糖尿病视网膜病变的药物治疗研究进展

糖尿病视网膜病变(diabetic retinopathy,DR)是糖尿病最常见的微血管并发症之一,已成为糖尿病患者失明和视力障碍的主要原因之一。DR的发病机制复杂,主要涉及炎症、氧化应激、神经血管性病变等诸多方面,为疾病治疗提供了潜在的干预靶点。当前,抗血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)药物是DR的一线治疗手段,主要针对疾病晚期阶段,但此时视网膜已经发生了不可逆的神经血管损伤及视功能降低。另外,仍有部分患者对抗VEGF治疗反应欠佳、甚至无反应。目前几乎没有针对疾病早期的干预手段,因此,迫切需要基于DR发病机制开发出新型的局部或全身疗法,能够对DR进行早期预防和治疗,并尽可能挽救患者视力。针对不同靶点的药物如抗炎药物(糖皮质激素、非甾体抗炎药)、神经营养和神经保护类药物、靶向生化途径类药物、抗氧化植物化合物、基因治疗类药物等在治疗效果上可以互相补偿,从而能够让更多DR患者获益。该文结合既往研究报道,对DR的发病机制、药物治疗方法以及潜在药物治疗靶点进行综述,旨在为临床治疗及相关研究提供参考。

抗VEGF辅助治疗增殖性糖尿病视网膜病变对眼内炎症因子水平的影响

目的:探讨玻璃体切除(PPV)术前辅助应用抗血管内皮生长因子(VEGF)药物(康柏西普)对增殖性糖尿病视网膜病变(PDR)患者玻璃体液中炎症细胞因子水平的影响。方法:收集2017-06/2018-01于南京医科大学第一附属医院眼科就诊并确诊的PDR患者49例49眼,随机分为两组,no-IVC组患者25例25眼PPV术前未接受玻璃体腔注射治疗,IVC组患者24例24眼PPV术前5~7d接受玻璃体腔注射康柏西普治疗。纳入患者均于PPV术前收集玻璃体液样本,并采用Luminex液相悬浮芯片技术检测血管内皮生长因子A(VEGF-A)、单核细胞趋化因子(MCP-1)及炎症细胞因子的水平。结果:与no-IVC组相比,IVC组患者玻璃体液中VEGF-A水平显著降低(P<0.001),炎症细胞因子IL-6(P=0.004)、IL-8(P=0.002)、IL-18(P=0.04)、TNF-α(P=0.03)水平显著升高,其余炎症细胞因子水平均无显著差异。结论:PPV术前辅助玻璃体腔注射康柏西普可有效降低PDR患者玻璃体液中VEGF-A水平,但对炎症细胞因子水平的影响有限。

青藤碱抗炎作用机理研究

【目的】通过观察青藤碱对人环氧化酶(COX)、白介素-1β(IL-1β)基因表达的影响,探讨青藤碱的抗炎作用机理。【方法】分离正常人外周血单核细胞(PBMC),体外加药培养,提取细胞总核糖核酸(RNA),采用半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,观察青藤碱对脂多糖(LPS)刺激和非LPS刺激状态下环氧化酶及IL-1β基因表达的影响。【结果】青藤碱对COX-1基因表达无明显影响,对COX-2基因表达仅有轻微的抑制作用,而对IL-1β基因表达的抑制作用较强。【结论】青藤碱可能是通过抑制炎症性细胞因子的产生而发挥其抗炎作用。

黄蒲通窍胶囊对血管性痴呆大鼠神经细胞凋亡Fas/FasL蛋白表达的影响

目的探讨黄蒲通窍胶囊对血管性痴呆大鼠神经细胞凋亡Fas/FasL蛋白表达的影响机制。方法制作线栓法大脑中动脉栓塞所致的血管性痴呆大鼠模型,观察各组大鼠神经细胞凋亡Fas/FasL蛋白表达的变化。结果4周后模型组大鼠皮层(额顶叶皮质)及海马CA1区神经细胞内有大量的Fas、FasL蛋白表达,中药组的阳性细胞数明显降低,有显著性差异(P<0.01)。结论黄蒲通窍胶囊可能通过Fas信号路径抑制神经细胞凋亡而起到改善记忆和认知功能的作用。

