肝纤方配合拉米夫定治疗慢性乙型肝炎31例临床观察

目的 :评价肝纤方配合拉米夫定治疗慢性乙型肝炎 (慢性乙肝 )的疗效。方法 :采用肝纤方 (制大黄、鳖甲、首乌、赤芍等 )联合拉米夫定治疗慢性乙肝 31例 ,并与单用拉米夫定治疗 37例随机对照观察 1年。结果 :肝纤方配合拉米夫定治疗组总有效率 (完全应答 +部分应答 )达 90 .3% ,与对照组 70 .3%比较有显著性差异(P<0 .0 5 ) ;且无一例乙肝病毒基因型变异 (YMDD)阳性发生 ,而对照组出现阳性 5例 (占 16 .7% ) ;其他客观指标治疗组也略优于对照组。结论 :肝纤方弥补了拉米夫定的不足 ,联合使用具有明显的协同作用。

拉米夫定单独或联合双环醇治疗慢性乙型肝炎的临床研究

目的观察拉米夫定单独或联合双环醇治疗慢性乙型肝炎的临床疗效。方法慢性乙型肝炎患者90例分A组30例(拉米夫定100 mg qd po;双环醇25 mg tid po连续72周),B组30例(单用拉米夫定,方法剂量同A组),C组30例(不用抗病毒仅给以护肝对症治疗,作为对照组);动态观查患者血清HBV DNA和肝功能变化及YMDD变异。结果A组HBV DNA阴转率在24、48、72周时分别为90.0%、86.7%、83.3%,B组分别为86.7%、83.3、76.7%,两组HBV DNA阴转率均显著高于C组(P<0.05),但两组之间比较差异无显著性(P>0.05);A组72周时YMDD变异率是16.7%,B组36.7%,A组显著高于B组(P<0.05);A组丙氨酸氨基转移酶(ALT)复常率在24、48、72周时分别为83.3%、90.0%、86.7%,B组分别为76.7%、86.7%、83.3%,A、B两组ALT复常率与C组比较在24、48、72周时差异有显著性(P<0.05)。结论拉米夫定单独或联合双环醇,均具有抑制乙型肝炎病毒作用,联合用药有改善肝功,且有提高HBV DNA阴转率及减少YMDD变异率的趋势。

严重乙型肝炎活动进展为肝衰竭的预后因素分析

目的旨在探讨影响严重肝炎活动预后的因素。方法应用Logistic回归分析69例严重肝炎活动患者,探讨可能与进展成肝衰竭相关的临床和病毒学指标,包括HBV基因型、PC(G1896A)及BCP(A1762T/G1764A)变异;筛选出独立预测因素。结果严重活动性肝炎患者中,33例(47.8%)进展成肝衰竭。多因素分析筛选出总胆红素升高(TB>256μmol/dL,P=0.008)及凝血功能异常(PTA<40%,P<0.001)是严重肝炎活动进展为肝衰竭的危险因素。HBeAg阴性(P=0.065)、PC变异(P=0.090)与病情恶化有一定相关性。结论血清总胆红素水平、凝血功能、HBeAg状态及PC变异在预测HBV相关的严重肝炎活动进展为肝衰竭中有预测价值。

番木瓜抗病突变体阻碍环斑病毒体内运转

应用RT PCR一步法检测了PRSVYs株系在感病番木瓜及其抗病突变体植株体内的运转动态 ,结果表明 :在感病植株中 ,接种后 48hr接种叶的未接种部位可检出病毒 ,第 4天部分接种叶柄可检出病毒 ,第 6天植株各部位均能检出病毒 ;而在抗病植株中 ,接种后可以而且仅能在接种部位检出病毒 ;因而认为抗病突变体能够阻碍病毒从接种部位运出及 (或 )

乙型肝炎病毒adr型全基因组C区突变株的构建及其生物学活性检测

目的构建乙型肝炎病毒(HBV)全基因组C区L97和V60突变质粒,并检测其生物学活性。方法采用定点突变技术将HBVadr1.2拷贝基因组质粒p3.8Ⅱ进行C区点突变,构建L97和V60两个突变株。质粒经脂质体介导转染HepG2细胞,Southern杂交分析细胞内HBVDNA复制,ELISA检测培养上清中HBsAg和HBeAg。结果测序结果表明所构建的突变质粒p3.8L97和p3.8V60分别为nt2189A→C和nt2086C→G,突变质粒均可在宿主细胞内复制和表达。结论所构建HBV(adr型)全基因组C区L97和V60突变质粒具有生物活性。

HBV－DNA前C区变异的重型肝炎末梢血T细胞亚群分布的研究

用限制性酶切片段长度多态性分析，对１７例经巢式聚合酶链反应扩增ＨＢＶ—ＤＮＡ阳性的重型肝炎患者血清的Ｃ基因前Ｃ区１８９６位点进行分析，并比较研究变异株组和野毒株组重型肝炎末梢血Ｔ细胞亚群分布。结果：①单纯前Ｃ区１８９６位变异株感染３例，单纯野毒株感染８例，变异株和野毒株共同存在６例；②９例前Ｃ区变异株感染重型肝炎末梢血ＣＤ８＋Ｔ细胞百分率与单纯野毒株感染重型肝炎组比较明显降低。变异组９例全部死亡，非变异组８例中仅１例死亡。结果说明：乙肝病毒基因组前Ｃ区１８９６位变异与重型肝炎发生有关。Ｃ区变异组末梢血ＣＤ８＋Ｔ细胞下降可能由ＣＤ８＋Ｔ细胞向肝脏集聚所致。

