤组织中Cyclin D1和VEGF的表达情况。结果:PIP表达下调后,其在裸鼠体内成瘤能力明显降低,肿瘤平均体积空白对照组为(1 075±65)mm3,阴性对照组为(1 095±72)mm3,实验组为(473±56)mm3,空白对照组与阴性对照组差异无统计学意义,P=0.719,空白对照组与实验组、实验组与阴性对照组差异均有统计学意义,P<0.001。空白对照组肿瘤平均体质量为(908±86)mg,阴性对照组为(889±64)mg,实验组为(272±30)mg,空白对照组与阴性对照组差异无统计学意义,P=0.738,空白对照组与实验组、实验组与阴性对照组差异均有统计学意义,P<0.001。肿瘤生长抑制率为71.1%。免疫组化结果显示,PIP表达下调的肿瘤组织中Cyclin D1的相对表达量空白对照组为1 535±78,阴性对照组为1 594±123,实验组为367±72,空白对照组与阴性对照组差异无统计学意义,P=0.472,空白对照与实验组、实验组与阴性对照组差异均有统计学意义,P<0.001。VEGF的相对表达量空白对照组为4 270±558,阴性对照组为4 365±324,实验组为1 286±292,空白对照组与阴性对照组差异无统计学意义,P=0.758,空白对照与实验组、实验组与阴性对照组差异均有统计学意义,P<0.001。结论:下调PIP基因表达可明显抑制乳腺癌MDA-MB-453细胞体内成瘤能力,提示PIP可能在乳腺癌发生和发展中发挥重要作用。

玻璃体视网膜术后感染病原菌特点及血清和玻璃体IGF-1与VEGF表达意义

目的探讨玻璃体视网膜术后感染病原菌特点及血清和玻璃体胰岛素生长因子(IGF-1)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达意义。方法选择于2013年6月-2017年6月医院收治的行玻璃体视网膜手术患者3 971例。分别采集患者血清标本和玻璃体液标本,采用酶联免疫吸附法测定IGF-1和VEGF含量;同时采集患者玻璃体液标本分离培养及细菌鉴定,进行耐药性试验。结果 3 971例患者中有21例玻璃体视网膜手术术后发生感染性眼内炎,感染率为0.53%;21例术后感染性眼内炎患者中共分离培养病原菌19株,其中革兰阳性菌15株占78.95%、革兰阴性菌2株占10.53%、真菌2株占10.53%;表皮葡萄球菌对左氧氟沙星、红霉素、青霉素G和头孢他啶耐药率较高,均>70%;感染组患者血清IGF-1和VEGF水平高于未感染组(P<0.05);感染组患者玻璃体中IGF-1和VEGF水平高于未感染组(P<0.05)。结论玻璃体视网膜术后感染病原菌主要为表皮葡萄球菌,术后感染患者血清和玻璃体中IGF-1和VEGF水平升高,提示可能参与玻璃体视网膜手术患者术后感染性眼内炎发生和发展。

白血病患者血管新生及相关因素研究

目的 观察白血病患者骨髓血管新生情况,分析血管新生相关因素内皮抑素(ES)、血管内皮生长因子(VEGF)及其受体(VEGFR)在急、慢性白血病患者中的表达及意义。方法 应用血管性血友病因子(vWF)抗体标记免疫组化法观察骨髓血管新生情况,ELISA法测定血浆ES和VEGF水平,流式细胞术(FCM)分析新鲜分离的白血病细胞表面VEGFR表达。结果 26例初诊的急性白血病(AL)和 5例慢性粒细胞白血病(CML)患者骨髓微血管密度 (MVD)分别为 (20. 78±7. 75) /高倍镜视野(HP)和(28. 67±7. 32) /HP,较对照组 [ (9. 29±3. 53) /HP]明显增高 (P<0. 01),治疗后获缓解者骨髓MVD[AL缓解患者为(11. 33±5. 66) /HP,CML缓解患者为(17. 00±8. 04) /HP]较治疗前明显降低(P<0. 05和<0. 01),AL缓解组与对照组比较差异无统计学意义(P>0. 05)。AL和CML患者血浆ES、VEGF明显高于对照组(P值均<0. 05),化疗后获完全缓解(CR)的AL患者血浆ES和VEGF含量和CML CR患者的ES水平均降低至正常水平 (与对照组相比,P值均 >0. 05),但CML患者的VEGF水平仍高于正常对照(P<0. 01)。AL患者骨髓单个核细胞表面VEGFR均有不同程度的高表达,而 3例CML和 5例正常对照骨髓均为VEGFR低表达。结论 初诊白血病患者存在骨髓血管新生及血浆ES、VEGF水平增高。