榴莲皮提取物抗炎作用研究

【目的】探讨榴莲皮提取物(DPE)的抗炎效果及其作用机制。【方法】采用角叉菜胶致小鼠足跖肿胀及2,4-二硝基氟苯(2,4-DNFB)引起小鼠变应性接触性皮炎实验模型评价DPE的体内抗炎效果;采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法以及脂多糖(LPS)诱导的RAW 264.7细胞炎症模型评估体外抗炎效果。【结果】在体内实验,与空白组比较,DPE各剂量组对角叉菜胶诱发的小鼠足跖肿胀抑制效果显著(P<0.01或P<0.001),DPE对2,4-DNFB所致小鼠变应性接触性皮炎也呈现明显的抑制作用,且作用效果具有较好的量效关系。在体外实验,在给定的浓度下DPE不影响细胞增殖;25 mg/L与50 mg/L DPE可有效地抑制炎症因子肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-1β(IL-1β)、一氧化氮(NO)以及转录因子核因子-кВ(NF-кВ)含量,提高白细胞介素-10(IL-10)等抗炎因子含量。【结论】DPE具有较好的抗炎作用,其作用可能与DPE抑制NF-кВ信号通路相关。

通痹灵对胶原诱导性关节炎大鼠滑膜组织血管内皮生长因子表达水平的影响

[目的]观察通痹灵对胶原诱导性关节炎(CIA)大鼠关节滑膜组织炎症和血管内皮生长因子(VEGF)表达水平的影响,以探讨通痹灵治疗类风湿性关节炎(RA)的作用机理。[方法]大鼠尾根部皮下注射Ⅱ型胶原蛋白建立CIA模型,分组给药治疗.给药37d后处死动物,对动物膝关节滑膜组织病理切片后分别常规HE染色和免疫组化染色。对HE染色切片用显微镜观察炎症细胞浸润、巨噬细胞增生和纤维增生情况,对免疫组化染色切片观察血管内皮生长因子(VEGF)阳性细胞情况以了解各组动物关节滑膜VEGF的表达水平。[结果]HE染色切片显示通痹灵高剂量组滑膜炎症细胞浸润、巨噬样A型细胞增生和纤维组织增生的程度均比模型组低(P<0.05或P<0.01),并与正常组相仿(P>0.05)。免疫组化染色切片显示通痹灵和雷公藤高剂量组均能降低滑膜VEGF表达水平(P<0.05)。[结论]通痹灵有改善大鼠关节滑膜炎症,抑制滑膜VEGF表达作用,这可能是通痹灵治疗关节炎取得临床疗效的机理之一。

理脾化痰方对食饵性动脉粥样硬化症家兔血管平滑肌细胞增殖和凋亡的调控

【目的】探讨由法半夏、白术、天麻、橘红、丹参等组成的理脾化痰方抗早期动脉粥样硬化症(atherosclerosis,AS)的可能性和作用机制。【方法】通过组织形态学 (包括光镜和电镜 )、免疫组化和TUNEL等方法观察了该方对食饵性动脉粥样硬化症家兔脂纹脂斑期主动脉内膜形态和相对厚度、血管平滑肌细胞 (vascularsmoothmusclecells ,VSMCs)ki- 6 7和凋亡细胞阳性率的影响。【结果】理脾化痰方确能阻抑早期AS的形成 ,观察组主动脉内膜相对厚度小于模型组 (P <0 .0 5) ,VSMCski- 6 7的表达率和凋亡的VSMCs阳性率均低于模型组 (P <0 .0 5)。【结论】该方抗早期AS的机制与其同时抑制VSMCs的增殖和过高水平的凋亡有关。

两种雷公藤多苷片抗炎及免疫抑制作用的对比研究

【目的】比较两种雷公藤多苷片（TWP1、TWP2）的抗炎和免疫抑制作用。【方法】分别选用NIH小鼠和SD大鼠，随机分为模型组，TWP1高、低剂量组和TWP2高、低剂量组，大鼠取人用剂量的10、5倍，小鼠取人用剂量的20、10倍分别灌胃给药；采用角叉菜胶、棉球肉芽肿和二甲苯致炎法观察TWP1、TWP2对NIH小鼠和SD大鼠的抗炎作用；采用溶血素生成反应、迟发型超敏反应（DTH）、碳廓清指数、免疫器官质量等指标观察其免疫抑制作用。【结果】高、低剂量的TWP1、TWP2均可显著性抑制二甲苯所致小鼠耳肿胀及小鼠溶血素生成反应，且TWP1的作用优于TWP2；TWP2高、低剂量均可显著性抑制大鼠角叉菜胶足肿胀和棉球肉芽肿，而TWP1无此作用；TWP1低剂量和TWP2高剂量均可显著性降低小鼠校正碳廓清指数，但两种TWP均对小鼠DTH反应和胸腺、脾脏质量无明显影响。【结论】在7.5-30 mg/kg剂量范围内，TWP2的抗炎效果较优，而TWP1的免疫抑制作用较强。