沈阳地区乙型肝炎病毒DNA前C区变异研究

用限制性酶切片段长度多态性分析对沈阳地区７０例血清经巢式聚合酶链反应扩增ＨＢＶＤＮＡ阳性的乙型肝炎患者的Ｃ基因前Ｃ区１８９６位点进行分析。结果：（１）急性乙型肝炎前Ｃ区变异检出率为４％（１／２０），慢性迁延肝炎为２５％（５／２０），慢性活动性肝炎为３８％（５／１３），肝硬化为３３％（４／１２）；（２）ＡＬＴ升高组中，ＨＢｅＡｇ及抗ＨＢｅ均阴性患者和ＨＢｅＡｇ阴性，抗ＨＢｅ阳性患者ＨＢＶＤＮＡ前Ｃ区变异检出率分别为５７％和５０％，明显高于ＡＬＴ正常组（１７％和０％）。上述结果说明ＨＢＶ感染时间长短和肝功反复活动与ＨＢＶＤＮＡ前Ｃ区变异有关。

拉米夫定治疗相关的乙型肝炎病毒变异研究进展

拉米夫定治疗相关HBV变异多发生于活性最强、包含第546～575位氨基酸的C区段酪氨酸-蛋氨酸-天门冬氨酸-天门冬氨酸(YMDD)位点,亦涉及第501～545位氨基酸的B区段.YMDD位点是HBV逆转录酶的活性部分,属高度保守序列.

用现行国产HBsAg EIA检测乙肝S基因突变体问题的研究

目的探讨乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）突变体对抗体结合能力的影响，寻找鉴别变异株的办法和规律，并为改进试剂质量进行基础研究。方法用２３家国产ＨＢｓＡｇＥＩＡ检测１０株重组表达ＨＢｓＡｇ突变体和１株原型ＨＢｓＡｇ。结果２３家国产试剂均能检测出原型、重组表达ＨＢｓＡｇ。表达的１０株突变体，１号试剂可全部检出，其它试剂的检出率分别为：对突变体抗原１４５精氨酸、１３３亮氨酸、１２６天冬酰胺的检出率为９１％，１４２丝氨酸为８６％，１４２亮氨酸为８２％，１２９组氨酸为７８％，１４１谷氨酸为３４％，１２６丝氨酸为３０％，１４４丙氨酸为２６％，１４５精氨酸＋１２６丝氨酸为１７％。结论乙肝Ｓ基因不同位点变异可导致与某些单抗的结合力降低，为进一步发展检测鉴别ＨＢｓＡｇ突变体的诊断试剂提供了理论基础。

乙型肝炎病毒新的免疫逃避株的S基因序列分析

目的分析乙型肝炎患者体内ＨＢＶＳ基因的变异情况及对乙型肝炎的免疫预防的现实意义。方法采用巢式聚合酶链反应（ＰＣＲ）、Ｍ１３噬菌体克隆和核苷酸序列分析方法对一例乙型肝炎免疫失败儿童患者体内ＨＢＶＳ基因序列进行分析。结果发现该患儿所感染ＨＢＶ的Ｓ基因上有一个重要的点突变，即第５５１位碱基由野生型的Ａ变为Ｇ。该突变使乙型肝炎表面抗原（ＨＢｓＡｇ）１３３位氨基酸由甲硫（ＡＴＧ）变为缬（ＧＴＧ）。这一氨基酸替换恰恰发生在ＨＢｓＡｇ中和性α抗原决定簇区段（ａａ１２４～ａａ１４７）内。结论鉴于该患者接种乙型肝炎疫苗，其血清呈抗－ＨＢｓ阳性和ＨＢｓＡｇ阴性。

拉米夫定抗乙型肝炎治疗中发生YMDD变异的因素研究

目的 探讨拉米夫定治疗慢性乙型肝炎YMDD变异的发生与血清HBVDNA水平、HBeAg、ALT的关系。方法以295例慢性乙型肝炎患者为研究对象，分别于接受拉米夫定治疗前测定慢性乙型肝炎患者血清HBVDNA水平、HBeAg、ALT等指标；经过12个月随访，期间每3个月检测患者血清HBVDNA水平和YMDD变异等。结果在接受拉米夫定治疗12个月后，295例慢性乙型肝炎患者中有63例发生YMDD变异（21．36％），YMDD变异组治疗前血清HBVDNA水平显著高于未发生YMDD变异组[（7．16±0．34）：（6．20±0．63）log10拷贝／mL，P〈0．01]，YMDD变异组患者的HBeAg阳性率与未发生YMDD变异组患者的HBeAg阳性率相比，差异具有统计学意义（61．90％：40．95％，P〈0．01）；YMDD变异组患者治疗前ALT水平显著高于未发生YMDD变异组患者[（174．9±108．1）：（96．1±54．4）IU／L，P〈0．01]。结论拉米夫定治疗慢性乙型肝炎YMDD变异的发生与血清HBVDNA水平、HBeAg、ALT等具有密切的相关性；在拉米夫定治疗前对慢性乙型肝炎患者进行血清HBVDNA、HBeAg、ALT等检测，具有重要的指导意义。