解毒活血方对经皮冠状动脉介入术后患者NF-κB、IL-1β、TNF-α变化及支架内再狭窄的影响

【目的】观察解毒活血方干预经皮冠状动脉介入(PCI)术后患者外周血中核因子kappaB(NF-κB)、白细胞介素-1β(IL-1β)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的变化及支架内再狭窄(ISR)的发生情况,以期阐明解毒活血方防治ISR的远期疗效及机制。【方法】选择符合PCI术后纳入标准的患者40例,将PCI术后给予基础治疗者设为对照组,将PCI术后给予基础治疗+解毒活血方治疗者设为中药组,每组各20例。治疗结束后,观察2组临床疗效。于PCI术前及术后24 h、14 d,采用流式细胞仪检测2组患者外周血单个核细胞NF-κB活性,采用酶联免疫吸附法(ELISA)检测2组患者血浆IL-1β及TNF-α表达水平。观察患者术后6个月内心血管事件及ISR的发生情况。【结果】中药组患者的临床疗效显著优于对照组(P<0.05),证候积分及PCI术后6个月内心血管事件和ISR的发生率显著低于对照组(P<0.05或P<0.01)。2组患者PCI术后24 h NF-κB阳性表达率及TNF-α、IL-1β表达水平较治疗前显著升高(P<0.01),但2组差异无统计学意义(P>0.05);2组患者PCI术后14 d NF-κB阳性表达率及TNF-α、IL-1β表达水平较术后24 h显著降低(P<0.01),且中药组降低效果明显优于对照组(P<0.05)。【结论】解毒活血方可降低ISR的发生率,其机制可能与降低NF-κB活性及血浆IL-1β、TNF-α表达水平有关。

多种中药单体对人结肠癌HT-29细胞株TLR4 mRNA表达和IL-8分泌的影响

【目的】观察不同中药单体对人结肠癌细胞株HT-29细胞Toll样受体信使核糖核酸(TLR4 mRNA)表达及白细胞介素8(IL-8)分泌的影响。【方法】选用人结肠癌细胞株HT-29细胞,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)检测HT-29细胞的TLR4 mRNA的表达;酶联免疫吸附法(ELISA)检测HT-29细胞的IL-8分泌。【结果】黄芪甲苷组和大黄素组可抑制干扰素-γ(IFN-γ)诱导的TLR4 mRNA表达,而姜黄素组、柚皮苷组和栀子苷组则对TLR4 mRNA表达无显著性影响;大黄素能显著性降低IFN-γ+脂多糖(LPS)所诱导的HT-29细胞IL-8的产生。【结论】大黄素抗炎细胞分子机制可能与其能抑制IFN-γ诱导的HT-29细胞TLR4 mRNA表达和IFN-γ+LPS诱导的IL-8分泌有关。

石决牡蛎汤通过p38MAPK通路改善自发性高血压大鼠血管重构的机制研究

【目的】探讨石决牡蛎汤通过p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路改善自发性高血压大鼠(SHR)血管重构的作用。【方法】将40只16周龄自发性高血压大鼠随机分为模型对照组,石决牡蛎汤高、中、低剂量组,卡托普利组,每组8只;将8只Wistar-Kyoto大鼠设为正常对照组。治疗8周后,采用苏木精—伊红(HE)染色法观察胸主动脉形态,光镜下采用计算机图像分析系统测量血管内膜中层厚度(IMT)、管腔直径(LD),酶联免疫吸附法(ELISA)测定血清中内皮素-1(ET-1)水平,硝酸还原酶法测定血清中一氧化氮(NO)水平,免疫组织化学法检测磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)在胸主动脉组织中的表达水平。【结果】与模型对照组比较,石决牡蛎汤中、高剂量组及卡托普利组收缩压和舒张压、ET-1水平均显著降低,NO水平增高,中药高剂量组及卡托普利组IMT、IMT/LD值显著降低,差异均有统计学意义(P<0.05)。免疫组织化学结果显示,石决牡蛎汤中、高剂量组及卡托普利组能较显著抑制p-p38MAPK在胸主动脉的表达。【结论】石决牡蛎汤可能通过抑制p38MAPK信号通路、调节ET/NO系统改善自发性高血压大鼠血管重构。

复聪香液对血管性痴呆模型大鼠海马神经元的影响

【目的】 观察复聪香液对血管性痴呆大鼠海马CA1区神经元形态结构的影响。【方法】 SD大鼠40只随机分为4组,分别为假手术组、模型组、脑复康对照组和复聪香液组,经反复脑缺血再灌流加降血压法造模后,分别给予生理盐水、复聪香液及脑复康溶液,连续15 d后脑部取材,苏木素伊红(HE)染色观察海马CA1区组织形态变化。【结果】 与假手术组比较,模型组可见大量神经细胞损伤、变性,甚至坏死;而复聪香液及脑复康均能不同程度地减轻神经细胞损伤。【结论】 复聪香液对血管性痴呆模型大鼠大脑海马CA1神经元损伤具有一定的保护作用。

盆炎清胶囊主要药效学研究

【目的】探讨由丹参、赤芍、枳实、毛冬青、延胡索等组成的盆炎清胶囊治疗慢性盆腔炎的药理作用 ,从抗炎、镇痛、免疫及微循环方面阐明其作用机制。【方法】采用小鼠热板法了解盆炎清胶囊的镇痛作用 ;通过观察盆炎清胶囊对小白鼠耳廓肿胀的影响、对大白鼠琼脂肉芽肿的影响了解盆炎清胶囊的抗炎作用 ;通过观察盆炎清胶囊对小白鼠单核吞噬细胞功能的影响 ,及对大白鼠肠系膜微循环的影响了解盆炎清胶囊对免疫及微循环的作用。【结果】盆炎清胶囊能提高小鼠痛阈值 ;抑制二甲苯所致的小鼠耳廓肿胀及大白鼠琼脂肉芽肿重量 ;改善由去甲肾上腺素 (NA)所致的大白鼠肠系膜微循环障碍 ,并能提高小白鼠单核吞噬细胞吞噬功能。【结论】盆炎清胶囊具有良好的消炎镇痛作用 ,能改善由炎症所致的红、肿、热、痛等症状 ;同时具有改善微循环的作用 ,能增加机体局部血供 ,促进炎症吸收 ;并能提高机体的免疫功能。以上结果为本方在临床上治疗慢性盆腔炎提供了药效学依据。

木犀草素的体外抗炎机制研究

【目的】观察木犀草素对脂多糖(LPS)诱导的RAW264.7细胞(小鼠单核/巨噬细胞系)核因子κB(NF-κB)和环氧合酶2(COX-2)表达及NF-κB DNA结合活性的影响,探讨其体外抗炎机制。【方法】以RAW264.7细胞为研究对象,选用对数生长期的细胞,分别设空白对照组,脂多糖(LPS)处理组(模型组),5、15、45μmol/L木犀草素处理组(中药低、中、高剂量组);加入药物30 min后再加入终浓度为1μg/mL的LPS继续培养12 h,分别采用酶免疫测定法(EIA)检测木犀草素对RAW264.7细胞前列腺素E2(PGE2)生成的影响;电泳迁移率变动分析法(EMSA)检测NF-κB的DNA结合活性;逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定RAW264.7细胞中COX-2 mRNA的水平;Western blot法测定RAW264.7细胞中NF-κB和COX-2蛋白的表达。【结果】木犀草素能显著性抑制LPS诱导的RAW264.7细胞PGE2的生成,降低NF-κB的DNA结合活性;下调LPS诱导的RAW264.7细胞COX-2 mRNA、NF-κB和COX-2蛋白的表达。【结论】木犀草素的抗炎作用可能与其能抑制核内NF-κB的表达和DNA结合活性从而下调COX-2的表达有关。

补肾活血汤加减治疗血管性痴呆的临床研究

[目的]观察中药复方补肾活血汤(由熟地、山茱萸、淮山、龟板、何首乌、枸杞、巴戟天、肉苁蓉、石菖蒲、远志、水蛭、蒲黄、紫河车、太子参、陈皮等组成)治疗血管性痴呆(VD)的临床疗效。[方法]采用随机数字表法将80例VD患者随机分为2组,治疗组(40例)采用补肾活血汤结合辨证加减治疗,对照组(40例)采用西药都可喜和尼莫地平治疗,观察2组的临床疗效,以简易智能状态检查量表(MMSE)评定VD患者的智力障碍程度,以日常生活能力量表(ADL)评定VD患者的生活能力,并检测治疗前后患者的血液流变学指标的变化。[结果]治疗组的临床总有效率为80.0%,对照组为57.5%,2组比较,治疗组疗效优于对照组(P<0.01)。治疗后2组的MMSE及ADL评分均较治疗前改善(P<0.01),且治疗组在MMSE及ADL评分改善方面优于对照组(P<0.05);治疗后治疗组的全血高切粘度、全血低切粘度、血浆粘度、红细胞比容等血液流变学指标均较治疗前有明显的改善(P<0.01),其改善作用优于对照组(P<0.05 或P<0.01)。[结论]补肾活血汤辨证加减治疗能改善VD患者的学习、记忆能力和提高患者的生活能力,这可能与其改善VD患者的血液流变学指标有关。

青藤碱对环氧化酶2活性的选择性抑制作用

【目的】探讨中药青风藤的单体生物碱提取物青藤碱的抗炎作用机理。[方法]应用体外酶反应实验体系,观察青藤碱对离体环氧化酶－１(ＣＯＸ－１)和ＣＯＸ－２纯酶活性的影响。[结果]一定浓度的青藤碱对ＣＯＸ－２所致前列腺素Ｅ２(ＰＧＥ２)合成表现出较强的抑制作用,且有良好的量效关系。[结论]提示青藤碱选择性抑制ＣＯＸ－２的活性,可能是其抗炎镇痛作用较强而胃肠副作用小的主要机制之一。

仙龙胶囊对血管性痴呆患者平衡能力和脑电地形图的影响

目的 :初步探讨仙龙胶囊治疗老年血管性痴呆的作用机理。方法 :随机分组 ,单盲给药。治疗组2 4例给予仙龙胶囊 ,对照组 2 2例给予喜得镇。分别测定两组药物对患者平衡能力和脑电地形图的影响。结果 :仙龙胶囊可改善血管性痴呆患者的平衡能力 ,降低脑电地形的异常率 ,总疗效率优于喜得镇。结论 :仙龙胶囊治疗血管性痴呆的作用机制可能与其明显改善中枢神经细胞功能状态的作用有关。

内皮细胞的活化／损伤与炎症反应

炎症研究通常以白细胞组织浸润为重点,多种细胞因子错综复杂地交织呈网状,以各种不同的方式作用于白细胞的同时,也在改变着血管内皮细胞的功能,而血管内皮细胞发生的变化也影响着炎症反应的发生、发展,因此,血管内皮细胞主动参与了炎症反应并在炎症反应过程中起着重要的调控作用.本文旨在对血管内皮细胞活化/损伤在炎症反应发生和消退中作用的研究进展做一简要综述.

妇炎克颗粒剂体内外抑菌作用的研究

妇炎克颗粒剂对临床分离的 8种致病菌体外抑菌作用研究结果表明 :妇炎克对革兰氏阳性菌中的金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血性链球菌和肠球菌有明显的抑菌作用 ;对革兰氏阴性菌中的大肠埃希氏菌、铜绿色假单胞菌、奇异变形杆菌也有较强的抑菌作用 ;对白色念珠菌也有较好的抑菌作用 ,且优于妇乐冲剂。妇炎克颗粒剂对金黄色葡萄球菌ATCC 2 592 3、金黄色葡萄球菌临床菌、大肠杆菌ATCC 4 481 5、大肠杆菌临床菌感染小鼠口服的ED50 分别是 2 .68g/kg、2 .98g/kg、2 .92 g/kg、2 .73g/kg ,且作用强于妇乐冲剂 (P <0 .0 1 )。

脉复生通过核因子-κB通路对脂多糖诱导血管内皮细胞损伤的保护作用

【目的】观察脉复生(主要由牛大力、熟地黄、白花蛇舌草等组成)对脂多糖(LPS)诱导的人脐静脉内皮细胞(ECV304)内核因子-κB(NF-κB)信号通路蛋白表达的影响。【方法】体外培养ECV304细胞,实验分为正常对照组,LPS诱导组(终浓度为1μg/m L),LPS诱导+脉复生高、中、低剂量组(终浓度分别为10、1、0.1μg/m L),采用Western-blot法检测各组细胞中NF-κB p65、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、一氧化氮合酶(i NOS)、环加氧酶-2(COX-2)、血管细胞黏附因子-1(ICAM-1)及细胞间黏附分子-1(VCAM-1)的蛋白表达水平。【结果】与正常对照组比较,LPS诱导组细胞上清液中NF-κB p65、TNF-α、i NOS、COX-2、ICAM-1、VCAM-1蛋白表达均显著增加(P<0.01);脉复生各剂量组能不同程度地减少LPS诱导细胞中NF-κB p65、TNF-α、i NOS、COX-2、ICAM-1、VCAM-1蛋白表达水平,其中中、高剂量组作用显著(P<0.05或P<0.01)。【结论】脉复生可通过抑制LPS诱导的ECV304细胞中NF-κB、TNF-α、i NOS、COX-2、ICAM-1、VCAM-1的蛋白表达,调节NF-κB信号通路,从而发挥保护血管内皮细胞的作用。